قسمت 2 اکیناکوزید با سرکوب Ca2 وابسته به ولتاژ به اضافه ورودی و پروتئین کیناز C در پایانه های عصبی مغزی موش صحرایی، آزادسازی گلوتامات را مهار می کند.

برای اطلاعات بیشتر لطفا تماس بگیرید:Joanna.jia@wecistanche.com

برای قسمت 1 اینجا را کلیک کنید

3. بحث

در این مطالعه، اکیناکوزید، یک ترکیب فعال درهربا سیستانچ، آزادسازی گلوتامات ناشی از آمینوپیریدین را در پایانه های عصبی قشر مغز موش مهار کرد. مکانیسم های زمینه ای احتمالی برای مهار انتشار گلوتامات با واسطه اکیناکوزید در اینجا بیشتر مورد بررسی و بحث قرار می گیرند.

Cistanche deserticola اثرات زیادی دارد، برای اطلاعات بیشتر اینجا را کلیک کنید

3.1. مکانیسم های نهفته در مهار انتشار گلوتامات با واسطه اکیناکوزید آزادسازی گلوتامات

برانگیخته شده توسط 4-آمینوپیریدین شامل دو جزء است: یک جزء وابسته فیزیولوژیکی Ca2 به علاوه وابسته، که از طریق اگزوسیتوز وزیکول های سیناپسی حاوی گلوتامات تولید می شود. و یک جزء مستقل از Ca2 به علاوه، که از دپلاریزاسیون طولانی‌مدت سرچشمه می‌گیرد که باعث جابجایی با واسطه پتانسیل غشایی در حالت ثابت ناقل گلوتامات به سمت خارج می‌شود، بنابراین بر جریان گلوتامات سیتوزولی تأثیر می‌گذارد [31]. در اینجا، ما آن را مشاهده کردیماکیناکوزیدبه طور قابل توجهی از انتشار گلوتامات برانگیخته با آمینوپیریدین در حضور یک محیط بدون Ca2 به علاوه (انتشار مستقل Ca2 به علاوه) جلوگیری نکرد. علاوه بر این، مشاهده شده استاکیناکوزیدمهار با واسطه 4-آمینوپیریدین برانگیخته گلوتامات به طور موثر توسط بافیلومایسین A1 (که محتوای گلوتامات وزیکول‌های سیناپسی را کاهش می‌دهد) جلوگیری شد، اما نه توسط DL-TBOA (که به‌طور غیرانتخابی همه زیرگروه‌های ناقل اسید آمینه تحریکی را مهار می‌کند). این نتایج نشان می دهد کهاکیناکوزیدبر اگزوسیتوز وابسته به Ca2 به علاوه آزادسازی گلوتامات بدون تأثیر بر جریان سیتوزولی مستقل از Ca2 به علاوه گلوتامات از طریق معکوس شدن انتقال دهنده گلوتامات غشای پلاسمایی انتهایی عصبی تأثیر می گذارد. در پایانه های سیناپسی، مهار کانال Na به علاوه یا فعال شدن کانال K به علاوه تحریک پذیری غشاء را تثبیت می کند و در نتیجه ورود Ca2 برانگیخته و انتشار انتقال دهنده عصبی را کاهش می دهد [32،33]. بنابراین، مکانیسم بالقوه زیربناییاکیناکوزیدمهار انتشار گلوتامات با واسطه شامل کاهش تحریک پذیری سیناپتوزومی است. با این حال، این احتمال بر اساس دو مشاهدات غیرقابل دفاع است: (1) 4-دپلاریزاسیون پتانسیل غشایی برانگیخته با آمینوپیریدین، اندازه‌گیری شده با رنگ حساس به پتانسیل غشاء DiSC3(5) تحت تأثیر افزودناکیناکوزید; و (2) اکیناکوزید بر 4-آمینوپیریدین برانگیخته شده Ca2 به علاوه گلوتامات مستقل تأثیر نمی گذارد، جزء آزادسازی که تنها به پتانسیل غشاء بستگی دارد [31]. اگر این اثر ناشی از سرکوب تحریک پذیری سیناپتوزومی نباشد، ممکن است از طریق کاهش فعالیت کانال های Cav2.2 (نوع N) و Cav2.1 (نوع P/Q) Ca2 بعلاوه همراه با اگزوسیتوز گلوتامات در بدن آشکار شود. پایانه های عصبی [34-36]. با استفاده از فورا{15}}، این را نشان می‌دهیماکیناکوزیدبه طور قابل توجهی افزایش 4-آمینوپیریدین برانگیخته در غلظت Ca2 به اضافه را کاهش می دهد. علاوه بر این، داده های ما نشان می دهد که اثر مهاریاکیناکوزیددر 4-آزادسازی گلوتامات برانگیخته با آمینوپیریدین پس از قرار گرفتن در معرض مسدودکننده‌های Cav2.2 (نوع N) و Cav2.1 (نوع P/Q) Ca2 از 42.4 درصد تا 2.3 درصد به 12.1 درصد تا 3.9 درصد کاهش یافت. کانال های پلاس علاوه بر این، ما مشاهده کردیم کهاکیناکوزیدهمچنان به طور قابل‌توجهی آزادسازی گلوتامات برانگیخته شده توسط آمینوپیریدین را در حضور مهارکننده‌های انتشار Ca2 داخل سلولی مهار می‌کند. این نتایج نشان می دهد که سرکوب همزمان Cav2.2 (نوع N) و Cav2.1 (نوع P/Q) Ca2 به علاوه فعالیت کانال مکانیسم بالقوه زیربنایی است.اکیناکوزیدمهار انتشار گلوتامات با واسطه با این حال، فعال سازی ترکیبی Cav2.2 (نوع N) و Cav2.1 (نوع P/Q) Ca2 به علاوه فعالیت کانال نمی تواند مانع از عملکرد کانال شود.اکیناکوزیدبه صورت کامل. از این رو، سایر انواع ناشناس کانال های Ca2 به علاوه یا سایر مسیرهای پیش سیناپسی ممکن است در مهار دخیل باشند. به عنوان مثال، گیرنده‌های گاباآ در سطح پیش‌سیناپسی وجود دارند و نشان داده شده است که فعال‌سازی آن‌ها هجوم Ca2 به علاوه و آزادسازی گلوتامات را مهار می‌کند [37]. در مطالعه حاضر، آنتاگونیست‌های گیرنده گاباآ SR95531 و بیکوکولین، مهار انتشار گلوتامات با واسطه اکیناکوزید را مسدود نکردند، که نشان می‌دهد گیرنده‌های گاباآ در کاهش فعالیت کانال Ca2 به علاوه وابسته به ولتاژ و در مهار متعاقب انتشار گلوتامات نقشی ندارند.

ورود Ca2 پلاس از طریق کانال های Ca2 پلاس وابسته به ولتاژ، چندین پروتئین کیناز مرتبط با انتشار گلوتامات در پایانه های عصبی از جمله پروتئین کیناز فعال شده با میتوژن، پروتئین کیناز C و پروتئین کیناز A را فعال می کند. در اینجا، ما نشان می دهیم که مهار کننده های پروتئین کیناز C به طور موثری مخالفاکیناکوزیدمهار انتشار گلوتامات با واسطه. با این وجود، مهارکننده پروتئین کیناز فعال شده با میتوژن PD98059 یا مهارکننده پروتئین کیناز A H89 بی اثر بود. علاوه بر این، که. جی. مول. علمی 2016، 17، 1006 8 از 13 4-فسفوریلاسیون پروتئین کیناز C ناشی از آمینوپیریدین در سیناپتوزوم ها پس از پیش درمانی بااکیناکوزیددر غلظتی موثر برای مهار آزادسازی گلوتامات. بنابراین، مسیر سیگنالینگ ازاکیناکوزیدمهار انتشار گلوتامات با واسطه ممکن است شامل پروتئین کیناز C باشد. پروتئین کیناز C یک سیستم سیگنال دهی مهم درون سلولی است که در سطح پیش سیناپسی وجود دارد و نقش مهمی در اگزوسیتوز انتقال دهنده عصبی دارد. به عنوان مثال، چندین پروتئین سیناپسی درگیر در قاچاق وزیکول سیناپسی یا استخدام و اگزوسیتوز، مانند سوبسترای C کیناز غنی از آلانین میریستویله شده، توسط پروتئین کیناز C فسفریله می شوند [38،39]. این فرآیند فسفوریلاسیون را می توان با ورود Ca2 به علاوه تحریک شده با دپلاریزاسیون افزایش داد که آزادسازی گلوتامات را تسهیل می کند [40]. از این رو، ما می توانیم به طور منطقی حدس بزنیم که اثر مهاریاکیناکوزیددر ورود Ca2 به علاوه مشاهده شده در اینجا ممکن است فعالیت پروتئین کیناز C و در نتیجه انتشار گلوتامات را کاهش دهد.

3.2. پیامدهای درمانی

سمیت تحریکی، یک فرآیند پاتولوژیک ناشی از آزادسازی بیش از حد گلوتامات و فعال شدن گیرنده گلوتامات، علت اصلی مرگ عصبی در اختلالات مغزی حاد و مزمن مانند سکته مغزی، آسیب مغزی تروماتیک، پارکینسون و بیماری های آلزایمر است [13،41] و استراتژی های درمانی. شامل مهار انتشار گلوتامات ممکن است استراتژی‌های محافظت کننده عصبی امیدوارکننده برای درمان چنین بیماری‌هایی باشد.اکیناکوزیدتایید شده است که به سد خونی مغزی (BBB) ​​نفوذ می کند و اثرات محافظت کننده عصبی را در مدل های مختلف در داخل بدن سمیت عصبی نشان می دهد [8،10-12،42]. اگرچه مکانیسم این اثرات محافظت کننده عصبی به طور کامل شناخته نشده است، چندین مکانیسم ممکن از جمله مهار پاسخ التهابی، تثبیت عملکرد میتوکندری، آنتی اکسیداسیون، مهار رادیکال های آزاد و تقلید عملکرد نوروتروفیک گزارش شده است [5،9،12،42]. در مطالعه حاضر، توانایی اکیناکوزید برای کاهش انتشار گلوتامات از پایانه های عصبی نیز ممکن است تا حدی مکانیسم محافظت عصبی آن را توضیح دهد. با این حال، اینکه آیا این اثر به پتانسیل درمانی آشکار اکیناکوزید در اختلالات مغزی مرتبط با سمیت تحریک‌پذیری گلوتامات کمک می‌کند، تحقیقات بیشتر را ضروری می‌کند.

4. مواد و روش ها

4.1. مواد شیمیایی

فورا{0}استوکسی متیل استر (Fura{1}AM) و یدید 3',3',3'-dipropylthiadicarbocyanine[DiSC3(5)] از Invitrogen (Carlsbad، CA، USA) خریداری شد. ω-کونوتوکسین MVIIC، روتلرین،2-[1-(3-dimethylaminopropyl)indol-3-yl]-3-(indol{14}}yl) maleimide ( GF109203X)، 5،6،7،13-تتراهیدرو{20}}متیل-5-oxo-12H-indolo[2،3-a]pyrrolo[3،{ {27}c]carbazole{28}}propanenitrile (Go6976) و N-[{31}}(p bromocinnamylamino)ethyl]-5-isoquinolinessulfonamide (H89) از TocrisBioscience (بریستول، انگلستان) خریداری شد. اکیناکوزید، دانترولن، DL-ترئو-بتا-بنزیل-اکسی اسپارتات (DL-TBOA)، 7-کلرو-5-(2-کلروفنی)-1،5-دی هیدرو -4،1-بنزوتیازپین-2(3H)-one (CGP37157)، 2-(2-آمینو-3-متوکسی فنیل)-4 H{54}}benzopyran-4-one) (PD98059)، اتیلن گلیکول بیس (-آمینو اتیل اتر) -N,N,N1,N{60}}تترااستیک اسید (EGTA) و سایر معرف‌ها خریداری شدند از شرکت Sigma-Aldrich (سنت لوئیس، MO، ایالات متحده آمریکا).

4.2. حیوانات

موش های صحرایی نر دو ماهه Sprague-Dawley مورد استفاده قرار گرفتند. حیوانات تحت شرایط محیطی استاندارد شده (22 ˘ 1˝C؛ 50 درصد رطوبت نسبی، چرخه نور/تاریکی 12 ساعت) قرار گرفتند و اجازه دسترسی نامحدود به غذا و آب داده شد. حیوانات با بریدن سر کشته شدند و قشر مغز به سرعت در دمای 4 درجه سانتیگراد برداشته شد. رویه های آزمایشی مطابق با راهنمای مؤسسه ملی بهداشت برای مراقبت و استفاده از حیوانات آزمایشگاهی توسط کمیته مراقبت و استفاده از حیوانات مؤسسه Fu Jen (A10259) تأیید شد. تمام تلاش ها برای به حداقل رساندن رنج حیوانات و استفاده از حداقل تعداد حیوانات لازم برای تولید نتایج قابل اعتماد انجام شد.

4.3. آماده سازی سیناپتوزومی

سیناپتوزوم ها از قشر مغز موش ها بر روی شیب های ناپیوسته Percoll همانطور که قبلا توضیح داده شد، خالص شدند [43،44]. به طور خلاصه، بافت در محیطی حاوی 0}.32 مولار ساکارز (pH 7.4) همگن شد، هموژنه به مدت 1{19}} دقیقه در 3000ˆ گرم (5{25) سانتریفیوژ شد. }}00 دور در دقیقه در یک روتور JA 25.5؛ Beckman Coulter, Inc., Miami, FL, USA) و 4˝C، و مایع رویی دوباره به مدت 12 دقیقه در 14500 درجه گرم سانتریفیوژ شد ( 11، {64}} دور در دقیقه در روتور JA 25.5). گلوله به آرامی در ساکارز 0.32 مولار (pH 7.4) معلق شد و مقدار کمی از این سوسپانسیون سیناپتوزومی (2 میلی لیتر) روی یک گرادیان ناپیوسته 3 میلی لیتری Percoll حاوی 0.32 مولار ساکارز، 1 میلی مولار EDTA، 0.25 و 0.25 mM EDTA قرار داده شد. 3 درصد، 10 درصد و 23 درصد پرکول (PH 7.4). پس از سانتریفیوژ در 32500 گرم (16500 دور در دقیقه در روتور JA 20.5) به مدت 7 دقیقه در دمای 4 درجه سانتیگراد، سیناپتوزوم ها از باندهای 10 تا 23 درصد Percoll بازیابی شدند و در حجم نهایی 30 میلی لیتر رقیق شدند. از محیط بافر HEPES (140 میلی‌مولار NaCl، 5 میلی‌مولار KCl، 5 میلی‌مولار NaHCO3، 1 میلی‌مولار MgCl2¨ 6H2O، 1.2 میلی‌مولار Na2HPO4، 10 میلی‌مولار گلوکز، و 10 میلی‌مولار HEPES (pH 7.4)). پس از سانتریفیوژ بیشتر در 27 گرم (15000 دور در دقیقه در JA 25.5) به مدت 10 دقیقه، پلت سیناپتوزومی در 3 میلی لیتر محیط بافر HEPES معلق شد و محتوای پروتئین با استفاده از روش برادفورد تعیین شد. در نهایت 0.5 میلی گرم از سوسپانسیون سیناپتوزوم ها در 10 میلی لیتر از محیط بافر HEPES رقیق شد و به مدت 10 دقیقه در 3000 درجه گرم (5000 دور در دقیقه در روتور JA 20.1) سانتریفیوژ شد. مایع رویی دور انداخته شد و گلوله‌های حاوی سیناپتوزوم‌ها روی یخ ذخیره شدند و ظرف 4 تا 6 ساعت مورد استفاده قرار گرفتند.

4.4. انتشار گلوتامات

آزادسازی گلوتامات توسط فلورمتری آنلاین همانطور که قبلاً توضیح داده شد مورد سنجش قرار گرفت [45،46]. گلوله های سیناپتوزومی در محیط بافر HEPES ({2}}.5 میلی گرم در میلی لیتر) مجدداً معلق شدند و در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 10 دقیقه در حضور 16 میکرومولار آلبومین سرم گاوی برای اتصال اسیدهای چرب آزاد آزاد شده از سیناپتوزوم ها در طول انکوباسیون، پیش انکوبه شدند. مقدار 2- میلی‌لیتر از سیناپتوزوم‌ها به یک کووت همزن حاوی 2 میلی‌مولار NADP پلاس، 50 واحد گلوتامات دهیدروژناز و 1.2 میلی‌مولار کلسیم کلسیم منتقل شد و فلورسانس FL NADPH در دستگاه Perkin-Elmer اندازه‌گیری شد. 14}} طیف‌سنج (PerkinElmer Life and Analytical Sciences, Waltham, MA, USA) در طول موج‌های تحریک و انتشار به ترتیب 340 و 460 نانومتر. از آنجایی که سیناپتوزوم‌ها در معرض تحریک الکتریکی نیستند، از مسدودکننده کانال پتاسیم 4-آمینوپیریدین برای تحریک آزادسازی گلوتامات استفاده شد. 4-آمینوپیریدین پتانسیل غشا را بی‌ثبات می‌کند و تصور می‌شود که باعث دپلاریزاسیون خودبه‌خودی سدیم به‌علاوه وابسته به کانال می‌شود که تقریباً به دپلاریزاسیون in vivo پایانه سیناپسی نزدیک می‌شود که منجر به فعال شدن کانال‌های Ca2 به علاوه وابسته به ولتاژ و انتشار انتقال‌دهنده عصبی می‌شود [47]. ]. داده ها در فواصل 2 ثانیه به دست آمد. در پایان هر آزمایش یک استاندارد گلوتامات اگزوژن (5 نانومول) اضافه شد. مقدار تغییر فلورسانس FL تولید شده توسط افزودن استاندارد برای محاسبه گلوتامات آزاد شده به عنوان نانومول گلوتامات در هر میلی گرم پروتئین سیناپتوزومی (nmol/mg) استفاده شد. مقادیر آزادسازی ذکر شده در متن، سطوحی هستند که پس از 5 دقیقه دپلاریزاسیون (nmol/mg/5min) در حالت پایدار به دست می‌آیند. داده های تجمعی با استفاده از صفحات گسترده Lotus 1-2-3 (IBM، White Plains، NY، USA) و MicroCal Origin (OriginLab Corporation، Northampton، MA، USA) تجزیه و تحلیل شد.

4.5. پتانسیل غشای پلاسما

پتانسیل غشای پلاسمایی با رنگ حساس به پتانسیل غشا، DiSC3(5) [48] تعیین شد. سیناپتوزوم‌ها مجدداً در محیط بافر HEPES معلق شدند و مقادیر 2 میلی‌لیتری به یک کووت همزن حاوی 5 میکرومولار DiSC3(5) در دمای 37 درجه سانتیگراد در طیف‌سنج Perkin-Elmer LS{10}} منتقل شدند (PerkinElmer Life and Analytical, MA، ایالات متحده). پس از اجازه دادن به مخلوط به مدت 3 دقیقه به تعادل رسید، فلورسانس FL به ترتیب در طول موج های تحریک و انتشار 646 و 674 نانومتر تعیین شد. داده ها در فواصل زمانی 2 ثانیه جمع آوری شد. داده های تجمعی با استفاده از MicroCal Origin (OriginLab Corporation، Northampton، MA، USA) تجزیه و تحلیل شد و در واحدهای فلورسانس FL بیان شد.

4.6. غلظت سیتوزولی Ca2 به اضافه ([Ca2+]C)

[Ca2+]C با فورا نشانگر Ca2 plus-2 اندازه‌گیری شد. سیناپتوزوم‌ها ({3}}.5 میلی‌گرم در میلی‌لیتر) در محیط بافر HEPES حاوی 5 میکرومولار فورا{6}} و {7}}}.1 میلی‌مولار CaCl2 به مدت 30 دقیقه در دمای 37 درجه سانتی‌گراد در یک آزمایش همزده پیش انکوبه شدند. لوله پس از بارگذاری فورا، سیناپتوزوم‌ها به مدت 30 ثانیه در میکروسانتریفیوژ با سرعت 3000 گرم (5000 دور در دقیقه) سانتریفیوژ شدند. گلوله های سیناپتوزومی در یک محیط بافر HEPES مجدداً معلق شدند و سوسپانسیون سیناپتوزومی در یک کووت ترموستات شده در طیف سنج Perkin-Elmer LS{17}} (PerkinElmer Life and Analytical Sciences, Waltham, MA, USA) هم زده شد. CaCl2 (1 میلی‌مولار) پس از 3 دقیقه اضافه شد و پس از 10 دقیقه اضافی افزوده شد. داده های فلورسانس در طول موج های تحریک 340 و 380 نانومتر (طول موج انتشار 505 نانومتر) در فواصل 2 ثانیه جمع آوری شدند. [Ca2+]C (nM) با استفاده از روش‌های کالیبراسیون [49] و معادلاتی که قبلاً توضیح داده شد [50] محاسبه شد. داده های تجمعی با استفاده از MicroCal Origin (OriginLab Corporation، Northampton، MA، USA) تجزیه و تحلیل شد.

4.7. وسترن بلاتینگ

سیناپتوزوم ها در بافر لیز (بافر HEPES 10 میلی مولار، pH 7.4)، 1 درصد Triton X{4}} و مخلوط بازدارنده پروتئاز همگن شدند. لیزها با سانتریفیوژ شفاف شدند و غلظت پروتئین با استفاده از کیت سنجش پروتئین (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA, USA) تعیین شد. مقادیر مساوی از پروتئین ها با الکتروفورز ژل دودسیل سولفات-پلی آکریل آمید سدیم (SDS-PAGE) جدا و به غشای نیتروسلولز منتقل شدند. غشاها با نمک تریس بافر حاوی 5 درصد شیر کم چرب مسدود شدند و با آنتی بادی اولیه مناسب (فسفو پروتئین کیناز C (پان)، 1:3000، NOVUS Biologicals Inc., Beverly, MA, USA) یک شبه در انکوبه شدند. 4 ˝C. پس از سه بار شستشو در سالین بافر تریس، غشاء سپس با آنتی بادی ثانویه کونژوگه ترب کوهی پراکسیداز (1:3000) به مدت 1 ساعت در دمای اتاق تحت درمان قرار گرفت. سپس غشاها حداقل سه بار با سالین بافر تریس شسته شدند و با استفاده از سیستم لومینسانس شیمیایی تقویت شده (آمرشام، باکینگهام شایر، انگلستان) مشاهده شدند. مقدار کمی از نمونه‌ها با یک آنتی‌بادی ضد PKC برای تشخیص PKC به‌عنوان کنترل بارگیری بارگیری و بررسی شد. سطح بیان یا فسفوریلاسیون با چگالی نوار، که با چگالی سنجی اندازه گیری شد، ارزیابی شد. سنجش چگالی باندها با استفاده از نرم افزار Syngene (Synoptics، کمبریج، انگلستان) مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت.

4.8. تحلیل آماری

داده ها از یک آماده سازی سیناپتوزومی منفرد به دست آمد و مستقل از یکدیگر نبودند. برای بررسی اهمیت اثر دارو در مقابل کنترل، از آزمون t-test Student دو طرفه استفاده شد. هنگامی که یک مقایسه اضافی مورد نیاز بود (مانند اینکه آیا یک درمان دوم بر عملکرد اکیناکوزید تأثیر می‌گذارد)، از ANOVA یک طرفه و به دنبال آن آزمایش توکی استفاده شد. تجزیه و تحلیل از طریق نرم افزار SPSS (17.{4}}؛ SPSS Inc., Chicago, IL, USA) تکمیل شد. داده ها به صورت میانگین ˘ SEM بیان می شوند. معنی داری در p < 0.05="" برای="" تمام="" معیارهای="" آماری="" ارزیابی="">

5. نتیجه گیری ها

این اولین مطالعه ای است که نشان می دهداکیناکوزیدبا کاهش هجوم Ca2 به علاوه از طریق کانال‌های Cav2.2 و Cav2.1، آزادسازی گلوتامات را از سیناپتوزوم‌های قشر مغز موش صحرایی مهار می‌کند و این مهار آزادسازی احتمالاً حداقل تا حدودی به سرکوب مسیر پروتئین کیناز C بستگی دارد. یافته حاضر ارزشمند است زیرا بینش جدیدی در مورد مکانیسم های عمل اکیناکوزید در مغز ارائه می دهد.

قدردانی ها:این کار با کمک مالی وزارت علوم و فناوری (MOST 103-2320-B-030-001 MY3) حمایت شد.

مشارکت نویسنده:تزو یو لین و سو جین وانگ این آزمایش ها را تصور و طراحی کردند. چنگ وی لو آزمایش ها را انجام داد. چنگ وی لو و شو کوئی هوانگ داده ها را تجزیه و تحلیل کردند. سو جین وانگ مقاله را نوشت.

تضاد علاقه:نویسندگان هیچ تضاد منافعی را اعلام نمی کنند.

تضاد منافع: نویسندگان هیچ گونه تضاد منافع را اعلام نمی کنند.

منابع

1. Tu، PF; وانگ، بی. دیاما، ت. ژانگ، ZG; لو، ZC تجزیه و تحلیل گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید ازگیاه سیستانچتوسط RP-HPLC. اکتا فارم. گناه 1997، 32، 294-300.

2. دالبی براون، ال. بارت، اچ. Landbo، AK; مایر، ع. Molgaard، P. اثرات آنتی اکسیدانی سینرژیک آلکامیدها، مشتقات اسید کافئیک، و فراکسیون های پلی ساکارید از اکیناسه پورپوره روی اکسیداسیون آزمایشگاهی لیپوپروتئین های با چگالی کم انسانی. جی. آگریک. مواد شیمیایی مواد غذایی 2005، 53، 9413-9423. [CrossRef] [PubMed]

3. داپاس، بی. دالا آکوا، اس. بولا، ر. آگوستینیس، سی. پریسوتی، بی. اینورنیزی، اس. گراسی، جی. Voinovich, D. Immunomodulation با واسطه یک شربت گیاهی حاوی عصاره ریشه اکیناسه استاندارد شده: یک مطالعه آزمایشی در افراد سالم بر روی بیان ژن سیتوکین. Phytomedicine 2014, 21,1406-1410. [CrossRef] [PubMed]

4. او، WJ; نیش، تی. Tu، PF پیشرفت تحقیقات در مورد فعالیت های دارویی اکیناکوزید. چین جی چین. ماتر پزشکی 2009، 34، 476-479.

5. دنگ، م. ژائو، جی. تو، پی اف. جیانگ، Y; Li، ZB; Wang، YH Echinacoside سلول های عصبی SHSY5Y را از آپوپتوز ناشی از TNFalpha نجات می دهد. یورو J. Pharmacol. 2004، 505، 11-18. [CrossRef] [PubMed]

6. کو، کا. سونگ، SH; پارک، جی اچ. کیم، SH; لی، کی. Kim, YC فعالیت‌های محافظ عصبی در شرایط آزمایشگاهی گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید از کالیکارپا دیکوتوما. Planta Med. 2005، 71، 778-780. [CrossRef] [PubMed]

7. وانگ، YH; Xuan، ZH; تیان، اس. Du، GH Echinacoside از طریق کاهش تولید ROS در برابر 6-اختلالات میتوکندری ناشی از هیدروکسی دوپامین و پاسخ‌های التهابی در سلول‌های PC12 محافظت می‌کند. اوید. مکمل مبتنی بر. جایگزین. پزشکی 2015، 2015، 189239. [CrossRef] [PubMed]

8. زو، م. لو، سی. Li, W. قرار گرفتن در معرض گذرا با اکیناکوزید برای فعال کردن سیگنال دهی Trk و محافظت از سلول های عصبی در برابر روتنون کافی است. جی. نوروشیم. 2013,124، 571-580. [CrossRef] [PubMed]

9. گنگ، ایکس. تیان، ایکس. تو، پ. Pu, X. اثرات محافظتی عصبی اکیناکوزید در مدل MPTP موش بیماری پارکینسون. یورو J. Pharmacol. 2007، 564، 66-74. [CrossRef] [PubMed]

10. Wei, LL; چن، اچ. جیانگ، Y; تو، پی اف. ژونگ، ام. دو، ج. لیو، اف. وانگ، ال. لیو، CY اثرات اکیناکوزید بر سطوح بافت مرکزی توده فعال در موش های انسداد شریان مغزی میانی. بیومد. محیط زیست علمی 2012، 25، 238-244. [PubMed]

11. وو، CR; Lin، HC; معکوس سو، MH توسط عصاره های آبی ازCistanche tubulosaاز نقص های رفتاری در مدل موش شبیه بیماری آلزایمر: ارتباط با رسوب آمیلوئید و عملکرد انتقال دهنده عصبی مرکزی مکمل BMC. جایگزین. پزشکی 2014، 14، 202. [CrossRef] [PubMed]

12. ژائو، کیو. گائو، جی. لی، دبلیو. Cai، D. اثرات نوروتروفیک و نجات عصبی اکیناکوزید در مدل موش MPTP تحت حاد بیماری پارکینسون. Brain Res. 2010، 1346، 224-236. [CrossRef] [PubMed]

13. Meldrum، BS گلوتامات به عنوان یک انتقال دهنده عصبی در مغز: بررسی فیزیولوژی و آسیب شناسی. J. Nutr. 2000, 130, 1007S-1015S. [PubMed]

14. لی، دی. شیم، ام اس; کیم، کی. نه، YH; کیم، اچ. کیم، سی. Weinreb، RN; Ju، WK کوآنزیم Q10 سمیت تحریک گلوتامات و تغییر میتوکندری ناشی از استرس اکسیداتیو را در مدل موش گلوکوم مهار می کند. تحقیق کنید افتالمول. Vis. علمی 2014، 55، 993-1005. [CrossRef] [PubMed]

15. Choi، DW کلسیم و آسیب عصبی اکسیتوتوکسیک. ان آکادمی نیویورک علمی 1994، 747، 162-171. [CrossRef] [PubMed]

16. لاو، ا. Tymianski، M. گیرنده های گلوتامات، سمیت عصبی، و تخریب عصبی. Pflugers. قوس. 2010، 460، 525-542. [CrossRef] [PubMed]

17. Sattler، R. Tymianski، M. مکانیسم‌های مولکولی مرگ سلول عصبی اکسیتوتوکسیک ناشی از گیرنده گلوتامات. مول. نوروبیول. 2001، 24، 107-129. [CrossRef]

18. Schauwecker، PE Neuroprotection توسط آنتاگونیست های گیرنده گلوتامات در برابر مرگ سلولی اکسیتوتوکسیک ناشی از تشنج در مغز پیر. انقضا نورول. 2010، 224، 207-218. [CrossRef] [PubMed]

19. یگانه، ف. نیکبخت، ف. بهمنپویی; اس. رستگار، ک. Namavar, R. اثرات محافظتی عصبی NMDA و آنتاگونیست های متابوتروپیک گیرنده گلوتامات گروه I در برابر تخریب عصبی ناشی از هموسیستئین در هیپوکامپ موش: مطالعه in vivo. جی. مول. نوروسک. 2013، 50، 551-557. [CrossRef] [PubMed]

20. Doble، A. نقش اکسیتوتوکسیسیته در بیماری نورودژنراتیو: پیامدهایی برای درمان. داروسازی آنجا 1999، 81، 163-221. [CrossRef]

21. رویکردهای درمانی مبتنی بر گلوتامات Muir، KW: کارآزمایی‌های بالینی با آنتاگونیست‌های NMDA. Curr. نظر. داروسازی 2006، 6، 53-60. [CrossRef] [PubMed]

22. گونزالس، جی سی. اژه، ج. دل کارمن گودینو، م. فرناندز-گومز، FJ; سانچز-پریتو، جی. گاندیا، ال. گارسیا، AG; جردن، جی. Hernandez-Guijo، JM مینوسایکلین محافظ عصبی، انتقال عصبی گلوتاماترژیک و سیگنال‌دهی Ca2 به علاوه در نورون‌های هیپوکامپ را کاهش می‌دهد. یورو J. Neurosci. 2007، 26، 2481-2495. [CrossRef] [PubMed]

23. لو، CW; لین، TY; Wang, SJ Memantine از طریق مهار ورود Ca2 وابسته به ولتاژ و پروتئین کیناز C در پایانه‌های عصبی قشر مغز موش صحرایی: یک مکانیسم مستقل از گیرنده NMDA باعث کاهش انتشار گلوتامات می‌شود. نوروشیمی. بین المللی 2010، 57، 168-176. [CrossRef] [PubMed]

24. وانگ، اس جی; Sihra، TS آنتاگونیست غیررقابتی گیرنده گلوتامات 5 متابوتروپیک (E)-2-متیل-6- استیریل پیریدین (SIB1893) از طریق مهار ورود Ca2 وابسته به ولتاژ به همراه اعصاب قشر مغز موش (پایانه های اعصاب قشر مغز) از انتشار گلوتامات جلوگیری می کند. J. Pharmacol. انقضا آنجا 2004، 309، 951-958. [CrossRef] [PubMed]

25. دانکلی، روابط عمومی. جاروی، PE; هیث، جی دبلیو. کید، جی جی; Rostas, JA روشی سریع برای جداسازی سیناپتوزوم ها بر روی گرادیان های Percoll. Brain Res. 1986، 372، 115-129. [CrossRef]

26. اراق، ع. لی، ن. دویل، RT; هایدون، انتشار گلوتامات وابسته به پروتئین PG SNARE از آستروسیت ها. J. Neurosci. 2000، 20، 666-673. [PubMed]

27. Dunlop، J. رویکردهای درمانی مبتنی بر گلوتامات: هدف قرار دادن سیستم حمل و نقل گلوتامات. Curr. نظر. داروسازی 2006، 6، 103-107. [CrossRef] [PubMed]

28. زوکی، ر. Ronca-Testoni، S. شبکه سارکوپلاسمی Ca2 به علاوه گیرنده کانال/ریانودین: تعدیل توسط عوامل درون زا، داروها و حالات بیماری. داروسازی Rev. 1997, 49,1-51. [PubMed]

29. فن، ی. لی، جی. ژانگ، YQ; جیانگ، LH; ژانگ، YN; Yan، CQ پروتئین کیناز C دلتا با واسطه سمیت سلولی 6-هیدروکسی دوپامین از طریق فعال‌سازی کیناز 1/2 با سیگنال تنظیم‌شده خارج سلولی در سلول‌های PC12. نورول. Res. 2014، 36، 53-64. [CrossRef] [PubMed]

30. گشوندت، م. مولر، اچ جی; کیلبسا، ک. زنگ، ر. کیتشتاین، دبلیو. رینکه، جی. مارکز، F. Rottlerin، یک مهارکننده جدید پروتئین کیناز. بیوشیمی. بیوفیز. Res. اشتراک. 1994، 199، 93-98. [CrossRef] [PubMed]

31. نیکولز، DG; Sihra, TS; Sanchez-Prieto، J. آزادسازی وابسته به کلسیم و مستقل از گلوتامات از سیناپتوزوم ها با فلورومتری مداوم نظارت می شود. جی. نوروشیم. 1987، 49، 50-57. [CrossRef] [PubMed]

32. Nicoll, RA جفت شدن گیرنده های انتقال دهنده عصبی به کانال های یونی در مغز. Science 1988, 241, 545-551. [CrossRef] [PubMed]

33. وو، ال جی; Saggau، P. مهار پیش سیناپسی انتشار ناقل عصبی برانگیخته. گرایش های عصبی. 1997، 20، 204-212. [CrossRef]

34. ترنر، تی جی; Dunlap، K. خصوصیات دارویی کانال های کلسیم پیش سیناپسی با استفاده از اندازه گیری های بیوشیمیایی دوم ترشح عصبی سیناپتوزومی. نوروفارماکولوژی 1995، 34، 1469-1478. [CrossRef]

35. میلان، سی. سانچز-پریتو، جی. جفت شدن دیفرانسیل کانال های کلسیم نوع N و P/Q به اگزوسیتوز گلوتامات در قشر مغز موش صحرایی. نوروسک. Lett. 2002، 330، 29-32. [CrossRef]

36. وازکز، ای. Sanchez-Prieto، J. مدولاسیون پیش سیناپسی آزادسازی گلوتامات، کانال‌های کلسیمی مختلف را در پایانه‌های عصبی قشر مغز موش هدف قرار می‌دهد. یورو J. Neurosci. 1997، 9، 2009-2018. [CrossRef] [PubMed]

37. بلند، پ; مرسر، آ. بیگم، ر. استفنز، جی. Sihra, TS; گیرنده‌های GABAA پایانه عصبی Jovanovic، JN، سیگنال‌های Ca2 به علاوه / وابسته به کالمودولین را فعال می‌کنند تا مانع ورود Ca2 با ولتاژ به‌علاوه هجوم و انتشار گلوتامات شود. جی بیول. شیمی. 2009,284، 8726-8737. [CrossRef] [PubMed]

38. ترنر، جی آر. زاویه، JM; سیاه، ED; جویال، جی ال. گونی، DB; Madara، تنظیم وابسته به JL PKC مقاومت ترانس اپیتلیال: نقش MLC و MLC کیناز. صبح. جی. فیزیول. 1999, 277, C{4}}C562. [PubMed]

39. Vaughan، PF; واکر، جی اچ. Peters, C. تنظیم ترشح ناقل عصبی توسط پروتئین کیناز C. Mol. نوروبیول. 1998، 18، 125-155. [CrossRef] [PubMed]

40. Coffey, ET; Sihra, TS; نیکولز، دی جی; Pocock، JM فسفوریلاسیون سیناپسین I و MARCKS در پایانه های عصبی با ورود Ca2 به علاوه از طریق کانال Ca2 پلاس حساس به Aga-GI که ​​با اگزوسیتوز گلوتامات همراه است، انجام می شود. FEBS Lett. 1994، 353، 264-268. [CrossRef]

41. اوبرنوویچ، تی پی; Urenjak, J. تغییر انتقال گلوتاماترژیک در اختلالات عصبی: از گلوتامات خارج سلولی بالا تا اثر سیناپسی بیش از حد. Prog. نوروبیول. 1997، 51، 39-87. [CrossRef]

42. ژانگ، دی. لی، اچ. Wang، JB Echinacoside فیبریلیزاسیون آمیلوئید HEWL را مهار می کند و در برابر سمیت عصبی ناشی از Ap محافظت می کند. بین المللی جی بیول. ماکرومول. 2015، 72، 243-253. [CrossRef] [PubMed]

43. Lin, TY; لو، سی دبلیو؛ وانگ، سی سی; لو، جی اف. وانگ، اس جی هیسپیدولین آزادسازی گلوتامات را در پایانه‌های عصبی قشر مغز موش‌ها مهار می‌کند. سموم Appl. داروسازی 2012، 263، 233-243. [CrossRef] [PubMed]

44. چانگ، سی. لین، TY; لو، سی دبلیو؛ هوانگ، SK; وانگ، YC; چو، اس اس. Wang, SJ Hesperidin آزادسازی گلوتامات را مهار می کند و محافظت عصبی در برابر سمیت تحریکی ناشی از اسید کاینیک در هیپوکامپ موش ها اعمال می کند. Neurotoxicology 2015,2015,157-169. [CrossRef] [PubMed]

45. نیکولز، دی جی; Sihra، TS Synaptosomes دارای یک استخر اگزوسیتوز از گلوتامات هستند. طبیعت 1986، 321، 772-773. [CrossRef] [PubMed]

46. ​​وانگ، سی سی; کو، جی آر. وانگ، اس جی دیمبون، یک داروی آنتی هیستامین، آزادسازی گلوتامات را در پایانه های عصبی قشر مغز موش مهار می کند. یورو J. Pharmacol. 2014، 734، 67-76. [CrossRef] [PubMed]

47. Tibbs، GR; باری، AP; ون میگم، اف جی; مک ماهون، اچ تی. Nicholls، DG پتانسیل‌های عمل تکراری در پایانه‌های عصبی جدا شده در حضور 4-آمینو پیریدین: اثرات بر روی Ca2 به علاوه آزاد سیتوزولی و انتشار گلوتامات. جی. نوروشیم. 1989،53،1693-1699. [CrossRef] [PubMed]

48. آکرمن، KE; اسکات، ال جی؛ هیکیلا، جی. Heinonen، E. وابستگی یونی پتانسیل غشاء و پاسخ های مرتبط با گیرنده گلوتامات در سیناپتون نوروزوم ها با رنگ سیانین، DiSC2 (5) اندازه گیری می شود. جی. نوروشیم. 1987، 48، 552-559. [CrossRef] [PubMed]

49. صیحرا، ت.س. بوگونز، ای. Nicholls، DG Localized Ca2 plus ورودی ترجیحاً بر دفسفوریلاسیون پروتئین، فسفوریلاسیون و آزادسازی گلوتامات تأثیر می گذارد. جی بیول. شیمی. 1992، 267، 1983-1989. [PubMed]

50. گرینکیویچ، جی. پونی، م. Tsien، RY نسل جدیدی از نشانگرهای Ca2 plus با خواص فلورسانس بسیار بهبود یافته است. جی بیول. شیمی. 1985، 260، 3440-3450. [PubMed]