کاربرد کوئرستین برای کپور معمولی (Cyprinus Carpio): I. اثرات بر عملکرد رشد، ایمنی هومورال، وضعیت آنتی اکسیدانی، ژن های مرتبط با ایمنی، و مقاومت در برابر استرس گرمایی

این مطالعه به منظور بررسی تأثیر سطوح مختلف کورستین بر عملکرد رشد، پاسخ‌های ایمنی، وضعیت آنتی‌اکسیدانی، عوامل بیوشیمیایی سرم و پاسخ‌های استرس در دمای بالا در ماهی کپور معمولی (Cyprinus carpio) انجام شد. تعداد کل 216 ماهی کپور معمولی با میانگین وزن 53 ± 27:21 گرم به 12 تانک (چهار تیمار × سه تکرار) تقسیم شدند و با 0 میلی‌گرم بر کیلوگرم کوئرستین (T0) تغذیه شدند. 200 mg/kg کورستین (T1)، 400 mg/kg کورستین (T2) و 600 mg/kg کورستین (T3) به مدت 60 روز. تفاوت معنی داری در عملکرد رشد وجود داشت و بیشترین وزن نهایی بدن (FBW)، افزایش وزن (WG)، سرعت رشد ویژه (SGR) و مصرف خوراک (FI) در T2 و T3 مشاهده شد (P <0:05). .

بین فاکتورهای بیوشیمیایی سرم و ایمنی رابطه نزدیکی وجود دارد. فاکتورهای بیوشیمیایی سرم متابولیت های اصلی بدن انسان هستند که افزایش یا کاهش سطح آنها بر ایمنی بدن انسان تأثیر می گذارد.

فاکتورهای بیوشیمیایی سرم شامل پروتئین ها، کربوهیدرات ها، چربی ها و سایر مواد است که شبکه متابولیک پیچیده ای را در بدن انسان تشکیل می دهند. هنگامی که بدن انسان در وضعیت سالمی قرار دارد، سطح فاکتورهای بیوشیمیایی سرم در حالت متعادلی خواهد بود که به حفظ سلامت بدن انسان کمک می کند.

هنگامی که بدن انسان از بیماری یا استرس رنج می برد، سطح فاکتورهای بیوشیمیایی سرم تغییر می کند که باعث کاهش ایمنی می شود. به عنوان مثال، هنگامی که سطح پروتئین و آمیلاز در سرم کاهش می یابد، ایمنی بدن به طور قابل توجهی ضعیف می شود و در نتیجه حساسیت به بیماری افزایش می یابد.

بنابراین حفظ تعادل فاکتورهای بیوشیمیایی سرم بسیار مهم است که از طریق تغییر سبک زندگی می توان به آن دست یافت. به عنوان مثال، ورزش بیشتر، مصرف کمتر غذاهای پرچرب، پر نمک و قند بالا و خوردن بیشتر میوه ها و سبزیجات تازه می تواند به بدن کمک کند سطح فاکتورهای بیوشیمیایی سرم سالم را حفظ کند و در نتیجه ایمنی را بهبود بخشد.

به طور خلاصه، فاکتورهای بیوشیمیایی سرم ارتباط تنگاتنگی با ایمنی انسان دارند و با هم شبکه متابولیک بدن را تشکیل می دهند. ما باید یک سبک زندگی سالم را حفظ کنیم و عوامل بیوشیمیایی سرم را در تعادل نگه داریم تا از سلامت خود محافظت کنیم. از این منظر، ما باید ایمنی خود را تقویت کنیم. سیستانچ می تواند به طور قابل توجهی ایمنی را بهبود بخشد زیرا سیستانچ همچنین دارای اثرات ضد ویروسی و ضد سرطانی است که می تواند توانایی سیستم ایمنی را برای مبارزه و بهبود ایمنی بدن تقویت کند.

روی فواید سلامتی سیستانچ کلیک کنید

سطوح مختلف کوئرستین به طور قابل توجهی فعالیت مسیر کمپلمان (ACH50) و فعالیت لیزوزیم را قبل و بعد از استرس گرمایی افزایش داد (P < 0:05). کاتالاز (CAT)، گلوتاتیون پراکسیداز (GPx) و مالون دی آلدئید (MDA) به طور قابل توجهی در ماهیانی که در معرض استرس گرمایی قرار داشتند افزایش یافتند، اما ماهی‌های تغذیه شده با رژیم غذایی مکمل با کورستین کمترین سطوح را هم قبل و هم بعد از استرس گرمایی نشان دادند (P < {{ 7}}:05). سطح سوپراکسید دیسموتاز (SOD) به طور قابل توجهی در رژیم غذایی ماهی های تغذیه شده با کوئرستین در هر دو فاز افزایش یافت (P <0:05). سطوح مختلف کوئرستین منجر به کاهش قابل توجهی در آلانین آمینوترانسفراز (ALT) و آسپارتات آمینوترانسفراز (AST) قبل و بعد از آزمون چالش برانگیز شد (P <0:05).

سطح گلوکز و کورتیزول در گروه کنترل در مقایسه با سایر تیمارها در هر دو مرحله به طور معنی‌داری بالاتر بود (P < {{0}}}:05). بیان گلوتاتیون پراکسیداز (GPx) و لیزوزیم به طور قابل‌توجهی در ماهی‌های تغذیه‌شده با جیره‌های حاوی کوئرستین افزایش یافت (P <0:05). هیچ اثر مشخصی برای هورمون رشد (GR) و اینترلوکین{5}} (IL8) مشاهده نشد (P > 0:05). در نتیجه، مکمل‌های غذایی کورستین (400- 600 میلی‌گرم/کیلوگرم کورستین) عملکرد رشد، ایمنی و وضعیت آنتی‌اکسیدانی را بهبود بخشید و تحمل به استرس گرمایی را افزایش داد.

1. معرفی

آبزی پروری به موازات رشد جمعیت جهان به طور فزاینده ای در حال توسعه است. با این وجود، فعالیت‌های فشرده تولید، تغییرات ناگهانی دما، آب و هوای غیرعادی و سایر شرایط محیطی مانند اینها باعث ایجاد استرس در ماهی می‌شود و با ایجاد افسردگی سیستم ایمنی و افزایش اپیدمی‌های عفونی، کیفیت تولید و عملکرد را مختل می‌کند. یکی از مهمترین موارد زیست محیطی در صنعت آبزی پروری دما است زیرا می تواند بر متابولیسم، رفتار تغذیه، عملکرد رشد، بقا و مقاومت در برابر بیماری حیوانات آبزی تأثیر بگذارد [1-3]. تغییرات دما باعث کاهش رشد، بازده خوراک، عملکرد فیزیولوژیکی، پاسخ ایمنی و وضعیت اکسیداتیو در اندام های آبزیان شد ([3-5]).

برای مبارزه با چنین چالش هایی، دخالت افزودنی های خوراکی کاربردی در جیره غذایی ماهی سازگار با محیط زیست و کارآمد است. این افزودنی ها به طور بالقوه می توانند رشد و عملکرد تولیدمثلی ماهی، کیفیت فیله و مقاومت در برابر بیماری ها و شرایط محیطی را افزایش دهند.

پلی فنل ها و افزودنی های غنی از پلی فنل برای افزایش عملکرد رشد، پاسخ ایمنی، وضعیت آنتی اکسیدانی و مقاومت در برابر بیماری به خوراک حیوانات آبزی اضافه می شوند [6، 7]. کورستین به عنوان کلاس اصلی فلاونوئیدها (فلاونول ها)، خانواده ای از ترکیبات پلی فنلی، در بسیاری از میوه ها و سبزیجات از جمله چای، پیاز، سیب، توت فرنگی، کلم، آجیل و گل کلم به وفور یافت می شود.

به طور گسترده ای پذیرفته شده است که کورستین تولید بیوفیلم بسیاری از باکتری های بیماری زا مانند انتروکوکوس فکالیس، استافیلوکوکوس اورئوس، استرپتوکوک جهش یافته، اشرشیاکلی و سودوموناس آئروژینوزا را با ویژگی هایی مانند سرکوب مسیر، اختلال در پمپاژ، ناهنجاری، جلوگیری می کند. غشای پلاسما، و مانع سنتز اسید نوکلئیک [8]. علاوه بر این، کورستین دارای خواص مفید بسیاری مانند ضد سرطان [9]، آنتی اکسیدان و ضد التهاب است [10].

یافته های قبلی نشان داد که کورستین رژیم غذایی بر وضعیت آنتی اکسیدانی [11، 12]، عملکرد رشد [13، 14]، کیفیت گوشت [15]، پارامترهای خونی و ایمنی [16]، مقاومت به بیماری [17، 18] تأثیر مثبت دارد. و خواص دفاعی ایریدوویروس هامور [19-21]. برخی تحقیقات نشان داد که کورستین رژیم غذایی عملکرد رشد مرغ [22] را افزایش داد و نمرات حسی مانند رنگ، بافت و پذیرش کلی کمر بز را افزایش داد [23]. در حیوانات آبزی، کورستین بالای 400 میلی گرم بر کیلوگرم عملکرد رشد ماهی تیلاپیا (Oreochromis spp.) را بهبود بخشید [24].

مطالعات قبلی گزارش کرده‌اند که مکمل‌های گیاهی رژیمی نشانگرهای استرس را در برخی از ماهی‌ها و/یا گونه‌های صدف مانند Macrobrachium rosenbergii [25]، Megalobrama amblycephala [26] و Oncorhynchus mykiss [27] که در معرض دمای بالا قرار دارند، کاهش می‌دهد. با این حال، هیچ اطلاعاتی در مورد تأثیر کورستین غذایی بر روی حیوانات آبزی در معرض استرس دمای بالا در دسترس نیست. بنابراین، مطالعه حاضر به منظور مقایسه اثر مکمل‌های کورستین غذایی بر عملکرد رشد، برخی پارامترهای ایمنی، وضعیت آنتی‌اکسیدانی، برخی از متغیرهای بیوشیمیایی سرم و پاسخ‌های استرس در دمای بالا در ماهیان انجام شد.

2. مواد و روش ها

2.1. Experimental Diets. Four experimental diets with different quercetin (>سطوح خلوص 95 درصد، Sigma Chemical Co., USA) فرموله شد (جدول 1). به طور خلاصه، مواد خشک کاملاً مخلوط شدند. پس از انتشار مواد مایع در مخلوط، آب دیونیزه شده (25{5}} میلی‌لیتر به ازای هر کیلوگرم جیره) اضافه شد. مخلوط آماده شده در چرخ گوشت برقی (MG1400R، پارس خزر، تهران، ایران) اکسترود شد و خوراک بر اساس اندازه دهان ماهی (قطر 1 میلی متر) پخش شد. در نهایت، چهار جیره آزمایشی شامل 0 میلی گرم بر کیلوگرم کورستین (T0)، 200 میلی گرم بر کیلوگرم کورستین (T1)، 400 میلی گرم بر کیلوگرم کوئرستین (T2) و 600 میلی گرم بر کیلوگرم کورستین (T3) تهیه شد. گلوله ها در یک کابینت خشک کن خشک شده و تا زمان استفاده در دمای 4 درجه سانتیگراد نگهداری می شوند. ترکیب شیمیایی، رطوبت، پروتئین خام، لیپیدها و محتوای خاکستر با استفاده از روش‌های استاندارد زیر تایید شد [28].

2.2. ماهی و شرایط آزمایشی. تعداد 216 ماهی کپور معمولی با میانگین وزن 53 ± 27:21 گرم از یک مزرعه پرورش ماهی خصوصی تهیه و به سالن تحقیقات دانشگاه گنبد (گنبد، ایران) منتقل شد. آنها در 12 تانک با تراکم 18 ماهی در هر مخزن نگهداری شدند و به مدت 1{17}} روز با شرایط آزمایشی سازگار شدند. در طول دوره سازگاری، ماهی کپور معمولی دو بار در روز با رژیم غذایی پایه تغذیه شد. در پایان زمان سازگاری، این تانک ها به طور تصادفی در 4 تیمار با 3 تکرار نامزد شدند و ماهی ها به میزان 2.5 درصد وزن بدن دو بار در روز به مدت 6{21}} روز تغذیه شدند. ضایعات ماهی و نیمی از آب آکواریوم روزانه سیفون می شد و با آب هوادهی خوب جایگزین می شد. پارامترهای کیفیت آب مانند دما، اکسیژن محلول و pH به طور منظم اندازه‌گیری شده و در سطوح استاندارد برای کپور معمولی (دمای 24:1±0}:5C، اکسیژن محلول 6:8±0:2 میلی‌گرم در لیتر، pH7) نگهداری شد. :36 ± 0:1، و دوره نوری 12D: 12L) [29].

2.3. بیومتری و جمع آوری نمونه خون. پس از 24 ساعت ناشتایی، تمام ماهیان هر تانک با 200 میلی گرم در لیتر پودر میخک بیهوش شدند و وزن هر ماهی ثبت شد [30]. عملکرد رشد و نرخ بقا با استفاده از یک فرمول رایج [7] محاسبه شد. سه ماهی در هر مخزن (9 ماهی در هر تیمار) به طور تصادفی برای جمع‌آوری نمونه خون انتخاب شدند. نمونه خون از طریق ورید دمی هر ماهی با استفاده از سرنگ استریل جمع‌آوری و وارد لوله‌ها شد. لوله‌ها سانتریفیوژ شدند (5000 دور در دقیقه به مدت 10 دقیقه در دمای 4 درجه سانتی‌گراد) [29] و سپس مایع رویی جدا شد و در دمای {12}} درجه سانتی‌گراد نگهداری شد.

2.4. چالش گرما. پس از 60 روز تغذیه، چالش استرس گرمایی طبق داوود و همکاران انجام شد. [30] مطالعه در سه نسخه. ابتدا، تغذیه در طول آزمایش متوقف شد و هفت ماهی گرسنه در هر مخزن (21 ماهی در هر تیمار) در شرایط مشابه با دمای بالا (32 درجه سانتیگراد) به مدت 48 ساعت برای استرس گرمایی نگهداری شدند. از هیترهای آکواریومی برای افزایش دما تا 32 درجه سانتیگراد استفاده شد و دمای آب به طور مکرر توسط چند پارامتر متر قابل حمل (YSI، چین) بررسی شد.

2.5. نمونه گیری خون و بافت. پس از آزمایش چالش برانگیز، تمام ماهیان هر مخزن با استفاده از 200 میلی گرم در لیتر پودر میخک بیهوش شدند و در هر مخزن سه ماهی (9 ماهی در هر تیمار) برای جمع آوری نمونه خون انتخاب شدند. نمونه خون از طریق ورید دمی هر ماهی با استفاده از سرنگ استریل جمع‌آوری و وارد لوله‌ها شد. لوله ها سانتریفیوژ شدند (5000 دور در دقیقه به مدت 10 دقیقه در دمای 4 درجه سانتیگراد) [29] و سپس مایع رویی جدا شد و در دمای -20 درجه سانتیگراد نگهداری شد.

2.6. سنجش بیوشیمی. قبل و بعد از آزمایشات چالش برانگیز، گلوکز، آلانین آمینوترانسفراز (ALT)، آسپارتات آمینوترانسفراز (AST)، کاتالاز (CAT)، گلوتاتیون پراکسیداز (GPx)، مالون دی آلدئید (MDA) و سوپراکسید دیسموتاز (SOD) با استفاده از کیت های تجاری (پارس آزمون) مورد سنجش قرار گرفتند. ، ایران). فعالیت لیزوزیم سرم با استفاده از روش Saurabh و Sahoo [31] با کدورت سنجی سنجش شد. ابتدا سوسپانسیون Micrococcus lysodeikticus با حل کردن 0.2 میلی‌گرم میلی‌لیتر-1 در بافر فسفات سدیم 5 مولار (pH 6.2) 0 تهیه شد. سپس، 50 اولتر سرم به سوسپانسیون 2 میلی‌لیتری Micrococcus lysodeikticus اضافه شد، و مخلوط واکنش به یک صفحه میکروتیتر چاهی (Hyperion، آلمان) تقسیم شد و OD اولیه بلافاصله با اسپکتروفتومتری در 450 نانومتر اندازه‌گیری شد. OD نهایی پس از انکوباسیون مخلوط واکنش در دمای 24 درجه سانتیگراد به مدت 1 ساعت اندازه گیری شد. واحد فعالیت لیزوزیم به عنوان مقدار نمونه تعریف شد که باعث کاهش جذب 0.001 در دقیقه لیزوزیم نمونه کالیبره شده با استفاده از منحنی استاندارد تعیین شده با لیزوزیم سفیده تخم مرغ (Sigma) در PBS می شود. فعالیت مکمل جایگزین سرم (ACH50) بر اساس یانو و همکاران اندازه گیری شد. [32]، که در آن از گلبول های قرمز خرگوش (RBCs) به عنوان هدف استفاده شد. سطوح سرمی کورتیزول با روش ELISA رقابتی با استفاده از کیت تجاری (IBL Co., Gesellschaft für Immunchemie und Immunbiologie) اندازه گیری شد.

2.7. بیان ژن کل RNA جگر ماهی جمع آوری شده پس از یک آزمایش چالش برانگیز با استفاده از کیت GeneAll (GeneAll Biotechnology، سئول، کره) جدا شد. پس از ارزیابی کیفیت RNA توسط ژل آگارز الکتروفورز، 2 میکروگرم از RNA کل با DNase I تیمار شد و برای سنتز cDNA رشته اول با استفاده از پرایمرهای اولیگو (dT)، 10 mM dNTPs و رونوشت معکوس مطابق با سازنده استفاده شد. دستورالعمل (Thermo Scientific، آلمان). پرایمرهای اختصاصی ژن برای آنالیز RT-PCR در جدول 2 ذکر شده است. ژن بتا-اکتین به عنوان کنترل داخلی استفاده شد. qPCR با استفاده از RealQ Plus Master Mix Green (AMPLIQONIII) طبق دستورالعمل سازنده انجام شد. واکنش متشکل از 10 میکرولیتر مخلوط سبز SYBR، 1 لیتر از cDNA رقیق شده، 0.5 اول از هر آغازگر و آب میلیپور به حجم نهایی 20 میکرولیتر اضافه شد. از برنامه زیر برای واکنش استفاده شد: 10 دقیقه در دمای 95 درجه سانتیگراد، دناتوراسیون در 95 درجه سانتیگراد به مدت 10 ثانیه، بازپخت در دمای 60 درجه سانتیگراد به مدت 40 ثانیه، و گسترش در دمای 72 درجه سانتیگراد به مدت 35 ثانیه برای 40 سیکل. سطح RNA بر اساس روش 2-ΔΔCT [33] محاسبه شد. سه تکرار بیولوژیکی برای هر آزمایش انجام شد.

2.8. تحلیل آماری. داده ها (میانگین ± انحراف معیار) با استفاده از آنالیز واریانس یک طرفه (ANOVA) و سپس آزمون چند دامنه ای دانکن برای مقایسه میانگین ها بین گروه ها مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. قبل از تجزیه و تحلیل، داده ها از نظر نرمال بودن و همگنی واریانس به ترتیب با آزمون Shapiro-Wilk و آزمون Levene ارزیابی شدند. همچنین از آنالیز واریانس دوطرفه برای آزمایش اثرات رژیم غذایی، استرس گرمایی و اثرات متقابل آنها استفاده شد. تجزیه و تحلیل های آماری با استفاده از نرم افزار SPSS نسخه 23 انجام شد و P < ​​0:05 سطح معنی داری پذیرفته شده بود.

3. نتایج

3.1. عملکرد رشد. تفاوت معنی داری در عملکرد رشد وجود داشت و بیشترین FBW، WG، SGR و FI در T2 و T3 مشاهده شد (جدول 3، P < 0:05). FCR به طور قابل توجهی در کوئرستین تغذیه شده با ماهی کاهش یافت (جدول 3، ص< 0:05).

3.2. پاسخ ایمنی سرم فعالیت لیزوزیم و ACH5{4}} زمانی که کپورهای معمولی در معرض تنش گرمایی قرار گرفتند به طور قابل ملاحظه‌ای کاهش یافت و کمترین فعالیت در ماهی‌های تغذیه‌شده با جیره شاهد و ماهی‌های تغذیه‌شده با جیره‌های مکمل مشاهده شد که نشان‌دهنده بالاترین سطح است (جدول 4، P < 0:05). قبل و بعد از تنش گرمایی، سطوح مختلف کوئرستین به طور قابل توجهی باعث افزایش فعالیت ACH50 و لیزوزیم شد و بیشترین فعالیت در ماهیان تغذیه شده با 400 (T2) و 600 (T3) میلی گرم بر کیلوگرم کورستین مشاهده شد (جدول 4، P <0:05).

3.3. آنزیم های آنتی اکسیدان کاتالاز، MDA و GPx به طور قابل توجهی در ماهیانی که در معرض استرس گرمایی قرار داشتند افزایش یافتند، با بالاترین سطح در ماهیان تغذیه شده با جیره شاهد و ماهیان تغذیه شده با جیره مکمل با کورستین که کمترین سطوح را نشان می دهد (جدول 4، P <{3} }:05). سطح SOD به طور قابل توجهی در ماهی در معرض استرس گرمایی (زمانی که تمام تیمارها ترکیب شدند) کاهش یافت. همچنین، تفاوت معنی‌داری در سطوح SOD در بین تیمارهای قبل و بعد از چالش حرارتی وجود داشت و بالاترین سطح در T2 در هر دو فاز ثبت شد (جدول 5، P <0:05).

3.4. پارامترهای استرس قبل و بعد از استرس گرمایی، سطوح گلوکز و کورتیزول در گروه کنترل در مقایسه با تیمارهای مکمل کورستین به طور معنی‌داری بالاتر بود (جدول 6، P < 0:05). قرار گرفتن ماهی کپور معمولی در دمای بالا منجر به افزایش قابل توجهی در AST و ALT در تمام تیمارها شد، اما ماهی‌های تغذیه شده با 6{11}}0 میلی‌گرم بر کیلوگرم کوئرستین کمترین سطح را داشتند (جدول 6، P <0:05). علاوه بر این، قبل و بعد از چالش، بیشترین و کمترین فعالیت ALT و AST به ترتیب در گروه کنترل و T3 مشاهده شد (جدول 6، P <0:05).

3.5. بیان ژن پس از قرار گرفتن در معرض استرس گرمایی، بیان GPx (شکل 1(a)) به طور قابل توجهی تنظیم شد و بالاترین سطوح RNA در ماهیانی مشاهده شد که با 4{4}}0 میلی‌گرم/کیلوگرم کوئرستین تغذیه شده بودند (P <0: 05). هیچ اثر مشخصی برای GR (شکل 1(b)) و IL8 (شکل 1(c)) مشاهده نشد، اما این اثرات در ماهی هایی که با خوراک های مکمل کوئرستین تغذیه می شدند، بیشتر بود (P > 0:05).

بیان ژن لیزوزیم در ماهی کپور معمولی تغذیه شده با خوراک های مکمل کوئرستین به طور قابل توجهی بیشتر از گروه کنترل بود (شکل 1(d)).

4. بحث

در این مطالعه، ترکیب کورستین در رژیم غذایی به طور قابل توجهی باعث بهبود رشد و کارایی تغذیه در ماهی کپور معمولی شد. بر این اساس، بهترین WG، SGR، FI و FCR در ماهیان تغذیه شده با جیره های حاوی 400 و 600 میلی گرم بر کیلوگرم کوئرستین به دست آمد. یافته‌های قبلی نشان داد که کورستین رژیم غذایی تأثیر مثبتی بر WG، SGR و FCR در ماهی تیلاپیا نیل (Oreochromis niloticus) [34]، کپور علف (Ctenopharyngodon idella) () و کپور معمولی دارد [13]. اثر تقویتی کورستین بر عملکرد رشد ماهی ممکن است به اثربخشی بهتر آنها در تحریک ترشح آنزیم های گوارشی مانند پروتئاز، آمیلاز و لیپاز [13، 34]، کاهش فراوانی باکتری های مضر روده و ارتقای جمعیت مربوط باشد. باکتری های مفید [35]، عملکرد سد روده را بهبود می بخشد، و سطح پرزهای روده و سلول های جام را بهبود می بخشد [36].

فعالیت ACH50 پارامتر مهمی است که در ارزیابی پاسخ ایمنی غیراختصاصی هومورال در ماهی سودمند است. کاهش سطح سرمی ACH50 در شرایط استرسی مختلف که ماهی ها در معرض آن قرار دارند گزارش می شود. در مطالعه حاضر، فعالیت ACH50 سرم در گروه مکمل با دوزهای 400 و 600 میلی گرم بر کیلوگرم کوئرستین قبل از استرس و بعد از استرس نسبت به گروه کنترل به طور معنی داری افزایش یافت. در نتیجه، از آنجایی که کبد منبع اصلی پروتئین های مکمل است، افزایش سطح ACH50 را می توان با بهبود سلامت و عملکرد کبد توضیح داد. نتایج ما از نظر افزایش فعالیت ACH50 با یافته های مطالعات قبلی در جیره های معمولی تغذیه شده با کپور همراه با 200 یا 800 میلی گرم بر کیلوگرم کوئرستین مطابقت کامل دارد [16]. علاوه بر این، نتایج مطابق با مطالعات قبلی است که نشان می‌دهد افزودنی‌های خوراک برون‌زا برای جلوگیری از کاهش فعالیت مکمل پس از تنش موفق هستند [37، 38].

لیزوزیم یک پپتید ضد میکروبی مهم سیستم ایمنی ذاتی است که به پاتوژن‌ها حمله می‌کند. کاهش معنی داری در فعالیت لیزوزیم سرم در گروه شاهد ماهیانی که به مدت 48 ساعت در دمای 32 درجه سانتیگراد قرار گرفتند، مشاهده شد. کاهش مشابهی در فعالیت لیزوزیم سرم در دماهای بالاتر در ماهی تیلاپیا نیل، Oreochromis niloticus [39] مشاهده شد. در مطالعه حاضر، فعالیت لیزوزیم سرم در تمام گروه های مکمل کورستین قبل از استرس و بعد از استرس نسبت به گروه کنترل به طور معنی داری افزایش یافت. این نشان می دهد که مکمل کورستین از سرکوب سیستم ایمنی پس از استرس در دمای بالا جلوگیری می کند.

به موازات مطالعه ما، سطح لیزوزیم در برخی از گونه های ماهی تغذیه شده با خوراک های حاوی کوئرستین نیز افزایش یافته است. به عنوان مثال، C. carpio با رژیم غذایی حاوی 200 یا 800 میلی گرم در کیلوگرم کوئرستین تغذیه شده بود، افزایش سطح لیزوزیم در سرم، روده و مخاط را نشان داد [16]. وانگ و همکاران [18] 0.01، 0.1، 1، 10، 100 و 1000 میکروگرم در لیتر کوئرستین به آب پرورش گورخرماهی (Danio rerio) اضافه کرد و گزارش کرد که فعالیت لیزوزیم سرم در گروه 1 ug/l کوئرستین به طور قابل توجهی بیشتر از گروه کورستین بود. گروه کنترل.

به خوبی شناخته شده است که گلوکز سرم به عنوان یک شاخص استرس غیراختصاصی در مطالعات ماهی استفاده می شود [40، 41]. در این مطالعه مکمل‌های کورستین باعث کاهش معنی‌دار گلوکز سرم در گروه پیش استرس شد. برخی گزارش ها در مورد اثرات هیپوگلیسمی کورستین در دسترس است [42، 43]. این در یک مطالعه اخیر تأیید شد، جایی که کورستین سطح گلوکز سرم را در ماهی کپور معمولی کاهش می دهد [16]. با این حال، بر خلاف مطالعه ما، سطوح گلوکز سرم در گربه ماهی نقره‌ای، ملکه رامدیا [12]، و سیم پوزه بلانت، Megalobrama amblycephala [44] که با خوراک حاوی کوئرستین تغذیه می‌شد، بدون تغییر باقی ماند.

سوپراکسید دیسموتاز (SOD)، کاتالاز (CAT) و گلوتاتیون پراکسیداز (GPx) آنزیم‌های اصلی هستند که به ترتیب گونه‌های اکسیژن فعال (ROS) و سم‌زدایی H2O2 و هیدروپراکسیدها را از بین می‌برند. علاوه بر این، مالون دی آلدئید (MDA) اغلب به عنوان یک نشانگر زیستی پراکسیداسیون لیپیدی استفاده می شود. نتایج ما از نظر افزایش SOD و کاهش فعالیت MDA با یافته های مطالعات قبلی در ماهی کپور معمولی، C. carpio، با جیره های تغذیه شده با 800 میلی گرم بر کیلوگرم کوئرستین مطابقت کامل دارد. به همین ترتیب، ابراهیم و همکاران. [45] افزایش SOD و GPx و کاهش اثر MDA کوئرستین را در تیلاپیا نیل، Oreochromis niloticus گزارش کردند.

علاوه بر این، بیان mRNA SOD [46] و سطوح فعالیت SOD و CAT مغز، آبشش، کبد و/یا ماهیچه [12] در ماهی‌های تغذیه شده با جیره‌های کورستین بالاتر بود. پارامترهای SOD، CAT، MDA، و GPx نقش مهمی در پاسخ آنتی اکسیدانی در شرایط مختلف استرس مانند آفت‌کش‌ها [47]، فلزات [48]، دماهای بالا [49، 50]، هیپوکسی [50] و دمای سرد [51]. با این حال، هیچ مطالعه ای در مورد اثرات کورستین بر ظرفیت آنتی اکسیدانی در ماهی در شرایط تنش دمای بالا در دسترس نیست. در مطالعه حاضر، کاهش سطوح CAT، MDA و GPx و افزایش سطح SOD مشاهده شده در شرایط استرس پس از دمای بالا، نشان دهنده اثر آنتی اکسیدانی قابل توجه کورستین است. به طور مشابه، عصاره رژیم غذایی آنتراکینون به ویژه در سطوح 0.2 درصد به طور قابل توجهی SOD را افزایش داد و کاهش سطح MDA در کبد در M. rosenbergii تحت استرس دمای بالا گزارش شد [25].

فعالیت آنزیم های سرم به عنوان شاخص های مهم آسیب بافت پذیرفته شده است. به عنوان مثال، AST و ALT نشانگر آسیب کبدی هستند و لاکتات دهیدروژناز (LDH) برای آسیب کبدی یا عضلانی در ماهی [52]. بنابراین، افزایش این آنزیم ها در خون را می توان به آسیب کبد و بافت عضلانی نسبت داد. مطالعات قبلی نشان داد که فعالیت‌های ALT و AST سرم زمانی که ماهی‌ها با کوئرستین تغذیه می‌شوند کاهش می‌یابد [13، 16]. هیچ مطالعه ای در مورد اثرات کورستین تحت تنش در دمای بالا بر سطح آنزیم سرم ماهی در مقالات تاکنون یافت نشده است. با این حال، [25] گزارش داد که فعالیت‌های AST و ALT در میگوی آب شیرین (M. rosenbergii) با رژیم غذایی حاوی عصاره آنتراکینون از R. officinale Bail تحت تنش دمای بالا به طور قابل‌توجهی کمتر از ماهیان شاهد بود. در این مطالعه، AST و ALT سرم (به جز mg/kg 200) در ماهیان تغذیه شده با خوراک های مکمل کوئرستین قبل از استرس دمای بالا کاهش یافت. این روند پس از تنش در دمای بالا نیز حفظ شد.

سطوح پایین گلوکز سرم در ماهی های تحت استرس با دمای بالا ممکن است نتیجه شرایط سوء تغذیه، اختلالات کبدی و التهاب باشد [25، 50، 53]. این می تواند به افزایش مصرف گلوکز در بافت های محیطی مرتبط باشد که احتمالاً به افزایش تقاضای انرژی تولید شده توسط پاسخ استرس مربوط می شود [54]. کاهش مشابهی در سطح گلوکز سرم در دمای بالاتر (21 درجه سانتیگراد) در قزل آلای رنگین کمان، Oncorhynchus mykiss [50] مشاهده شد. با این حال، برخلاف یافته‌های ما، افزایش سطح گلوکز در خون در ماهی Wuchang، M. amblycephala، تحت استرس دمای بالا گزارش شد [26]. این نتایج متفاوت ممکن است با تفاوت در شرایط پرورش، زمان قرار گرفتن در معرض، گونه‌های ماهی، اندازه ماهی و/یا سن مرتبط باشد.

کورتیزول خون یکی از مهمترین شاخص های پاسخ به استرس گرمایی در ماهی است [55]. در این مطالعه، سطوح کورتیزول در ماهیان تغذیه شده با سطوح مختلف کورستین قبل از استرس گرمایی به طور قابل توجهی کمتر بود. همچنین، ماهی‌های تغذیه‌شده با رژیم‌های غذایی حاوی کورستین، سطوح پایین‌تری از کورتیزول را پس از استرس گرمایی نشان دادند، که پتانسیل محافظتی مکمل‌های کورستین را بر متابولیسم کپور معمولی برجسته می‌کند. به طور مشابه، تیلاپیا نیل که با سدیم بوتیرات رژیم غذایی تغذیه می‌شد، در مواجهه با استرس گرمایی، کاهش سطح کورتیزول را نشان داد [30]. در این مطالعه، کورتیزول در طول تنش گرمایی در کوئرستین تغذیه شده با ماهی در مقایسه با گروه کنترل به طور قابل توجهی کمتر بود. این نتایج ممکن است مربوط به اثرات ضد استرس کوئرستین باشد که دامنه افزایش کورتیزول را مهار می کند.

مطابق با این یافته‌ها، می‌توان پیشنهاد کرد که کورستین (400-600 میلی‌گرم/کیلوگرم) ممکن است یک ماده مفید در درمان و محافظت از سلول‌ها در برابر استرس اکسیداتیو احتمالی باشد.

در دسترس بودن داده ها

مجموعه داده های تولید شده در طول مطالعه فعلی و/یا تجزیه و تحلیل شده در طول مطالعه جاری در صورت درخواست معقول از نویسندگان مربوطه در دسترس است.

تضاد علاقه

نویسندگان اعلام می کنند که هیچ تضاد منافعی ندارند

قدردانی

این مطالعه توسط دانشگاه زابل (ایران) با کد کمک هزینه (IR-UOZ-GR-6313) پشتیبانی شد. این کار تا حدی توسط دانشگاه چیانگ مای پشتیبانی شد.

منابع

[1] F. Wu، C. Yang، H. Wen، و همکاران، "بهبود تحمل تنش در دمای پایین ماهی تیلاپیا، Oreochromis niloticus: تجزیه و تحلیل عملکردی Astragalus membranaceus"، مجله انجمن جهانی آبزی پروری، جلد. 50، نه 4، صفحات 749–762، 2019.

[2] ME Abd El-Hack، SA Abdelnour، AE Taha، و همکاران، "گیاهان به عنوان عوامل تنظیم کننده حرارت در طیور: یک مرور کلی"، Science of the Total Environment, vol. 703، ماده 134399، 2020.

[3] C. Liu، W. Shen، C. Hou و همکاران، "تغییرات ناشی از دمای پایین در شاخص‌های بیوشیمیایی پلاسما و بیان ژن آکواگلیسرپورین در غوغاگر زرد بزرگ Larimichthys crocea،" Scientific Reports، جلد. 9، نه 1، صفحات 1-10، 2019.

[4] J. Qiang، H. Yang، H. Wang، P. Xu، Z. Qi، و J. He، "مطالعات بر روی شاخص های بیوشیمیایی خون و بیان mRNA HSP70 کبدی سویه های مختلف تیلاپیا که به طور مصنوعی با استرپتوکوک اینیا به چالش کشیده شده اند، مجله ماهیگیری چین، جلد. 36، شماره 6، صفحات 958-968، 2012.

[5] IS Vicente, LF Fleuri, PL Carvalho, et al., "قطعه پوست پرتقال ظرفیت آنتی اکسیدانی و مشخصات هماتولوژیکی ماهی تیلاپیا نیل را که در معرض استرس ناشی از گرما/اکسیژن محلول قرار می گیرد را بهبود می بخشد." Aquaculture Research, vol. 50، نه 1، صفحات 80-92، 2019.

[6] ا. احمدی فر، م. یوسفی، م. کریمی، و همکاران، "مزایای پلی فنول های رژیمی و افزودنی های غنی از پلی فنل برای سلامت حیوانات آبزی: مروری،" Reviews in Fisheries Science & Aquaculture, vol. 29، شماره 4، صفحات 478-511، 2021.

[7] E. احمدی فر، محمد اسلامی، ن. کلهر، و همکاران، "تأثیر رژیم غذایی غنی شده با پروپیونات سدیم بر عملکرد رشد، خاصیت آنتی اکسیدانی، پاسخ ایمنی تطبیقی ​​ذاتی و بیان ژن های مرتبط با رشد در در معرض خطر جدی ماهیان خاویاری بلوگا (Huso huso)،" Fish & Shellfish Immunology, vol. 125، صفحات 101-108، 2022.

[8] H. Memariani, M. Memariani, and A. Ghasemian, "Anview on anti-biofilm milk of quercetin against bacterial pathogens," World Journal of Microbiology and Biotechnology, vol. 35، شماره 9، 2019.

[9] SS Baghel, N. Shrivastava, RS Baghel, P. Agrawal, and S. Rajput, "A review of quercetin: antioxidant and anticancer properties," World Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, vol. 1، نه 1، صفحات 146-160، 2012.

[10] M. Lesjak، I. Beara، N. Simin، و همکاران، "فعالیت های آنتی اکسیدانی و ضد التهابی کوئرستین و مشتقات آن،" Journal of Functional Foods, vol. 40، صفحات 68-75، 2018.

[11] TS Pês، EM Saccol، É. P. Londero و همکاران، "اثر محافظتی کورستین در برابر استرس اکسیداتیو ناشی از اکسی تتراسایکلین در ماهیچه گربه ماهی نقره ای"، Aquaculture، جلد. 484، صفحات 120-125، 2018.

[12] TS Pês، EM Saccol، GM Ourique، و همکاران، "کوئرستین در رژیم غذایی گربه ماهی نقره ای: اثرات بر وضعیت آنتی اکسیدانی، پارامترهای خون، و بیان هورمون هیپوفیز"، Aquaculture، جلد. 458، صفحات 100-106، 2016.

[13] ح. غفاریفرسانی، ش.ح حسینی فر، س. جواهری، م. یازیچی و ح. ون دوان، "عملکرد رشد، پارامترهای بیوشیمیایی و آنزیم های گوارشی در ماهی کپور معمولی (Cyprinus carpio) تغذیه شده با جیره های آزمایشی حاوی ویتامین C، آویشن اسانس، و کورستین، مجله ایتالیایی علوم حیوانات، جلد. 21، شماره 1، صفحات 291-302، 2022.

[14] SW Zhai و SL Liu، "اثرات کورستین رژیم غذایی بر عملکرد رشد، سطح لیپیدهای سرم و ترکیب بدن ماهی تیلاپیا (Oreochromis niloticus)،" مجله ایتالیایی علوم حیوانات، جلد. 12، شماره 4، مقاله e85، 2013.

[15] Z. Xu، X. Li، H. Yang، G. Liang، B. Gao، و X. Leng، "کوئرستین رژیم غذایی رشد، آنتی اکسیداسیون و کیفیت گوشت ماهی کپور علف (Ctenopharyngodon idella) را بهبود بخشید. از انجمن جهانی آبزی پروری، جلد. 50، نه 6، صفحات 1182-1195، 2019.

For more information:1950477648nn@gmail.com