انتخاب و مشخص کردن مهارکننده‌های تیروزیناز از ریزوم Atractylodis Macrocephalae بر اساس رابطه طیف-فعالیت و اتصال مولکولی

حق چاپ © 2021 یونگ-کین لیو و همکاران. 2is یک مقاله با دسترسی آزاد است که تحت مجوز Creative Commons Attribution توزیع شده است، که اجازه استفاده، توزیع و تکثیر نامحدود را در هر رسانه ای می دهد، مشروط بر اینکه اثر اصلی به درستی ذکر شده باشد.

سیستانچعملکرد تولید کلاژن را افزایش می دهد که می تواند خاصیت ارتجاعی و درخشندگی پوست را افزایش دهد و به ترمیم سلول های آسیب دیده پوست کمک کند.سیستانچگلیکوزیدهای فنیل اتانول اثر کاهش دهنده قابل توجهی بر فعالیت تیروزیناز دارند و اثر آن بر تیروزیناز به عنوان یک مهار رقابتی و برگشت پذیر نشان داده شده است که می تواند مبنای علمی برای توسعه و استفاده از مواد سفید کننده در سیستانچ فراهم کند. بنابراین، سیستانچ نقش کلیدی در سفید شدن پوست دارد. می تواندتولید ملانین را مهار می کندبرای کاهش تغییر رنگ و تیرگی؛ و تولید کلاژن را برای بهبود خاصیت ارتجاعی و درخشندگی پوست تقویت می کند. با توجه به شناخت گسترده این اثرات سیستانچ، بسیاری از محصولات سفید کننده پوست شروع به تزریق مواد گیاهی مانند سیستانچ برای پاسخگویی به تقاضای مصرف‌کنندگان کرده‌اند، بنابراین ارزش تجاری سیستانچ را افزایش داده‌اند.سفید شدن پوستمحصولات به طور خلاصه، نقش سیستانچ در سفید شدن پوست بسیار مهم است. اثر آنتی اکسیدانی و اثر کلاژن سازی آن می تواند تغییر رنگ و تیرگی را کاهش دهد.بهبود خاصیت ارتجاعی و درخشندگی پوست، و در نتیجه به یک اثر سفید کننده دست می یابد. همچنین کاربرد وسیع سیستانچ در محصولات سفید کننده پوست نشان می دهد که نقش آن در ارزش تجاری را نمی توان دست کم گرفت.

برای سفید کردن روی Cistanche ارگانیک کلیک کنید

بیشتر بخواهید: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

Atractylodis macrocephalus Rhizoma (AMR) یک طب سنتی کلاسیک چینی معروف (CTM) است که هزاران سال است که به عنوان مقوی برای بسیاری از بیماری ها استفاده می شود. در چین باستان از آن به عنوان غذای مکمل برای زیبایی در کاخ استفاده می شد. در مطالعات اولیه، عملکرد سفیدکننده پوست و اثر بازدارندگی قابل توجهی بر تیروزیناز (TYR) که آنزیم فعال در ترکیب ملانین AMR است، کشف شد و تحقیقات مربوطه به ندرت گزارش شده است. در این مطالعه، کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) همراه با آنالیز رگرسیون حداقل مربعات جزئی (PLS) برای بررسی انسجام بین اجزای شیمیایی و فعالیت بازدارنده 11 دسته AMR بر فعالیت TYR استفاده شد. نتایج PLS نشان داد که پیک‌های کروماتوگرافی 11 (atractylenolide III) و 15 می‌توانند اجزای مؤثر مهمی برای مهار فعالیت TYR باشند که توسط روابط طیف-فعالیت مشخص می‌شود. علاوه بر این، فعالیت مهاری TYR atractylenolide III توسط آزمایش آزمایشگاهی توسط -arbutin به عنوان یک داروی کنترل مثبت تأیید شد.رانتایج آزمایش آزمایشگاهی و اتصال مولکولی نشان داد که atractylenolide III دارای فعالیت بازدارندگی TYR بالایی است و می‌تواند به باقی مانده‌های موجود در پاکت کاتالیزوری TYR مرتبط باشد.رابنابراین، سنجش زیستی، اتصال مولکولی، و روابط طیف-فعالیت برای پیوند کیفیت نمونه‌ها با مواد فعال مرتبط با داروسازی مناسب هستند. و مطالعه ما یک پایه نظری برای استفاده از عصاره آب AMR در لوازم آرایشی سفید کننده ایجاد می کند.

1. معرفی

تیروزیناز (TYR)، همچنین به عنوان پلی فنل اکسیداز نامگذاری شده است، یک آنزیم حاوی مس گلیکوزیله چند عملکردی است که به طور گسترده در ارگانیسم حیوانات، گیاهان و میکروارگانیسم ها وجود دارد [1-3]. در حضور اکسیژن مولکولی، تیروزین ابتدا توسط TYR کاتالیز می شود تا به دوپا اکسید شود و سپس بیشتر به دوپاکینون اکسید می شود که برای تشکیل رنگدانه دوپا ایزومریزه می شود. رنگدانه دوپا در نهایت با مشارکت CO2 و TRP{4}} ملانین را تشکیل داد که باعث ایجاد بیماری های پوستی مختلف مانند هایپرپیگمانتاسیون، ملاسما، کک و مک و لکه های پیری می شود [4، 5]. TYR نقش حیاتی ایفا می کند زیرا آنزیم حیاتی و آنزیم محدود کننده در روند ترکیب ملانین است [6-8]. لکه های رنگدانه و ملانوم به طور قابل توجهی با افزایش فعالیت و کمیت TYR افزایش یافت [9]. امروزه، مهارکننده‌های TYR به دلیل استفاده نهفته به عنوان عوامل هیپوپیگمانته مورد توجه گسترده‌ای قرار گرفته‌اند [10].

Atractylodis macrocephalus rhizoma (AMR)، ریزوم خشک Atractylodes macrocephalaKoidz.، یکی از داروهای گیاهی چینی است که در فارماکوپه چینی گردآوری شده است [11-15]. در چین باستان، AMR برای تشکیل فرمول کلاسیک معروف برای سفید کردن با نام «پماد هفت سفید» انتخاب شد و به عنوان غذای مکمل برای زیبایی در کاخ استفاده می‌شد [16]. گزارش شده است که AMR عمدتاً حاوی sesquiterpenoids و triterpenoids (شامل atractylenolideI، atractylenolide II و atractylenolide III)، پلی استیلن‌ها، کومارین‌ها و فنیل پروپانوئیدها، فلاونوئیدها و فلفلاوونوئید گلیکوزیدها، پلی ساکاریدها، 1،100،100، 10،000،000،000،000،000،000،000،000،000،000،00،000،000،000،000،000،000،000 و 2013 می باشد. با این حال، اثرات آن بر سفید کردن پوست و مواد فعال به ندرت گزارش شده است.رامطالعه رابطه طیف-فعالیت برای بررسی ارتباط آنها استفاده شد.

تحقیق در مورد رابطه طیف-فعالیت نه تنها می تواند کمبود تفکیک بین مواد شیمیایی و فارماکودینامیک را دور بزند، بلکه به اندازه کافی اثر انگشت را با فارماکودینامیک توسط مدل ریاضی مرتبط می کند [19، 20].Thرابطه طیف-فعالیت ارتباط بین اثر انگشت و فارماکودینامیک را بررسی می‌کند تا روشی معتبر برای شفاف‌سازی پایه مواد گیاهی چینی ارائه دهد [21].رااثر انگشت معمولاً توسط HPLC، UPLC، GC، GC MS و LC-MS ایجاد می‌شود [19، 22-24]. داده های "فارماکودینامیک" معمولاً توسط مدل ها به دست می آید [25].راروش‌های پردازش داده‌ها، عمدتاً شامل تجزیه و تحلیل مؤلفه‌های اصلی (PCA)، تحلیل رگرسیون حداقل مربعات جزئی (PLS)، تحلیل متمایز حداقل مربعات جزئی متعامد (OPLS-DA)، تجزیه و تحلیل همبستگی متعارف (CCA) و تحلیل رابطه خاکستری (GRA) است. معمولا [26-29].

برای روشن شدن اجزای AMR که به فعالیت بازدارندگی TYR کمک می کنند [30، 31]، اثر انگشت 11 دسته AMR توسط HPLC ایجاد شد. فارماکودینامیک فعالیت مهار TYR در شرایط آزمایشگاهی با روش آنزیمی بیوشیمیایی مورد بررسی قرار گرفت. ترکیبات موثر 2e توسط مدل رابطه طیف-فعالیت که با همبستگی پیک های اثر انگشت با داده های فارماکودینامیک ایجاد شد، انتخاب شدند. علاوه بر این، مواد فعال با آزمایش‌های آزمایشگاهی و آزمایش‌های اتصال مولکولی تأیید می‌شوند. مطالعه 2is می تواند مبنایی نظری برای استفاده از AMR به عنوان داروی درمان بیماری های پوستی رنگدانه و توسعه آن به عنوان مکمل های آرایشی سفیدکننده ایجاد کند.

2. مواد و روشها

2.1. مواد شیمیایی و مواد.متانول (بیشتر یا مساوی 99.5 درصد) از شرکت معرف شیمیایی سینوفارم (شانگهای، چین) خریداری شد. اسید فسفریک (بیشتر یا مساوی 99 درصد) از شرکت واکنشگر شیمیایی Chengdu Jinshan (چنگدو، چین) خریداری شد. استونیتریل از شرکت Tiandi Reagent Co., Ltd. (ایالات متحده آمریکا) خریداری شد. Atractylodes III (بیشتر یا مساوی 98 درصد)، بافر فسفات، تیروزیناز، و L-تیروزین از Beijing Soleibao Technology Co., Ltd. (پکن، چین) خریداری شد. -آربوتین (بیشتر یا مساوی 99.7 درصد) از آکادمی شناسایی مواد غذایی و دارویی چین خریداری شد. تیروزیناز و ال-تیروزین قبل از استفاده در بافر فسفات (pH 6.8) حل شدند. آتراکتیلوز III و -آربوتین در 50 درصد متانول (v/v) حل شدند.راآب خالص از Hangzhou Wahaha Baili Food Co., Ltd. (هانگژو، چین) خریداری شد. ستون Comix C18 (250 × 4.6 میلی متر، 5 میکرومتر) از Guangzhou Philemon Scientific Instrument Co., Ltd. (گوانگژو، چین) خریداری شد.

2.2. مواد گیاهی.را11 دسته از نمونه های دارویی AMR جمع آوری شد و در جدول 1 نشان داده شده است.رانمونه های فوق توسط پروفسور Ronggui Qin (مدرسه داروسازی، دانشگاه پزشکی گوئیژو) تأیید شد.

2.3. استخراج.قطعات گیاهی هر نمونه (حدود 10 گرم) به طور دقیق وزن شده و سپس در یک فلاسک ته گرد قرار داده شده و آب اضافه شده و برای عصاره گیری رفلاکس می شود. محصولات تحت فشار کاهش یافته برای به دست آوردن عصاره آبی AMR خشک شدند. عصاره‌های آبی AMR (حدود 30.{3}} میلی‌گرم) به طور دقیق وزن شده و با متانول 50 درصد (v/v) حل شد.

2.4. آنالیز HPLCستون کروماتوگرافی فاز معکوس Comix C18 (250 × 4.6 میلی متر، 5 میکرومتر).رافاز متحرک 0.1 درصد فسفر مخلوطی از آب اسیدی (A) - استونیتریل (B) بود. سیستم شستشو طراحی شده و در جدول 2 آمده است.رانرخ زیر در 0.6 میلی لیتر در دقیقه ثابت شد. دمای ستون 2e 30 درجه بود.راطول موج UA 210 نانومتر بود.راحجم تزریق 30 میکرولیتر بود.

روش تشخیص با آزمون دقیق، آزمون تکرارپذیری و آزمون پایداری تأیید شد.

2.5. آنالیز شیمی سنجیدر این مطالعه، اطلاعات پیک مشترک اثر انگشت 11 دسته AMR به نرم افزار SIMCA14.1 برای HCA، PCA و OPLS-DA وارد شد.

2.6. تست مهار TYR در شرایط آزمایشگاهی. راعصاره AMR با بافر فسفات (pH 6.8) حل و در دمای 4 درجه نگهداری شد و سپس برای سنجش آنزیم مورد استفاده قرار گرفت.

در این مطالعه، L-تیروزین به عنوان یک سوبسترا برای تعیین مهار فعالیت TYR استفاده شد.رامحلول های واکنش مطابق جدول 3 تهیه شد و نرخ مهار AMR بر فعالیت TYR تعیین شد. ابتدا محلول های واکنش به مدت 10 دقیقه در حمام آب 37 درجه قرار گرفتند. در مرحله دوم، محلول TYR بلافاصله به محلول های واکنش T2 و T4 اضافه شد. ثالثاً محلول های واکنش پس از مخلوط شدن کامل در دمای ثابت حمام آب 37 درجه به مدت 10 دقیقه واکنش نشان دادند. در نهایت، محلول واکنش مقادیر جذب بلافاصله در 475 نانومتر اندازه‌گیری شد. نرخ بازداری (درصد) از معادله به دست آمد: نرخ بازداری (درصد) =[(AT2− AT1) - (AT4 - AT3)]/(AT2− AT1) × 100 درصد.

2.7. تجزیه و تحلیل رابطه طیف - فعالیت. رابرای تنظیم زمان ماندگاری هر پیک از نرم‌افزار "سیستم ارزیابی تشابه اثر انگشت کروماتوگرافی طب سنتی چینی 2012 A Edition" استفاده شد و ناحیه پیک (PA) با یکسان سازی پردازش شد.راn، داده های کمی به دست آمد.رامعادله رگرسیون PLS با نرم افزار SIMCA14.1 تنظیم شد. منطقه اوج به عنوان متغیر مستقل (X) و نرخ بازداری TYR به عنوان متغیر وابسته (Y) در نظر گرفته شد.

2.8. اثر مهاری Atractylodes III بر TYR و اتصال مولکولی.برای اثبات اثر مهاری Atractylenolide III بر روی TYR، آزمایش‌های فعالیت آنزیمی در شرایط آزمایشگاهی توسط -arbutin به عنوان یک داروی کنترل مثبت انجام شد.

برنامه AutoDock4.2 در شبیه سازی docking استفاده شد. ساختار کریستالی Agaricus bisporus (PDB ID: 2Y9X) به عنوان ساختار سه بعدی TYR در نظر گرفته شد [32]. ما شبیه سازی های اتصال TYR به Atractylodes III را انجام دادیم. با هدف اتصال با AutoDock Vina، اندازه شبکه به (x, y, z) =(16, 12, 14) و مرکز شبکه به (x, y, z) { طراحی شد. {10}} (-10.348، -28.279، -45.925). در هر روش شبیه سازی، پیشرفت با پارامترهای پیش فرض از AutoGrid و AutoDock انجام می شود. الگوریتم ژنتیک لامارکی (LGA) برای تعیین مناسب ترین جهت گیری های اتصال لیگاند به تصویب رسید.

3. نتایج و بحث

3.1. اعتبار سنجی روش.دقت، تکرارپذیری و پایداری برای روش تحلیلی تایید شد. در آزمایش دقیق، دقت زمان‌های ماندگاری نسبی (RRTs) و مناطق اوج نسبی (RPAs) از {{0}} تجاوز نکرد.0به ترتیب در RSD از 2 درصد و 4 درصد; شباهت 1 بود. تکرارپذیری RRTها و RPAها کمتر از 0.11 درصد و 4 درصد در RSD بود و شباهت بیشتر یا مساوی با 0.998 بود. پایداری با آزمایش یک محلول نمونه که در دمای محیط آزمایشگاهی پس از 0، 6، 8، 12 و 18 ساعت حفظ شده بود، برآورد شد. RSDهای RRTها و RPAهای پیکهای مشترک به ترتیب کمتر از 0.1 درصد و 4 درصد بودند. شباهت بیش از 0.999 بود.رانتایج نشان داد که سیستم آزمایشی AMR برای تجزیه و تحلیل اثر انگشت ثابت و قابل اعتماد است.

3.2. استقرار اثر انگشت HPLC و تجزیه و تحلیل تشابه.اثر انگشت مواد مرجع Atractylodes III در شکل 1(a) نشان داده شده است. نمونه AMR تفکیک مطلوبی را در میان قله های خود نشان داد (شکل 1(b)). تحت شرایط عالی، اثر انگشت HPLC از 11 دسته مختلف نمونه AMR تولید شد (شکل 1(c))، و شباهت ها محاسبه شد. نتایج شباهت ها در جدول 4 نشان داده شده است که نشان می دهد تمام مقادیر شباهت 11 نمونه بیشتر از 0.8 بود که نشان می دهد همه نمونه ها از نظر نوع ترکیبات شیمیایی مشابه بودند. 16 پیک مشترک با مقایسه زمان ماند آنها در طیف UV مشاهده شد. قله 11 به عنوان Atractylodes III توسط مواد مرجع شناسایی شد. RSDهای PAهای 16 پیک رایج بین 18/1 تا 68/58 درصد بود (جدول 5). این نتایج نشان داد که محتویات مواد شیمیایی موجود در AMR از مناطق مختلف تولید متفاوت است.

3.3. تجزیه و تحلیل شیمی

3.3.1. HCA. HCA برای شناسایی AMR از مناطق مختلف تولید بر اساس خوشه های مختلف و شباهت اثر انگشت استفاده شد. منطقه پیک مشترک در 11 دسته AMR به عنوان شاخص استفاده شد و تجزیه و تحلیل خوشه ای توسط نرم افزار SIMCA14.1 انجام شد. نتایج در شکل 2 نشان داده شده است. نمونه های 11 دسته AMR به 3 دسته تقسیم شدند که فواصل کلاس بین 20 تا 30 بود که S4، S8، S9، S1 و S3 در دسته های I و S7 گروه بندی شدند. در گروه II، در حالی که S2، S5، S10، S6 و S11 در دسته III گروه بندی شدند.

3.3.2. PCA. در این مطالعه، PCA 11 دسته AMR محاسبه شد. در 16 مؤلفه اصلی، سهم تجمعی واریانس پنج مؤلفه اصلی اول 91.3 درصد بود.راماتریس امتیاز دو مؤلفه اول برای تجزیه و تحلیل استفاده می شود زیرا واریانس تجمعی از 65.9 درصد فراتر رفته است.رابنابراین، در غیاب برخی اطلاعات، یک صفحه دو بعدی از جزء اصلی بسازید که ابسیسا جزء اصلی و مختصات جزء اصلی دیگر است. سپس، 11 نمونه بر روی صفحه 2 بعدی پرتاب شدند تا تجمع طبیعی آنها مشاهده شود (شکل 3(a)). مشخص شد که S4، S8، S9، S1 و S3 دارای طبقه‌بندی واضح هستند، S7 را می‌توان به یک نوع و S2، S5، S10، S6 و S11 را به نوع دیگری تقسیم کرد.رانتیجه PCA با نتیجه HCA مطابقت داشت.

هر نقطه در نمودار بار نشان دهنده یک پیک کروماتوگرافی است که نشان دهنده سهم هر پیک کروماتوگرافی در اثر جامعاجزای اصلیراارزش وزنی متغیرها می تواندمنعکس کننده همبستگی بین ترکیب شیمیاییو نمونه به بیشترین میزان.رادورتر ازمبدأ نمودار بار، متغیر بزرگتر استوزن.رانتیجه در شکل 3 (b) نشان داده شده است که پیشنهاد می کندکه پیک های کروماتوگرافی 9، 11 (آتراتیلنولید III)،و 12 تأثیر بیشتری بر مؤلفه اصلی اول داشتند. با این حال، پیک های کروماتوگرافی 4، 5، 6، 15 و 16تأثیر بیشتری بر مؤلفه اصلی دوم داشت. آی تینشان داد که پیک های کروماتوگرافی فوق ممکن است دارای یکتاثیر بیشتر بر طبقه بندی

3.3.3. OPLS-DA.را11 نمونه به دو گروه تقسیم شدند که S1، S3، S4، S8 و S9 گروه اول و S2، S5، S6، S7، S10 و S11 گروه دوم بودند.رااطلاعات پیک مشترک همه نمونه ها به نرم افزار SIMCA14.1 برای OPLS-DA وارد شد. R2 X و R2 Y نرخ توضیحی مدل را به ماتریس‌های x و y به صورت جداگانه مشخص می‌کنند و Q2 توانایی پیش‌بینی مدل را مشخص می‌کند.رانتایج نشان داد که مقادیر R2 X، R2 Y و Q2 به ترتیب 0.939، 0.992، و 0.583 بود که همگی بیشتر از {{ 9}}.5، نشان می دهد که مدل می تواند دو گروه نمونه را متمایز کند و از برازش و توانایی پیش بینی بهتری در پردازش داده ها برخوردار است. می توان از آن برای تشخیص AMR از مناطق مختلف تولید استفاده کرد (شکل 4(a)).

رامشخصات متغیرهای مهم برای طرح ریزی (VIP) در مدل OPLS-DA می تواند سهم هر پیک کروماتوگرافی را در نمونه منعکس کند.رامقادیر VIP 16 پیک کروماتوگرافی قدرت تأثیر را بر هر نمونه AMR منعکس می کند. بر اساس اصل انتخاب که مقدار VIP بیشتر از 1 بود.0 و نوار خطا کمتر از مبدا بود (شکل 4(b))، 4 پیک کروماتوگرافی مهم انتخاب شدند که به ترتیب مرتب شدند: قله 1 > قله 6 > قله 16 > قله 5.

رانتایج تجزیه و تحلیل نمودار بار در شکل 4 (c) نشان داده شده است، که نشان می دهد موقعیت 4 قله کروماتوگرافی مهم بالا از مبدأ فاصله زیادی دارد. پیشنهاد شد که 4 پیک کروماتوگرافی طبقه‌بندی AMR را به طور قابل‌توجهی تحت تاثیر قرار می‌دهند، و این مولفه‌های نشان‌داده‌شده توسط 4 پیک کروماتوگرافی ممکن است اجزای اصلی نشانگر هر نمونه باشند.

3.4. ارزیابی فعالیت مهاری AMR بر روی TYR در شرایط آزمایشگاهی.رااثرات مهاری AMR از مناطق مختلف تولید کننده بر فعالیت TYR با روش آنزیم بیوشیمیایی تعیین شد.رااثرات نمونه‌ها بر فعالیت TYR در جدول 6 آمده است. هر نمونه با غلظت 10 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر می‌تواند فعالیت TYR را مهار کند و فعالیت دارویی به‌طور قابل‌توجهی متفاوت بود، در این میان نرخ مهار S5 بالاترین، در حالی که S6 کمترین بود.

3.5. تجزیه و تحلیل روابط طیف-اثر. در این مقاله از PLS برای تحلیل رابطه طیف-فعالیت استفاده شد.راضریب رگرسیون جزئی و مقدار VIP در شکل 5(الف) و 5(ب) نشان داده شده است، که نشان می دهد پیک های کروماتوگرافی 1، 2، 5، 6، 7، 9، 10، 11، 15 و 16 همبستگی مثبتی با مهار فعالیت TYR، اما پیک های کروماتوگرافی 3، 4، 8، 12، 13، و 14 با آنها همبستگی منفی داشتند. در میان پیک‌های کروماتوگرافی که با مهار فعالیت TYR همبستگی مثبت داشتند، مقادیر VIP پیک‌های کروماتوگرافی 11 (Atractylodes III) و 15 بیشتر از 1 بود که نشان می‌دهد این دو مولفه به طور قابل‌توجهی بر مهار فعالیت TYR تأثیر می‌گذارند.

3.6. اثر مهاری Atractylodes III بر TYR و اتصال مولکولی.رااثر مهاری Atractylodes III بر فعالیت TYR با روش آنزیم بیوشیمیایی در شرایط آزمایشگاهی با -arbutin به عنوان یک کنترل مثبت تعیین شد.رانتایج نشان داد که نرخ مهار Atractylodes III و -arbutin بر فعالیت TYR به ترتیب 63.68 ± 2.36 درصد و 94.85 ± 0.35 درصد بود که غلظت نمونه ها 1 mg/ml بود.

از اتصال مولکولی برای مطالعه مکانیسم اتصال Atractylodes III در تعامل با TYR استفاده شد (شکل 6 (a)-6 (c)).رامحل اتصال تیروزیناز قارچ از یک حفره باریک و کم عمق با دو یون مس (Cu2 پلاس) تشکیل شده است که هر کدام توسط سه باقیمانده هیستیدین (مثلا His 61) در مرکز فعال آنزیم تثبیت شده اند. در این مطالعه، Atractylodes III یک ترکیب مولکولی کوچک است که در مرکز فعال آنزیم قرار دارد و با باقیمانده های اطراف (His 244, Phe 264, Ala 286, His 263, Val 283, His259, His 85, Asn 260) برهم کنش دارد. قابل توجه است که Atractylodes III یک پیوند هیدروژنی پایدار با Asn 260 با طول پیوند 1.9 ˚ A تشکیل داد.

4. نتیجه گیری

در این مطالعه، یک روش سیستماتیک برای اتصال اثر انگشت HPLC با تجزیه و تحلیل کمومتری برای تشخیص نمونه‌های AMR از منشاء مختلف ایجاد شد و اثر سفید کنندگی AMR با روش آنزیم بیوشیمیایی ثابت شد. روابط اثر طیف نشان داد که پیک های کروماتوگرافی 1، 2، 5، 6، 9، 10، 11، 15، و 16 با اثر بازداری AMR بر فعالیت TYR همبستگی مثبت دارند، که در میان آنها پیک های 11 (atractylenolide III) و 15 ممکن است وجود داشته باشند. اجزای فعال مهم در همین حال، atractylenolide III دارای فعالیت بازدارندگی TYR بالایی در آزمایش آزمایشگاهی است و نتیجه اتصال مولکولی نشان داد که مکانیسم آن ممکن است مربوط به اتصال باقی مانده‌های اسید آمینه در کپسول کاتالیزوری TYR باشد.رابنابراین، این نتایج ثابت کرد که سنجش زیستی، اتصال مولکولی، و روابط طیف-فعالیت برای پیوند کیفیت نمونه‌ها با مواد فعال مرتبط با داروسازی مناسب هستند.

در دسترس بودن داده ها

داده های مورد استفاده برای حمایت از یافته های این مطالعه در صورت درخواست از نویسنده مسئول در دسترس است.

افشای

یونگ کین لیو و چانگ یان ژو به عنوان اولین نویسندگان در نظر گرفته می شوند.

تضاد علاقه

نویسندگان اعلام می کنند که در این مطالعه تضاد منافع ندارند.

مشارکت نویسندگان

یونگ-کین لیو و چانگ یان ژو در این کار مشارکت داشتند.

قدردانی

این مطالعه توسط برنامه آموزش نوآوری و کارآفرینی برای دانشجویان کالج در استان گوئیژو (شماره 20195200925) حمایت مالی شد.

منابع

[1] Y.-L. وانگ، G. Hu، Q. Zhang، و همکاران، "غربالگری و مشخص کردن مهارکننده های تیروزیناز از مریم گلی و Carthamus tinctorius با تجزیه و تحلیل رابطه اثر طیف و اتصال مولکولی،" مجله روش های تحلیلی در شیمی، جلد. 2018، شناسه مقاله 2141389، 10 صفحه، 2018.

[2] HX Cui، FF Duan، SS Jia، FR Cheng، و K. Yuan، "فعالیت های مهاری آنتی اکسیدانی و تیروزیناز روغن دانه از قلعه Torreya grandis. ex Lindl"، BioMed Research International, vol. 2018، شناسه مقاله 5314320، 10 صفحه، 2018.

[3] Y. Tian، Z. Zhang، N. Gao، P. Huang، و FY Wu، "یک سنجش لومینسانس بدون برچسب برای نظارت بر فعالیت تیروزیناز و غربالگری مهارکننده با نانوذرات پلیمری هماهنگ کننده لانتانید پاسخگو"، Spectrochimica Acta قسمت A: طیف سنجی مولکولی و زیست مولکولی، جلد. 228، 2020.

[4] H. Liu، B. Liu، P. Huang، Y. Wu، FY Wu، و L. Ma، "تعیین رنگ سنجی تیروزیناز بر اساس متالیزاسیون نقره در محل کاتالیز شده توسط نانوذرات طلا"، MikroChim Acta، جلد. 187، شماره 10، ص. 551، 2020.

[5] DC Franco، GS de Carvalho، PR Rocha، R. da Silva Teixeira، AD da Silva، و NR Raposo، "اثرات مهاری آنالوگ های رسوراترول بر فعالیت قارچ تیروزیناز"، Molecules (بازل، سوئیس)، جلد. 17، شماره 10، ص 11816– 11825، 2012.

[6] HH Kim، JK Kim، J. Kim، S.-H. Jung و K. Lee، "ویژگی اسیدهای کافئویل کوینیک از قسمت های thunbergianus و فعالیت مهاری ملانوژنز آنها"، ACS Omega، جلد. 5، نه 48، صفحات 30946-30955، 2020.

[7] F. Pintus, D. Span`o, A. Corona, and R. Medda, "Anti tyrosinase activity ofEuphorbia characiasextracts," PeerJ, vol. 3، ص. e1305، 2015.

[8] M. Shi، Y. Zhang، M. Song، Y. Sun، C. Li، و W. Kang، "غربالگری اجزای نشانگر در Psoralea corylifolia L. با کمک رابطه اثر طیف و ضربه مولفه- منتشر شده توسط UPLC-MS(2)،" International Journal of Molecular Sciences, vol. 19، شماره 11، 2018.

[9] G.-H. وانگ، سی.-ای. چن، T.-H. تسای و همکاران، "ارزیابی فعالیت های مهاری و آنتی اکسیدانی تیروزیناز عصاره های ریشه گلپر داهوریکا برای چهار تخمیر باکتری های پروبیوتیک مختلف"، مجله Bioscience and Bioengineering، جلد. 123، شماره 6، صفحات 679-684، 2017.

[10] YS Lin, HJ Chen, JP Huang et al., "سینتیک فعالیت مهاری تیروزیناز با استفاده از عصاره برگ وینیفرا" BioMed Research International, vol. 2017، شناسه مقاله 5232680، 5 صفحه، 2017.

[11] S. Yang، J. Zhang، Y. Yan، و همکاران، "استراتژی مبتنی بر فارماکولوژی شبکه برای بررسی مکانیسم‌های فارماکولوژیک Atractylodes macrocephala Koidz. برای درمان گاستریت مزمن،" Frontiers in Pharmacology، جلد. 10، ص. 1629، 2019.

[12] H.-R. یانگ، جی. یوان، ال.-اچ. لیو، دبلیو. ژانگ، اف. چن و سی. Dai, "Endophytic Pseudomonas fluorescent induced sesquiterpenoid accumulation by gibberellic acid and jasmonic acid in Atractylodes macrocephala Koidz plantlets," Plant Cell, Tissue and Organ Culture (PCTOC)، جلد. 138، شماره 3، صفحات 445-457، 2019.

[13] L. Hu، X. Chen، J. Yang، و L. Guo، "تأیید هویت جغرافیایی طب سنتی چینی Atractylodes macrocephala Koidz. (Baizhu) با استفاده از ایزوتوپ پایدار و تجزیه و تحلیل چند عنصری"، Rapid Communications in Mass Spectrometry، جلد . 33، شماره 22، صفحات 1703-1710، 2019.

[14] H. Li و G. Yang، "ژنوم کامل کلروپلاست Atractylodes macrocephala Koidz. (Asteraceae)،" DNA میتوکندری قسمت B، جلد. 5، نه 3، ص. 2060-2061، 2020.

[15] S. Gu، L. Li، H. Huang، B. Wang، و T. Zhang، "اثر ضد توموری، ضد ویروسی، و ضد التهابی اسانس های Atractylodes macrocephala Koidz،" تولید شده با روش های مختلف پردازش، مولکول ها ، جلد 24، شماره 16، 2019.

[16] J. Wang، L. Peng، M. Shi، C. Li، Y. Zhang، و W. Kang، "رابطه اثر طیف و حذف مولفه در ریشه گلپر داهوریکا توسط کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا-Q". طیف‌سنج جرمی ترکیبی چهار قطبی-اوربیتراپ، "Molecules, vol. 22، شماره 7, 2017.

[17] B. Zhu، Q.-L. ژانگ، J.-W. هوآ، W.-L. چنگ، و L.-P. کین، "راکاربردهای سنتی، فیتوشیمی و فارماکولوژی Atractylodes macrocephala Koidz.: مروری، مجله Ethnopharmacology، جلد 226، صفحات 143-167، 2018.

[18] Y.-Y. فنگ، اچ.-ای. جی، X.-D. دونگ، و A.-J. لیو، "یک پلی ساکارید محلول در الکل از Atractylodes macrocephala Koidz باعث آپوپتوز سلولهای Eca{6}} می شود" Carbohydrate Polymers, vol. 226، شناسه مقاله 115136، 2019.

[19] W. Li، Y. Zhang، S. Shi، و همکاران، "رابطه اثر طیفی فعالیت آنتی اکسیدانی و تیروزیناز با پیروان Malus pumila توسط UPLC-MS/MS و روش حذف اجزا"، مواد غذایی و شیمیایی سم شناسی، ج. 133، شناسه مقاله 110754، 2019.

[20] B. Xu، J. Gao، S. Zhao، Y. Li، Y. Du، و H. Pan، "رارابطه طیف اثر بین اثر انگشت HPLC و خون نیروبخش و اثر سکون حل کنندگی برگ‌های زالزالک، "کروماتوگرافی، جلد 83، شماره 3، صفحات 409-421، 2020.

[21] Y. Feng، Z. Jing، Y. Li و همکاران، "غربالگری اجزای آنافیلاکتوئید تزریق Shuang Huang Lian با تجزیه و تحلیل روابط طیف اثر همراه با UPLC-TOF-MS"، Biomedical Chromatography، جلد. 33، شماره 2، شناسه مقاله e4376، 2019.

[22] X. Jiang، L. Tao، C. Li و همکاران، "گروه بندی، رابطه طیف-اثر و ترکیبات آنتی اکسیدانی بره موم چینی از مناطق مختلف با استفاده از آنالیزهای چند متغیره و سنجش آفلاین anti-DPPH" Molecules, vol. . 25، شماره 14، 2020.

[23] Y. Zhao، X.-M. شما، اچ جیانگ، جی.-ایکس. Zou، و B. Wang، "روابط اثر طیفی بین اثر انگشت کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا و فعالیت های ضد التهابی Leontopodium leontopodioides (Willd.) Beauv، Journal of Chromatography B, vol. 1104، صفحات 11-17، 2019.

[24] X. Zhou، Y. Li، M. Zhang، و همکاران، "رابطه اثر طیفی بین اثر انگشت UPLC و اثر ضد سرطان ریه سی جون زی تانگ"، طب مکمل و جایگزین مبتنی بر شواهد، جلد. 2019، شناسه مقاله 7282681، 9 صفحه، 2019.

[25] X. Sun، Q. Zhao، Y. Si و همکاران، "مبنای ساختاری زیست فعال پروتئوگلیکان ها از Sarcandra glabra بر اساس رابطه طیف-اثر،" مجله Ethnopharmacology، جلد. 259، شناسه مقاله 112941، 2020.

[26] S. Gao، H. Chen، و X. Zhou، "مطالعه بر روی رابطه طیف اثر فعالیت بازدارنده گزانتین اکسیداز Ligustrum lucidum"، مجله علوم جداسازی، جلد. 42، شماره 21، صفحات 3281-3292، 2019.

[27] J. Tan، J. Liu، H. Wang، و همکاران، "شناسایی اجزای فعال کننده خون از قرص Xueshuan Xinmaining بر اساس رابطه طیف-اثر و تجزیه و تحلیل فارماکولوژی شبکه"، RSC Advances، جلد. 10، نه 16، صفحات 9587-9600، 2020.

[28] J. Zhang، T. Chen، K. Li و همکاران، "غربالگری مواد فعال رزماری بر اساس روابط اثر طیفی بین اثر انگشت UPLC و فعالیت شل کننده عروق با استفاده از سه شیمی سنجی"، Journal of Chromatography B, vol. 1134-1135، شناسه مقاله 121854، 2019.

[29] Y. Chen, G. Pan, W. Xu et al., "مطالعه رابطه اثر طیفی بین اثر انگشت HPLC و فعالیت آنتی اکسیدانی Sabia parviflflora" Journal of Chromatography B, vol. 1140، شناسه مقاله 121970، 2020.

[30] M. Liao، P. Yan، X. Liu، و همکاران، "رابطه اثر طیفی برای فعالیت ضد توموری شیکونین‌ها و شونوفوران‌ها در زیکائو دارویی با روش‌های UHPLC-MS/MS و شیمی‌سنجی،" مجله کروماتوگرافی B، جلد. 1136، شناسه مقاله 121924، 2020.

[31] JH Wu، YT Cao، HY Pan، و LH Wang، "شناسایی ترکیبات ضد تومور در زهر وزغ با تجزیه و تحلیل رابطه طیف-اثر و بررسی مکانیسم فارماکولوژیک آن"، Molecules, vol. 25، شماره 18، 2020.

[32] J. Tang، J. Liu، و F. Wu، "مطالعات اتصال مولکولی و ارزیابی بیولوژیکی 1،3،{3}} مشتقات تیادیازول حاوی بخش‌های پایه شیف به عنوان مهارکننده‌های تیروزیناز، شیمی ارگانیک، جلد. 69، صفحات 29-36، 2016.