نمایه های اسید آمینه سرم و مدفوع در گربه های مبتلا به بیماری مزمن کلیه

خلاصه

هدف از این مطالعه تعیین کمیت اسیدهای آمینه سرم و مدفوع (AA) در گربه های مبتلا به بیماری مزمن کلیوی (CKD) و مقایسه آنها با گربه های سالم بود. سی و پنج گربه مبتلا به CKD مرحله 1 تا 4 جامعه بین المللی علایق کلیوی و 16 گربه بالغ بالغ و بالغ سالم و متعلق به مشتری در این مطالعه مقطعی آینده نگر وارد شدند. سرم برای غلظت 25 AA با استفاده از تجزیه و تحلیل کروماتوگرافی تبادل یونی AA با مشتق سازی نین هیدرین پس از ستون مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. نمونه های مدفوع خالی شده برای غلظت 22 AA با استفاده از کروماتوگرافی مایع با طیف سنجی جرمی پشت سر هم مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. غلظت سرمی فنیل آلانین در گربه‌های CKD پایین‌تر بود (میانگین اختلاف ± خطای استاندارد میانگین: 4.3 ± 12.7 میکرومولار؛ p=0.03)، ترئونین (9.2 ± 29.6 میکرومولار؛ p{19} }.03)، تریپتوفان (18.4 ± 5.4 میکرومولار؛ p=0.005)، سرین (29.8 ± 12.6 میکرومولار؛ p=0.03)، و تیروزین (11.6 ± 3.8 میکرومولار؛ p {{ 37}}.01) و غلظت سرمی بالاتر اسید آسپارتیک (4.7 ± 2.0 میکرومولار؛ p=0.01)، -آلانین (3.4 ± 1.2 µM؛ p=0.01)، سیترولین (5.7) 1.6 ± میکرومولار؛ p=0.01) و تورین (109.9 ± 29.6 میکرومولار؛ p=0.01) در مقایسه با گربه‌های سالم. غلظت AA مدفوع بین گربه های سالم و گربه های CKD تفاوتی نداشت. 3-متیل هیستیدین به کراتینین بین گربه های سالم با و بدون از دست دادن عضله تفاوتی نداشت. گربه‌های مبتلا به CKD IRIS مراحل 1-4 در مقایسه با گربه‌های سالم، پروفایل اسید آمینه سرم مختلی دارند.

کلید واژه ها

گربه ها؛ بیماری مزمن کلیوی؛ آمینو اسید؛ تریپتوفان

اینجا را کلیک کنید تا بدانید سیستانچ چه اثراتی دارد

معرفی

از دست دادن عضلات، با یا بدون از دست دادن همزمان ذخایر چربی، در گربه های مبتلا به بیماری مزمن کلیوی (CKD) رخ می دهد و می تواند به کاهش وزن کمک کند [1،2]. کاشکسیا از دست دادن توده بدون چربی بدن در بیماری های حاد و مزمن است و در اثر استفاده از اسیدهای آمینه (AA) از ماهیچه ها به عنوان منبع انرژی اولیه ایجاد می شود [3]. کاشکسی ثانویه به CKD به بهترین وجه در افراد با برون یابی به گونه های دامپزشکی تعریف شده است. طبق مطالعات انجام شده در افراد و مدل‌های موش، کاشکسی نتیجه دریافت انرژی منفی و افزایش کاتابولیسم پروتئین ثانویه به اسیدوز متابولیک، التهاب سیستمیک و مقاومت به انسولین است [4]. علاوه بر این، CKD ممکن است در نتیجه کاهش راندمان هضم پروتئین و کاهش جذب AA در روده کوچک، باعث عدم جذب پروتئین شود [5،6]. اختلال در هضم پروتئین، فراوانی باکتری های پروتئولیتیک و تخمیر AA را به پیش سازهای سموم اورمیک افزایش می دهد [4،7،8].

اسیدهای آمینه برای سنتز پروتئین مورد نیاز است. 20 AA پروتئین زا وجود دارد که 11 مورد آن در گربه ها ضروری است. در مقایسه با AA های غیر ضروری، AA های ضروری نمی توانند توسط ارگانیسم سنتز شوند و نیاز به دریافت رژیم غذایی دارند. قبلاً گزارش شده بود که انسان‌ها، سگ‌ها و گربه‌های مبتلا به بیماری کلیوی، حتی آن‌هایی که بیماری اولیه دارند، نمایه‌ای مختل از AA در گردش دارند [9-14]. علاوه بر این، نمایه‌های AA مدفوع در افرادی که همودیالیز می‌شوند و در مدل CKD جوندگان در مقایسه با افراد سالم تغییر می‌کند [6،15]. تا به امروز، غلظت AA مدفوع و ارتباط بین غلظت AA سرم و مدفوع در گربه های مبتلا به CKD ثبت نشده است.

یک اسید آمینه می تواند تحت تغییرات پس از ترجمه، مانند فسفوریلاسیون یا متیلاسیون، قرار گیرد تا مولکول های زیست فعال نزدیک به هم را تشکیل دهد. یکی از این اسیدهای آمینه 3- متیل هیستیدین (3-MH) است که توسط ماهیچه‌های اسکلتی سنتز می‌شود، در جریان تخریب عضله در گردش خون آزاد می‌شود و بدون تغییر در ادرار دفع می‌شود [16]. یک مطالعه قبلی غلظت MH پلاسما را در گربه‌های مبتلا به CKD در مقایسه با گربه‌های کنترل سالم و همچنین در گربه‌های CKD بی‌اشتها در مقایسه با گربه‌های با اشتهای طبیعی بیشتر گزارش کرد [9]. سن با از دست دادن توده لاغر بدن در گربه ها در غیاب بیماری (به عنوان مثال، سارکوپنی) همراه است و گربه های مسن نسبت به گربه های جوان معمولاً سارکوپنی دارند [17،18]. از آنجایی که کراتینین سرم یک نشانگر جایگزین توده عضلانی اسکلتی است، نرمال کردن غلظت 3-MH به کراتینین (3-MH/Crea) به عنوان نشانگر زیستی گردش پروتئین عضلانی در افراد مسن استفاده شده است [19،20] . در دامپزشکی، رابطه بالقوه بین غلظت 3-MH در گردش و از دست دادن عضله در گربه‌ها قبلاً ارزیابی نشده بود.

ما فرض کردیم که گربه‌های مبتلا به CKD در مقایسه با گربه‌های سالم، نمایه سرم و مدفوع AA مخدوش دارند. به طور خاص، ما فرض کردیم که گربه‌های CKD غلظت سرمی AAهای ضروری را با افزایش همزمان غلظت مدفوع آن AAها کاهش می‌دهند و از سوء جذب پروتئین در روده کوچک حمایت می‌کنند. علاوه بر این، ما فرض کردیم که نسبت 3-MH/Crea به ارزیابی از دست دادن عضله در گربه‌های بالغ و مسن سالم کمک می‌کند. برای آزمایش این فرضیه ها، هدف اصلی این مطالعه تعیین کمیت غلظت AA سرم و مدفوع در گربه های مبتلا به CKD و مقایسه آنها با گروهی از گربه های سالم بود. هدف ثانویه بررسی رابطه مقطعی 3-MH/Crea با نمره وضعیت عضلانی (MCS) در گربه‌های بالغ و مسن سالم بود.

Cistanche tubulosa

مواد و روش ها

1. مطالعه طراحی و انتخاب گربه ها

در این مطالعه مقطعی آینده‌نگر، گربه‌های بالغ و مسن سالم (بیش از یا مساوی 8 سال) و گربه‌هایی که مبتلا به CKD تشخیص داده شده بودند از مشتریان بیمارستان آموزشی دامپزشکی دانشگاه ایالتی کلرادو بین سال‌های 2018 و 2020 انتخاب شدند. برای واجد شرایط بودن برای ورود گربه‌ها تحت ارزیابی کاملی قرار گرفتند که شامل تاریخچه مشتری و بررسی سوابق پزشکی گذشته، معاینه فیزیکی کامل توسط متخصص داخلی دارای گواهینامه تک هیئت مدیره، CBC، مشخصات بیوشیمی سرم، آنالیز ادرار، غلظت تیروکسین تام سرم، فشار خون توسط داپلر و نسبت پروتئین به کراتینین ادرار (اگر میزان پروتئین ادرار بزرگتر یا مساوی 1 به علاوه باشد). معاینه فیزیکی شامل 9-نمره وضعیت بدن نقطه (BCS؛ نستله پورینا، سنت لوئیس، MO، ایالات متحده) و امتیاز وضعیت عضلانی (MCS) [21،22] بود. گربه های مبتلا به CKD بر اساس دستورالعمل های انجمن بین المللی علاقه کلیوی (IRIS) مرحله بندی شدند [23]. گربه‌ها به‌عنوان IRIS CKD مرحله 1 بر اساس کراتینین سرم مرحله‌بندی شدند<1.6 mg/dL with an inadequate urinary concentrating ability (urine specific gravity (USG) ≤1.035) and either abnormal renal palpation or renal imaging findings consistent with chronic renal degenerative disease. Cats were diagnosed as IRIS CKD Stage 2–4 based on a serum creatinine >1.6 mg/dL with an inadequate urinary concentrating ability. Cats were considered healthy based on an unremarkable client history, physical examination, and normal laboratory testing including a serum creatinine ≤1.8 mg/dL and urine specific gravity (USG) >1.{3}}35. در هنگام ثبت نام، از صاحبان خواسته شد تا به طور ذهنی اشتهای گربه خود را با استفاده از یک مقیاس امتیازی 5- ارزیابی کنند (0 درصد، 25 درصد، 50 درصد، 75 درصد یا 100 درصد جیره مصرفی).

معیارهای خروج شامل عوارض CKD، مانند بیماری حاد انسدادی ادرار، عفونت دستگاه ادراری، یا بستری شدن اخیر در بیمارستان، و تشخیص بیماری سیستمیک از جمله دیابت، پرکاری تیروئید، یا بیماری شناخته شده یا مشکوک دستگاه گوارش (از جمله انتروپاتی مزمن پاسخگو به غذا) بود.

2. آنالیز اسید آمینه سرم

به صاحبان آنها دستور داده شد که حداقل 12 ساعت قبل از جمع آوری خون، غذا را از گربه خودداری کنند. خون در لوله‌های استریل بدون هپارینه جمع‌آوری شد و پس از تشکیل لخته سانتریفیوژ شد (در 30 دقیقه از جمع‌آوری نمونه) با سرعت 5000 دور در دقیقه به مدت 5 دقیقه. سرم بلافاصله برداشت و در دمای -80 ◦C به مدت 0 تا 2 هفته قبل از ارسال روی یخ خشک به آزمایشگاه گوارش تگزاس A&M برای تجزیه و تحلیل ذخیره شد. پس از ورود، نمونه ها در دمای اتاق ذوب شدند و با حجم مساوی 5 درصد (w/v) اسید سولفوسالیسیلیک با 500 میکرومولار ال-نورلوسین به عنوان استاندارد داخلی پروتئین زدایی شدند. سپس نمونه ها در دمای 4 درجه سانتیگراد به مدت 10 دقیقه قبل از سانتریفیوژ در 10، 000× گرم به مدت 5 دقیقه نگهداری شدند. مایع رویی به یک فیلتر سانتریفیوژ با اندازه منافذ 0.2 میکرومتر PVDF منتقل شد و در 10000 × گرم به مدت 5 دقیقه در دمای 4◦C سانتریفیوژ شد. سپس نمونه‌ها برای محتوای اسید آمینه با استفاده از تجزیه‌کننده اسید آمینه کروماتوگرافی تبادل یونی با مشتق‌سازی نین‌هیدرین پس از ستون مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند (Biochrom 30 plus, Biochrom Ltd., Holliston, MA, USA). 100 میکرولیتر از مایع رویی فیلتر شده به ویال های نمونه برداری خودکار منتقل شد و در دمای 4 درجه سانتیگراد به مدت حداکثر 48 ساعت قبل از تزریق خودکار 30 میکرولیتر بر روی ستون تحلیلی نگهداری شد.

غلظت سرمی 25 اسید آمینه زیر و ترکیبات مرتبط مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت: -آلانین، ال-آلانین، ال-آرژنین، ال-آسپارژین، اسید ال-اسپارتیک، ال-سیترولین، اسید ال-گلوتامیک، ال-گلوتامین، گلیسین، تورین ال-هیستیدین، هیدروکسی ال-پرولین، ال-ایزولوسین، ال-لوسین، ال-لیزین، ال-متیونین، 3-MH، ال-اورنیتین، ال-فنیل آلانین، ال-پرولین، ال-سرین، ال-ترئونین، ال-تریپتوفان، ال-تیروزین و ال-والین. R2 منحنی های استاندارد از 2.5 میکرومولار تا 75{29}} میکرومولار برای همه ترکیبات بیشتر از 0.998 بود. سطح پیک استاندارد داخلی L-norleucine در 250 میکرومولار در 2 انحراف استاندارد از میانگین برای همه نمونه‌ها و استانداردها بود. یک کالیبراتور استاندارد کار در 250 میکرومولار تهیه شد و هر 10 تزریق با تغییر بین غلظت های حاصل کمتر از 5 درصد اجرا شد. حدود پایین‌تر کمی‌سازی با استفاده از کمترین غلظت روی منحنی استاندارد محاسبه شد که نسبت مشاهده شده به انتظار بین 80 تا 120 درصد باقی ماند.

غلظت اسیدهای آمینه با استفاده از نرم افزار Biochrom BioSys V.3.{1}} که با نرم افزار مدیریت داده EZChrom Elite™ VA04.08 (Agilent Technologies Inc., Santa Clara, CA, USA) یکپارچه شده است، محاسبه شد.

عصاره سیستانچ

3. آنالیز اسید آمینه مدفوع

به مالکان دستور داده شد که یک نمونه مدفوع خالی شده از گربه خود را ظرف 12 ساعت پس از اجابت مزاج جمع آوری کنند و به طور موقت آن را در دمای 4 درجه سانتیگراد در یک ظرف در بسته نگهداری کنند تا اینکه نمونه در 24 ساعت پس از جمع آوری روی یخ به بیمارستان آورده شود. مقدار کمی مدفوع تا زمان تجزیه و تحلیل در دمای 80- درجه سانتیگراد ذخیره شد. پس از ثبت نام در مطالعه، تمام نمونه های مدفوع برای تجزیه و تحلیل توسط کروماتوگرافی مایع با طیف سنجی جرمی پشت سر هم به آزمایشگاه خارج (Metabolon Inc.، Morrisville، NC، USA) فرستاده شد. نمونه های مدفوع برای 22 AA زیر آنالیز شدند: ال-آلانین، ال-آرژنین، ال-آسپارژین، ال-اسپارتیک اسید، ال-سیترولین، ال-گلوتامیک اسید، ال-گلوتامین، گلیسین، ال-هیستیدین، هیدروکسی-L -پرولین، ال-ایزولوسین، ال-لوسین، ال-لیزین، ال-متیونین، ال-اورنیتین، ال-فنیل آلانین، ال-پرولین، ال-سرین، ال-ترئونین، ال-تریپتوفان، ال-تیروزین و ال- والین

نمونه‌های مدفوع لیوفیلیز شدند و مقدار کمی وزن شد. مقدار کمی مدفوع خشک شده سپس با یک حلال آلی استخراج شد و بخشی از مایع رویی به یک صفحه نمونه تمیز منتقل شد. مقدار کمی از مایع رویی با استانداردهای داخلی نشاندار شده پایدار (جدول S1) مشخص شد و در معرض رسوب پروتئین با یک حلال آلی قرار گرفت. مواد مرجع آنالیت (سیگما آلدریچ، سنت لوئیس، MO، ایالات متحده آمریکا) و استانداردهای داخلی با برچسب ایزوتوپی (سیگما-آلدریچ، آزمایشگاه ایزوتوپ کمبریج، ایزوتوپ های CDN) به دست آمد. پس از سانتریفیوژ، مقدار کمی از مایع رویی رقیق شد و به یک سیستم طیف سنجی جرمی کروماتوگرافی مایع- پشت سر هم با کروماتوگرافی مایع Agilent 1290/AB Sciex QTrap 5500 مجهز به یک ستون کروماتوگرافی مایع با کارایی فوق العاده بالا فاز معکوس C18 تزریق شد. طیف سنج جرمی با استفاده از یونیزاسیون الکترواسپری در حالت مثبت کار می کند.

نواحی پیک یون‌های والد آنالیت فردی در برابر نواحی پیک یون‌های اصلی استانداردهای داخلی مربوطه در حالت شبه MRM اندازه‌گیری شد. کمی سازی با استفاده از تجزیه و تحلیل رگرسیون حداقل مربعات وزنی تولید شده از استانداردهای کالیبراسیون تقویت شده تهیه شده بلافاصله قبل از هر اجرا انجام شد. داده های خام با استفاده از نرم افزار SCIEX OS-MQ v1.7 جمع آوری و پردازش شد. کاهش داده ها با استفاده از Microsoft Excel برای Office 365 v.16 انجام شد.

برای 22 آنالیت پانل اسید آمینه، یک مقدار پلاسما برای تهیه نمونه های کنترل کیفیت استفاده شد. تجزیه و تحلیل نمونه در قالب 96-چاهی شامل دو منحنی کالیبراسیون و شش نمونه کنترل کیفیت (در هر صفحه) برای نظارت بر عملکرد سنجش انجام شد. دقت با استفاده از تکرارهای کنترل کیفیت مربوطه در هر نمونه مورد ارزیابی قرار گرفت. دقت درون سنجش (درصد CV) کمتر یا مساوی 20 درصد بود. یک دسته واحد تهیه و پردازش شد. مقادیر غلظت بر اساس وزن نمونه اصلاح شد. مقادیر بر حسب میکروگرم بر گرم بیان می شوند. حد پایین تعیین مقدار (LLOQ) برای گلوتامین 2.5 میکروگرم بر گرم بود. برای ال-آلانین، ال-آرژنین، ال-لیزین، ال-پرولین، ال-تیروزین و ال-والین، LLOQ 1 بود.{14}} ug/g. برای گلیسین، LLOQ 0.75 میکروگرم بر گرم بود. برای ال-گلوتامیک اسید، ال-هیستیدین، ال-لوسین، ال-ترئونین و ال-تریپتوفان، LLOQ 5/0 میکروگرم بر گرم 0 بود. برای L-phenylalanine و L-serine، LLOQ 0.4 میکروگرم بر گرم بود. برای ال-آسپارژین، ال-اسپارتیک اسید، ال-ایزولوسین و ال-اورنیتین، LLOQ 25/0 میکروگرم در گرم 0 بود. برای ال سیترولین، LLOQ 0.2 میکروگرم بر گرم بود. برای L-متیونین، LLOQ 0.125 میکروگرم بر گرم بود. برای هیدروکسی ال-پرولین، LLOQ 0.05 میکروگرم بر گرم بود.

4. تجزیه و تحلیل آماری

برای مقایسه آماری نتایج بین مراحل CKD IRIS، گربه‌های مرحله 1 و 2 CKD و گربه‌های مرحله 3 و 4 CKD، با توجه به تعداد معدودی از گربه‌های مرحله 1 و مرحله 4 CKD که در مطالعه ثبت‌نام شده بودند، ترکیب شدند.

هیستوگرام و نمودارهای QQ اندازه گیری AA در گربه های سالم و CKD فرض نرمال بودن تقریبی را تایید کرد. بررسی جعبه‌ها نشان داد که اندازه‌گیری‌ها در گربه‌های CKD اغلب متغیرتر از گربه‌های سالم بود. بنابراین، از آزمون ولش برای مقایسه متغیرهای پیوسته بین دو گروه مستقل (یعنی گربه سالم و گربه CKD) استفاده شد. برای مقایسه متغیرها بین سه گروه مستقل (یعنی گربه‌های سالم؛ گربه‌های مرحله 1 و 2 CKD؛ و گربه‌های مرحله 3 و 4 CKD) از آزمون ANOVA ولش یک‌طرفه با آزمون مقایسه‌های چندگانه هولم-سیداک استفاده شد. علاوه بر این، ضریب همبستگی اسپیرمن (rho) برای ارزیابی همبستگی بین غلظت AA سرم و مدفوع و غلظت کراتینین سرم، بین غلظت کراتینین سرم و 3-MH، و بین غلظت سرمی و غلظت AA مدفوع محاسبه شد. روش تطبیقی ​​بنجامینی، کریگر و یکوتیلی [24] برای کنترل نرخ کشف نادرست، با مقدار q در 5 درصد استفاده شد. برای تجزیه و تحلیل آماری، هر نمونه ای که غلظت قابل اندازه گیری نداشت به عنوان 0 گزارش شد. هنگامی که در دسترس بود، قدر مطلق برای نمونه هایی با غلظت کمتر یا بالاتر از حد کمی استفاده شد. با استفاده از انحراف استاندارد گزارش شده غلظت AA پلاسما در گربه های سالم و CKD [9]، تجزیه و تحلیلی برای تعیین حداقل تفاوت برای هر AA که می تواند با حجم نمونه در مطالعه ما شناسایی شود (16 برای گربه سالم؛ 26 گربه CKD) انجام شد. ). تجزیه و تحلیل حداقل تفاوت قابل تشخیص را برای هر AA با توان 80 درصد و آلفای {{20}}.05 به دست آورد. بر اساس تجزیه و تحلیل، حداقل تفاوتی که می توان تشخیص داد اختلاف یک انحراف استاندارد است. تجزیه و تحلیل آماری با استفاده از برنامه های نرم افزاری آماری (GraphPad Prism 9.2.0؛ GraphPad Software، La Jolla، CA، و SAS 9.4؛ SAS Institute، Cary، NC، USA) انجام شد. مقدار p اصلاح شده < 0.05 معنی دار در نظر گرفته شد.

کپسول سیستانچ

بحث

در این مطالعه، غلظت AA سرم و مدفوع را برای مقایسه پروفایل‌های بین گربه‌های بالغ بالغ و مسن و گربه‌های مبتلا به CKD اندازه‌گیری کردیم. اول، ما متوجه شدیم که گربه‌های CKD پروفایل AA سرم مختلی دارند. به طور خاص، گربه های CKD در مقایسه با گربه های سالم، غلظت سرمی کمتری از سه عنصر ضروری (فنیل آلانین، ترئونین، تریپتوفان) و دو AA غیر ضروری (سرین، تیروزین) داشتند. تغییرات در پروفایل های AA سرم در گربه های مبتلا به بیماری در مراحل اولیه (مرحله IRIS 1 و 2) رخ داده است، و میزان ناهنجاری ها در گربه های مبتلا به CKD در مراحل پایانی (مرحله IRIS 3 و 4) برای چندین AA (اسپارتیک اسید، -) بیشتر بود. آلانین، سیترولین، لوسین، فنیل آلانین، سرین، تورین، تریپتوفان، والین). دوم، برخلاف فرضیه ما، تفاوت معنی‌داری در غلظت AA مدفوع بین گربه‌های سالم و گربه‌های CKD پیدا نکردیم. این نشان می دهد که عدم جذب پروتئین و از دست دادن متعاقب آن AA در مدفوع ممکن است یکی از عوامل اصلی بهم ریختگی پروفایل AA سرم در گربه های CKD نباشد. سایر علل بالقوه تغییر وضعیت AA سرم در گربه ها ممکن است شامل دریافت انرژی ناکافی و افزایش کاتابولیسم پروتئین همانطور که قبلاً ذکر شد، علاوه بر از دست دادن AA ادرار ثانویه به اختلال عملکرد لوله، کاهش متابولیسم کلیوی انتخابی AA و تغییر متابولیسم AA ثانویه به التهاب سیستمیک باشد. [25،26]. اکثر گربه های CKD در این مطالعه اشتهای کافی با توجه به نمرات اشتهای به دست آمده در ثبت نام داشتند. با این حال، این سیستم امتیازدهی ذهنی است و محاسبه کالری دریافتی روزانه بر اساس اطلاعات ارائه شده امکان پذیر نبود. بنابراین، مصرف ناکافی را نمی توان به عنوان یک عامل کمک کننده در نمایه آشفته AA در این گربه های CKD کنار گذاشت. در نهایت، متوجه شدیم که نسبت 3-MH/Crea بین بزرگسالان بالغ سالم و گربه‌های مسن با و بدون از دست دادن عضله تفاوت معنی‌داری ندارد.

یک مطالعه قبلی غلظت AA پلاسما قبل از غذا را در گربه های مبتلا به CKD ارزیابی کرد و نمایه غیرطبیعی AA پلاسما را در گربه های CKD در مقایسه با گربه های سالم نشان داد [9]. مطالعه ما چندین تفاوت مشابه در غلظت AA بین گربه های سالم و CKD نشان داد. هر دو مطالعه غلظت تریپتوفان و تیروزین به طور قابل توجهی پایین تر و غلظت بالاتر سیترولین در گربه های CKD در مقایسه با گربه های سالم نشان دادند [9]. به طور کلی، تکرارپذیری خوبی از غلظت متابولیت ها در پلاسما و سرم در افراد وجود دارد. با این حال، برخی از غلظت های AA (به عنوان مثال، آرژنین، سرین، فنیل آلانین، گلیسین) ممکن است در سرم بیشتر باشد [27]. بنابراین، هنگام مقایسه مستقیم یافته‌های مطالعه ما و مطالعه قبلی که غلظت AA در پلاسما را اندازه‌گیری می‌کرد، باید احتیاط کرد.

برای برخی از AA ها، غلظت سرمی در گربه های CKD بیشتر از گربه های سالم بود، از جمله تورین ضروری AA و اسید آسپارتیک، سیترولین و آلانین غیر ضروری AA. غلظت گردشی تورین و سیترولین در گربه ها و افراد مبتلا به اختلال عملکرد کلیه بیشتر است [9،28]. برای سیترولین، این یافته به کاهش تبدیل سیترولین به آرژنین توسط کلیه نسبت داده می شود [29]. تورین یک آمینو اسید ضروری در گربه ها است، برخلاف افراد و سگ ها، و بنابراین گربه ها نیاز به دریافت رژیم غذایی دارند. غلظت بالای تورین سرم در گربه های CKD ممکن است نتیجه کاهش دفع کلیوی باشد [30]. دلیل غلظت‌های بالاتر -آلانین و اسید آسپارتیک در گردش خون در گربه‌های CKD ناشناخته است. با این حال، این با الگوی نمایه AA در گردش (یعنی AAهای غیرضروری بالا و کم ضروری) که در افراد مبتلا به بیماری کلیوی ثبت شده است مطابقت دارد [28،31].

غلظت لوسین، فنیل آلانین، لیزین، هیستیدین، متیونین، تیروزین و تریپتوفان در مدفوع در افراد مبتلا به بیماری کلیوی مرحله پایانی (ESRD) که تحت همودیالیز قرار می گیرند در مقایسه با افراد سالم به طور چشمگیری افزایش یافت [15]. این AA های هضم نشده در کولون بیماران ESRD ممکن است به نفع باکتری های پروتئولیتیک باشند که سموم اصلی اورمیک مشتق شده از روده، ایندوکسیل سولفات (IS) و p-cresol sulfate (PCS) را تولید می کنند [32]. مردم، گربه‌ها و سگ‌ها IS را انباشته می‌کنند، در حالی که برخی از گونه‌ها pCS را در گردش خون سیستمیک انباشته می‌کنند، و تجمع این سموم اورمیک در درجه اول نتیجه کاهش دفع لوله‌ای است [33-35]. با این حال، برخی معتقدند که عدم جذب پروتئین و افزایش AAs در روده بزرگ نیز ممکن است با حمایت از باکتری‌های پروتئولیتیک در روده بزرگ به غلظت‌های در گردش کمک کند [6،32]. برخلاف فرضیه ما، مطالعه ما تفاوت معنی‌داری در غلظت AA مدفوع بین CKD و گربه‌های سالم نشان نداد. این موضوع سهم AA های هضم نشده را در تجمع IS و pCS در حال گردش در گربه های CKD زیر سوال می برد. عدم تفاوت در غلظت AA مدفوع ممکن است به دلیل جمعیت بیماران ما باشد. بیشتر گربه‌های مطالعه ما از نظر بالینی پایدار بودند، و گروه مطالعه ما تعداد بسیار کمی از گربه‌های مرحله 4 بیماری مزمن کلیه (n=4) داشت تا مقایسه معناداری انجام دهد. تفاوت های شدیدتر در نمایه AA مدفوع ممکن است در گربه های مبتلا به CKD در مرحله پایانی بهتر قابل درک باشد.

ما غلظت سرمی 3-MH را در گربه‌های سالم و گربه‌های CKD اندازه‌گیری کردیم. همانطور که انتظار می‌رفت، متوجه شدیم که گربه‌های CKD غلظت سرمی 3-MH بالاتری نسبت به گربه‌های کنترل سالم داشتند، و غلظت سرمی 3-MH با غلظت کراتینین سرم همبستگی مثبت داشت. این مشابه یافته‌های مطالعات قبلی روی گربه‌ها، سگ‌ها و افراد است که نشان می‌دهد 3-غلظت MH در پلاسما یا سرم بیماران مبتلا به CKD بیشتر از افراد سالم است [9،11،28]. این یافته به کاهش دفع کلیوی 3-MH در بیماران مبتلا به CKD نسبت داده می شود. به همین دلیل، نسبت 3-MH/Crea را در گربه‌های CKD با از دست دادن عضله انجام ندادیم زیرا کراتینین یک عامل مخدوش‌کننده است. برای بررسی اینکه آیا می‌توان از نسبت‌های 3-MH/Crea به‌عنوان نشانگر تخریب ماهیچه‌های اسکلتی در گربه‌های بالغ و مسن سالم استفاده کرد، 3-نسبت MH/Crea بین گربه‌هایی با و گربه‌هایی که از دست دادن عضله نداشتند مقایسه شد. یک MCS بدست آمده توسط یک دامپزشک برای ارزیابی توده عضلانی در این گروه از گربه ها استفاده شد. تخمین MCS برای افراد آموزش دیده برای انجام در یک محیط کلینیک آسان و غیر تهاجمی است و مشخص شد که تکرارپذیری قابل توجهی و تکرارپذیری متوسطی بین ناظران دارد [36]. گربه‌های سالم با از دست دادن عضلانی خفیف تا متوسط ​​به طور ذهنی دارای میانگین نسبت 3-MH/Crea بالاتری نسبت به گربه‌های بدون از دست دادن عضله بودند، اما این یافته از نظر آماری معنی‌دار نبود، که به اندازه نمونه کوچک و دریافت پروتئین بالقوه متغیر در این نسبت داده شد. گروه مطالعه [20،37]. استفاده از 3-MH به‌عنوان نشانگر زیستی تخریب ماهیچه‌های اسکلتی در گربه‌ها نیازمند بررسی بیشتر است.

برای مبارزه با کاشکسی در افراد مبتلا به CKD، پزشکان افزایش فعالیت بدنی، درمان اسیدوز متابولیک و حذف عوامل التهابی قابل اصلاح (به عنوان مثال، بیماری روده) را برای به حداقل رساندن کاتابولیسم پروتئین توصیه می کنند. علاوه بر این، بهینه سازی تغذیه درمانی مهم است. مانند افراد، کاهش مصرف پروتئین با استفاده از یک منبع پروتئینی بسیار قابل هضم و حفظ کالری کافی، پایه اصلی درمان گربه های مبتلا به CKD است [38،39]. مطالعه قبلی روی گربه‌های مبتلا به CKD مرحله 1 و 2 IRIS نشان داد که افزایش مصرف ترئونین AA ضروری با استفاده از یک رژیم غذایی درمانی کلیوی محدود با پروتئین (6.7 گرم در 100 کیلو کالری) به مدت 6 ماه، توده بدون چربی بدن را حفظ کرد (رژیم غذایی نسخه‌ای هیل k/d گربه با مرغ، Hill's Pet Nutrition، Topeka، KS، ایالات متحده آمریکا) [40]. پروفایل اسید آمینه قبل و بعد از انتقال رژیم غذایی در این گربه ها ارزیابی نشد. ما دریافتیم که ترئونین در سرم گربه‌های مبتلا به CKD در مقایسه با گربه‌های کنترل سالم کم است، که بیشتر از مزایای بالقوه مکمل این AA در گربه‌های CKD حمایت می‌کند. در افراد تحت همودیالیز، یک ماده غذایی خوراکی که برای تامین کالری از درشت مغذی ها، از جمله پروتئین به شکل AA و پپتید استفاده می شود، بیشتر غلظت AA را در سرم بهبود می بخشد [41]. بر اساس این مطالعات، رژیم‌های درمانی کلیوی غنی‌شده با AA ضروری ممکن است در گربه‌های بیماری مزمن کلیه به امید حفظ توده بدون چربی بدن و به طور بالقوه بهبود غلظت سرمی AA مفید باشد. با این حال، دومی باقی مانده است که روشن شود.

پودر سیستانچ

این مطالعه دارای محدودیت هایی است. در مورد جمعیت گربه ها، گروه کنترل به دلیل عدم امکان یافتن گربه های مسن سالم از نظر سنی با گروه CKD مطابقت نداشت.<14 years of age in the referral hospital population. As a result, the healthy control cats were significantly younger than the CKD cats, which may have affected our conclusions. In people, serum AA profiles differ between the young and elderly, and therefore, the deranged serum AA profile in CKD cats in comparison to the healthy controls may be explained in part by age [42,43]. Second, our results reflect only a single time-point and are not representative of dynamic changes that may occur in circulating or fecal AA concentrations. Third, deproteinization of serum was not performed until after freezing and just before analysis within 2 weeks of collection. Deproteinization prevents losing AA by co-precipitation with other serum proteins, therefore this may have impacted our results, especially for sulfur-containing AAs (methionine, taurine) [44]. However, all samples were handled similarly, so any effect should have been standardized across all samples. Lastly, all healthy cats and the majority of CKD cats (21/26) were fasted before blood collection. In cats, there is a mild postprandial rise in plasma AA concentrations, and the magnitude of the postprandial rise varies based on the AA concentration of the diet and feeding regimen [45–47]. Therefore, the fed state of these five CKD could have affected results to an unknown degree.

نتیجه گیری

گربه‌های مبتلا به CKD مراحل 1-4 IRIS در مقایسه با گربه‌های بالغ بالغ و مسن، غلظت سرمی پایین‌تری از برخی از AA ضروری دارند، و بنابراین پروفایل‌های AA مختلط سرم در گربه‌های CKD ممکن است به عنوان یک هدف درمانی برای مدیریت رژیم غذایی باشد. غلظت AA مدفوع بین CKD و گربه‌های سالم تفاوت معنی‌داری نداشت، بنابراین دفع مدفوع AA بعید است که سهم عمده‌ای در پروفایل‌های AA سرم مختل مستند شده در گربه‌های CKD داشته باشد. غلظت سرمی 3-MH در گربه های CKD بیشتر از گروه کنترل سالم است و این یافته به کاهش دفع کلیوی نسبت داده می شود. نسبت 3-MH/Crea در گربه‌های سالم با از دست دادن عضله در مقایسه با گربه‌های با توده عضلانی طبیعی به‌طور معنی‌داری بالاتر نبود. با این حال، با توجه به حجم نمونه کوچک، ارزیابی بیشتر ضروری است.

منابع

1. سامرز، اس. کویمبی، جی.ام. فیلیپس، RK; استاکمن، جی. اشعیا، ا. لیدبری، جی. اشتاینر، جی.ام. Suchodolski، J. ارزیابی اولیه غلظت اسیدهای چرب مدفوع در گربه های مبتلا به بیماری مزمن کلیوی و ارتباط با سولفات ایندوکسیل و سولفات p-cresol. J. Vet. کارآموز پزشکی 2020، 34، 206–215. [CrossRef]

2. فریمن، ال.ام. لاشو، نماینده مجلس؛ متیوز، اس. رودز، ال. Zollers، B. ارزیابی کاهش وزن در طول زمان در گربه‌های مبتلا به بیماری مزمن کلیوی. J. Vet. کارآموز پزشکی 2016، 30، 1661-1666. [CrossRef]

3. Freeman، LM Cachexia و sarcopenia: سندرم های نوظهور مهم در سگ ها و گربه ها. J. Vet. کارآموز پزشکی 2012، 26، 3-17. [CrossRef]

4. ژا، ی. کیان، کیو. تغذیه پروتئین و سوء تغذیه در CKD و ESRD. مواد مغذی 2017، 9، 208. [CrossRef]

5. بامنس، بی. وربکه، ک. Vanrenterghem، Y.; Evepoel، P. شواهدی برای اختلال در جذب پروتئین در نارسایی مزمن کلیه. کلیه بین المللی 2003، 64، 2196-2203. [CrossRef]

6. لیو، ی. لی، جی. یو، جی. وانگ، ی. لو، جی. شانگ، EX; زو، ز. گوا، جی. Duan, J. اختلال متابولیسم اسیدهای آمینه روده در طول پیشرفت CKD با دیس بیوز میکروبیوتای روده و تغییر متاژنوم مرتبط است. جی فارم. بیومد. مقعدی 2018، 149، 425-435. [CrossRef]

7. گریپ، ت. Huys، GRB; جوسنز، ام. ون بیسن، دبلیو. گلوریو، جی. Vaneechoutte, M. جداسازی و کمی سازی باکتری های روده تولید کننده پیش ساز توکسین اورمیک در بیماران مبتلا به بیماری مزمن کلیوی. بین المللی جی. مول. علمی 2020، 21، 1986. [CrossRef]

8. Graboski، AL; Redinbo، سموم اورمیک متصل به پروتئین مشتق از روده MR. Toxins 2020, 12, 590. [CrossRef]

9. گلدشتاین، RE; Marks, SL; Cowgill، LD; کاس، پی اچ. راجرز، پروفایل اسید آمینه QR پلاسما در گربه‌هایی که به طور طبیعی نارسایی مزمن کلیوی دارند. صبح. J. Vet. Res. 1999، 60، 109-113.

10. پارکر، وی جی; Fascetti، AJ; وضعیت اسید آمینه کلامر، BG در سگ های مبتلا به نفروپاتی از دست دادن پروتئین. J. Vet. کارآموز پزشکی 2019، 33، 680–685. [CrossRef]

11. هانسن، بی. دیبارتولا، اس پی; جویدن، دی جی; براونر، سی. پروفایل های آمینو اسید بری، HK در سگ های مبتلا به نارسایی مزمن کلیه که با دو رژیم غذایی تغذیه شدند. صبح. J. Vet. Res. 1992، 53، 335-341.

12. کومار، م. بیتلا، آر. راجو، KV; Monohar, SM; کومار، VS; Narasimha، S. نمایه آمینو اسید شاخه دار در بیماری مزمن کلیوی اولیه. عربستان ج. کلیه دیس. Transpl. 2012، 23، 1202-1207.

13. زنگ، ل. یو، ی. کای، ایکس. زی، اس. چن، جی. ژونگ، ال. Zhang، Y. تفاوت در فنوتیپ اسید آمینه سرم در میان بیماران مبتلا به نفروپاتی دیابتی، نفروپاتی فشار خون بالا، و نفریت مزمن. پزشکی علمی نظارت کنید. 2019، 25، 7235–7242. [CrossRef]

14. Laidlaw, SA; برگ، RL; Kopple، JD; نایتو، اچ. واکر، WG; والسر، ام. الگوهای سطوح اسید آمینه پلاسما ناشتا در نارسایی مزمن کلیوی: نتایج از مرحله امکان سنجی اصلاح رژیم غذایی در مطالعه بیماری کلیوی. صبح. جی. کلیه دیس. 1994، 23، 504-513. [CrossRef]

15. لیو، اس. لیانگ، اس. لیو، اچ. چن، ال. سان، ال. وی، ام. جیانگ، اچ. Wang, J. پروفایل متابولیت مدفوع و سرم در بیماران همودیالیزی و تأثیر قرص های زغالی دارویی. پرس خون کلیه. Res. 2018، 43، 755-767. [CrossRef]

16. کچلیک، بی. گربراخت، سی. گرون، تی. وبر، دی. تأثیر عادات غذایی و مصرف گوشت بر 3-متیل هیستیدین پلاسما - یک نشانگر بالقوه برای گردش پروتئین ماهیچه. مول. Nutr. مواد غذایی Res. 2018, 62, e1701062. [CrossRef]

17. هال، ج.ا. جکسون، MI; فارس، جی. یرامیلی، م. Jewell، DE تأثیر مواد غذایی بر درصد لاغر بدن، غلظت سم اورمیک و عملکرد کلیه در گربه‌های مسن و بالغ. متابولیت‌ها 2019، 9، 238. [CrossRef]

18. هال، JA; یرامیلی، م. اوبار، ای. یرامیلی، م. Jewell, DE مقایسه غلظت سرمی دی متیل آرژینین و کراتینین متقارن به عنوان بیومارکرهای عملکرد کلیه در گربه‌های سالمند سالم تغذیه شده با غذاهای پروتئینی کاهش‌یافته غنی‌شده با روغن ماهی، ال-کارنیتین و تری گلیسیریدهای زنجیره متوسط. دامپزشک J. 2014, 202, 588-596. [CrossRef]

19. پاتل، اس.اس. مولنار، MZ; تایک، ج.ا. Ix، JH; نوری، ن. بنر، دی. هیمسفیلد، اس. Kopple، JD; Kovesdy، CP; کلانتر زاده، ک. کراتینین سرم به عنوان نشانگر توده عضلانی در بیماری مزمن کلیوی: نتایج یک مطالعه مقطعی و مرور ادبیات. J. Cachexia Sarcopenia Muscle 2013، 4، 19-29. [CrossRef]

20. کوچلیک، بی. استوتز، دبلیو. پرز، ک. ترس، سی. تگنر، جی. رودریگز-ماناس، ال. گرون، تی. وبر، دی. ارتباط متیل هیستیدین پلاسما با وضعیت شکنندگی در گروه های فرانسوی ابتکار FRAILOMIC. جی. کلین. پزشکی 2019، 8، 1010. [CrossRef]

21. پیترسون، من; کاستلانو، کالیفرنیا؛ Rishniw، M. ارزیابی وزن بدن، وضعیت بدن، و وضعیت عضلانی در گربه‌های مبتلا به پرکاری تیروئید. J. Vet. کارآموز پزشکی 2016، 30، 1780-1789. [CrossRef]

22. امتیاز وضعیت عضلانی - گربه. در دسترس آنلاین: https://wsava.org/global-guidelines/global-nutrition-guidelines/ (در 18 ژانویه 2022 قابل دسترسی است).

23. IRIS مرحله بندی CKD. در دسترس آنلاین: http://www.iris-kidney.com/guidelines/staging.html (در 18 ژانویه 2022 قابل دسترسی است).

24. بنیامینی، ی. کریگر، AM; یکوتیلی، دی. رویه‌های افزایش خطی تطبیقی ​​که نرخ کشف نادرست را کنترل می‌کنند. Biometrika 2006، 93، 491-507. [CrossRef]

25. van de Poll، MCG; Soeters، PB; Deutz، NEP; Fearon، KCH; دجونگ، CHC متابولیسم کلیوی اسیدهای آمینه: نقش آن در تبادل اسیدهای آمینه بین اندامی. صبح. جی. کلین. Nutr. 2004، 79، 185-197. [CrossRef]

26. سلیمان، من; قریشی، ع. استنوینکل، پی. Pecoits-Filho، R.; بارانی، پ. هایمبرگر، او. اندرستم، بی. آیالا، ER; فیلهو، JCD; آلوستراند، ا. و همکاران التهاب باعث کاهش غلظت اسید آمینه پلاسما در بیماران مبتلا به بیماری مزمن کلیوی می شود. صبح. جی. کلین. Nutr. 2005، 82، 342-349. [CrossRef]

27. یو، ز. کاستنمولر، جی. سلام.؛ بلکردی، پ. مولر، جی. پرهن، سی. مندز، جی. وال، اس. رومیش-مارگل، دبلیو. Ceglarek، U. و همکاران تفاوت بین پروفایل های متابولیت پلاسمایی و سرم انسان PLoS ONE 2011, 6, e21230. [CrossRef]

28. Ceballos، I. شوو، پ. گورین، وی. باردت، جی. پاروی، پ. کمون، پ. Jungers, P. تغییرات اولیه اسیدهای آمینه آزاد پلاسما در نارسایی مزمن کلیه. کلین چیم. Acta 1990, 188, 101-108. [CrossRef]

29. بوبی، ن. هاسلر، سی. پاروی، پ. Bankir, L. سنتز کلیه آرژنین در نارسایی مزمن کلیه: مطالعات in vivo و in vitro در موش‌های با نفرکتومی 5/6. کلیه بین المللی 1993، 44، 676-683. [CrossRef]

30. سلیمان، من; بارانی، پی. فیلو، جی سی. لیندهولم، بی. برگستروم، ج. تجمع تورین در بیماران مبتلا به نارسایی کلیه. نفرول. شماره گیری کنید. Transpl. 2002، 17، 528-529. [CrossRef]

31. برگستروم، ج. آلوستراند، ا. Fürst، P. آمینو اسیدهای آزاد پلاسما و عضله در بیماران همودیالیز نگهدارنده بدون سوء تغذیه پروتئینی. کلیه بین المللی 1990، 38، 108-114. [CrossRef]

32. وانگ، ج. Piceno، YM; DeSantis، TZ; پهل، م. اندرسن، جی ال. وزیری، ND گسترش اوره آز و اوریکاز، تشکیل ایندول و پی کرزول و انقباض میکروبیوتای روده تولید کننده اسیدهای چرب زنجیره کوتاه در ESRD. صبح. جی. نفرول. 2014، 39، 230-237. [CrossRef]

33. سامرز، SC; کویمبی، جی.ام. اشعیا، ا. سوچودولسکی، جی اس. Lunghofer، PJ; گوستافسون، DL میکروبیوم مدفوع و غلظت سرمی ایندوکسیل سولفات و سولفات p-cresol در گربه‌های مبتلا به بیماری مزمن کلیوی. J. Vet. کارآموز پزشکی 2018، 33، 662-669. [CrossRef]

34. چنگ، FP; حسیه، ام جی; Chou, CC; Hsu، WL; Lee, YJ تشخیص سطوح ایندوکسیل سولفات در سگ‌ها و گربه‌هایی که از بیماری‌های کلیوی طبیعی رنج می‌برند. دامپزشک J. 2015, 205, 399-403. [CrossRef]

35. Lin, CN; وو، آی دبلیو. هوانگ، YF; پنگ، سی. هوانگ، YC; Ning، HC اندازه گیری سرم کل و آزاد ایندوکسیل سولفات و p-cresyl سولفات در بیماری مزمن کلیوی با استفاده از UPLC-MS/MS. J. مواد غذایی مقعدی. 2018، 27، 502–509. [CrossRef]

36. فریمن، ال.ام. میشل، KE; زنگی، ب.م. بولر، BMV; Fages, J. سودمندی نمره وضعیت عضلانی و اندازه‌گیری‌های سونوگرافی برای ارزیابی توده عضلانی در گربه‌های مبتلا به کاشکسی و سارکوپنی. صبح. J. Vet. Res. 2020، 81، 254-259. [CrossRef]

37. Rebholz، CM; ژنگ، ز. گرم، ME; Appel، LJ; سرناک، ام جی; اینکر، لس آنجلس؛ لیوی، ع. Coresh, J. متابولیت‌های سرمی مرتبط با مصرف پروتئین در رژیم غذایی: نتایج حاصل از کارآزمایی بالینی تصادفی‌سازی شده اصلاح رژیم غذایی در بیماری کلیوی (MDRD). صبح. جی. کلین. Nutr. 2019، 109، 517–525. [CrossRef]

38. اسپارکس، ق. کانی، اس. چلهوب، س. الیوت، جی. فینچ، ن. Gajanayake، I. لنگستون، سی. Lefebvre, HP; وایت، جی. دستورالعمل های اجماع Quimby، J. ISFM در مورد تشخیص و مدیریت بیماری مزمن کلیه گربه ها. J. Feline Med. سرگ 2016، 18، 219-239. [CrossRef]

39. رژیم غذایی برای گربه های مبتلا به بیماری مزمن کلیه. در دسترس آنلاین: http://www.iris-kidney.com/education/protein_restriction_ feline_ckd.html#:~{}:text= بر اساس درصد 20 درصد 20 درصد شواهد 20 درصد از درصد 20 بالینی، درصد دارویی 20 تا درصد 20 درصد مدیریت 20 درصد پزشکی 20 شرایط (در 18 ژانویه 2022 قابل دسترسی است).

40. هال، JA; فریچ، دی. Jewell، DE; بوریس، PA; گربه‌های ناخالص، KL مبتلا به بیماری مزمن کلیوی مرحله 1 و 2 IRIS وزن بدن و توده عضلانی بدون چربی را در هنگام تغذیه با غذا با افزایش تراکم کالری و افزایش غلظت کارنیتین و اسیدهای آمینه ضروری حفظ می‌کنند. دامپزشک ضبط 2019، 184، 190. [CrossRef]

41. Małgorzewicz، S. گالو زووسکا، جی. Cieszy ´ska-Semenowicz, M.; راتاجیک، جی. ولسکا، ال. روتکوفسکی، پ. یانکووسکا، م. روتکوفسکی، بی. Debska-Slizien، A. پروفایل اسید آمینه پس از مکمل های غذایی خوراکی در بیماران همودیالیزی با اتلاف پروتئین-انرژی. تغذیه 2019، 57، 231-236. [CrossRef]

42. تیمرمن، کی ال. Volpi، E. متابولیسم اسید آمینه و اثرات تنظیمی در پیری. Curr. نظر. کلین Nutr. متاب. مراقبت 2008، 11، 45-49. [CrossRef]

43. سرور، ج. بوتینگ، HG; کالینز، ام. مقایسه پروفایل اسیدهای آمینه سرم ناشتا افراد جوان و مسن. مربا. Coll. Nutr. 1991، 10، 668-674. [CrossRef]

44. فیپس، WS; جونز، PM؛ پاتل، ک. تجزیه و تحلیل اسیدهای آمینه و آلی: ابزارهای ضروری در تشخیص خطاهای ذاتی متابولیسم. Adv. کلین شیمی. 2019، 92، 59-103.

45. کامارا، ع. وربروگه، ا. بار-فروم، سی. هوگان، ک. DeVries، TJ; سانچز، آ. رابینسون، LE; شوولر، AK فرکانس تغذیه در طول روز بر هورمون‌های تنظیم‌کننده اشتها، اسیدهای آمینه، فعالیت بدنی و ضریب تنفسی تأثیر می‌گذارد، اما نه بر مصرف انرژی، در گربه‌های بالغی که به مدت 21 روز با رژیم تغذیه می‌شوند. PLoS ONE 2020, 15, e0238522. [CrossRef]

46. ​​Pion، PD; لوئیس، جی. گرین، ک. راجرز، QR؛ موریس، جی جی. Kittleson، MD اثر تغذیه با وعده غذایی و محرومیت از غذا بر غلظت تورین پلاسما و کل خون در گربه ها. جی. نوتر. 1991، 121، S177–S178. [CrossRef]

47. هاینز، CR; لارسن، جی. کاس، پی اچ. غلظت آمینو اسید Fascetti، AJ پلاسما و غلظت تورین در خون در گربه‌هایی که از رژیم‌های غذایی آماده تجاری استفاده می‌کنند. صبح. J. Vet. Res. 2009، 70، 1374-1382. [CrossRef]

استیسی سی سامرز 1، جسیکا کویمبی 2، آماندا بلیک 3، دبورا کیز 4، جورگ ام. اشتاینر 3 و یان سوکودولسکی 3

1 کالج دامپزشکی کارلسون، دانشگاه ایالتی اورگان، کوروالیس، OR 97331، ایالات متحده آمریکا

2 گروه علوم بالینی دامپزشکی، دانشگاه ایالتی اوهایو، کلمبوس، OH 43210، ایالات متحده آمریکا. quimby.19@osu.edu

3 آزمایشگاه گوارش تگزاس A&M، گروه علوم بالینی حیوانات کوچک، ایستگاه کالج، TX 77843، ایالات متحده; ablake@cvm.tamu.edu (AB); jsteiner@cvm.tamu.edu (JMS); jsuchodolski@cvm.tamu.edu (JS)

4 آمار کالیدوسکوپ، مشاوره تحقیقات پزشکی دامپزشکی، آتن، GA 30606، ایالات متحده; deborah.a.keys@kaleidoscopestatistics.com