راپالوگ و مهارکننده‌های MTOR به عنوان داروهای ضد پیری

راپامایسین، یک مهارکننده هدف مکانیکی راپامایسین (mTOR)، دارای قوی‌ترین پشتیبانی تجربی تا به امروز به عنوان یکدرمان بالقوه ضد پیریدر پستانداران برخلاف بسیاری از ترکیبات دیگر که ادعا می‌شود بر طول عمر تأثیر می‌گذارند، راپامایسین بارها بر روی موش‌های با عمر طولانی و از نظر ژنتیکی ناهمگن آزمایش شده است که در آن‌ها میانگین و حداکثر طول عمر را افزایش می‌دهد. با این حال، مکانیسمی که این اثرات را توضیح می‌دهد کاملاً واضح نیست و فهرست رو به رشد عوارض جانبی، این تردید را ایجاد می‌کند که راپامایسین در نهایت برای انسان مفید باشد. این بررسی چشم انداز توسعه جدیدتر و ایمن تر را مورد بحث قرار می دهددرمان های ضد پیریبر اساس آنالوگ های راپامایسین (راپالوگ نامیده می شود) یا سایر رویکردهایی که سیگنالینگ mTOR را هدف قرار می دهند.

برای دریافت اطلاعات بیشتر درباره سیستانچ برای درمان ضد پیری اینجا را کلیک کنید

تاریخچه مختصری از راپامایسین و هدف مکانیکی راپامایسین راپامایسین در خاک جزیره ایستر به عنوان یک ترکیب تولید شده توسط Streptomyces hygroscopicus کشف شد که قادر به مهار تکثیر مخمر کاندیدا آلبیکنس بود اما بر رشد باکتری ها تأثیری نداشت (1). در پستانداران، راپامایسین برای مهار پاسخ ایمنی یافت شد و متعاقباً به عنوان یک درمان استاندارد برای جلوگیری از رد پیوند در گیرندگان پیوند و برای درمان اختلالات خودایمنی مورد استفاده قرار گرفت (2، 3). راپامایسین همچنین رشد و تکثیر سلول‌های پستانداران را به طور گسترده مهار می‌کند و علاقه اخیر را به استفاده از آن به عنوان درمان سرطان برانگیخته است (4). از نظر مکانیکی، راپامایسین به FKBP12، یک ایمونوفیلین با فعالیت پرولیل ایزومراز متصل می شود. دو پروتئین اضافی مورد نیاز برای اثرات آن در مخمر در یک غربال ژنتیکی در سال 1991 شناسایی شد و اهداف راپامایسین 1 (TOR1) و TOR2 (5) نامیده شد. در طی سال‌های 1994 و 1995، سه گروه جداگانه یک 289-kDa کیناز را جدا کردند که توسط کمپلکس راپامایسین-FKBP12 در سلول‌های پستانداران متصل و مهار می‌شود (6-8). این کیناز اکنون به عنوان هدف مکانیکی راپامایسین (mTOR) شناخته می‌شود و تقریباً 40 درصد با پروتئین‌های ساکارومایسس سرویزیه TOR همولوگ است و در بین یوکاریوت‌ها بسیار حفظ شده است. mTOR در دو کمپلکس یافت می‌شود که عملکردهای متمایز و حساسیت‌های متفاوتی نسبت به عمل راپامایسین دارند. کمپلکس mTOR 1 (mTORC1؛ متشکل از mTOR، رپتور، mLST8/GL، PRAS40، DEPTOR) نقش کلیدی در تنظیم ترجمه و رشد سلولی از طریق فسفوریلاسیون سوبستراها ایفا می کند که شامل S6 کیناز (S6K) و پروتئین اتصال دهنده فاکتور شروع یوکاریوتی eIF4E است. (4E-BP)، و به شدت توسط راپامایسین مهار می شود. در مقابل، mTORC2 (متشکل از mTOR، Rictor، mLST8/GL، mSIN1، pro tor، DEPTOR) مجموعه متنوعی از سوبستراها از جمله AKT S473، کیناز تنظیم‌شده سرم/گلوکوکورتیکوئید و PKC- را تنظیم می‌کند و به شدت به راپامایسین مقاوم است. اگرچه ممکن است در طول مواجهه مزمن از نظر فیزیکی دچار اختلال شود. mTORCها ورودی‌ها را از طریق طیف گسترده‌ای از مکانیسم‌های سیگنال دریافت می‌کنند و در بسیاری از جنبه‌های فیزیولوژی نقش دارند که به طور عمیق مورد بررسی قرار گرفته‌اند (9). به طور خلاصه، mTORC1 به سیگنال‌هایی که شامل اسیدهای آمینه، گلوکز، لیگاندهای WNT، اکسیژن، cAMP و انسولین/IGF است پاسخ می‌دهد. تنظیم فعالیت mTORC2 کمتر واضح است اما ممکن است شامل تعامل با ریبوزوم باشد (10). سیگنال دهی انسولین/IGF{37}} به mTORC1 تا حدی توسط mTORC2 از طریق فسفوریلاسیون AKT انجام می شود. به نوبه خود، فعال‌سازی mTORC1 برای تضعیف سیگنال‌های انسولین/IGF{41} از طریق S6K1 و GRB10 بازخورد می‌کند (شکل 1 و رفر. 11).

اتصال سیگنال‌های mTOR به سن نقشی برای سیگنال‌دهی TOR در پیری برای اولین بار در سال 2003 آشکار شد، زمانی که Vellai و همکارانش نشان دادند که RNAi در برابر let-363/ CeTor به طور قابل‌توجهی طول عمر Caenorhabditis elegans را افزایش داد و مستقل از daf عمل کرد{{2} }، یک همو لاگ FOXO که قبلاً نشان داده شده بود بر طول عمر تأثیر می گذارد (12). این به سرعت با نشان دادن اینکه مهار ژنتیکی سیگنال دهی TOR طول عمر را در مگس سرکه و مخمر جوانه زنی S. cerevisiae افزایش می دهد دنبال شد (13، 14). مهار ژنتیکی سیگنال دهی mTOR در پستانداران یک موضوع حساس است، زیرا پروتئین کیناز mTOR، رپتور، ریکتور و mLST8 همگی برای توسعه ضروری هستند (15). اخیراً، ما نشان دادیم که موش‌های ماده Mtor plus /–Mlst8 plus/– فعالیت mTORC1 را کاهش داده و طول عمر را افزایش داده‌اند، مشابه فنوتیپ گزارش شده توسط Sel man و همکاران برای موش‌هایی که فاقد S6K1، یکی از بسترهای اصلی mTORC1 هستند (16، 17). ). بنابراین، ارتباط بین سیگنال دهی mTOR و طول عمر به نظر می رسد از مخمر به پستانداران حفظ شود (جدول 1).

اثرات راپامایسین بر طول عمر

راپامایسین طول عمر را در مخمرها، کرم ها و مگس ها افزایش می دهد (جدول 2 و مراجع 18-21). در سال 2009، راپامایسین نشان داد که میانگین و حداکثر طول عمر موش‌های نر و ماده ناهمگن ژنتیکی را افزایش می‌دهد (فرزندان تلاقی چهار طرفه بین گونه‌های همخون با عمر طولانی) (22). شایان ذکر است، این درمان تا زمانی که موش ها به سن پیشرفته (20 ماهگی)، تقریباً معادل 60 سال سن انسان، نرسیده بودند، شروع نشد. در یک مطالعه پیگیری که از 9 ماهگی شروع شد، راپامایسین متوسط ​​طول عمر را در مردان و زنان به ترتیب 10 و 18 درصد و حداکثر طول عمر را 16 درصد و 13 درصد افزایش داد (23). راپامایسین در یک پوشش روده ای ریز کپسوله شده بود که در طی این مطالعات امکان تحویل در غذا را فراهم کرد و سطح خون به دست آمده تقریباً سه برابر بیشتر از محدوده درمانی معمول برای سرکوب سیستم ایمنی در انسان بود (24).

شکل 1 سیگنالینگ mTOR. mTOR در دو کمپلکس mTORC1 و mTORC2 یافت می شود. mTORC1 تا حدی از طریق کمپلکس TSC تنظیم می‌شود، که معمولاً به عنوان یک پروتئین فعال‌کننده GTPase برای Rheb عمل می‌کند تا سیگنال‌دهی mTORC1 را سرکوب کند. mTORC1 همچنین توسط آمینو اسیدها از طریق خانواده GTPaseهای کوچک مرتبط با Ras (Rag) تنظیم می شود. پروتئین های Rag با محلی سازی mTORC1 در لیزوزوم از طریق تعامل با مجموعه تنظیم کننده، mTORC1 را فعال می کنند (110). mTORC1 با افزایش بیوژنز ریبوزومی، ترجمه و سایر فرآیندهای آنابولیک و در عین حال مهار اتوفاژی باعث رشد می شود. mTORC1 سیگنال‌های انسولین/IGF{13}} را از طریق تنظیم مستقیم Grb10 و S6K سرکوب می‌کند، که متعاقباً سیگنال‌دهی را به mTORC2 کاهش می‌دهد. AKT، یک مهارکننده TSC1/2، یکی از چندین بستر مستقیم mTORC2 است. فرآیندهایی که توسط سیگنالینگ mTOR تنظیم می شوند با رنگ قرمز نشان داده شده اند. آنهایی که توسط سیگنالینگ mTOR تنظیم می شوند با رنگ آبی نشان داده شده اند.

مطالعات دیگر نیز اثر مثبت راپامایسین را بر طول عمر نشان داده اند. چن و همکاران متوجه شد که راپامایسینمیزان مرگ و میر در مردان مسن را کاهش دادموش C57BL/6 (25). انیسیموف و همکاران نشان داد که راپامایسین حداکثر طول عمر (میانگین طول عمر 10 درصد آخرین بازمانده) را در یک سویه کوتاه مدت و مستعد تومور موش (FVB/N HER-2/neu transgenic) افزایش می دهد (26). در حالی که این مطالعه شواهد قوی ارائه می دهد که راپامایسین می تواند در زمینه سرطان مفید باشد، انتخاب سویه جداسازی اثرات ضد سرطانی از پیری را به خودی خود دشوار می کند. با این حال، راپامایسین همچنین طول عمر موش‌های 129/Sv را افزایش می‌دهد، یک سویه همخون با طول عمر معمول‌تر و بروز تومور (27). به طور قابل توجهی، 22.9 درصد از موش های تحت درمان پس از مرگ آخرین حیوان شاهد زنده ماندند.

در مجموع، این مشاهدات راپامایسین را به بهترین نامزد حمایت شده برای داروی طول عمر پستانداران تبدیل می کند. درک مکانیسم اثر آن پتانسیل ارائه بینشی در مورد ماهیت فرآیند اصلی پیری را دارد و ممکن است به رویکردهای درمانی جدید برای کاهش بار بیماری‌های مرتبط با افزایش سن منجر شود. با این حال، مکانیسم محاسبه اثرات ضد پیری راپامایسین هنوز روشن نیست (جدول 2).

مکانیسم های بالقوه افزایش طول عمر توسط راپامایسین

اثرات ضد سرطانی سرطان شایع ترین علت مرگ موش های آزمایشگاهی است و راپامایسین یک داروی ضد سرطان است. بنابراین، این امکان وجود دارد که افزایش طول عمر توسط راپامایسین ثانویه به سرکوب تومور باشد و به روند اصلی پیری ارتباطی نداشته باشد. دلایل متعددی وجود دارد که چرا ما از این مدل استقبال نمی کنیم. ابتدا، آزمایش‌های اولیه مرتبط با مهار راپامایسین و mTOR به طول عمر در ارگانیسم‌هایی انجام شد که عمدتاً پس‌میتوتیک (کرم‌ها و مگس‌ها) یا تک سلولی (مخمر) هستند و بنابراین سرطان را تجربه نمی‌کنند. دوم، راپامایسین حداکثر طول عمر را افزایش می دهد و از این ایده پشتیبانی می کند که آسیب شناسی های متعدد مرتبط با سن را کاهش می دهد. هدف قرار دادن یک بیماری منفرد نباید طول عمر طولانی‌ترین افراد در یک گروه را افزایش دهد، زیرا مسن‌ترین افراد در معرض خطر بسیار بالایی برای بیشتر یا همه علل مرگ قرار دارند، مگر اینکه فرآیند اصلی پیری به تعویق بیفتد. سوم، نشان داده شده است که راپامایسین تغییرات متعدد مرتبط با افزایش سن را در موش به تاخیر می اندازد، از جمله از دست دادن عملکرد سلول های بنیادی (25)، زوال شناختی (28)، رتینوپاتی (29)، تجمع تغییرات درون سلولی در میوکارد، دژنراسیون کبد، هیپرپلازی آندومتر. سفتی تاندون و کاهش فعالیت بدنی (30). علاوه بر این، راپامایسین در مدل‌های جوندگان هیپرتروفی قلبی (31، 32) و بیماری‌های عصبی (33-35)، شرایطی که انسان‌های پیر را تحت تأثیر قرار می‌دهند، درمانی است. در حالی که پیشگیری از سرطان به وضوح نقش مهمی در مزیت بقای ارائه شده توسط راپامایسین ایفا می کند، درک این نکته مهم است که سرطان یک بیماری مرتبط با افزایش سن است و پیشگیری از آن نتیجه مورد انتظار هر درمانی است که پیری را کند می کند.

ترجمه. mTORC1، از طریق S6K و 4E-BP، نقش اصلی را در تنظیم ترجمه ایفا می کند، و ارزش این را دارد که در نظر بگیریم که آیا کاهش سنتز پروتئین به خودی خود ممکن است اثرات راپامایسین بر طول عمر را واسطه کند یا خیر. به عنوان مثال، کاهش سرعت کلی ترجمه ممکن است باعث وفاداری بهتر در طول سنتز شود و/یا استرس را بر مکانیسم‌هایی که پروتئین‌های اشتباه، تاخورده یا آسیب‌دیده را تخریب می‌کنند، کاهش دهد (36). در واقع، آزمایش‌ها در S. cerevisiae، C. elegans و D. melanogaster نشان داده‌اند که حذف یا از بین رفتن زیرواحدهای ریبوزومی با واسطه siRNA، S6K یا فاکتورهای شروع ترجمه منجر به افزایش طول عمر و حذف S6K1 طول عمر را در موش‌های ماده افزایش می‌دهد. در حالی که حذف 4E-BP اثرات افزایش دهنده زندگی محدودیت کالری (CR) در مگس ها را مسدود می کند (13، 37-40).

یافته‌های اخیر این دیدگاه را به چالش می‌کشد که ترجمه به خودی خود کلید مزایای بازداری TOR/mTOR است. در حالی که موش‌های ماده فاقد S6K1 طول عمر طولانی‌تری دارند، هیچ اثر قابل‌توجهی بر ترجمه کلی، حداقل در ماهیچه‌های اسکلتی وجود ندارد (41). علاوه بر این، طول عمر طولانی کرم‌هایی که فاقد یک عامل کلیدی شروع ترجمه هستند، همچنان می‌تواند با حذف TOR بیشتر شود، که به این معنی است که مکانیسم‌های مجزایی در حال بازی هستند (38). علاوه بر این، افزایش طول عمر به دلیل حذف عوامل شروع ترجمه به daf{4}} وابسته است، در حالی که افزایش طول عمر با کاهش زیرواحدهای TOR، S6K یا ریبوزومی وابسته نیست، و دوباره به دخالت مکانیسم‌های متمایز متعدد اشاره می‌کند (12). ، 37). جالب توجه است، کاهش TOR با استفاده از RNAi نمی‌تواند طول عمر کرم‌های جهش‌یافته eat-2 را افزایش دهد، مدلی برای CR، علی‌رغم اینکه نرخ سنتز پروتئین در حال حاضر پایین را تا 49 درصد دیگر سرکوب می‌کند (37). علاوه بر این، غیرفعال کردن همولوگ کرم AMPK برای سرکوب افزایش طول عمر در حیوانات فاقد S6K، ظاهراً بدون تأثیر بر ترجمه کافی است (16). واضح است که رابطه بین ترجمه و طول عمر پیچیده تر از آنچه در ابتدا تصور می شد است

ترجمه mRNA های خاص ممکن است بر طول عمر تأثیر بگذارد.

در حالی که از دست دادن کامل عملکرد mTOR تأثیر عمده ای بر ترجمه کلی دارد، راپامایسین اثر ظریف تری دارد، به احتمال زیاد به این دلیل که زیر مجموعه ای از عملکردهای 4E-BP مقاوم به راپامایسین است (42، 43). هم راپامایسین و هم مهار کامل mTOR ترجیح می‌دهند ترجمه mRNA‌ها را با موتیف‌های الیگو پیریمیدین انتهایی 5' سرکوب کنند، که نقش بالقوه این ژن‌ها را در طول عمر نشان می‌دهد (43، 44). علیرغم کاهش سنتز کلی پروتئین، CR در مگس ها به طور خاص ترجمه زیرمجموعه ای از mRNA ها را افزایش می دهد که دارای UTRهای 5' کوتاه و ساختار کمتری هستند، از جمله ژن های میتوکندری با کدگذاری هسته ای (40). بستر TOR 4E-BP برای این اثر و برای افزایش طول عمر مورد نیاز است. در مخمر فاقد زیرواحدهای ریبوزومی یا TOR، افزایش طول عمر کامل نیاز به افزایش ترجمه یک رونوشت خاص، GCN4 دارد (45). بیان GCN4 توسط چند ORFهای بالادستی محدود می شود که معمولا ریبوزوم هایی را که به mRNA متصل می شوند جدا می کنند. تحت شرایط کاهش فعالیت TOR یا فراوانی زیرواحد ریبوزومی بزرگ، ORF های بالادستی اغلب برای شروع ترجمه ORF GCN4 دور زده می شوند. این مثال‌ها ظرافت‌هایی را در تنظیم ترجمه برجسته می‌کنند که ما تازه شروع به درک آن‌ها کرده‌ایم.

جدول 2 اثرات راپامایسین بر طول عمر

خویشتن خواری. یکی دیگر از اثرات مهار mTOR که با طول عمر مرتبط است، القای اتوفاژی است، فرآیندی که در آن سلول ها پروتئین ها و اندامک های خود را بازیافت می کنند. اتوفاژی به سلول ها اجازه می دهد تا در شرایط محدود مواد مغذی زنده بمانند و یک مکانیسم مرکزی است که توسط آن اجزای آسیب دیده حذف می شوند. تحت شرایط کافی مواد مغذی، mTOR کیناز ULK1 شروع کننده اتوفاژی را فسفریله و مهار می کند (46). غیرفعال سازی ژن های دخیل در اتوفاژی باعث کاهش طول عمر در مخمر (کرونیولوژیک)، C. elegans و Drosophila می شود و ترویج اتوفاژی در سیستم عصبی مگس طول عمر را افزایش می دهد (47-49). علاوه بر این، اتوفاژی برای افزایش طول عمر زمانی مخمر توسط راپامایسین (47) و برای افزایش طول عمر توسط CR یا مهار ژنتیکی سیگنال دهی mTOR در کرم ها مورد نیاز است (50).

به نظر می رسد که اتوفاژی در پستانداران نیز نقش مهمی در روند پیری دارد. از همه مهمتر، القای اتوفاژی برای جوانسازی بافت شناسی و عملکرد کبد موشهای مسن کافی است (51). علاوه بر این، به نظر می‌رسد اتوفاژی در موش‌های CR تنظیم شده است و برخی از اثرات مفید رژیم غذایی CR را بر قلب، کبد و کلیه‌ها واسطه می‌کند (52-54). سلول‌های موش‌های کوتوله اسنل با عمر طولانی نیز شواهدی از افزایش اتوفاژی را نشان می‌دهند (55).کاردیومیوسیت iجدا شده از موش های مسن اتوفاژی کمتری دارند و نقص هایی در مدیریت کلسیم نشان می دهند که هر دو با قرار گرفتن در معرض راپامایسین ex vivo اصلاح می شوند (56). با این حال، افزایش اتوفاژی ممکن است همیشه مفید نباشد، و در واقع ممکن است به فنوتیپ پیری موش‌های پروژروئید کمک کند (57).

جالب توجه است که راپامایسین باعث بهبود حباب هسته ای و پیری زودرس در سلول های مشتق شده از بیماران مبتلا به پروگریا هاچینسون گیلفورد، یک سندرم نادر پیری زودرس می شود (58). این بیماری ناشی از نوع غلط املایی لامین A به نام پروگرین است که به میزان زیادی در بیماران انباشته می شود و همچنین در طول پیری سلولی طبیعی در مقادیر کمتری شناسایی می شود (59، 60). به نظر می رسد راپامی سین پاکسازی پروگرین را از سلول های بیمار از طریق اتوفاژی تحریک می کند و بنابراین ممکن است تجمع طبیعی پروگرین مرتبط با سن را نیز محدود کند. به طور کلی، تنظیم مناسب اتوفاژی احتمالاً یک عامل تعیین کننده مهم در پیری سالم است.

شکل 2 درمان مزمن راپامایسین mTORC2 را مختل می کند. (الف) در داخل بدن، مواد مغذی و فاکتورهای رشد فعالیت mTORC1 و mTORC2 را هدایت می‌کنند که باعث رشد، پیری و حساسیت به انسولین می‌شوند. (ب) درمان حاد با راپامایسین سیگنال دهی mTORC1 را مهار می کند، رشد را محدود می کند و طول عمر را بدون کاهش حساسیت به انسولین افزایش می دهد. (C) درمان مزمن با راپامایسین هر دو mTORC1 و mTORC2 را مهار می کند، رشد را محدود می کند و سیگنال دهی انسولین را مختل می کند، اما طول عمر را افزایش می دهد.

نگهداری سلول های بنیادی راپامایسین تعدادی اثرات جالب بر عملکرد سلول های بنیادی دارد. سیگنال دهی بیش فعال در بالادست mTORC1 به دلیل حذف Pten، حذف توبروس اسکلروز 1 (Tsc1)، یا فعال سازی سازنده AKT تعداد و ظرفیت عملکردی HSC ها را کاهش می دهد (61-63). درمان با راپامایسین می‌تواند ظرفیت طبیعی خود-بازسازی را در یک زیرجمعیت از HSCهای موش که استرس اکسیداتیو خود به خود بالا و ظرفیت عملکردی آنها کاهش یافته است، بازگرداند (64). اخیراً، چن و همکاران. اشاره کرد که فعالیت mTORC1 در HSC های مشتق شده از موش های مسن افزایش می یابد که نقص های عملکردی را یادآور موارد ناشی از حذف Tsc1 نشان می دهند (25). راپامایسین ظرفیت عملکردی HSCهای موش های مسن را احیا کرد و پاسخ ایمنی به ویروس آنفولانزا را تقویت کرد. راپامایسین همچنین از طریق مهار mTORC1 در سلول‌های Paneth مجاور، خود نوسازی سلول‌های بنیادی روده را افزایش می‌دهد، مشابه اثراتی که در حیوانات CR مشاهده شده است (65). علاوه بر این، راپامایسین برنامه‌ریزی مجدد سلول‌های سوماتیک را برای تولید سلول‌های بنیادی پرتوان القایی افزایش می‌دهد که نشان‌دهنده ارتقای کلی عملکرد سلول‌های بنیادی است (66). از سوی دیگر، راپامایسین پرتوانی را مختل می کند، تکثیر را کاهش می دهد و تمایز را در سلول های بنیادی جنینی انسان تقویت می کند (67، 68). در سلول‌های بنیادی جنینی موش، بیان نشانگرهای پرتوانی نسبت به درمان راپامایسین مقاوم‌تر است، با این حال اندازه و تکثیر سلول همچنان کاهش می‌یابد و تمایز افزایش می‌یابد (67، 69). به طور جالبی، راپامایسین سلول های شروع کننده سرطان خون را کاهش می دهد و ظرفیت های خود تجدید و تمایز سلول های بنیادی مشتق شده از همانژیوم نوزادی را مهار می کند، که نشان دهنده یک اثر محافظتی در برابر سلول های بنیادی سرطانی است (61، 70). در مجموع، این نتایج نشان می‌دهد که راپامایسین رفتار سلول‌های بنیادی را تعدیل می‌کند و به طور کلی از حفظ «بنیاد» و فنوتیپ جوان‌تر در انواع سلول‌های بنیادی بالغ که مورد مطالعه قرار گرفته‌اند، حمایت می‌کند.

به عنوان یک سرکوب کننده ایمنی نباید در مورد طول عمر نادیده گرفته شود.

مزمن،التهاب کم درجه یکی از ویژگی های پیری استو تقریباً هر بیماری مزمن دارای یک جزء التهابی است (71). بحث کامل در مورد اثرات ایمونولوژیک راپامایسین خارج از محدوده این بررسی است و این موضوع در جای دیگری پوشش داده شده است (72). نکته مهم این است که این دارو هم اثرات مثبت و هم منفی بر ایمنی ذاتی و انطباقی دارد، با یک نتیجه خالص که پیچیده تر از سرکوب ساده سیستم ایمنی است، همانطور که با توانایی آن در افزایش ایمن سازی موش های مسن در برابر ویروس آنفولانزا نشان داده می شود (25). مکانیسم های وابسته به mTORC2-. علیرغم ویژگی بالای راپامایسین برای mTORC1 در طول درمان حاد، قرار گرفتن در معرض مزمن نیز می تواند mTORC2 را مهار کند. این اثر برای اولین بار در رده های سلولی کشت شده خاصی مشاهده شد (73)، و اخیراً نشان داده ایم که در بافت های مختلف از جمله کبد، ماهیچه و چربی نیز در داخل بدن رخ می دهد (شکل 2 را ببینید). در حال حاضر مشخص نیست که آیا مهار mTORC2 در اثرات طولانی مدت راپامایسین نقش دارد یا خیر. موش‌های ماده فاقد S6K1 و ماده Mtor plus /–Mlst8 plus /– ظاهراً به دلیل اختلال در سیگنال‌دهی وابسته به mTORC عمر طولانی دارند، اما داده‌های C. elegans نشان می‌دهد که مهار mTORC2 همچنین می‌تواند طول عمر را افزایش دهد ( 21، 74). جالب توجه است که افزایش طول عمر با اختلال mTORC1 در کرم‌ها به پوست-1 (هولوگ NRF1/2 پستانداران) و daf{22}} (هولوگ FOXOهای پستانداران) نیاز دارد، هر دو عامل رونویسی که ژن‌های دخیل در آن را کنترل می‌کنند. دفاع از استرس با این حال، افزایش طول عمر توسط راپامایسین یا اختلال mTORC2، فقط به SKN-1 نیاز دارد. مطابق با نقش دفاعی کلی از استرس در مزایای راپامایسین، هم کرم‌ها و هم مگس‌ها با اختلال در عملکرد TOR مقاوم به استرس هستند و القای ژن‌های هدف NRF1/2 و FOXO در کبد موش‌های تحت درمان با راپامایسین (2 میلی‌گرم) شناسایی شده است. / کیلوگرم روزانه به مدت دو هفته) (20، 21).