تصویربرداری از میکروسیرکولاسیون کلیه در سلول درمانی

تماس:ali.ma@wecistanche.com

کاترینا آپلت و

ساقه سیستانچ برای بیماری کلیوی، برای دریافت نمونه اینجا را کلیک کنید

خلاصه:

کلیوینادر شدن میکروواسکولار نقش اساسی در پیشرونده داردکلیهمرض. بنابراین، روش‌های تجسم میکروسیرکولاسیون کلیه، درک ما از مکانیسم‌های بیماری را افزایش می‌دهد و در نتیجه ممکن است رویکردهای جدیدی برای ارزیابی درمان مبتنی بر سلول ارائه دهد. با این حال، در حال حاضر، عمل بالینی فاقد روش‌های تصویربرداری غیرتهاجمی، ایمن و کارآمد برای نظارت بر تغییرات میکروواسکولار کلیه در طول زمان در بیماران مبتلا به بیماری کلیوی است. برای تأکید بر اهمیت، دانش فعلی میکروسیرکولاسیون کلیوی را خلاصه می کنیم و در مورد دخالت در بیماری پیشرونده کلیه بحث می کنیم. علاوه بر این، مروری بر تکنیک‌های تصویربرداری موجود برای کشف مورفولوژی، عملکرد و رفتار ریز عروق کلیه با مزایا و محدودیت‌های مرتبط ارائه شده است. در نهایت، ضرورت ارزیابی و بررسی بیماری کلیوی بر اساس بازخوانی‌های in vivo با وضوح تا سطح مویرگی ممکن است یک تغییر پارادایم برای تشخیص و درمان در زمینهنفرولوژی.

کلید واژه ها: کلیه; میکروسیرکولاسیون؛ میکروواسکولارکمیاب شدن; سلول درمانی؛ تصویربرداری

1. مقدمه

عروق کلیوی دارای معماری پیچیده آناتومیکی است که نشان دهنده عملکرد فیزیولوژیکی منحصر به فرد آن است [1]. علیرغم سازگاری بسیار پویای شبکه میکروواسکولار با تغییرات همودینامیک، اختلال عملکرد عروقی ممکن است پیامد یا حتی علت آن باشد.کلیهتوسعه و پیشرفت بیماری [2،3]. بر این اساس، اختلال عملکرد میکروواسکولار ممکن است به عنوان نشانه اولیه آسیب کلیه فیبروتیک عمل کند، که نشان می دهد ارزیابی غیرتهاجمی و اعتبار سنجی ساختار و عملکرد میکروواسکولار کلیه، پیشرفت بزرگی برای ارزیابی اثربخشی درمان هایی با هدف کاهش فیبروز کلیه خواهد بود.

در عمل بالینی، شدت مزمن استکلیهبیماری (CKD) بر اساس نرخ فیلتراسیون گلومرولی (GFR) طبقه بندی می شود که به طور خفیف (60-89 میلی لیتر در دقیقه / 1.73 متر مربع)، متوسط ​​(30-59 میلی لیتر در دقیقه / 1.73 متر مربع) یا شدید (15-29 میلی لیتر در / 15-29 میلی لیتر /) منعکس می شود. min/1.73 m2) کاهش یافتکلیهعملکردبر اساس دسته های از پیش تعریف شده [4]. پیشرفت بیماری به CKD پیشرفته و بیماری کلیوی مرحله نهایی (ESRD) با وقوع گلومرولواسکلروز و فیبروز توبولو بینابینی با GFR کمتر از 15 میلی لیتر در دقیقه / 1.73 متر مربع تعریف می شود. چندین مطالعه نشان داده اند که پدیده از دست دادن مویرگ های کلیوی، به عنوان مثال، نادر شدن عروق کلیوی، ارتباط نزدیکی با شدت بیماری کلیوی دارد و در بیولوژی پیشرفت بعدی به سمت CKD دخالت دارد [3،5-7]. تشکیل فیبروز کلیه به عنوان یک مشخصه مرکزی برای چنین از دست دادن مویرگ اطراف لوله و از دست دادن اپیتلیال کلیه برجسته شد. اگر بتوان ریز عروق کلیه را محافظت یا حتی ترمیم کرد، یکپارچگی بافت ساختاری کلیه بهبود می یابد و از پیشرفت بیماری جلوگیری می شود [2،8]. علاوه بر این، یک پنجره درمانی به طور بالقوه می تواند برای ارزیابی شدت آسیب قبل از غیرقابل برگشت بودن درجه آسیب کلیوی تعریف شود. به طور خاص، استفاده از سلول درمانی مانند کاربردهای امیدوارکننده سلول های استرومایی مزانشیمی (MSCs) را می توان برای درمان بیماری های عروق کلیوی ارزیابی و اصلاح کرد. با این حال، درک دقیق نادر شدن عروق کلیوی هنوز با عدم وجود روش‌های تصویربرداری که نظارت با وضوح بالا و غیرتهاجمی معماری و عملکرد عروق را ممکن می‌سازد، با مشکل مواجه است.

در این بررسی، ما دانش فعلی را در مورد عروق کلیوی و مکانیسم‌های پاتولوژیکی که می‌توانند بر میکروسیرکولاسیون تأثیر بگذارند، خلاصه می‌کنیم. ما در مورد اهمیت پری‌سیت‌ها بحث می‌کنیم و بینش‌هایی در مورد نقش اصلی آن‌ها در ایجاد پیشرفت بیماری کلیوی از طریق اختلال عملکرد میکروواسکولار و نادر شدن، و همچنین توسعهکلیهفیبروز. ما متعاقباً پیشرفت‌های جدیدی را در تکنیک‌های تصویربرداری توصیف می‌کنیم که می‌تواند چنین تغییراتی را در میکروسیرکولاسیون کلیوی نظارت کند.

2. عروق کلیوی

2.1. گردش خون کلیوی

ریز عروق بدن انسان از شریان‌ها، مویرگ‌ها و ونول‌ها تشکیل شده و تبادل اکسیژن، مواد مغذی و متابولیت‌ها را بین خون و بافت اطراف انجام می‌دهد [8،9]. بدیهی است که عملکرد حیاتی میکروسیرکولاسیون به شدت بر اساس نیازهای متابولیک اندام تنظیم می شود. وظیفه اصلی شریان ها تنظیم جریان خون با تنظیم مقاومت برای اطمینان از انجام تبادل حیاتی در سطح مویرگ ها است [10]. در این راستا، سازگاری مداوم با تقاضای هموستاتیک بافت زیرین عمدتاً به شکل پذیری دینامیکی سلول های اندوتلیال وابسته است. در عین حال، سلامت اندوتلیال میکروسیرکولاسیون به ارتباط بین سلولی نزدیک با پری‌سیت‌ها متکی است که از نظر فیزیکی رگ‌های خونی را تثبیت می‌کنند، رگ‌زایی را تنظیم می‌کنند و جریان خون را کنترل می‌کنند [11،12].

کلیه یک اندام بسیار عروقی است که ویژگی های مورفولوژیکی و عملکردی منحصر به فردی را نشان می دهد که نشان دهنده ناهمگونی قابل توجه شبکه عروقی آن است [1،10]. خون از طریق شریان کلیوی از طریق ناف وارد کلیه می شود (شکل 1)، که بیشتر به صورت دوگانه در لگن کلیه به شریان های سگمنتال تقسیم می شود و به تدریج در سطح کاسه گل کوچک به شریان های بین لوبار که بین هرم های کلیوی گسترش می یابد، منشعب می شود [1،13]. ]. در مرز بین قشر و بصل النخاع، شریان های بین لوبار به داخل شریان های قوسی جریان می یابند و یک جدایی آناتومیکی بین هر دو بخش کلیوی ایجاد می کنند [1]. در قشر، شریان‌های بین لوبولار که به عنوان شریان‌های تابشی قشر یا شریان‌های نافذ قشری نیز شناخته می‌شوند، به‌طور عمود از شریان‌های قوسی شکل می‌آیند و به شریان‌های آوران واگرا می‌شوند تا شاخه‌های مختلف درخت گلومرولی را تأمین کنند. بسته به محل گلومرول ها، خون تصفیه شده در شبکه مویرگی قشر اطراف لوله های پروگزیمال و دیستال یا شبکه مویرگی مدولاری در سطح حلقه هنله جمع می شود. در نهایت، خون به سیستم وریدی که به موازات شبکه شریانی که از کلیه از طریق ورید بین لوبولار، کمانی، بین لوبار، سگمنتال و در نهایت ورید کلیه درست بالای حالب خارج می شود، تخلیه می شود. به طور کلی، این الگوی عروقی پایه در بین پستانداران حفظ می شود [14،15].

2.2. شبکه های مویرگی کلیه

پیچیدگی معماری ریز عروق کلیوی با مورفولوژی متنوع رگ های خونی کلیوی منعکس شده است (شکل 2). ناهمگونی ساختاری و عملکردی اندوتلیوم کلیه و سلول های اطراف عروق اطراف آن با نوع شبکه مویرگی همراه است [15-17]. در واقع، وجود بسترهای مویرگی مختلف یک ویژگی قابل توجه است که فیلتراسیون را از طریق شبکه مویرگی گلومرولی تضمین می کند، همچنین ترشح و بازجذب از طریق شبکه مویرگی اطراف لوله و شبکه مویرگی مدولاری را تضمین می کند [1،13،14]. میکروسیرکولاسیون قشر مغز عمدتاً جذب مجدد فیلتر گلومرولی را تضمین می کند، در حالی که دفع نمک و آب عمدتاً توسط محفظه ریز عروقی مدولاری تنظیم می شود [14]. جالب توجه است، حتی اگر بصل النخاع تقریباً 30 درصد از کل توده بافت کلیوی را تشکیل می دهد، تنها 10 درصد از کل جریان خون کلیوی (RBF) این بخش را تشکیل می دهد [10]. بر اساس موقعیت آناتومیکی، میکروسیرکولاسیون کلیه را می توان به (i) میکروسیرکولاسیون قشر مغز تقسیم کرد. و (ب) میکروسیرکولاسیون مدولاری [13،14].

میکروسیرکولاسیون قشر مغز به طور فیزیکی توسط شریان های کمانی جدا می شود که باعث ایجاد شریان های بین لوبولی می شود که بیشتر از هر دو طرف به چندین شریان آوران منشعب می شوند تا شبکه مویرگی گلومرولی را تامین کنند [14]. بسته به محل گلومرول ها در داخل قشر، انشعاب در زاویه متفاوتی رخ می دهد. از طریق شریان آوران، شبکه مویرگی گلومرولی متشکل از 6-8 حلقه مویرگی با خونی تامین می شود که پس از فیلتر شدن از طریق شریان وابران خارج می شود [10]. مویرگ های گلومرولی (شکل 2a) از یک اندوتلیوم نازک، پیوسته و عمدتاً مسطح شکل گرفته اند که توسط پودوسیت ها پوشیده شده است. نواحی فنس دار می توانند تا 20 تا 50 درصد کل سطح سلولی خود را اشغال کنند [16]. گلومرول های قشر مغز 90 درصد از کل گلومرول های موجود در کلیه را تشکیل می دهند، و بنابراین جای تعجب نیست که بیشتر RBF عمدتاً از طریق آن جریان می یابد [13]. 10 درصد باقیمانده از همه گلومرول ها در مرز کورتیکومدولاری قرار دارند و از نظر اندازه بزرگتر هستند. علاوه بر تفاوت‌های اندازه گلومرول‌ها، تفاوت‌های ساختاری شریان‌های آوران و وابران تأمین‌کننده گلومرول‌های قشر مغز و کنار هم را می‌توان با اهمیت حفظ فشار مویرگی توضیح داد.

برای اطمینان از فیلتراسیون مناسب خون، اختلاف قطر بین شریان های آوران قشر (شکل 2b) و وابران قشر (شکل 2c) 15 میکرومتر در مقابل 10 میکرومتر است [13]. فشار خون در کنار شریان‌های آوران از طریق تغییرات مقاومتی تنظیم می‌شود که اندوتلیوم پیوسته را که توسط سلول‌های ماهیچه صاف (SMCs) پیچیده شده است توضیح می‌دهد [18]. بررسی دقیق‌تر شریان آوران، وجود دو بخش عروقی را به جای یک اندوتلیوم یکنواخت در تمام طول عروق نشان می‌دهد که معمولاً با آن مواجه می‌شویم. قسمت پروگزیمال شریان آوران از یک اندوتلیوم غیرقابل نفوذ با SMC های محکم مرتب شده تشکیل شده است که برای انقباض عروق لازم است. در مقابل قسمت دیستال که نزدیک به گلومرول قرار دارد و به دلیل وجود فنستراسیون از اندوتلیوم نفوذپذیر تشکیل شده است. جالب اینجاست که این فنستراسیون یک ویژگی غیر معمول در عروق با فشار داخل عروقی بالا است. علاوه بر این، پریسیت‌های مکعبی شکل که رنین تولید می‌کنند، قسمت انتهایی شریان آوران را می‌پیچند تا تنظیم فشار خون موضعی در گلومرول را انجام دهند [17،19].

خون فیلتر شده از هر یک از گلومرول های قشر از طریق شریان وابران خارج می شود تا در شبکه مویرگی متراکم قشری اطراف توبول های کلیوی جمع شوند [10]. به غیر از سیستم مویرگی گلومرولی، این محفظه مویرگی دوم به عنوان سیستم مویرگی اطراف لوله ای شناخته می شود [16]. مویرگ های اطراف لوله ای (شکل 2d) دارای فنر و دیواره نازک با قطر متوسط ​​تقریباً 7 میکرومتر هستند [13،15]. این مویرگ‌ها اکسیژن و مواد مغذی را برای لوله‌های واقع در قشر کلیه فراهم می‌کنند، اما نه لزوماً برای لوله‌هایی که از آن سرچشمه می‌گیرند [10،15]. مویرگ های اطراف لوله ای اندوتلیوم پیوسته تر و همچنین قطر کمتری را در مقایسه با مویرگ های مدولاری وازا رکتا نشان می دهند [13،16]. در بیماری کلیوی، آسیب گلومرولی در نهایت بر مویرگ های اطراف لوله ای که به طور متوالی مرتب شده اند تأثیر می گذارد و در نتیجه پیشرفت بیماری کلیوی را تسریع می کند [10،20].

شریان آوران مجاوری (شکل 2e) دارای قطر تقریبی 20 میکرومتر است، در حالی که شریان آوران مجاوری (شکل 2f) دارای قطر داخلی 20 تا 25 میکرومتر است [13]. شریان وابران خروجی از گلومرول ژاکستامدولاری به شدت توسط چندین SMC احاطه شده است. این تفاوت قابل توجه در قطر عروق، و همچنین افزایش عضلانی شدن، بحث در مورد دخالت این نوع گلومرول در ایسکمی را بالا می برد. به نظر می رسد که معماری عروق کلیوی به روش خاصی سازماندهی شده است تا مدولا را از آسیب ایسکمیک حفظ کند. این فرضیه وجود دارد که شریان‌های آوران و وابران گلومرول‌های جانبی ممکن است مسئول تنظیم خون مدولاری (MBF) نباشند، اما این نیز با نقش آنها در کنترل میزان فیلتراسیون گلومرولی در تناقض بالقوه است [21]. در عوض، به نظر می‌رسد که نزولی وازا رکتا (DVR) دسته‌های عروقی واقع در نوار داخلی مدولای بیرونی مسئول کنترل MBF است که ممکن است تعداد بالای پریکیت‌هایی را که این محفظه رگ را می‌پیچند توضیح دهد. بنابراین DVR نقش کلیدی در تنظیم طولانی مدت فشار شریانی ایفا می کند [13]. شریان های وابران متصل به گلومرول های جانبی از طریق بسته های عروقی، که در نوار داخلی مدولای خارجی قرار دارند، به DVR تبدیل می شوند. DVR باعث ایجاد شبکه مویرگی مدولاری می شود که به وازا رکتا صعودی (AVR) متصل است [1].

میکروسیرکولاسیون مدولاری زمانی شروع می‌شود که شریان‌های وابران منشأ گرفته از گلومرول‌های مجاورت مدولاری به اعماق بافت وارد می‌شوند تا 30 درصد باقی‌مانده بافت کلیوی معروف به مدولا را تامین کنند [13،14]. بصل النخاع یک هرم کلیه از نظر تشریحی به دو قسمت تقسیم می شود: بصل النخاع بیرونی درست در زیر قشر مغز قرار دارد و به دنبال آن بصل النخاع داخلی که تا نوک پارانشیم به نام پاپیلا گسترش می یابد. به طور کلی، تعداد مویرگ های مدولاری از نوک هرم کلیوی افزایش می یابد. مشاهدات دقیق تر نشان می دهد که بصل النخاع خارجی را می توان بیشتر به نوار بیرونی و نوار داخلی بسیار عروقی که شامل شبکه مویرگی متراکم و شبکه بین باندل است تقسیم کرد [15]. مویرگ های بین بسته ای با اندوتلیوم بالدار مشخص می شوند و به ورید کمانی متصل می شوند [14،22].

هر شریان وابران مجاوری به چند دسته تقسیم می‌شود که به دسته‌های عروقی معروف هستند و شاخه‌های DVR را تشکیل می‌دهند (شکل 2g) که قطر بزرگ‌تری در مقایسه با مویرگ‌های اطراف لوله‌ای قشر دارند [15،23]. چندین پری سیت به اندوتلیوم DVR دسته های عروقی متصل می شوند [17]. جالب توجه است که تعداد پری سیت هایی که رگ ها را می پوشانند در DVR (شکل 2h) مدولای داخلی کاهش می یابد [15،17]. این آرایش مورفولوژیکی DVR در بخش بیرونی و داخلی مدولا نشان دهنده عملکرد دوگانه آن است [10]. برای توضیح بیشتر، انقباض عروق DVR بیشتر در قسمت پروگزیمال ظاهر می شود، که در بصل النخاع خارجی قرار دارد [15]. در قسمت دیستال، یعنی مدولای داخلی، اما عمدتاً تبادل الکترولیت در حال انجام است. این تفاوت آناتومیکی مستقیماً بر زیرجمعیت متمایز پری سیت ها از نظر ظاهر مورفولوژیکی و ویژگی عملکردی دلالت دارد [15،17].

در اعماق بصل النخاع داخلی، شاخه های مختلف DVR قبل از اتصال به AVR کوچکتر به یک شبکه مویرگی پیچیده تقسیم می شوند [10]. اندوتلیوم DVR بر خلاف سلول های اندوتلیال AVR (شکل 2i) که به شدت فنس دار هستند، پیوسته است. در نهایت، تمام خون از AVR و همچنین مویرگ های اطراف لوله ای شبکه مویرگی قشر مغز به سیستم وریدی جمع آوری می شود. به طور کلی، وریدهای کلیوی یک دیواره عروقی بسیار نازک را نشان می دهند و وریدهای بین لوبولی، کمانی و بین لوباری بالدار و حاوی دیافراگم هستند. با کمال تعجب، وریدهای بین لوبولار به طور کلی شباهت های بیشتری با مویرگ های اطراف لوله ای نسبت به وریدها نشان می دهند که دلیل آن اپیتلیوم نازک و بسیار پرپشت است.

بخش‌های مختلف میکروواسکولار کلیوی و ظاهر زیبای مورفولوژیکی آنها در سطح سلول این ظن را ایجاد می‌کند که پیچیدگی موجود به یک مکانیسم بیماری حتی پیچیده‌تر تبدیل می‌شود. بنابراین، بخش زیر بر روی فرآیندهای اساسی درگیر در عملکرد ناقص عروق کلیوی تمرکز دارد.

3. اختلالات میکروواسکولار کلیه

3.1. اختلال عملکرد اندوتلیال

اندوتلیوم کلیه در شرایط فیزیولوژیکی عمدتاً ساکن است. با این حال، در پاسخ به تغییرات میکرو محیطی، به عنوان مثال، تنش برشی، هیپوکسی، استرس اکسیداتیو، یا التهاب، فعال شدن سلول های اندوتلیال رخ می دهد و فاکتورهای رشد رگ زایی تولید می شوند [24]. بسته به محرک، فعال‌سازی سلول‌های اندوتلیال ممکن است یک فنوتیپ پیش‌التهابی و پیش‌ترومبوتیک را القا کند تا چسبندگی و نفوذ سلول‌های ایمنی برای تشکیل میکروترومب‌ها را تقویت کند. با این حال، برای حفظ سد عروقی برای عملکرد تنظیمی گسترده و نفوذپذیری مناسب برای انتقال املاح، تنظیم دقیق وضعیت متابولیک ساکن و همچنین سلول های اندوتلیال فعال ضروری است.

یکپارچگی بافت و عملکرد اندام عمدتاً به پرفیوژن مناسب شبکه میکروواسکولار وابسته است [8]. بنابراین، تعجب آور نیست که سلول های اندوتلیال انعطاف پذیری بالایی از خود نشان می دهند تا از سازگاری دینامیکی با تغییرات محیطی با تنظیم تعداد مویرگی، شکل مورفولوژیکی و عملکرد اطمینان حاصل کنند [1،2،8]. با این حال، یک دوره طولانی افزایش فشار خون باعث تغییرات برگشت ناپذیر در میکروسیرکولاسیون می شود و باعث ایجاد سلول های اندوتلیال آسیب دیده می شود که با ویژگی های سازگاری مختل می شود. این هموستاز مختل شده با کاهش اکسید نیتریک (NO)، فاکتور القا کننده هیپوکسی-1 (HIF-1) و فاکتور رشد اندوتلیال عروقی (VEGF)، همراه با افزایش سایر عوامل منعکس می‌شود. به عنوان آنژیواستاتین، اندوستاتین و ترومبوسپوندین [1]. به طور قابل‌توجهی، حساسیت به اختلال عملکرد اندوتلیال در کلیه متنوع است و به نوع سلول‌های اندوتلیال که در بخش‌های مختلف میکروسیرکولاسیون کلیوی قرار دارد، بستگی دارد [16،24]. برای روشن کردن فنوتیپ‌های ناهمگن سلول‌های اندوتلیال کلیه و پاسخ متفاوت آنها به تغییرات میکروواسکولار، دوماس و همکارانش. [25] اخیراً با استفاده از توالی یابی RNA تک سلولی، اطلسی با وضوح بالا از اندوتلیوم کلیه ارائه کرده است.

اختلال عملکرد اندوتلیال اغلب با کاهش حاد و پیشرونده عملکرد کلیه همراه است [24]. این نقص باعث افزایش مقاومت عروقی می شود که با کاهش RBF همراه است [26]. یک دوره طولانی انقباض عروقی باعث پرفیوژن ناکافی بافت و فعال شدن استرس و عوامل رشد می شود که منجر به تغییرات مورفولوژیکی می شود [1]. بسته به شدت و به ویژه مدت هر توهین داده شده، RBF را می توان با ایجاد تغییرات ساختاری در میکروسیرکولاسیون به طور غیر قابل برگشت تغییر داد. این تغییرات مورفولوژیکی توسط فرآیندی به نام بازسازی میکروواسکولار ایجاد می شود. بازسازی ریز عروقی به عنوان پاسخ به تغییرات عملکردی عروق ریز تعریف می شود که در نتیجه ممکن است در آخرین تلاش برای رسیدن به هموستاز همودینامیک باعث تغییر معماری میکروواسکولار در سطح ساختاری شود [1،2،8]. در نهایت، اختلال عملکرد اندوتلیال ممکن است منجر به پدیده‌ای به نام «بدون جریان مجدد» شود، که در آن پرفیوژن نمی‌تواند ترمیم شود، و در نهایت منجر به آسیب سلول‌های اپیتلیال لوله‌ای می‌شود که منجر به آسیب حاد کلیه (AKI) می‌شود [24].

تاکید بر این نکته بسیار مهم است که اختلال عملکرد اندوتلیال نه تنها با بیماری کلیوی مرتبط است، بلکه به طور فعال باعث پیشرفت بیماری می شود [24]. اختلال عملکرد میکروواسکولار کلیه توسط اختلال عملکرد اندوتلیال ناشی از آسیب سلولی منعکس می شود، که تعامل نزدیک پری سیت ها با لایه اندوتلیال را مختل می کند و ارتباط سلولی را مختل می کند.

3.2. درگیری پریسیت در اختلال عملکرد کلیه

یکی از ویژگی های اصلی CKD از دست دادن پیش رونده شبکه مویرگی اطراف لوله است، فرآیندی که به عنوان نادر شدن [27] شناخته می شود. فیبروز توبولو بینابینی، و همچنین اپیتلیوم لوله‌ای آسیب دیده، پیش از این نادر شدن مویرگی در کلیه است [27]، در حالی که این نادر شدن میکروواسکولار مستقیماً با شدت فیبروز مرتبط است [28،29]. علاوه بر این، میزان نادری برای پیش‌بینی میزان آسیب بینابینی و همچنین تغییرات در نرخ فیلتراسیون گلومرولی در بیماران CKD یافت شده است [28]. این یافته‌ها نقش محدودکننده سرعت اولیه را برای بی‌ثباتی/از دست دادن میکروواسکولار در ایجاد CKD و پاتوژنز فیبروز نشان می‌دهد [30]. فعال‌سازی مزمن سلول‌های اندوتلیال توسط عوامل خطر قلبی عروقی می‌تواند باعث از بین رفتن پری‌سیت‌هایی شود که نقش مهمی در تثبیت و تکثیر مویرگ‌ها از طریق تعامل با سلول‌های اندوتلیال دارند [31]. در واقع، شواهد جمع آوری شده اهمیت پری سیت ها و دخالت آنها در سلامت میکروواسکولار کلیه را مشخص می کند [17].

پریسیت ها سلول های دیواری اطراف عروقی با فرآیندهای دراز اندوتلیوم هستند که در غشای پایه مویرگ ها تعبیه شده اند [32]. آنها سلول هایی با منشاء مزانشیمی هستند و از جعبه پیشانی D1 (FoxD1) به همراه جمعیت پیش ساز استرومایی به وجود می آیند، که همچنین باعث ایجاد سایر سلول های دیواری عروق کلیه از جمله SMCs، فیبروبلاست های ساکن، سلول های رنین و سلول های مزانژیال می شوند [33]. در حالی که تمام سلول های اندوتلیال عروق کلیه از لوسمی سلول های بنیادی (SCL) به همراه اجداد سرچشمه می گیرند [34]. پری‌سیت‌ها با فیبروبلاست‌های ساکن (پیرو عروقی) متفاوت هستند، زیرا در غشای پایه عروقی تعبیه شده‌اند، اما بیشتر مطالعات در کلیه، بین پری‌سیت‌ها و فیبروبلاست‌های اطراف عروقی تمایز قائل نمی‌شوند [31،35]، احتمالاً به دلیل کمبود نشانگرهای خاص. نشانگرهایی که معمولا برای شناسایی پری سیت ها استفاده می شوند شامل گیرنده فاکتور رشد مشتق از پلاکت (PDGFR)، کندرویتین سولفات پروتئوگلیکان NG2، اکتین ماهیچه صاف (SMA)، خوشه تمایز 73 (CD73) و PDGFR هستند، اما این نشانگرها متفاوت هستند. همپوشانی) زیرمجموعه‌های پری‌سیت‌هایی که در مناطق آناتومیکی مختلف موضعی شده‌اند، که منعکس‌کننده ناهمگنی این جمعیت سلولی [17] و به احتمال زیاد ناهمگنی عملکردی است. پری سیت ها رشد عروقی، تثبیت، بلوغ و بازسازی را به شدت تنظیم می کنند [11] و جریان خون را با انقباض عروق کنترل می کنند. پری سیت ها از نظر عملکردی توسط عوامل منقبض کننده عروق مانند آنژیوتانسین II و آدنوزین تری فسفات (ATP) و همچنین توسط عوامل گشادکننده عروقی مانند NO و پروستاگلاندین ها تنظیم می شوند [17]. بلوغ رگ‌های خونی به جذب سلول‌های اطراف عروق برای تثبیت عروق و کنترل فشار خون بستگی دارد [12].

در کلیه، پری‌سیت‌ها قسمت‌های انتهایی شریان‌های آوران گلومرول‌های قشر مغز را می‌پیچند و عمدتاً در مویرگ‌های اطراف لوله‌ای و در وازا رکتا وجود دارند [13،19]. علاوه بر این، سلول های مزانژیال زیرمجموعه ای (تخصصی) از پری سیت های کلیوی هستند که در حفظ حمایت ساختاری مویرگ های گلومرولی و تنظیم همودینامیک گلومرولی مهم هستند. علاوه بر این، پری‌سیت‌های مجاور گلومرولی انقباضی که در شریان‌ها قرار دارند، واسطه فشار خون گلومرولی موضعی هستند و از طریق ترشح رنین بر فشار خون سیستمیک تأثیر می‌گذارند [19]. جالب توجه است، سلول‌های پیش‌ساز رنین که از محفظه استرومایی مشتق می‌شوند، از نظر فضایی و زمانی با رشد عروق خونی مرتبط هستند، در حالی که نشان داده شد که تشکیل شاخه‌های شریانی با ظهور سلول‌های بیان‌کننده رنین در نقطه انشعاب انجام می‌شود [33،36]. علاوه بر این، با استفاده از گورخرماهی گزارشگر رنین تراریخته، نشان داده شد که سلول های بیان کننده رنین قبل از جوانه های رگ زا هستند [37]. در کلیه موش بالغ، سلول‌های با منشاء رنین نیز در مکان‌های اطراف عروقی مشاهده می‌شوند و با نشانگرهای پری‌سیتی (PDGFR/NG2) همرنگ می‌شوند [38]، که احتمالاً نقش مهمی را برای این زیر مجموعه در نگهداری عروق نشان می‌دهد.

3.3. تعاملات سیگنالینگ سلول اندوتلیال-پری سیت

پری سیت ها با سلول های اندوتلیال از طریق بسیاری از فعل و انفعالات متقابل که مسیرهای سیگنالینگ مورد نیاز برای تثبیت و جوانه زایی رگ زایی را تنظیم می کند، برهم کنش می کنند. سیگنال پری سیتی از طریق فاکتورهای ترشحی مانند VEGF، PDGF، فاکتور رشد تبدیل کننده (TGF-)، و آنژیوپویتین-1 (Ang-1) و همچنین از طریق تداخل مستقیم اندوتلیال-پری سیت به اندوتلیوم می دهد [39 ]. به طور مشابه، اندوتلیوم با استفاده از عواملی مانند angiopoietin-2 (Ang-2) ​​و PDGF به سلول های استرومای اطراف سیگنال می دهد. Ang-2 به‌طور منفی با سیگنال‌های Ang{10}}Tie واسطه‌شده{11}} تداخل می‌کند، که منجر به اختلال در تعامل سلول‌های پری‌سیت و اندوتلیال و متعاقب آن بی‌ثباتی عروق و بازسازی غیرطبیعی ریز عروق می‌شود [40،41]. اهمیت حیاتی تعامل بین سلول‌های استرومایی اطراف عروقی و سلول‌های اندوتلیال در نگهداری شبکه مویرگی نیز توسط مطالعات موش اثبات شده است، که نشان می‌دهد، وقتی سرمایه‌گذاری پری‌سیت‌ها مختل می‌شود، شبکه مویرگی بی‌ثبات می‌شود و نادری رخ می‌دهد [42]. به عنوان مثال، هایپرگلیسمی بیان Ang اندوتلیال را افزایش می دهد و باعث می شود سلول های استرومایی اطراف عروقی به دور از مویرگ ها مهاجرت کنند [43]. مطالعات اخیر از آزمایشگاه ما نشان داد که هم در موش‌ها [44] و هم در کلیه‌های اهداکننده انسان [45] آسیب ایسکمی-پرفیوژن مجدد منجر به افزایش سریع تعادل Ang-2/Ang-1 می‌شود که مرتبط است. با از دست دادن یکپارچگی میکروواسکولار. علاوه بر این، در بیماران مبتلا به دیابت، معکوس شدن سلامت مویرگ ها و کاهش نسبت Ang-2/Ang{-1 و ترومبومودولین محلول (مارکر آسیب سلول های اندوتلیال) در عرض 12 ماه پس از پیوند همزمان کلیه و پانکراس مشاهده شد [46] ]. در کنار مسیرهای angiopoietin/Tie2 [47]، تداخل اندوتلیال-پریسیت توسط مسیرهای سیگنال دهی TGF ابرخانواده [48]، VEGF [49] و اسفنگوزین{31}فسفات (S1P) [50] تنظیم می شود.

3.4. پری سیت ها به عنوان پیش ساز میوفیبروبلاست ها

مدل‌های ردیابی نسب ژنتیکی موش نشان داده‌اند که پری‌سیت‌ها (و سایر سلول‌های اطراف عروقی) منبع اصلی میوفیبروبلاست‌های مثبت -SMA در مدل‌های موش فیفیبروز کلیوی هستند [51،52]. در واقع، یک مطالعه ظریف اخیر که شامل توالی یابی RNA تک سلولی بود، سه منبع اصلی میوفیبروبلاست ها را در کلیه های انسان مشخص کرد: (i) NOTCH3 به علاوه RGS5 به علاوه PDGFR - پری سیت. (ب) MEG3 به علاوه PDGFR به علاوه فیبروبلاست. و (iii) COLEC11 به علاوه CXCL12 به علاوه فیبروبلاست [53]. در طول تمایز پری سیت به میوفیبروبلاست، تغییرات چرخه سلولی مشاهده شد که با تمایز و گسترش سازگار است و مسیرهای غنی شده شامل سیگنال دهی WNT متعارف و پروتئین فعال کننده (AP{15}}) و همچنین رونویسی فعال می شود. فاکتور 2 (ATF2)، PDGFR، اینتگرین، تعامل گیرنده ماتریکس خارج سلولی (ECM) و مسیرهای سیگنال دهی TGF [53]. قبلاً نشان داده شده بود که بخش کوچکی از جمعیت سلولی PDGFR به علاوه شامل پیش‌سازهای Gli1 به‌علاوه اطراف عروقی است که جمعیت سلولی MSC مانند اطراف عروقی را مشخص می‌کند که نشان داده شد از طریق تولید میوفیبروبلاست‌ها، کمک‌کننده‌های کلیدی در فیفیبروز اندام ناشی از آسیب هستند [54] . علاوه بر این، همولوگ انکوژن مرتبط با گلیوما 1 (Gli1) به همراه از دست دادن پری سیتی نشان داده شد که باعث ایجاد نادر شدن مویرگی و آسیب لوله پروگزیمال می شود [55]. شایان ذکر است، از آنجایی که پری‌سیت‌ها قبلاً مرتبط بوده‌اند و ارتباط نزدیکی با سلول‌های بنیادی مزانشیمی دارند [56]، این سوال را نیز مطرح می‌کند که آیا زیرمجموعه‌ای از پری‌سیت‌ها ممکن است سلول‌های بنیادی مزانشیمی باشند و به این ترتیب به بازسازی کلیه کمک می‌کنند. در واقع، بسیاری از مطالعات نقش پیش ساز چند توانی را برای پری سیت ها در بافت های مختلف پیدا کرده اند [35،57،58].

روی هم رفته، نادر شدن عروق میکروواسکولار به طور مستقیم به مجموعه ای از میوفیبروبلاست ها کمک می کند که مسئول تولید بیش از حد پروتئین های ECM هستند که سازنده اصلی بافت اسکار در فیبروز هستند. علاوه بر این، انتقال پری‌سیت به میوفیبروبلاست باعث جدا شدن پری‌سیت‌ها از دیواره عروقی می‌شود و در نتیجه مویرگ‌های ناپایدار ایجاد می‌شود که به خودی خود باعث نادر شدن می‌شود [52]. با این وجود، تأثیر اصلی نادر شدن بر پاتوژنز نارسایی مزمن کلیوی ناشی از از دست دادن پرفیوژن کلیوی است که ایسکمی مدولاری را بیشتر تشدید می‌کند و باعث ایجاد فیبروز بینابینی می‌شود، که با افزایش بیان TGF و فاکتور رشد بافت همبند انجام می‌شود. (CTGF) [59]. بنابراین، نادر شدن عروق میکروواسکولار ممکن است به عنوان یک سوئیچ پروفیبروتیک محدود کننده سرعت در پاتوژنز نارسایی مزمن کلیوی عمل کند. در واقع، درمان هایی که تعامل سلول اندوتلیال-پریسیت را هدف قرار می دهند، به عنوان مثال، با هدف سیگنال دهی گیرنده PDGFR- یا VEGF، می توانند از انتقال میوفیبروبلاست جلوگیری کرده و توسعه فیبروز را محدود کنند [60-62]، که نقش کلیدی شبکه مویرگی را در آسیب کلیوی نشان می دهد. یک هدف درمانی بالقوه

با توجه به موارد فوق، واضح است که معماری پیچیده عروقی کلیه، بخش‌های اطراف عروقی متعددی را ایجاد می‌کند که هر کدام عملکردها و الزامات خاص خود را دارند. بنابراین، تحقیقات آینده با تمرکز بر طبقه‌بندی عمیق پری‌سیت‌های کلیوی با توصیف زیرجمعیت‌ها بر اساس مکان، مورفولوژی سلولی و عملکرد آنها مورد نیاز است. به این ترتیب، روش‌های تصویربرداری جدید که هدف آنها دسترسی غیرتهاجمی به عروق خونی با اندازه کوچک است، ممکن است این اطلاعات ضروری را ارائه دهد. همانطور که در زمینه نوروبیولوژی [12] نشان داده شده است، طبقه بندی به خوبی تعریف شده زیرگروه های مختلف پری سیت ها می تواند راه های جدیدی را برای توسعه درمان هدفمند برای سوء عملکرد عروقی فراهم کند.

4. روش های تصویربرداری عروقی

بیماری های کلیوی مختلف منعکس کننده الگوی مشخصی از تغییرات فراساختاری هستند. در نتیجه پیشرفت‌های تکنولوژیکی در زمینه تصویربرداری بیوپزشکی، مکانیسم‌های فیزیولوژیکی و پاتوفیزیولوژیکی کلیه در چند دهه گذشته آشکار شد [63]. با تمرکز بر تغییرات آناتومیکی و مورفولوژیکی معماری بافت، دانش ما در مورد بیماری کلیوی به تدریج افزایش یافت که تشخیص را بهبود بخشید و فرصت های درمانی نوآورانه ای را ارائه داد. با این حال، تغییر دینامیکی عروق خونی عمدتاً به دلیل چالش بررسی رفتار عروقی در آزمایش‌های سری زمانی نادیده گرفته شده است. در نتیجه، نیاز پزشکی برآورده نشده برای توسعه تکنیک های تصویربرداری غیرتهاجمی برای نظارت بر همودینامیک میکروسیرکولاسیون کلیوی وجود دارد [16].

همچنین پیوند دادن نتایج تصویربرداری به نشانگرهای زیستی (جدید) در زمینه نفرولوژی عروقی جالب خواهد بود. به عنوان مثال، ما نشان دادیم که RNA های غیر کدکننده به شدت با آسیب عروقی مرتبط هستند [64،65]. ترکیب این اندازه‌گیری‌ها ممکن است روابط جدید (علی) و احتمالات جدیدی برای تشخیص به دست آورد. علاوه بر این، هنگامی که روش‌های تصویربرداری جدید با توسعه اخیر تکنیک‌های مبتنی بر سلول منفرد مانند توالی‌یابی RNA تک سلولی و رونویسی فضایی [53،66،67] همراه می‌شوند، این می‌تواند امکان تجزیه و تحلیل عمیق بی‌سابقه‌ای از ترکیب و دینامیک را فراهم کند. از عروق کلیوی بخش‌های زیر روش‌های تصویربرداری خارج از بدن و in vivo را برای بررسی جنبه‌های مورفولوژیکی و عملکردی عروق کلیوی خلاصه می‌کنند.

4.1. Ex Vivo

بسیاری از دانش ما در مورد عروق کلیوی از تجزیه و تحلیل جامع برون تنی بیوپسی بافت به دست آمده است. بر این اساس، درمان مبتنی بر سلول اغلب با برش بافت و رنگ آمیزی ارزیابی می شود. اگرچه مطالعات زیادی در مورد بررسی اثر درمانی سلول‌های بنیادی مزانشیمی بر عروق کلیوی [68] وجود دارد، گروه‌های تحقیقاتی کمی از روش‌های تصویربرداری پیچیده، مانند توموگرافی ریز کامپیوتری (micro-CT)، برای ارزیابی درمان MSC با بررسی معماری سه‌بعدی استفاده کرده‌اند. از عروق کلیوی [69-74].

4.1.1. توموگرافی میکرو کامپیوتری (Micro-CT)

معرفی توموگرافی میکروکامپیوتری (micro-CT) توسط Flannery و همکاران. [75] در سال 1987 راه های جدیدی را برای مطالعه عروق دست نخورده جوندگان به منظور به دست آوردن دانش مکانیسم های بیماری با وضوح فضایی بالا باز کرد. این روش ex vivo تجسم معماری میکروواسکولار کلیه و تعیین کمیت تعداد گلومرولی، توزیع فضایی و حجم را ممکن می‌سازد، که می‌تواند به عنوان شاخصی برای وضعیت پاتوفیزیولوژیکی کل اندام مورد استفاده قرار گیرد [76]. وضوح در یک میدان دید سه بعدی با 10،243 وکسل امکان تجسم شریان های آوران و وابران و همچنین مویرگ های گلومرولی کلیه های جوندگان را فراهم می کند. در موش‌ها، اندازه وکسل بازسازی‌شده 21 میکرومتر استفاده شد [77] و در خوک‌ها، عروق کلیوی با اندازه وکسل 40 میکرومتر و میدان دید اسکن 1.2 میلی‌متر مورد مطالعه قرار گرفت [78]. پیشرفت‌ها در زمینه میکروسی‌تی فرصت تصویربرداری از رگ‌های نفرون موش را با وضوح وکسل 1 میکرومتر در میدان دید اسکن 2 میلی‌متری فراهم کرد [79].

بر اساس تکنیک کمی سازی توسعه یافته توسط هیلمن و همکاران. [80] با استفاده از CT معمولی، معماری عروق و حجم عروقی در محفظه‌های مختلف بافت کلیوی در راستای مطالعات مشابه، که عروق کلیوی را بر اساس مقاطع بافت‌شناسی ارزیابی می‌کردند، تعیین شد [77]. جالب توجه است که با استفاده از روش‌های تصویربرداری مانند میکرو سی‌تی، اهمیت بررسی مویرگ‌های اطراف لوله‌ای و درگیری آنها در شرایط پاتولوژیک علاوه بر تفکر مرسوم در مورد نقش شبکه مویرگی گلومرولی افزایش یافت.

تغییرات ساختاری اولیه ریز عروق را می توان با میکرو CT مشاهده و شناسایی کرد، بنابراین جای تعجب نیست که چندین مکانیسم مولکولی در سطح عروقی که در بیماری کلیوی دخیل هستند توسط میکرو CT شناسایی شوند. در مدل‌های مختلف بیماری کلیوی، مانند بیماری کلیه پلی کیستیک (PKD)، یک ارتباط بین پاتولوژی و کاهش عروق خونی که توسط میکرو CT با وضوح اندازه وکسل 17 میکرومتر تعیین شد، توصیف شد [81]. علاوه بر این، افزایش تراکم میکروواسکولار قشر مغز در هیپرکلسترولمی به عنوان نشانه اولیه آسیب مورفولوژیکی پیشرونده کلیه مشاهده شد [78]. در موش‌های مبتلا به بستن مزمن مجرای صفراوی، هیپوپرفیوژن قشر مغز با میکرو CT تشخیص داده شد که ممکن است اختلال احتباس نمک و آب را با پیشرفت بیشتر بیماری توضیح دهد [82]. علاوه بر این، در کلیه های تنگی، افزایش استرس اکسیداتیو با بازسازی ریز عروق کلیوی مرتبط بود و امکانات درمانی از طریق مداخله آنتی اکسیدانی مزمن ارائه شد [83].

مزیت عمده میکرو سی تی این است که می توان هندسه محوری و شعاعی سیستم های عروقی را تعریف کرد [84]. علاوه بر تجسم معماری عروق کلیوی به صورت سه بعدی، تراکم فضایی ریزرگ‌ها را می‌توان ارزیابی کرد [78،83]، تراکم و اندازه عروق را می‌توان با قطر تا 80 میکرومتر در بخش‌های آناتومیک کلیوی مختلف تعیین کرد [77،78،83،85]. ]، و پیچ خوردگی رگ ها را می توان مشاهده کرد [83]. علاوه بر این، حجم مویرگی عروقی گلومرول‌ها و همچنین مویرگ‌های اطراف لوله‌ای را می‌توان در داخل قشر تشخیص داد و کمیت کرد [82].

یک پروتکل کمی استاندارد شده به طور گسترده ای برای بررسی تغییرات ریز عروقی در بخش های قشر و مدولاری به خوبی تعریف شده در سطح ساختاری به منظور تعیین چگالی و قطر عروق استفاده شده است [77،82]. انگو و همکاران [84] مطالعه مقایسه ای میکرو CT و میکروسکوپ نوری را انجام داد و به این نتیجه رسید که کمی کردن هندسه عروق کلیوی به دست آمده توسط میکرو CT یک تکنیک عملی و دقیق است. تنها ارزش افزوده تصویربرداری میکروسکوپی نوری در مقایسه با میکرو CT این است که از طریق امکان تجسم دیواره عروقی، امکان تمایز بین شریان‌ها و وریدها را فراهم می‌کند. با این حال، با استفاده از میکرو CT، عروق با قطر 100 و 60 میکرومتر به ترتیب موش‌ها و خرگوش‌ها می‌توانند به صورت سه بعدی تجسم شوند. با این حال، رگ‌های خونی کوچک‌تر از 10 میکرومتر را نمی‌توان به‌درستی با میکرو CT شناسایی کرد، و نیاز به بازگشت به ایمونوهیستوشیمی برای گرفتن حتی کوچک‌ترین مویرگ‌های کلیوی را ضروری می‌کند [85].

4.1.2. میکروسکوپ فلورسانس ورق نوری (LSFM)

با معرفی میکروسکوپ فلورسانس صفحه نور (LSFM)، امروزه می توان تصویربرداری با وضوح بالا از حجم های بزرگ را در مدت زمان معقولی به دست آورد [86،87]. از طریق در دسترس بودن LSFM، علاقه از تکنیک‌های بافت‌شناسی مرسوم که شامل برش دادن بافت و به دنبال آن رنگ‌آمیزی عروق میکروسکوپی است، به سمت تصویربرداری از بافت به‌عنوان کل تغییر یافت. تجزیه و تحلیل حجمی مطلوب است زیرا نه تنها یک بخش انتخاب شده از بافت مورد بررسی قرار می گیرد، بلکه شخصیت دینامیکی معماری و رفتار رگ در نمای سه بعدی حفظ می شود.

برای حفظ اطلاعات سه بعدی، یک نمونه بیولوژیکی از طریق پروتکل های مختلف پاکسازی بافت نوری (OTC) شفاف ساخته می شود تا پراکندگی نور و جذب نور برای رنگ آمیزی فلورسنت FL بیشتر به حداقل برسد [87]. در سال‌های اخیر، روش‌های OTC محبوبیت پیدا کرده‌اند، زیرا تصویربرداری سه‌بعدی فرصتی برای مطالعه اندام‌های دست نخورده به دلیل پیشرفت‌های مدرن LSFM فراهم می‌کند. ساخت یک اندام دست نخورده یا حتی یک حیوان کامل با وضوح سه بعدی در سطح سلولی را می توان در عرض چند دقیقه به دست آورد [88]. با وضوح قابل مقایسه با میکروسکوپ فلورسانس FL کانفوکال، LSFM نسبت سیگنال به نویز دو مرتبه بهتری دارد، به طور چشمگیری سفید شدن فلوروفور FL و فوتوتوکسیک را کاهش می‌دهد و پردازش تصویربرداری در مقیاس بزرگ مورد نیاز برای OTC را ممکن می‌سازد [89]. مزایای دیگر این است که تعداد فریم های ضبط شده و سرعت ضبط بیشتر است، در حالی که مدت زمان کلی تصویربرداری بسیار کوتاه تر است.

از زمان معرفی LSFM، چندین پروتکل OTC برای نمونه‌های بافتی مختلف و اندام‌های مشتق شده از گونه‌های مختلف بهبود و اصلاح شدند. در سال های گذشته، پاکسازی غیرسمی مبتنی بر حلال توسط اتیل سینامات (ECi) به طور گسترده برای پاکسازی کلیه های موش استفاده می شود [88،90،91]. این پروتکل زمان‌بر کمتری دارد، به‌عنوان مثال پروتکل‌های پیشگام CLARITY (تصویربرداری صلب آکریل آمید تبادل‌شده با لیپید شفاف)، CUBIC (کوکتل‌های تصویربرداری واضح و بدون مانع از مغز/بدن و تجزیه و تحلیل محاسباتی)، و/یا DISCO (تصویربرداری سه بعدی از اندام های پاکسازی شده با حلال)، با این حال پاکسازی نسبتا معقولی از کلیه را با مقدار کمی اتوفلورسانس باقی مانده ارائه می دهد. کار قابل توجهی توسط Ertürk و همکاران [92] انجام شد، که با موفقیت یک کلیه انسان را با یک رویکرد نفوذپذیری بافت جدید به نام SHANEL (پاکسازی و برچسب زدن کارآمد اندام انسانی با واسطه میسل کوچک) پاکسازی کردند. ناحیه قشر به ابعاد حدود 665 ± 2742 میلی متر (میانگین ± انحراف معیار) تعیین شد که حاوی مویرگ های گلومرولی با قطر 37 ± 221 میلی متر بود و شریان آوران دارای قطر 28 ± 71 میلی متر بود. علاوه بر این، یک چارچوب مبتنی بر یادگیری عمیق بسیار پیچیده برای تعیین کمیت عروق عصبی پس از OTC، به نام VesSAP (خط لوله تقسیم‌بندی و تحلیل عروق)، در حوزه علوم اعصاب توسعه داده شده است [93].

علیرغم این واقعیت که در سال‌های اخیر پیشرفت‌های زیادی در زمینه OTC حاصل شده است، برخی از معایب هنوز باقی مانده است زیرا بیان فلوروفورهای درون‌زا FL عمدتاً به طور رضایت‌بخش حفظ نشده است و استفاده از حیوانات تراریخته را محدود می‌کند. با این حال، یک نگرانی عمده این است که اندازه مورفولوژیکی بافت و در نتیجه عروق توسط حلال‌های خشن مورد نیاز برای OTC تغییر می‌کند. علاوه بر این، حجم عظیمی از داده های تولید شده توسط LSFM، نه تنها برای ذخیره سازی و مدیریت صحیح داده ها، بلکه برای تجزیه و تحلیل کمی نیز یک چالش باقی می ماند [87].

به طور خلاصه، یکی از مزیت های مهم استفاده از تکنیک هایی مانند میکرو CT یا SFM این است که می توان توزیع عروق فضایی را ضبط کرد و نادر شدن ساختاری شبکه عروقی با وضوح مناسب برای تصویربرداری تقریباً از تمام ساختارهای مویرگی کلیوی شناسایی می شود. با این حال، هر دو تکنیک نیاز به تثبیت دارند و بنابراین فقط می‌توانند خارج از بدن انجام شوند. برای نظارت بر تغییرات مورفولوژیکی و عملکردی عروق کلیوی، استراتژی‌های تصویربرداری در زمان in vivo مورد نظر است.

4.2. در ویو

استفاده از روش‌های تصویربرداری in vivo فرصتی را برای ارزیابی درمان مبتنی بر سلول در زمان واقعی و تأیید اثرات درمانی احتمالی بر سطح عروقی ارائه می‌دهد. در نتیجه، پیشرفت‌ها در زمینه تصویربرداری زیست‌پزشکی in vivo برای مطالعه اثرات مبتنی بر MSC بر عروق کلیه فشار می‌آورد. تنها تعداد زیادی از مطالعات، تصویربرداری in vivo را برای بررسی عملکرد MSC، با استفاده از میکروسکوپ چند فوتونی (MPM) [94]، CT [95،96] و تصویربرداری رزونانس مغناطیسی (MRI) [95-97] اعمال کرده‌اند.

4.2.1. میکروسکوپ چند فوتونی (MPM)

میکروسکوپ چند فوتونی (MPM) به جذب همزمان دو یا چند فوتون فقط در سطح کانونی بستگی دارد که در سال 1995 در دسترس قرار گرفت [98]. فرآیندهای پویا را می توان در داخل بدن در سطح سلولی مشاهده کرد، و علاوه بر مطالعه جریان خون عروق کلیوی [63]، MPM فرصتی را برای نظارت بر بخش های میکروواسکولار کلیوی در زمان واقعی ارائه می دهد. وضوح بالا امکان تجسم شریان های آوران و وابران و مویرگ های گلومرولی را فراهم می کند. حتی اگر از نظر فنی دسترسی به میکروسیرکولاسیون مدولاری امکان پذیر است، با این وجود به دلیل عمق نفوذ همچنان یک چالش باقی می ماند [98]. با این حال، تجسم یک گلومرول کامل با قطر تقریبی 100 میکرومتر و دسترسی به فرآیندهای پویا در سطح سلولی امکان پذیر است.

نکته مهم این است که نشت میکروواسکولار in vivo را می توان از طریق برون ریزی آبی ایوانز در کلیه های فیبروتیک توسط MPM مشاهده و کمیت کرد [99]. تعداد مویرگ های پرفیوژن اندازه گیری شد و قطر بسیار کمتر از 10 میکرومتر تعیین شد. اخیراً، گروه تحقیقاتی ما از MPM استفاده کرد تا شواهدی را ارائه دهد که نشان می‌دهد ارگانوئیدهای کلیه مشتق از سلول‌های بنیادی پرتوان انسانی (hPSC) پس از پیوند زیر کپسولی کلیه، یک ارتباط عملکردی با عروق کلیوی از قبل موجود در موش‌ها ایجاد می‌کنند [100,101].

مزایای MPM عدم وجود فلورسانس خارج از فوکوس FL و فتوپلیچینگ محدود در ناحیه کانونی است [98]. با این حال، یکی از معایب، عمق تصویربرداری محدود است که نیاز به استفاده از یک پنجره تصویربرداری شکمی برای دسترسی به عروق کلیوی در داخل بدن دارد [102،103]. این پنجره شکمی امکان تصویربرداری in vivo را برای چند هفته تا یک ماه فراهم می کند. با این حال، قرار دادن چنین پنجره تصویربرداری نیاز به جراحی تهاجمی دارد و با احتمال التهاب همراه است. علاوه بر این، پنجره های تصویربرداری گاهی از بین می روند و نکروز بافتی ممکن است رخ دهد [102]. بدیهی است که این روش تصویربرداری قابل ترجمه به عمل بالینی نیست.

یک جایگزین جالب برای نظارت بر جریان خون مویرگی به صورت غیر تهاجمی در کنار تخت، از زمان معرفی میکروسکوپ حیاتی دستی (HVM) در عمل بالینی قابل دستیابی است [104]. اگرچه این روش تصویربرداری مبتنی بر فناوری کاملاً متفاوتی است، به‌عنوان مثال، میکروسکوپ‌های ویدئویی با میدان تاریک جریان جانبی و تصادفی، ارزیابی بلادرنگ مویرگ‌های واقع‌شده سطحی را ارائه می‌دهد. الگوریتم‌های جدید پیاده‌سازی شده بالینی، معروف به بسته‌های نرم‌افزاری MicroTools، آنالیز تصویربرداری میکروواسکولار خودکار از تراکم عروق کل و پرفیوژن را برای دسترسی به رگ‌زایی، اتساع/انقباض عروق، و تعادل مایع، و همچنین ظرفیت تحویل اکسیژن بر اساس هماتوکریت مویرگی و سرعت گلبول‌های قرمز، امکان‌پذیر می‌سازند [105]. ]. با این حال، برای مطالعه عروق کلیوی، این روش ها به دلیل عمق نفوذ محدود مناسب نیستند.

4.2.2. توموگرافی کامپیوتری (CT)

روش‌های تصویربرداری غیرتهاجمی که قادر به نظارت و تعیین کمیت تغییرات مورفولوژیکی و عملکردی عروق کلیوی هستند، برای تعیین نقش ریز عروق در پیشرفت بیماری به CKD بسیار مورد نیاز است. Ehling و همکاران، حتی با وجود اینکه یک رابطه علی بین نادر شدن مویرگی و پیشرفت فیبروز کلیوی برای سالهای متمادی شناخته شده است. [3] اولین کسانی بودند که آنالیزهای کیفی و کمی غیر تهاجمی تغییرات آناتومیکی و عملکردی عروقی را در طول پیشرفت CKD انجام دادند. کاهش تدریجی حجم خون کلیوی توسط میکرو CT با کنتراست in vivo در سه مدل موش مبتلا به فیبروز پیشرونده کلیه، به عنوان مثال، آسیب ایسکمی خونرسانی مجدد (IRI)، انسداد یک طرفه حالب، و موش آلپورت مشاهده شده است. علاوه بر تغییرات عملکردی رگ‌های کوچک، از دست دادن عروق اطراف لوله‌ای با تشکیل بافت فیبروتیک در هر سه مدل موش CKD مرتبط است. با این حال، برای به دست آوردن اطلاعات در مورد نقاط انشعاب، قطر رگ، و پیچ خوردگی، میکرو CT ex vivo مورد نیاز بود، که نشان دهنده نیاز به فناوری‌های تصویربرداری زیست پزشکی در حال ظهور است که دسترسی به رگ‌های کوچک را در داخل بدن با وضوح نزدیک به سلولی فراهم می‌کند.

مزیت اصلی CT این است که تجسم عروق کلیوی در عرض چند دقیقه با وضوح معقول به دست می آید و اطلاعات سه بعدی در مورد سازمان عروق ارائه می کند. با استفاده از مواد کنتراست مبتنی بر ید، کنتراست افزایش می یابد و حتی تصویر دقیق تری از ریز عروق به دست می آید. اخیراً، ارزیابی کمی و کیفی توسط میکرو CT کلیه‌های موش در شرایط فیزیولوژیکی و پاتولوژیک با پرفیوژن با اسید فسفو تنگستیک (PTA) برای افزایش کنتراست درون رگ‌های خونی اصلاح شد [106]. حتی اگر محدودیتی که شریان‌ها و سیاهرگ‌ها را نمی‌توان به وضوح از یکدیگر متمایز کرد، وضوح با اندازه وکسل 40 میکرومتر در داخل بدن و اندازه وکسل 12.5 میکرومتر در خارج از بدن، سازمان را تا سطح رگ‌های خونی کمانی تسخیر کرد.

یکی دیگر از معایب عمده استفاده از CT برای نظارت بر بیماری کلیوی، با این حال، لزوم استفاده از مواد حاجب رادیوگرافی یددار است. شناخته شده است که این مواد حاجب باعث ایجاد سمیت کلیوی می شوند، که یک منع مصرف برای کاربرد بالینی در بیماران مبتلا به نارسایی کلیوی از قبل موجود است [107-109]. نارسایی حاد کلیه به دلیل ماده حاجب تجویز شده، همودینامیک کلیه را تغییر می دهد و باعث هیپوکسی مدولاری می شود که به ویژه هنگام بررسی نادر شدن عروق کلیوی نامطلوب است. به طور مشابه، عوامل کنتراست مبتنی بر گادولینیوم که به طور گسترده در MRI استفاده می شود توسط کلیه حذف می شوند و به نظر می رسد که باعث نارسایی کلیوی می شوند [110].

4.2.3. تصویربرداری رزونانس مغناطیسی (MRI)

MRI در دهه 1980 در عمل بالینی معرفی شد و بلافاصله به یکی از پرکاربردترین تکنیک های تصویربرداری تبدیل شد [111]. MRI یک روش تصویربرداری غیر تهاجمی و غیر یونیزه است که میدان مغناطیسی قوی اعمال می‌کند و با استفاده از تغییر ماده حاجب T1 و T2 می‌توان خواص آرام‌سازی خون را تشخیص داد. علاوه بر این، آنژیوگرافی تشدید مغناطیسی (MRA) معماری عروقی حیوانات کوچک را با استفاده از یک ماده کنتراست مبتنی بر گادولینیوم به تصویر می‌کشد. با این حال، یکی از معایب اصلی MRA استفاده دشوار از ماده حاجب مورد نیاز است. خوشبختانه، پرفیوژن کلیوی را می‌توان با و بدون نیاز به مواد حاجب که هم مزایا و هم محدودیت‌هایی را ارائه می‌کنند، تعیین کرد.

بدون استفاده از ماده کنتراست، برچسب زدن اسپین از آب درون زا به عنوان یک ردیاب قابل انتشار بهره می برد که تنها امکان کمی سازی پرفیوژن در قشر کلیوی را فراهم می کند زیرا زمان انتقال مدولری برای ضبط بسیار طولانی است. علاوه بر این، برای تعیین جریان خون کلیوی، تغییر فاز اسپین ها در امتداد یک جهت اندازه گیری می شود، که نشان دهنده نیاز به یک صفحه تصویربرداری عمود بر شریان های مورد نظر برای دستیابی به اندازه گیری دقیق است [112]. بنابراین، جای تعجب نیست که این تکنیک چالش بزرگی را برای تجسم شریان‌های کلیوی فراهم می‌کند، نه اینکه به مویرگ‌های قشر کوچک اشاره کنیم.

عملکرد عروق را می توان با کمی کردن RBF با پرفیوژن MR و نظارت بر وضعیت اکسیژن رسانی با تصویربرداری کنتراست وابسته به سطح اکسیژن خون (BOLD) تعیین کرد [112,113]. با این حال، محدودیت اصلی MRI عملکردی دستیابی به نتایج قابل اعتماد و قابل تکرار در اندام هایی است که تحت تأثیر حرکات تنفسی قرار می گیرند، که شامل کلیه می شود، حتی اگر در مقایسه با کبد یا روده کمتر مستعد ابتلا به مصنوعات حرکتی باشد [112]. علیرغم این واقعیت که مطالعات امکان سنجی انجام شده توسط MRI عملکردی 1.5 تسلا در هنگام انجام کمی سازی وکسل [114] نوید بزرگی را ارائه می دهد، ناهنجاری های پرفیوژن تنها در نواحی پاتولوژیک قابل تشخیص است که این سوال را مطرح می کند که آیا تغییرات جزئی عروقی به اندازه کافی تشخیص داده می شود یا خیر. با معرفی یک اسکنر MRI با شدت میدان مغناطیسی 3.{13}} تسلا، نسبت سیگنال به نویز به شدت بهبود یافت [115,116]، با این حال، وضوح به دست آمده همچنان یک مشکل است.

وضوح ارائه شده توسط MRI عمدتاً به شدت میدان مغناطیسی بستگی دارد و می تواند برای هر میدان مغناطیسی معینی با تطبیق توالی پالس بهینه شود [111]. وضوح فضایی عمدتاً توسط نسبت سیگنال به نویز محدود می شود که به زمان اکتساب سریع نیاز دارد و به طور کلی به وضوح 3×4 میلی متر در اندازه پیکسل می رسد [117]. حتی زمانی که میدان مغناطیسی بالای 7 تسلا اعمال می‌شود، بهترین وضوحی که می‌توان با BOLD به دست آورد حدود 500 میکرومتر است. علاوه بر رزولوشن رضایت‌بخش و محدودیت برای تجسم بیشتر فرآیندهای پویا، یکی دیگر از معایب مهم این است که MRI با هزینه‌های بالا مرتبط است و به امکانات و نگهداری ویژه نیاز دارد.

4.2.4. سونوگرافی

پیشرفت‌ها در سونوگرافی یک تغییر پارادایم برای نظارت غیرتهاجمی تغییرات میکروواسکولار کلیوی ساختاری و عملکردی معرفی کرد و راه‌های جدیدی را برای کشف عروق کوچک با یک سیستم قابل حمل با هزینه نسبتاً کم باز کرد. در یک مدل موش از ایسکمی حاد ناشی از هیپوپرفیوژن شدید به مدت 1 ساعت، جریان خون کلیوی در زمان واقعی با استفاده از سونوگرافی داپلر رنگی و موج پالسی (PW) ارزیابی شد [118]. تصویربرداری داپلر رنگی همچنین دشواری در تجسم شریان های قوسی را به دلیل اندازه نسبتا کوچک آنها و موقعیت عمود بر پروب برای گرفتن جریان شریان مورد نیاز برای محاسبه سرعت خون و اعمال اصلاح زاویه داپلر نشان داد. با این حال، سرعت خون را فقط می توان در شریان های داخل کلیوی، به عنوان مثال، عروق سگمنتال، بین لوبار و کمانی محاسبه کرد. بر این اساس، به دلیل محدودیت وضوح ارائه شده توسط اولتراسوند معمولی، نمی توان اطلاعات مربوط به میکروسیرکولاسیون را به دست آورد.

با معرفی فناوری اولتراسوند داپلر فوق سریع، وضوح بیشتری را می توان با انتقال موج غیرمتمرکز که ارسال چندین امواج همزمان با نرخ فریم بالا به طور همزمان در یک میدان دید کامل است، به جای اسکن خط در هر خط از طریق استفاده از انتقال پرتو متمرکز [119]. این انتقال موج سطحی مفهوم اساسی پشت تصویربرداری اولتراسوند داپلر فوق سریع است و تشخیص عروق قشری کلیه پیوند شده انسان با قطر کمتر از 1 میلی متر را ممکن می سازد [120]. علاوه بر این، سونوگرافی داپلر فوق سریع، یک تکنیک بسیار مطلوب in vivo را برای پایش نادر شدن عروق کلیوی در مطالعات پیش‌بالینی فراهم می‌کند (شکل 3A). علی‌رغم پیشرفت‌های سونوگرافی داپلر فوق سریع، دسترسی به سطح مویرگی همچنان به استفاده از عوامل کنتراست افزایش یافته وابسته است [121]. با این وجود، هیچ نگرانی ایمنی قابل ذکری هنگام استفاده از یک ماده تقویت‌کننده کنتراست برای سونوگرافی داپلر وجود ندارد، به‌ویژه در مقایسه با مواد حاجب CT و MRI که اغلب سمیت کلیوی نشان می‌دهند [122]. با این حال، وضوح باورنکردنی عروق کلیوی موش را می توان در داخل بدن انجام داد (شکل 3B).

میکروسکوپ محلی سازی اولتراسوند (ULM) با استفاده از تصویربرداری اولتراسوند داپلر فوق سریع و از سوی دیگر با استفاده از مواد کنتراست اولتراسوند به شکل میکروحباب های پر از گاز، تعادل بین وضوح فضایی و عمق نفوذ را حل کرد. [121,123,124]. از جمله، اریکو و همکاران. [123] ULM را برای تصویربرداری از عروق ریز جمجمه ای با قطر 10 میکرومتر در کل عمق مغز موش که تقریباً 10 میلی متر ضخامت دارد، پیشنهاد کرد. در یک انتشار اخیر، Demené و همکاران. [125] می‌تواند دینامیک جریان خون عروق مغزی را در سطح میکروسکوپی در عمق مغز انسان با ردیابی میکروحباب‌های تزریق داخل وریدی به صورت جداگانه برای بهبود تصویربرداری با وضوح فوق‌العاده و امکان تفکیک عروقی تا 25 میکرومتر ثبت کند. برای درک این دستاورد شگفت‌انگیز، ذکر این نکته ضروری است که هیچ روش تصویربرداری غیرتهاجمی دیگری نمی‌تواند ریز عروق را در داخل بدن زیر مقیاس میلی‌متری تجسم کند. برای رسیدن به این وضوح فضایی قابل توجه در داخل بدن، دو چالش عمده برای غلبه بر وجود داشت: انحراف جمجمه و مصنوعات حرکتی. حتی اگر استفاده از ULM برای اندام های شکمی مانند کلیه با انحراف ساختارهای استخوانی مختل نمی شود، مصنوعات حرکتی مشکل بزرگی را نشان می دهند. با این حال، مطالعات اخیر in vivo با موفقیت اولین تلاش‌ها را برای تصویربرداری از عروق کلیوی توسط ULM ارائه کرد [5,126,127].

محفظه‌های عروقی مختلف در کلیه موش صحرایی قابل تشخیص بودند، و با اعمال میکروحباب‌ها، وضوح برای تجسم دسته‌های عروقی نازک وازا رکتا که با فاصله 400 میکرومتری از یکدیگر جدا شده‌اند، افزایش یافت [5]. علاوه بر این، سرعت خون محوری، یعنی کمتر از 2 میلی‌متر بر ثانیه، مرتبط با جریان ریزرگ‌های کلیوی، با ردیابی میکروحباب‌های تزریق شده با قطر 1 میکرومتر که می‌توانند به قطر رگ کمتر از 20 میکرومتر برسند، تخمین زده شده است. سونگ و همکاران [127] ریزرگ‌های قشر کلیوی خرگوش‌ها را تصویربرداری کردند و توانستند عروقی را در داخل بدن با قطر 76 میکرومتر به وضوح جدا کنند. اگرچه حرکت تنفسی را می توان اصلاح کرد، مصنوعات حرکتی خارج از صفحه همچنان چالش برانگیز هستند و اصلاح آنها غیرممکن است زیرا اطلاعات تصویربرداری به طور کامل به دست نمی آید [5].

اخیراً، پیشرفت AKI به CKD توسط سونوگرافی داپلر فوق سریع با کنتراست در مدل موش IRI یک طرفه مورد مطالعه قرار گرفته است [6]. با تزریق میکروحباب‌ها، رگ‌های خونی کوچک کلیوی 32 میکرومتری شناسایی و تغییرات عروقی در کلیه، یعنی حجم خون کلیوی، تراکم عروقی و پیچ‌خوردگی اندازه‌گیری شد. تراکم عروقی قشر و اتصال کورتیکومدولاری که توسط سونوگرافی در طی تصویربرداری درون تنی به دست می‌آید با کمیت به‌دست‌آمده پس از رنگ‌آمیزی ایمونوهیستوشیمی CD31 که به عنوان یک استاندارد طلایی در زیست‌شناسی عروقی شناخته می‌شود، مطابقت داشت. این در راستای مطالعه دیگری است که توسط Cao و همکارانش انجام شده است. [128]، که نشان می دهد که شدت AKI را می توان با سونوگرافی با کنتراست با استفاده از تزریق میکروحباب تعیین کرد. اندازه گیری پرفیوژن کلیه در داخل بدن با آسیب کلیوی تعیین شده در سطح بافت شناسی ارتباط نزدیکی دارد.

مطابق با آن مطالعات اولتراسوند، Hueper و همکاران. [7] قبلاً پیشنهاد کرده بود که پرفیوژن کلیه ممکن است پیشرفت AKI-to-CKD را که توسط MRI تعیین می شود، پیش بینی کند.

تصویربرداری اولتراسوند تقویت‌شده با میکروحباب از عروق کلیوی قبلاً با موفقیت در انسان برای تعیین پرفیوژن میکروواسکولار کلیه انجام شده است و دیدگاه‌های خوبی برای تشخیص نشان داده است [129-133]. جالب توجه است که این روش تصویربرداری در پیوند کلیه برای تعیین وضعیت پرفیوژن آلوگرافت کلیه استفاده شده است که ممکن است یک بازخوانی غیرتهاجمی مناسب برای پیش‌بینی رد حاد ارائه دهد [134]. علاوه بر وابستگی اپراتور که ممکن است در هنگام استفاده از اولتراسوند یک محدودیت را نشان دهد، قدرت توافق بین ناظر بین دو خواننده بسیار بالا بود که منعکس کننده امکان پذیری زیادی در هنگام استفاده در محیط بالینی بود [132]. با توجه به قابل حمل بودن و صرفه جویی در زمان و کاربرد ساده سفارشی، سونوگرافی با میکروحباب های تقویت شده با کنتراست چشم اندازهای عالی برای ارزیابی عروق کلیوی در عمل بالینی، به ویژه در بیماران ICU فراهم می کند [135]. بنابراین، این فناوری پس از تسلط موفقیت آمیز در تصحیح مصنوعات حرکتی شکم برای ردیابی میکروحباب قوی با دقت بالا، نوید بزرگی را برای ترجمه به عمل بالینی ارائه می دهد.

5. نتیجه گیری و دیدگاه ها

ناهمگونی چشمگیر معماری عروق کلیوی، تنوع عملکردی و بخش‌بندی پیچیده آن را منعکس می‌کند، با یک نتیجه منطقی که مطالعه تغییر و نادر شدن عروق کلیوی نیازمند روش‌های تصویربرداری پیچیده است. توسعه، کاربرد و بهبود روش‌های تصویربرداری in vivo برای مطالعه بیماری‌های عروقی کلیوی، درک بیشتری از عملکرد سلول‌درمانی‌ها مانند MSC در سطح عروقی فراهم می‌کند و ممکن است نشانگرهای زیستی خاصی را که می‌توان در طول پیشرفت بیماری نظارت کرد، روشن کرد.

منابع

1. چاد، AR ساختار عروق کلیوی و نادر. مقایسه فیزیول. 2013، 3، 817-831. [CrossRef] [PubMed]

2. چاد، عروق کوچک AR، نقش بزرگ: میکروسیرکولاسیون کلیوی و پیشرفت آسیب کلیوی. فشار خون بالا 2017، 69، 551-563. [CrossRef] [PubMed]

3. Ehling، J. بابیکووا، جی. گرمسه، اف. Klinkhammer، BM; باتکه، اس. ناچل، آر. کیسلینگ، اف. فلوژ، جی. لامرز، تی. Boor, P. تصویربرداری کمی توموگرافی میکروکامپیوتری از اختلال عملکرد عروقی در بیماری های پیشرونده کلیه. مربا. Soc. نفرول. 2016، 27، 520-532. [CrossRef] [PubMed]

4. چن، TK; نیکی، DH; Grams، ME تشخیص و مدیریت بیماری مزمن کلیه: مروری. فیزیول. رفتار 2019، 322، 1294-1304. [CrossRef] [PubMed]

5. فوئرت، ج. ژانگ، اچ. ایلوویش، تی. محاکیان، ل. تام، اس. میکروسکوپ محلی سازی فراصوت فرارا، KW برای تصویربرداری و ارزیابی ریز عروق در کلیه موش صحرایی. علمی Rep. 2017, 7, 13662. [CrossRef] [PubMed]

6. چن، س. یو، جی. راش، BM؛ Stocker، SD; قهوهای مایل به زرد، RJ; کیم، K. کلیه بین المللی. 2020، 98، 355-365. [CrossRef] [PubMed]

7. هوپر، ک. گاتبرلت، ام. رانگ، اس. هارتانگ، دی. منگل، م. لو، ایکس. هالر، اچ. واکر، اف. مایر، ام. Gueler، F. آسیب حاد کلیه: برچسب زدن چرخش شریانی برای نظارت بر اختلال پرفیوژن کلیوی در موش - مقایسه با نتایج هیستوپاتولوژیک و عملکرد کلیه. رادیولوژی 2014، 270، 117-24. [CrossRef]

8. لوی، BI; شیفرین، EL; مراد، جی جی; آگوستینی، دی. ویکاوت، ای. صفر، من; Struijker-Boudier، HA اختلال در پرفیوژن بافتی یک آسیب شناسی رایج برای فشار خون بالا، چاقی و دیابت است. تیراژ 2008، 118، 968-976. [CrossRef]

9. Carmeliet، P. مکانیسم‌های مولکولی جین، RK و کاربردهای بالینی رگ‌زایی. طبیعت 2011، 473، 298-307. [CrossRef]

10. مولما، ج. Aird، WC ناهمگونی عروقی در کلیه. سمین. نفرول. 2012، 32، 145-155. [CrossRef]

11. آرمولیک، ع. آبرامسون، ا. Betsholtz، C. برهمکنش اندوتلیال / پریسیت. دور Res. 2005، 97، 512-523. 03.16652.d7. [CrossRef]

12. اتول، دی. میشرا، ع. هال، CN؛ O'Farrell، FM; داکارا، تی. پری سیت چیست؟ جی. سرب. متاب جریان خون. 2016، 36، 451-5. [CrossRef]

13. ایوانز، آر جی; Eppel، GA; اندرسون، WP; دنتون، مکانیزم های KM زیربنای کنترل افتراقی جریان خون در مدولا و قشر کلیه. جی هیپرتنز. 2004، 22، 1439-1451. [CrossRef]

14. Palone, TL; سیلدورف، EP; ترنر، MR جریان خون داخل کلیوی: آناتومی میکروواسکولار و تنظیم پرفیوژن مدولاری. کلین انقضا فارماکول. فیزیول. 1998، 25، 383-392. doi:10.1111/j.1440-1681.1998.tb02220.x. [CrossRef]

15. پالون، TL; ادواردز، آ. Mattson، DL گردش مدولاری کلیه. مقایسه فیزیول. 2012، 2، 97-140. [CrossRef] [PubMed]

16. Guerci، P. ارگین، بی. Ince, C. ماکرو و میکروسیرکولاسیون کلیه. بهترین عمل. Res. کلین بیهوشی. 2017، 31، 315-329. [CrossRef]

17. شاو، آی. رایدر، اس. مولینز، جی. هیوز، جی. Péault، B. Pericytes در عروق کلیوی: نقش در سلامت و بیماری. نات. کشیش نفرول. 2018، 14، 521-534. [CrossRef]

18. روزیوال، ال. پتی-پتردی، JJ ناهمگنی شریان آوران - همبستگی بین مورفولوژی و عملکرد. نفرول. شماره گیری کنید. پیوند. 2006، 21، 2703-2707. [CrossRef]

19. استفانسکا، ا. کنیون، سی. کریستین، HC; باکلی، سی. شاو، آی. مولینز، جی جی. Péault, B. پری سیت های کلیه انسان رنین تولید می کنند. کلیه بین المللی 2016، 90، 1251-1261. [CrossRef]

20. Schlondorff, DO مروری بر عوامل مؤثر در پاتوفیزیولوژی بیماری پیشرونده کلیه. کلیه بین المللی 2008، 74، 860–866. [CrossRef]

21. پالون، TL; ژانگ، ز. راینهارت، ک. فیزیولوژی میکروسیرکولاسیون مدولاری کلیه. صبح. جی. فیزیول. رن. فیزیول. 2003، 284، F253-66. [CrossRef] [PubMed]

22. بسته‌های عروقی پالون، TL کمپلکس، اندام‌های صعودی ضخیم و آکواپورین‌ها: بصل النخاع خارجی را فشرده می‌کند. صبح. جی. فیزیول. رن. فیزیول. 2014، 306، 505-506. [CrossRef] [PubMed]

23. Zimmerhackl, BL; رابرتسون، CR; Jamison، RL میکروسیرکولاسیون مدولاری. کلیه بین المللی 1987، 31، 641-647. [CrossRef] [PubMed]

24. دوما، اس جی; متا، ای. بوری، م. لو، ی. لی، ایکس. Rabelink، TJ; Carmeliet، P. تنوع فنوتیپی و متابولیک. نات. کشیش نفرول. 2021، 1-24. [CrossRef]

25. دوما، اس جی; گارسیا-کابالرو، ام. Carmeliet، P. علائم متابولیک فنوتیپ های اندوتلیال متمایز. گرایش های اندوکرینول. متاب. 2020، 31، 580–595. [CrossRef]

26. Jourde-Chiche، N. فخوری، ف. دو، ال. بلینی، جی. برلی، اس. فرمت، م. Jarrot، PA; کاپلانسکی، جی. لو کوئینترک، ام. پرنین، وی. و همکاران ساختار و عملکرد اندوتلیوم در سلامت و بیماری کلیه نات. کشیش نفرول. 2019، 15، 87-108. [CrossRef]

27. لانگ، DA; نورمن، جی تی; خوب، LG بازیابی عروق کلیوی برای درمان بیماری مزمن کلیه. نات. کشیش نفرول. 2012، 8، 244-250. [CrossRef]

28. چوی، YJ; چاکرابورتی، اس. نگوین، وی. نگوین، سی. کیم، بی کی؛ شیم، SI; سوکی، WN; Truong، LD از دست دادن مویرگ دور لوله ای با آسیب مزمن لوله بینابینی در کلیه انسان همراه است: بیان تغییر یافته فاکتور رشد اندوتلیال عروقی. هوم پاتول. 2000، 31، 1491-1497. [CrossRef]

29. ایشی، ی. سوادا، تی. کوبوتا، ک. فوچینو، اس. ترائوکا، اس. Shimizu، A. آسیب و از دست دادن پیشرونده مویرگ های اطراف لوله در ایجاد نفروپاتی آلوگرافت مزمن. کلیه بین المللی 2005، 67، 321-332. [CrossRef]

30. سرون، دی. الکسوپولوس، ای. Raftery, MJ; هارتلی، بی. Cameron، JS تعداد مقاطع مویرگی بینابینی ارزیابی شده توسط آنتی بادی های مونوکلونال: ارتباط با آسیب بینابینی. نفرول. شماره گیری کنید. پیوند. 1990، 5، 889-893. [CrossRef]