نقش Prelimbic Cortex PKC و PKMζ در تثبیت مجدد حافظه ترس و تداوم پس از فعال سازی مجدد

برای اطلاعات بیشتر:ali.ma@wecistanche.com

تداوم خاطرات تازه به دست آمده توسط فعالیت PKMC، یک ایزوفرم غیر معمول پروتئین کیناز C(PKC) پشتیبانی می شود. اینکه آیا فعالیت ایزوفرم‌های معمولی و غیر معمول PKC به تداوم حافظه‌های فعال شده کمک می‌کند، هنوز ناشناخته است. به طور مشابه، آیاحافظهفعال سازی مجدد پیش نیاز مداخلاتی است که قادر به تغییر ماندگاری حافظه هستند، به ندرت بررسی شده است. بر اساس موارد فوق، ما نقش ایزوفرم‌های معمولی و غیر معمول PKC را در تحکیم مجدد قشر پیش‌لیمبیک و تداوم ترس زمینه‌ای فعال‌شده مورد بررسی قرار دادیم.حافظهدر موش های صحرایی نر ویستار نشان داده شده است که مهار فعالیت PKC با chelerythrine یا فعالیت PKMK با ZIP باعث تداوم فعالیت فعال شده ما می شود.حافظهبرای حداقل 21 روز؛ (i) ZIP بلافاصله پس از آن داده می شودحافظهفعال سازی مجدد نه بر تثبیت مجدد و نه روند تداوم تأثیری نداشت. در مقابل، هنگامی که 1 ساعت بعد داده شد، اختلال ایجاد کردحافظهماندگاری؛ (ب) chelerythrine داده شده بلافاصله پس از فعال سازی مجدد حافظه باعث اختلال در تثبیت مجدد شد؛ (v) حذفحافظهفعال سازی مجدد از اثرات ناشی از chelerythrine و ZIP جلوگیری کرد: (v) عمل ZIP مستقل از زمان سپری شده بین تجویز آن و اولیه است.حافظهتست. نتایج نشان می دهد که PKC و PKM قشر prelimbic درگیر هستندحافظهتثبیت مجدد و پایداری

تیاگو رودریگز داسیلوا1، آنا ماریا رایموندی1، لئاندرو خوزه برتوگلیو2،

روبرتو آندراتینی1 و کریستینا. استرن 1*

خانواده پروتئین کیناز C (PKC) شامل ایزوفرم های معمولی (،، و)، جدید (δ، ɛ، η، و θ)، و غیر معمول (ζ، ι، و λ) است. نقش هر یک از این ایزوفرم های PKC در حال حاضر تحت بررسی است. شواهد انباشته نشان می دهد که فعال شدن مداوم ایزوفرم پروتئین کیناز C غیر معمول (PKMζ) در مرحله پایانیحافظهتحکیم مسئول حفظ قدرت بلند مدت و بلند مدت استحافظه 3-5. همچنین گزارش شده است که PKMζ برای تداوم خاطرات رویه ای، فضایی، اشتهاآور (پاداش) و ناخوشایند به تازگی به دست آمده ضروری است4،6-8. نشان داده شده است که بیان بیش از حد PKMζ در قشر prelimbic (PL) پایداری حافظه بد را تقویت می کند. از سوی دیگر، متیلاسیون DNA آن در قشر PL، یا تجمع آن با درهم‌تنیدگی‌های نوروفیبریلاری در هیپوکامپ، باحافظهکاهش یا اختلال در مدل های حیوانی بیماری های مرتبط با پیری 10،11.

برای حافظه، روی Cistanche ارگانیک کلیک کنید

پیشنهاد شده است که یک فعال سازی مجدد حافظه مختصر باعث ایجاد فاز دیرهنگام (فراتر از پنجره زمانی تثبیت مجدد) سنتز پروتئین می شود که ممکن است زمینه ساز تداوم خاطرات منفور دوباره فعال شده باشد. بر این اساس، گزارش شده است که یک مهارکننده سنتز پروتئین که 9.5 ساعت پس از فعال‌سازی مجدد داده می‌شود، تداوم حافظه ترس فعال‌شده را مختل می‌کند. به طور مشابه، مهار PKC 6 یا 9 ساعت پس از فعال‌سازی مجدد حافظه ترس، تداوم آن را بدون تأثیر بر فرآیند تثبیت مجدد مختل کرده است. شباهت هایی بین تثبیت حافظه ترس و تثبیت مجدد وجود دارد، مانند پنجره زمانی وقوع آنها 15-17. مکانیسم‌هایی که از تداوم حافظه در طول و بعد از تثبیت حافظه پشتیبانی می‌کنند، نسبتاً بیشتر مورد بررسی قرار گرفته‌اند. بررسی مکانیسم‌های نگهداری حافظه در طول و بعد از پنجره زمانی تثبیت مجدد هنوز آغاز شده است. ارتقای دانش ما در مورد سوال دوم اهمیت علمی و درمانی دارد. کورتکس PKC و PKM (در تداوم حافظه ترس متنی در موش‌ها. در ابتدا، ما بر روی نقاط زمانی خاص پس از پایان پنجره زمانی تثبیت مجدد حافظه (از 6 تا 18 ساعت پس از فعال‌سازی مجدد حافظه) تمرکز کردیم. سپس با حذف فعال‌سازی مجدد حافظه، ارزیابی کردیم. در نهایت، ما به این موضوع پرداختیم که آیا PKC و/یا PKMC برای تثبیت و/یا تداوم حافظه در پنجره زمانی تثبیت مجدد (0 و/یا 1 ساعت پس از فعال‌سازی مجدد حافظه) مهم است یا خیر. ).

نتایج

اثرات مهار PKC قشر PL توسط chelerythrine بر تداوم یک حافظه ترس متنی مجدد فعال شده.

ما این مداخله دارویی را 6، 9، 12، و 18 ساعت بعد از فعال سازی مجدد حافظه آزمایش کردیم (شکل 1A). در اولین نقطه زمانی انتخاب شده، یک ANOVA مختلط اثرات قابل توجهی از جلسات را نشان داد [F(2,44)=33.7; پ<0.0001], the="" treatment="" [f(1,22)="8.77;" p="0.007]," and="" the="" interaction="" between="" these="" factors="" [f(2,44)="22.0;" p="0.00001]," for="" freezing="" time.="" as="" shown="" in="" fig.="" 1b,="" the="" tukey="" post-hoc="" test="" showed="" a="" signifcant="" diference="" between="" control="" and="" chelerythrine="" groups="" (n="13" and="" 11,="" respectively)="" during="" test="" a2="" (p="0.0001;" hedges'="" g="" efect="" size="2.65)," but="" not="" the="" reactivation="" session="" (p="0.90;" g="0.40)" or="" test="" a1="" (p="0.95;" g="">

در نقطه زمانی دوم انتخاب شده (9 ساعت)، یک ANOVA مختلط اثرات قابل توجهی از جلسات را نشان داد [F(2,36)=25.1; پ<0.0001], the="" treatment="" [f(1,18)="8.95;" p="0.0078]," and="" their="" interaction="" [f(2,36)="7.06;" p="0.0026]." as="" shown="" in="" fig.="" 1c,="" there="" was="" a="" signifcant="" diference="" between="" control="" and="" chelerythrine="" groups="" (n="12" and="" 8,="" respectively)="" during="" test="" a2="" (p="0.001;" g="1.92)," but="" not="" the="" reactivation="" session="" (p="0.81;" g="0.63)" or="" test="" a1="" (p="0.53;" g="">

در سومین نقطه زمانی انتخاب شده (12 ساعت)، یک ANOVA مختلط تأثیر قابل توجهی از جلسات را نشان داد [F(2,28)=20.9; پ<0.0001], the="" treatment="" [f(1,14)="11.3;" p="0.0047]," and="" their="" interaction="" [f(2,28)="18.0;"><0.0001]. as="" shown="" in="" fig.="" 1d,="" there="" was="" a="" signifcant="" diference="" between="" control="" and="" chelerythrine="" groups="" (n="7" and="" 9,="" respectively)="" during="" test="" a2="" (p="0.0002;" g="3.15)," but="" not="" the="" reactivation="" session="" (p="0.31;" g="0.75)" or="" test="" a1="" (p="0.96;" g="">

در چهارمین نقطه زمانی انتخاب شده (18 ساعت)، یک ANOVA مختلط اثرات قابل توجهی از جلسات را نشان داد [F(2,24)=9.43; پ<0.0001], and="" an="" interaction="" between="" sessions="" and="" treatment="" [f(2,24)="5.00;" p="0.02]," but="" not="" the="" treatment="" [f(1,12)="0.66;" p="0.43]." as="" shown="" in="" fig.="" 1e,="" there="" was="" a="" significant="" difference="" between="" test="" a2="" and="" the="" reactivation="" session="" in="" animals="" treated="" with="" vehicles="" (p="0.03;" g="1.12;" n="7)," but="" not="" chelerythrine="" (p="0.57;" g="0.76;" n="7)." there="" were="" no="" significant="" differences="" between="" groups="" during="" any="" session="" performed.="" altogether,="" the="" results="" associate="" the="" pl="" cortex="" pkc="" activity="" 6,="" 9,="" or="" 12h="" after="" reactivating="" an="" aversive="" memory="" with="" its="">

تداوم حافظه مختل ناشی از مهار PKC در قشر PL نیازمند فعال سازی مجدد حافظه قبلی است.

هنگامی که این دارو 6، 9 یا 12 ساعت پس از جلسه فعال سازی مجدد داده شد، تغییرات در تداوم حافظه ناشی از چلرترین مشابه بود. بر این اساس، اولین نقطه زمانی برای انجام آزمایش بعدی انتخاب شد که در آن جلسه فعال سازی مجدد حافظه حذف شد (شکل 2A) تا بررسی شود که آیا این پیش نیاز برای مشاهده نتیجه فوق الذکر است یا خیر. برای این هدف، حیوانات دارای ترس مشروط در معرض یک زمینه B خنثی و جفت نشده (جلسه بدون فعال‌سازی مجدد) قرار گرفتند و 6 ساعت بعد با وسیله نقلیه یا chelerythrine (n=6 در هر گروه) تحت درمان قرار گرفتند. ANOVA مخلوط اثرات قابل توجهی از جلسات را نشان داد [F(2,20)=167,48; P{12}}.000001]، اما نه درمان [F(1,10)=0.75; P{18}}.40] یا تعامل آنها [F(2.20)=0.34; ص{24}}.71]. همانطور که در شکل 2B نشان داده شده است، هر دو گروه مقادیر انجماد بالاتری را در طول تست A1 و A2 نسبت به جلسه بدون فعال سازی مجدد ارائه کردند (P<0.0001), confirming="" that="" this="" conditioned="" behavior="" is="" observed="" predominantly="" when="" the="" animals="" are="" re-exposed="" to="" the="" conditioning="" context.="" further,="" no="" treatment="" effect="" was="" observed,="" indicating="" that="" memory="" reactivation="" is="" essential="" for="" chelerythrine-induced="" impairments="" in="" its="">

اثرات مهار PKMζ قشر PL توسط ZIP بر تداوم یک حافظه ترس متنی مجدد فعال شده. نشان داده شده است که بیان بیش از حد PKMζ در قشر PL، پایداری حافظه بد را تقویت می کند. بر اساس این و یافته‌های قبلی chelerythrine، ما بررسی کردیم که آیا فعالیت PKMζ در قشر PL 6h پس از فعال‌سازی مجدد یک حافظه ترس زمینه‌ای در تداوم آن دخالت دارد یا خیر (شکل 3A). ANOVA مختلط اثرات قابل توجهی از جلسات را نشان داد [F(3,36)=31.4; پ<0.0001], the="" treatment="" [f(1,12)="25.9;" p="0.0003]," and="" their="" interaction="" [f(3,36)="15.1;" p="0.0001]." as="" shown="" in="" fig.="" 3b,="" there="" were="" significant="" differences="" between="" control="" and="" zip="" groups="" (n="7" in="" both="" cases)="" during="" test="" a2="" (p="0.0001;" g="2.53)," and="" test="" a3="" (p="0.0001;" g="4.11)," but="" not="" the="" reactivation="" session="" (p="0.99;" g="0.13)" or="" test="" a1="" (p="0.54;" g="1.35)." altogether,="" the="" results="" associate="" the="" pl="" cortex="" pkmζ="" activity="" 6h="" after="" reactivating="" an="" aversive="" memory="" with="" its="">

برای بررسی اینکه آیا فعال سازی مجدد حافظه پیش نیازی برای تأثیر ZIP بر روند ماندگاری است یا خیر، در آزمایش بعدی حیوانات در معرض یک زمینه B خنثی و جفت نشده (جلسه بدون فعال سازی مجدد) قرار گرفتند و 6 ساعت بعد با وسیله نقلیه تحت درمان قرار گرفتند (n{1}} ) یا ZIP (n=9) (شکل 3C). ANOVA مختلط اثرات قابل توجهی از جلسات را نشان داد [F(3,39)=202; P{7}}.00001]، اما نه درمان [F(1,13)=0.33; P{13}}.57] یا تعامل آنها [F(3,39)=0.17; ص{19}}.91]. همانطور که در شکل 3D نشان داده شده است، هر دو گروه زمان های انجماد بیشتری را در طول آزمون های A1، A2 و A3 نسبت به جلسه بدون فعال سازی مجدد ارائه کردند (P<0.0001), confirming="" that="" fear="" expression="" is="" more="" selective="" to="" the="" conditioning="" context.="" moreover,="" no="" treatment="" effect="" was="" observed,="" indicating="" that="" memory="" reactivation="" is="" necessary="" for="" the="" zip-induced="" changes="" in-memory="">

شکل 3. اثرات مهار PKM قشر prelimbic (PL) توسط ZIP بر تداوم حافظه ترس متنی فعال شده است. (الف) در طرح آزمایشی عمومی مورد استفاده، حیوانات در ابتدا با زمینه آشنا شدند. یک روز بعد، زمینه با سه شوک (ایالات متحده) همراه شد. در روز بعد، 6 ساعت پس از فعال‌سازی مجدد حافظه (موضوع A مجدد قرار گرفتن در معرض)، حیوانات یک تزریق دو طرفه از ZIP یا Scr-ZIP (10nmol) درون PL کورتکس دریافت کردند. یک، هفت و 21 روز بعد، حیوانات مجدداً در معرض زمینه جفت شدن (TestsA، A، و A،) قرار گرفتند تا اثرات ZIP بر حافظه ارزیابی شود، (B) اثرات ZIP بر ماندگاری حافظه زمانی که 6 ساعت پس از فعال‌سازی مجدد داده شد. ZIP حیوانات تیمار شده زمان انجماد کمتری نسبت به گروه کنترل در طول آزمایش‌های A و A ارائه کردند که نشان‌دهنده اختلال در تداوم حافظه است. (ج) طرح آزمایشی عمومی استفاده شد. حیوانات در ابتدا با زمینه A آشنا شدند. یک روز بعد، زمینه با سه شوک (US) جفت شد. روز بعد، 6 ساعت پس از حذف مجدد حافظه (قرار گرفتن در معرض زمینه B خنثی و جفت نشده)، حیوانات تزریق دو طرفه دریافت کردند. قشر درون PL ZIP یا Scr-ZIP. یک، هفت و 21 روز بعد، حیوانات دوباره در معرض زمینه جفتی قرار گرفتند (تست های A. A2 و A3) تا اثرات ZIP بر حافظه ارزیابی شود. (د) اثرات ZIP بر ماندگاری حافظه زمانی که 6 ساعت پس از حذف فعال سازی مجدد حافظه داده می شود. حیوانات تحت درمان با ZIP زمان انجماد مشابه گروه کنترل را در طول هر آزمایش نشان دادند که نشان می‌دهد هیچ تغییری در ماندگاری حافظه وجود ندارد. (ه) طرح آزمایشی عمومی استفاده شده. حیوانات در ابتدا با زمینه A آشنا شدند. یک روز بعد، زمینه با سه شوک (US) همراه شد. در روز بعد، 6 ساعت پس از فعال‌سازی مجدد حافظه (قرار گرفتن مجدد در زمینه A)، حیوانات یک تزریق دوطرفه از قشر درون PL ZIP یا Scr-ZIP دریافت کردند، ده روز بعد، حیوانات دوباره در معرض زمینه جفت قرار گرفتند (تست الف) ارزیابی اثرات ZIP روی حافظه. (F) اثرات ZIP بر ماندگاری حافظه زمانی که 6 ساعت پس از فعال‌سازی مجدد داده می‌شود، حیوانات تحت درمان با ZIP زمان انجماد کمتری نسبت به گروه کنترل در طول تست A ارائه کردند که نشان‌دهنده اختلال در ماندگاری در حافظه است. مقادیر به صورت میانگین± SEM بیان می‌شوند (تعداد حیوانات در هر گروه: B{28}}/گروه؛ D{29}}؛ F{30}}). در "B" و "F"، ستاره نشان‌دهنده یک تفاوت آماری معنی دار (P< 0.05)="" from="" the="" respective="" control="" group="" (mixed="" anova="" followed="" by="" the="" tukey="" test).in"d,="" the="" fence="" (hashtag)="" denotes="" a="" statistically="" significant="" difference="">< 0.05)from="" tests="" a,="" a,="" and,="" relative="" to="" the="" no="" reactivation="" session="" in="" both="" groups="" (mixed="" anova="" followed="" by="" the="" tukey="">

استدلال شده است که مهار PKMζ ممکن است بیان حافظه را به جای تداخل دائمی با تداوم آن مختل کند. برای بررسی اینکه آیا اثرات ناشی از دارو بر تداوم یک حافظه فعال شده مجدد بستگی به زمان سپری شده بین درمان و تست A1 دارد (شکل 3E)، در آزمایش بعدی، حیوانات تزریق درمانی را به قشر PL 6 ساعت پس از فعال سازی مجدد حافظه دریافت کردند، و تست A1 بعد از 10 روز (به جای 1 روز بعد) انجام شد. ANOVA مخلوط اثرات قابل توجهی از جلسات را نشان داد [F(1,14)=5.68; پ<0.03], the="" treatment="" [f(1,14)="7.40;" p="0.01]," and="" their="" interaction="" [f(1,14)="19.41;" p="0.0006]." as="" shown="" in="" fig.="" 3f,="" there="" was="" a="" significant="" difference="" between="" control="" and="" zip="" groups="" (n="7–9" animals/group)="" during="" test="" a1="" (p="0.01;" g="2.37)," but="" not="" the="" reactivation="" session="" (p="0.78;" g="0.50)." these="" results="" corroborate="" that="" pl="" cortex="" pkmζ="" activity="" 6h="" after="" reactivating="" a="" contextual="" fear="" memory="" is="" involved="" in="" its="" persistence,="" and="" indicate="" the="" zip="" action="" is="" independent="" of="" the="" time="" elapsed="" between="" its="" administration="" and="" test="">

شکل 4. اثرات مهار PKC prelimbic (PL) قشر توسط chelerythrine (Che) بر تثبیت مجدد حافظه ترس زمینه‌ای فعال شده (A) طرح آزمایشی عمومی مورد استفاده قرار گرفت. حیوانات در ابتدا با زمینه الف آشنا شدند. یک روز بعد، بافت با سه شوک (US) جفت شد. روز بعد، بلافاصله پس از فعال سازی مجدد حافظه (معرفی مجدد زمینه A)، حیوانات یک تزریق دوطرفه وسیله نقلیه (Veh) دریافت کردند. )یا Che(3.{3}} nmol) داخل PLcortex. یک، هفت و 21 روز بعد، حیوانات دوباره در معرض زمینه جفتی قرار گرفتند (تست های A، A و A،) برای ارزیابی اثرات Che بر حافظه، (B) اثرات Che در تثبیت مجدد حافظه زمانی که بلافاصله بعد از آن داده شد. فعال سازی مجدد حیواناتی که تحت درمان با Che بودند زمان انجماد کمتری نسبت به گروه کنترل در طول آزمایش‌های A، A و Az نشان دادند که نشان‌دهنده اختلال در تثبیت حافظه است. (ج) طرح آزمایشی عمومی استفاده شد. حیوانات در ابتدا با زمینه آشنا شدند. یک روز بعد، زمینه با سه شوک جفت شد (US). روز بعد، بلافاصله پس از حذف مجدد حافظه (قرار گرفتن در معرض زمینه B خنثی و جفت نشده)، حیوانات یک تزریق دوطرفه از Veh یا Che داخل PLcortex دریافت کردند. هفت روز بعد، حیوانات دوباره در معرض زمینه جفتی قرار گرفتند (تست A، و،) تا اثرات Che را بر حافظه ارزیابی کنند. (د) هنگامی که بلافاصله پس از حذف مجدد حافظه داده شود، بر تثبیت مجدد حافظه تأثیر می گذارد. حیواناتی که تحت درمان با Che بودند، زمان انجماد مشابه گروه کنترل را در طول تست A ارائه کردند که نشان می‌دهد هیچ تغییری در تثبیت حافظه وجود ندارد. مقادیر به صورت میانگین 土 SEM （تعداد حیوانات در هر گروه∶B{11}}/گروه بیان می‌شوند. D{12}}/گروه). در "B"، ستاره یک تفاوت آماری معنی‌دار را نشان می‌دهد (*P<0.05)from the="" respective="" control="" group="" (mixed-anova="" followed="" by="" the="" tukey="" test).in="" "d"="" the="" fence(hashtag)="" denotes="" a="" statistically="" significant="" difference=""><0.05)from tests="" a,="" and="" a,="" relative="" to="" the="" no="" reactivation="" session="" in="" both="" groups(mixed="" anova="" followed="" by="" the="" tukey="">

درمان [F(1،14)=7.40; P{4}}.01]، و تعامل آنها [F(1,14)=19.41; P{10}}.0006]. همانطور که در شکل 3F نشان داده شده است، بین گروه های کنترل و ZIP (n=7-9 حیوان/گروه) در طول تست A1 تفاوت معنی داری وجود داشت (P{16}}.01؛ g{18}}. 37)، اما نه جلسه فعال سازی مجدد (P{20}}.78; g=0.50). این نتایج تأیید می‌کند که فعالیت PKMζ قشر PL 6 ساعت پس از فعال‌سازی مجدد یک حافظه ترس متنی در تداوم آن نقش دارد و نشان می‌دهد که عمل ZIP مستقل از زمان سپری شده بین اجرای آن و تست A1 است.

اثرات مهار PKC قشر PL توسط chelerythrine بر تثبیت مجدد یک حافظه ترس متنی مجدد فعال شده.

ما این مداخله دارویی را بلافاصله پس از جلسه فعال سازی مجدد حافظه آزمایش کردیم (شکل 4A). ANOVA مختلط اثرات قابل توجهی از جلسات را نشان داد [F(3,36)=22.5; پ<0.0001], the="" treatment="" [f(1,12)="40.8;" p="0.0001]," and="" their="" interaction="" [f(3,36)="5.68;" p="0.0027]." as="" shown="" in="" fig.="" 4b,="" there="" were="" significant="" differences="" between="" control="" and="" chelerythrine="" groups="" (n="7" in="" both="" cases)="" during="" test="" a1="" (p="0.0003;" g="2.95)," test="" a2="" (p="0.0001;" g="4.30)," and="" test="" a3="" (p="0.003;" g="1.26)," but="" not="" the="" reactivation="" session="" (p="0.60;" g="0.79)." these="" results="" indicate="" that="" pl="" cortex="" pkc="" activity="" immediately="" after="" reactivating="" a="" contextual="" fear="" memory="" is="" involved="" in="" its="" reconsolidation,="" and="" the="" drug-induced="" reconsolidation="" impairment="" was="" still="" present="" 21="" days="">

برای بررسی اینکه آیا فعال‌سازی مجدد حافظه پیش‌نیازی برای تأثیر کلریترین بر فرآیند تثبیت مجدد است، در آزمایش بعدی جلسه فعال‌سازی مجدد حذف شد زیرا حیوانات در معرض بافت B قرار گرفتند و سپس با وسیله نقلیه یا چلرترین درمان شدند (شکل 4C؛ n{{1} }/گروه). ANOVA مختلط اثرات قابل توجهی از جلسات را نشان داد [F(2,26)=379.7; P{6}}.0001]، اما نه درمان [F(1,13)=5.71; P{12}}.06]، یا تعامل آنها [F(2, 26)=2.76; P{18}}.09]. همانطور که در شکل 4D نشان داده شده است، هر دو گروه زمان های انجماد بیشتری را در طول آزمون های A1 و A2 نسبت به جلسه بدون فعال سازی مجدد ارائه کردند (P<0.0001), confirming="" that="" fear="" expression="" is="" more="" selective="" to="" the="" conditioning="" context.="" moreover,="" there="" was="" no="" treatment="" effect,="" indicating="" that="" memory="" reactivation="" is="" also="" necessary="" for="" drug-induced="" efects="" in="" memory="">

شکل 5. اثرات مهار PKM قشر prelimbic (PL) توسط ZlP بر تثبیت مجدد حافظه ترس زمینه ای فعال شده مجدد. (الف) طرح آزمایشی عمومی استفاده شد. حیوانات در ابتدا با زمینه A آشنا شدند. یک روز بعد، زمینه با سه شوک (US) جفت شد، روز بعد، بلافاصله پس از فعال سازی مجدد حافظه (قرار گرفتن مجدد در زمینه A)، حیوانات تزریق دو طرفه ZIP یا Scr دریافت کردند. -ZIP (10 نانومول) داخل PLcortex. یک، هفت و 21 روز بعد، حیوانات دوباره در معرض زمینه جفتی (TestsA، A و A) قرار گرفتند تا اثرات ZIP بر حافظه ارزیابی شود. (ب) اثرات زیپ بر روی تثبیت مجدد حافظه زمانی که بلافاصله پس از فعال سازی مجدد حافظه داده شود. حیوانات تحت درمان با ZIP زمان انجماد مشابه با گروه کنترل را در طول آزمایش‌های A، A ارائه کردند و هیچ تغییری در تثبیت مجدد حافظه نشان ندادند. (ج) از طرح آزمایشی عمومی استفاده شد. حیوانات در ابتدا با زمینه A آشنا شدند. یک روز بعد، بافت با سه شوک (US) جفت شد. روز بعد، 1 ساعت پس از فعال سازی مجدد حافظه (قرار گرفتن مجدد در زمینه A)، حیوانات تزریق دو طرفه ZIP یا دریافت کردند. Scr-ZIP قشر داخل PL. یک، هفت و 21 روز بعد، حیوانات در معرض زمینه جفتی (تست های A، A و A) قرار گرفتند تا اثرات IP بر حافظه را ارزیابی کنند. (د) اثرات ZIP بر ماندگاری حافظه زمانی که 1 ساعت پس از فعال سازی مجدد داده شود. حیوانات تحت درمان با ZIP زمان انجماد کمتری نسبت به گروه کنترل در طول آزمایش‌های A2 و A ارائه کردند که نشان‌دهنده اختلال در تداوم حافظه است. مقادیر به صورت میانگین ± SEM بیان می‌شوند (تعداد حیوانات در هر گروه: B{16}}/گروه؛ D{17}}). قرار گرفتن در معرض (زمینه A). در "D"، ستاره یک تفاوت آماری معنی دار را نشان می دهد (P<0.05)from the="" respective="" control="" group="" (mixed="" anova="" followed="" by="" the="" tukey="">

اثرات مهار PKMζ قشر PL توسط ZIP در تثبیت مجدد یک حافظه ترس متنی مجدد فعال شده.

ما این مداخله دارویی را بلافاصله پس از جلسه فعال سازی مجدد حافظه و 1 ساعت بعد آزمایش کردیم. در اولین نقطه زمانی انتخاب شده (شکل 5A)، یک ANOVA مختلط هیچ اثر قابل توجهی از جلسات نشان نداد [F(3,36)=4.33; پ<0.303], the="" treatment="" [f(1,12)="0.109;" p="0.7472]," and="" their="" interaction="" [f(3,36)="1.62;" p="0.19]." as="" shown="" in="" fig.="" 5b,="" there="" were="" no="" signifcant="" diferences="" between="" control="" and="" zip="" groups="" (n="7" in="" both="" cases)="" during="" any="" session="" performed,="" suggesting="" that="" pkmζ="" activity="" in="" the="" pl="" cortex="" immediately="" afer="" reactivating="" a="" contextual="" fear="" memory="" is="" not="" involved="" in="" its="" reconsolidation="" (and="" persistence).="" at="" the="" second="" time="" point="" selected="" (fig.="" 5c),="" a="" mixed="" anova="" showed="" signifcant="" efects="" of="" the="" sessions="" [f(3,39)="42.2;"><0.0001], the="" treatment="" [f(1,13)="20.2;" p="0.0006]," and="" their="" interaction="" [f(3,39)="7.82;" p="0.0003]." as="" shown="" in="" fig.="" 5d,="" there="" were="" signifcant="" diferences="" between="" control="" and="" zip="" groups="" (n="8" and="" 7,="" respectively)="" during="" test="" a2="" (p="0.0005;" g="2.25)," and="" test="" a3="" (p="0.0002;" g="2.19)," but="" not="" the="" reactivation="" session="" (p="0.99;" g="0.48)" or="" test="" a1="" (p="0.35;" g="1.48)." altogether,="" the="" results="" associate="" the="" pl="" cortex="" pkmζ="" activity="" as="" early="" as="" 1h="" afer="" reactivating="" an="" aversive="" memory="" with="" its="">

بحث

مطالعه حاضر به دنبال بررسی نقش PKC و PKMζ قشر PL در تثبیت مجدد و تداوم یک حافظه ترس زمینه‌ای فعال شده در موش‌ها بود. نشان داده شد که: 1) فعالیت هر دو PKC و PKMζ برای تداوم یک حافظه فعال شده ضروری است. 2) اثرات مهار PKC یا PKMζ نیازمند فعال سازی مجدد حافظه قبلی است. 3) اثرات مهار PKMζ مستقل از آزمایش اولیه 1 روز پس از تزریق ZIP است. 4) فعالیت PKC، اما نه PKMζ، در تثبیت مجدد حافظه فعال شده نیز نقش دارد. 5) فعالیت PKMζ در طول پنجره زمانی تثبیت مجدد برای ماندگاری حافظه مهم است. یافته‌های Tese نشان می‌دهد که قشر PL PKC و PKMζ درگیری متفاوتی در فرآیندهای مورد بررسی دارند.

مهار PKC ناشی از chelerythrine 6 ساعت پس از فعال سازی مجدد حافظه هیچ تأثیری بر زمان انجماد نداشت که حیوانات یک روز بعد مورد آزمایش قرار گرفتند (تست A1). این نتیجه شواهد قبلی را تأیید می کند که نشان می دهد مداخلات تجربی مختلف ارائه شده در این مقطع زمانی دیگر قادر به تداخل با تثبیت مجدد حافظه نفرت انگیز نیستند. با این حال، پس از هفت روز (تست A2) بین گروه‌ها تفاوت وجود داشت، که نشان می‌دهد فعالیت PKC در قشر PL برای تداوم حافظه بدفعال مجدد مورد نیاز است. این الگوی نتایج (کاهش زمان انجماد 7 روز اما نه 24 ساعت پس از درمان دارویی) مطابق با نتایجی است که پس از تزریق یک مهارکننده سنتز پروتئین به آمیگدال قاعده‌ای 13، یک مهارکننده مسیر ERK در هیپوکامپ پشتی 25 و تجویز سیستمیک یک غیر -مهارکننده انتخابی PKC14.

فرآیندهای مرتبط با تداوم حافظه بد، مانند موج دوم بیان پروتئین Arc در آمیگدال قاعده‌ای، معمولاً تا 12 ساعت پس از فعال‌سازی مجدد آن رخ می‌دهند. برای بررسی بیشتر اینکه آیا فعالیت PKC در قشر PL برای تداوم حافظه مهم است، اثرات cheleryth-rine در گروه‌های مستقل حیوانات 9،12 یا 18 ساعت پس از فعال‌سازی مجدد پس از حافظه مورد بررسی قرار گرفت. زمانی که 9 یا 12 ساعت پس از فعال‌سازی مجدد حافظه داده شد، نسبت به گروه شاهد کاهشی در زمان انجماد ناشی از دارو وجود داشت، اما نه 18 ساعت بعد، که نشان می‌دهد دوره‌ای که در طی آن PLcortex PKCisinyolyedin تداوم حافظه منفی فعال می‌شوند از 6 تا ساعت 12 شایان ذکر است که حیوانات تحت درمان با وسیله نقلیه 18 ساعت پس از فعال‌سازی مجدد حافظه، زمان انجماد کمتری را در طول تست A در مقایسه با جلسه فعال‌سازی مجدد خود نشان دادند، که نشان می‌دهد یادگیری انقراض می‌تواند در گروه کنترل رخ داده باشد. جالب توجه است که این تفاوت در حیوانات تحت درمان با chelerythrine مشاهده نشد. مطالعات آینده برای بررسی اینکه آیا مهار PKC قشر PL بر روند انقراض تأثیر می گذارد تضمین شده است.

اگر تداوم درگیری PKC در حافظه به فعال سازی مجدد حافظه قبلی (یعنی مواجهه مختصر با زمینه شرطی سازی) بستگی دارد، در این صورت نمی توان انتظار داشت که هیچ تغییری در تداوم حافظه در حیواناتی که 6 ساعت پس از قرار گرفتن در معرض یک زمینه غیر شرطی به قشر درون PL با چلرترین تزریق شده اند، نباشد. . در واقع، هیچ اثری از مهار PKC در زمانی که فعال‌سازی مجدد حافظه حذف شد، مشاهده نشد، نتیجه موافق با نتایج نشان داد که القای مکانیسم‌های مرتبط با تداوم توسط فعال‌سازی مجدد حافظه ایجاد می‌شود.

نقش ایزوفرم‌های معمولی PKC مدت‌هاست که در پارادایم‌های یادگیری بد بررسی شده است{0}}. اخیراً، تمرکز بر دخالت بالقوه برخی ایزوفرم‌های PKC غیر معمول، به‌ویژه PKMC، در تداوم حافظه‌های بداخلاقی تازه به‌دست‌آمده و فعال شده-33 بوده است، با توجه به اینکه chelerythrine میل ترکیبی با PKCisoforms غیر معمول و غیر معمول دارد..3435 یک آزمایش اضافی انجام شد که در آن PKMCinhibitor ZIP انتخابی به داخل قشر PL 6 ساعت پس از فعال سازی مجدد حافظه تزریق شد. کاهش زمان انجماد ناشی از دارو در مقایسه با گروه کنترل در طول هر دو آزمون A و Aa. وجود داشت که نشان‌دهنده نیاز PKMC برای تداوم حافظه فعال شده است. این نتیجه با نتایجی مطابقت دارد که نشان می‌دهند تزریق ZIP به سایر مناطق مجزای مغز بر تداوم انواع مختلف خاطرات تازه به‌دست‌آمده تأثیر می‌گذارد. نکته مهم، از آنجایی که اثرات چلریترین و ZIP بر ماندگاری حافظه مشابه بودند، عمل چلرترین احتمالاً حداقل تا حدی با مهار فعالیت PKMC واسطه شده است، در هر صورت، همانطور که در مورد chelerythrine نشان داده شده است. جلوه های ZIP نیاز به فعال سازی مجدد حافظه دارند. این نتیجه از اهمیت ویژه ای برخوردار است زیرا گزارش شده است که مهار PKMG در غیاب فعالسازی مجدد حافظه باعث اختلال در تداوم آن می شود-3439. ویژگی ZIP نیز به چالش کشیده شده است، زیرا می‌تواند نگهداری LTP را در موش‌های حذفی PKM مختل کند، و فعالیت یک ایزوفرم غیر معمول PKC به نام PKC/λ³ را که در حال حاضر تنها با مراحل اولیه حافظه مرتبط است، مهار کند. تثبیت و LTP5 اولیه. بنابراین، می توان استدلال کرد که فقط اثرات ZIP تا حدی با مهار PKMC مرتبط است. در واقع، به عنوان یک مکانیسم جبرانی، موش های حذفی برای PKM بیان PKC را افزایش دادند، که به نوبه خود باعث فرآیند ماندگاری حافظه شد. در مطالعه ما، حیوانات تراریخته نیستند، بنابراین احتمال اینکه اثرات ناشی از ZIP به مکانیسم‌هایی غیر از آنهایی که توسط PKMC واسطه می‌شوند بستگی داشته باشد، کمتر است.

یک مطالعه گزارش داد که اثرات ناشی از ZIP بستگی به آزمایش اولیه دارد که یک روز پس از تزریق آن به آمیگدال قاعده‌ای جانبی، زمانی که از وحشت شدید استفاده شد، رخ داد. در اینجا، تزریق درون PIL ZIP6h پس از فعال‌سازی مجدد حافظه، بیان انجماد را در زمانی که حیوانات مجدداً آزمایش شدند یا 10 روز بعد، کاهش داد، که نشان می‌دهد زمان سپری شده بین تجویز دارو و آزمایش اولیه، یک عامل محوری تأثیرگذار بر عمل ZIP نیست. علاوه بر این، گزارش شده است که ZIP تزریق شده به قشر منزوی، 1 ماه پس از تزریق آن، ماندگاری حافظه بیزاری از طعم را مختل می کند. ما PL را بررسی کردیم. اثرات ZIP کورتکس بر تداوم حافظه با استفاده از یک پروتکل شرطی سازی ترس زمینه ای با یک جلسه آشنایی، که در آن سهم قشر پیش پیشانی میانی در حافظه بلندمدت بیشتر از پروتکل های بدون مواجهه قبلی با زمینه ای است که باید شرطی شود. همانطور که در این کارها استفاده شد.

در حال حاضر ناشناخته است که آیا مکانیسم‌های تثبیت مجدد و پایداری در قشر PL همپوشانی دارند یا خیر. برای شروع به پرداختن به این سوال، chelerythrine بلافاصله پس از فعال سازی مجدد حافظه داده شد. کاهش زمان انجماد ناشی از دارو نسبت به گروه شاهد در طول تست A وجود داشت، که نشان می‌دهد فعالیت PKC همچنین بر تثبیت مجدد حافظه ترس متنی تأثیر می‌گذارد. این نتیجه با نتایجی که اهمیت فعالیت PKC را در حین تثبیت مجدد حافظه در سایر نواحی مغز نشان می‌دهند، و سهم قشر PL در تثبیت مجدد خاطرات بد همخوانی دارد.، شایان ذکر است که گروه chelerythrine همچنین سطوح انجماد پایین‌تری نسبت به گروه‌های کنترل مربوطه منقضی می‌کند. 7 و 21 روز بعد آزمایش شد (تست های A و A)، نتیجه ای مطابق با مطالعاتی که نشان می دهد مداخلاتی که تثبیت مجدد را هدف قرار می دهند با ویژگی های مربوط به انقراض، مانند بازگرداندن و بازیابی خود به خود حافظه ترس اصلی مرتبط نیستند. علاوه بر این، نشان داده شد که اثرات chelerythrine در تحکیم مجدد نیاز به فعال سازی مجدد حافظه قبلی دارد.

اثرات بالقوه بر تثبیت مجدد حافظه نیز مورد بررسی قرار گرفت. هیچ تغییری ناشی از دارو در زمان انجماد نسبت به گروه کنترل در طول آزمایش A..A و Aa هنگامی که بلافاصله پس از فعال‌سازی مجدد حافظه داده شد، وجود نداشت، که نشان می‌دهد مهار PKMC در این نقطه زمانی در قشر PL هیچ‌کدام از آنها را تحت تأثیر قرار نمی‌دهد.

تثبیت مجدد و یا تداوم یک حافظه فعال شده مجدد. پیشنهاد شده است که مکانیسم های بازیابی و فعال سازی مجدد حافظه ممکن است تا حدی توسط ZIP مهار شود. به عنوان مثال، زیرواحد GluR2A گیرنده AMPA قاچاق به سیناپس ها توسط بازیابی حافظه القا می شود و برای تثبیت مجدد حافظه ضروری است --17. از آنجایی که عملکرد ZIP با مهار قاچاق GluR2A مرتبط است، این دارو می‌تواند باعث اختلال در فعال‌سازی مجدد حافظه شود و بنابراین، فرآیند تثبیت مجدد به اندازه کافی القا نشده است، که به نوبه خود از وقوع عمل ZIP جلوگیری می‌کند، نشان داده شده است که مهار PKMC علاوه بر این، CAI، تثبیت مجدد حافظه فضایی را مختل کرد. افزایش فعالیت PKMC ناشی از تحکیم مجدد در آمیگدال با حفظ حافظه ترس بویایی در موش‌های صحرایی جوان مرتبط بود. قابل قبول است که تفاوت در پارادایم های مورد استفاده (پیش بند-ابزار حافظه فضایی در مقابل حافظه ترس) ممکن است برای یافته های مختلط گزارش شده باشد، در واقع. پیشنهاد شده است که PKM (حافظه ترس را در آمیگدال قاعده‌ای جانبی 3) و PL، قشر مغز حفظ می‌کند، اما در هیپوکامپ پشتی 3 وجود ندارد، اگرچه این موضوع هنوز مورد بحث است. در اینجا، برای پرداختن به نقش PKMC در تثبیت مجدد حافظه، گروه دیگری از موش‌ها یک ساعت پس از دستیابی به حافظه، تزریق ZIP را در قشر PL دریافت کردند. همانطور که در شکل 5D نشان داده شده است. یک روز بعد، هیچ تفاوت‌هایی در رفتار انجماد در حیواناتی که تمام تیمار شده‌اند نسبت به گروه‌های کنترل مشاهده شد، که نشان می‌دهد در این زمان هیچ اثری از PKMinhibition بر تثبیت مجدد حافظه وجود ندارد. با این حال، در مقایسه با گروه کنترل در طول آزمایش‌های A و Ay، کاهشی در سطوح انجماد وجود داشت. ، نشان می دهد که فعالیت PKM قشر PL واسطه جنبه های مربوط به تداوم حافظه در اوایل 1 ساعت پس از فعال سازی مجدد حافظه است، این نتیجه با نتایج حاصل از مطالعه مطابقت دارد. Krawczyket al (2016P که در آن مهار ERK1/2 در هیپوکامپ پشتی 3 ساعت پس از فعال سازی مجدد حافظه، حافظه ترس را یک روز بعد دست نخورده نگه داشت، اما زمانی که حیوانات 7 روز بعد دوباره آزمایش شدند، مختل شد، قابل توجه اینکه اخیراً نشان داده شده است که فعال سازی مجدد حافظه مکانیسم هایی را القا می کند. مربوط به هر دو تثبیت مجدد حافظه و پایداری725.

با هم، اثرات ناشی از chelerythrine بر تثبیت مجدد حافظه و فقدان اثرات ZIP در این مرحله حافظه، سهم متفاوت PKC معمولی در تثبیت مجدد حافظه و PKC غیر معمول، مانند PKMC، برای ماندگاری حافظه پس از فعال‌سازی مجدد را نشان می‌دهد، مطالعات آینده می‌تواند به کدام PKC اشاره کند. ایزوفرم ها در هر فرآیند حافظه در قشر PL نقش دارند. در مجموع، یافته های حاضر نشان می دهد که PL. قشر PKC و PKMC در تثبیت مجدد و تداوم یک حافظه ترس متنی مجدد فعال شده نقش دارند. علاوه بر این، یافته‌های حاضر نشان داد که پس از پایان پنجره زمانی تثبیت مجدد، فرصت گسترده‌ای برای کاهش حافظه ترس وجود دارد.