عصاره متانولی اسفناج انحطاط شبکیه را در موش های دیابتی کاهش می دهد قسمت 2

لطفا تماس بگیریدoscar.xiao@wecistanche.comبرای اطلاعات بیشتر

3. نتایج

3.1. عصاره متانولی اسفناج (SME) گلیکاسیون آلبومین سرم گاوی (BSA) را در شرایط آزمایشگاهی مهار می کند 3.1.1. تأثیر SME بر تشکیل محصولات نهایی گلیکاسیون پیشرفته (AGEs) و فروکتوزامین

اثر ضد گلیکاسیون در غلظت‌های مختلف SME بر BSA تعیین شد. این اثر با مهار تشکیل AGEs و فروکتوزامین در مخلوط‌ها ارزیابی شد: قندهای کاهنده BSA (گلوکز یا فروکتوز) و BSA-methylglyoxal (BSA-MGO) پس از چهار هفته انکوباسیون. جدول 1 نتایج تشکیل AGEs را نشان می دهد که توسط فلورسانس ارزیابی شده است.رشد آلت تناسلی سیستانچیدر قندهای کاهنده BSA و مخلوط‌های BSA-MGO که با SME در 200 میلی‌گرم در میلی‌لیتر (SME{3}}) انکوبه شده بودند، سطح AGEs در مقایسه با گروه کنترل مثبت (BSA-گلوکز، BSA- فروکتوز و BSA- کاهش یافت. MGO) (ص<0.05). concentrations="" below="" 20mg/ml="" did="" not="" show="" significant="" differences="" compared="" to="" positive="" controls.="" the="" inhibition="" of="" ages="" formation="" by="" aminoguanidine(ag)="" in="" bsa-reducing="" sugars="" and="" bsa-mgo="" was="" higher="" than="" sme-200=""><0.05) and,="" therefore,="" than="" the="" positive="" controls=""><0.01). both="" sme-200="" and="" ag="" decreased="" fructosamine="" concentrations="" compared="" with="" controls=""><0.05).sme-200 compared="" to="" agin="" incubation="" with="" bsa-mgo="" further="" reduced="" the="" level="" of="" fructosamine=""><0.05)(table>

3.1.2. تأثیر SME بر سطوح گروه های کربونیل و تیول کاهش یافته

برای تعیین اینکه آیا SME اکسیداسیون BSA مربوط به تشکیل گروه‌های کربونیل و کاهش گروه‌های تیول را در طی گلیکوزیشن آن مهار می‌کند، سنجش‌های آزمایشگاهی انجام شد. جدول 1 سطوح گروه های کربونیل را در شرایط جوجه کشی با استفاده از مخلوط قندهای کاهنده BSA و BSA-MGO نشان می دهد. در این مخلوط ها، یک رابطه معکوس بین غلظت SME و سطح گروه های کربونیل وجود دارد. به طور خاص، SME{3}} کاهش قابل توجهی را در مقایسه با گروه کنترل مثبت ایجاد کرد (ص<0.05). as="" expected,="" ag="" significantly="" inhibited="" the="" formation="" of="" carbonyl="" groups="" in="" the="" bsa-reducing="" sugars="" and="" bsa-mgo="" (p=""><0.01), demonstrating="" its="" inhibitory="" effect="" on="" protein="" carbonylation,="" as="" reported="" [39].="" between="" sme="" and="" ag,="" there="" was="" no="" difference="" in="" carbonylation="">

لطفا برای دانستن بیشتر اینجا کلیک کنید

تعیین سطح گروه تیول در BSA در طول سنجش گلیکوزیله انجام شد. غلظت SME تمایل به حفظ گروه های تیول در همه مخلوط ها را نشان داد. در SME{0}}، افزایش قابل توجهی در سطح گروه های تیول در قندهای کاهنده BSA مشاهده شد (p<0.05) and="" the="" bsa-mgo=""><0.01) compared="" to="" positive="" controls.="" ag="" induced="" the="" highest="" conservation="" of="" thiol="" groups="" in="" bsa-reducing="" sugars="" and=""><0.05). however,="" in="" the="" incubation="" of="" sme-200="" with="" bsa-mgo,="" thiol="" group="" levels="" are="" higher="" compared="" to="" ag="" (p=""><0.05) (table="">

غلظت‌های 5، 10 و 25 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر از SME که در آزمایش قبلی مورد مطالعه قرار گرفت، سطوح قابل‌توجهی را برای مهار AGEs، فروکتوزامین، تشکیل گروه کربونیل و کاهش گروه‌های تیول BSA نشان نداد (داده‌ها نشان داده نشده است).

در مکمل 2، ترکیبات کربونیل و AGEs احتمالی تولید شده در طی انکوباسیون BSA با قند احیا کننده نشان داده شده است. مولکول های حاصل از تبدیل گروه تیول کاهش یافته (cys34) BSA تولید شده توسط MGO یا انکوباسیون گلیوکسال نیز نشان داده شده است [{3}}].

3.2. مطالعات SME در شبکیه موش های دیابتی ناشی از STZ (STZ)

3.2.1. تأثیر SME بر تشکیل کربوکسی متیل لیزین (CML) و برهمکنش آن با گیرنده AGEs (RAGE) در STZ

شکل 1 اثرات SME را در 400 میلی گرم بر کیلوگرم بر تشکیل CML، بیان RAGE و برهمکنش CML-RAGE (CML/RAGE) بر روی شبکیه STZ نشان می دهد. در شکل 1A، مشاهده می شود که CML و RAGE هر دو در لایه سلول گانگلیونی (GCL)، لایه سلول داخلی (INL) و لایه هسته خارجی (ONL) توزیع شده اند، در حالی که CML/RAGE ادغام شده عمدتا در INL توزیع شده است.فواید سالسا سیستانچشکل 1B-D چگالی نوری یکپارچه (OD) را برای CML، RAGE، و CML/RAGE در لایه‌های مختلف شبکیه نشان می‌دهد (به صورت نمودار جعبه و سبیل حداقل تا حداکثر ارائه شده است). داده ها (میانگین ± انحراف معیار) در پیوست A (جدول A1) گنجانده شده است.

شکل 1. اثر عصاره متانولی اسفناج (SME) بر کربوکسی متیل لیزین (CML)، گیرنده محصولات نهایی گلیکاسیون پیشرفته (RAGE) و برهمکنش CML-RAGE (CML/RAGE) در شبکیه موش‌های دیابتی ناشی از استرپتوزوتوسین. STZ). (الف) توزیع رنگ‌آمیزی‌های CML، RAGE و CML/RAGE در شبکیه موش‌های با قند خون طبیعی (NG)، STZ، تیمار شده با آمینوگوانیدین (STZ-AG) و درمان شده با SME (STZ-SME) نشان داده شده است. (BD) چگالی نوری یکپارچه (IOD، lum/pixel²) را در نمودار جعبه و سبیل در لایه سلول گانگلیونی (GCL)، لایه هسته داخلی (INL) و لایه هسته خارجی (ONL) برای هر رنگ‌آمیزی ایمنی نشان می‌دهد. *پ<0.01 compared="" to="" ng;=""><0.01 compared="" to="" stz;="" and=""><0.01 compared="" to="" stz-ag.magnification="" 200×.n1="PR" =="" photoreceptors.="">دوز cistanche tubulosa redditشکل 1B نشان می دهد که SME رنگ ایمنی CML را در هر سه لایه شبکیه در مقایسه با STZ کاهش می دهد (p<0.01). the="" treatment="" with="" ag(stz-ag)presented="" a="" more="" significant="" decrease="" than="" stz-sme="" in="" cml="" staining="" in="" both="" inl="" and=""><0.05). in="" gcl,="" there="" was="" no="" difference.="" in="" ng,="" cml="" staining="" was="" lower="" in="" the="" three="" retinal="" layers="" than="" in="" all="" those="" treated="" with="" stz(p≤0.05).="" figure="" 1c,="" and="" d="" show="" that="" stainings="" for="" rage="" and="" cml/rage="" were="" higher="" in="" stzthan="" stz-sme,="" stz-ag,="" and="" ng=""><>

سیستانچ می تواند ضد پیری باشد

با توجه به رنگ آمیزی RAGE بین STZ-SME و STZ-AG، تفاوتی بین GCL و INL وجود نداشت، در حالی که در ONL، افزایش STZ-SME مشاهده شد (p<0.01).stz-sme decreased="" cml/rage="" in="" all="" three="" retinal="" layers="" compared="" to="" stz=""><0.01), whereas="" stz-agin="" gcl="" and="" onlinduced="" a="" more="" significant="" decrease="" than="" sme=""><0.01). in="" inl,="" between="" stz-ag="" and="" stz-sme,="" there="" was="" no="">

3.2.2. اثر آنتی اکسیدانی SME در شبکیه چشم STZ

اثر آنتی اکسیدانی SME با رنگ آمیزی ایمنی برای NADPH اکسیداز{0}} (Nox{1}})، نیتریک اکسید سنتاز القایی (iNOS) و نیتروتیروزین (NT) ارزیابی شد. شکل 2A توزیع هر رنگ آمیزی ایمنی را در سه لایه شبکیه (GCL، INL، و ONL) نشان می دهد. شکل 2B-D درصد سلول های مثبت را برای هر نشانگر نشان می دهد که به صورت حداقل تا حداکثر نمودار جعبه و ویسکر ارائه شده است. داده ها (میانگین ± انحراف معیار) در پیوست A (جدول A2) گنجانده شده است. برای رنگ‌آمیزی Nox4 (شکل 2B)، درمان SME (STZ-SME) درصد سلول‌های رنگ‌آمیزی شده در سه لایه شبکیه را در مقایسه با STZ کاهش داد (p<0.05). comparing="" stz-sme="" with="" stz-ag,="" stz-sme="" showed="" a="" lower="" decrease="" for="" nox4="" in="" the="" three="" retinal="" layers="" (p=""><0.05).>رنگ‌آمیزی ایمنی iNOS در سه لایه شبکیه نیز توزیع شد (شکل 2A). در شکل 2C، STZ-SME درصد سلول‌های مثبت برای iNOS را در سه لایه شبکیه در مقایسه با STZ(p کاهش داد.<0.01). comparing="" sme="" effect="" with="" ag="" in="" this="" immunostaining,="" stz-ag="" decreased="" significantly="" in="" the="" three="" retinal="" layers=""><0.01). figure="" 2dshows="" the="" percentage="" of="" the="" positive="" cells="" for="" nt="" in="" the="" different="" groups.="" sme="" decreased="" this="" value="" for="" all="" retinal="" layers="" compared="" to=""><0.01). when="" the="" percentage="" between="" sme="" and="" ag="" was="" compared,="" there="" was="" no="" difference="" in="" gcl,="" whereas,="" in="" inl="" and="" onl,="" stz-sme="" had="" a="" lower=""><0.01). the="" ng="" group="" showed="" the="" lowest="" oxidative="" markers="" than="" the="" stz="" group="" (p="" <="" 0.01).="">سیستانچ แอ ม เว ย์اثر آنتی اکسیدانی SME در شبکیه دیابتی توسط سطوح تشکیل مالون دی آلدئید (MDA) نیز تعیین شد. شکل 3 غلظت MDA را در گروه های مورد مطالعه نشان می دهد. در STZ-SME و STZ-AG، سطوح MDA (5.1±0.1 و 4.34±1.{{10}}) در مقایسه با STZ (6.3±0.8;p) کاهش یافت.<0.01). comparing="" stz-sme="" with="" stz-ag,="" the="" levels="" are="" increased="" in=""><0.05).in ng(2.07±0.42),="" the="" levels="" were="" lowest="" compared="" to="" the="" stz="" groups=""><>

شکل 2. اثر آنتی اکسیدانی SME در شبکیه STZ. (الف) میکروگراف های نماینده ایمونوفلورسانس برای NADPH اکسیداز 4 (Nox{2}}) (A)، نیتریک اکسید سنتاز القایی (iNOS) و نیتروتیروزین (NT). (BD) نمودارهای جعبه و سبیل درصد سلول‌های مثبت در GCL، INL، و ONL را برای هر رنگ‌آمیزی ایمنی در گروه‌های NG، STZ، STZ-AG و STZ-SME نشان می‌دهد. هسته ها با DAPI (آبی) رنگ آمیزی شدند.*p<0.01 compared="" to="" ng;="" α=""><0.05 compared="" to="" stz,="" and="" β=""><0.01 compared="" to="" stz-ag.magnification="" 200×.="" in="" supplement="" 3,="" dapi="" and="" each="" specific="" antibody="" stain="" are="" shown="" in="" a="" single="" channel="" and="" the="" fused="">

شکل 3. اثر آنتی اکسیدانی SME در شبکیه دیابتی با پراکسیداسیون لیپیدی تعیین می شود. سطوح مالون دی آلدئید (MDA) در گروه های NG، STZ، STZ-AG و STZ-SME مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. غلظت ها در نمودار جعبه و سبیل نشان داده شده است.*ص< 0.01="" compared="" to="" ng;=""><0.01 compared="" to=""><0.05compared to="">

3.2.3.اثر SME بر التهاب شبکیه STZ

درصد رنگ‌آمیزی هسته‌ای NF-kB p65، فاکتور رشد اندوتلیال عروقی (VEGF)، و پروتئین اسیدی فیبریلاری گلیال (GFAP) برای تعیین اینکه آیا درمان SME در STZ باعث کاهش التهاب شبکیه می‌شود، ارزیابی شد.

رنگ آمیزی هسته ای NF-kB در سه لایه شبکیه (GCL، INL، و ONL) در همه گروه ها قرار داشت (شکل 4A). STZ-SME درصد کمتری از رنگ آمیزی NF-kB را در مقایسه با STZ و STZ-AG در سه لیوان شبکیه (ص<0.01)(figure 4b).="" similarly,="" diabetic="" rats="" treated="" with="" ag(stz-ag)showed="" that="" nf-staining="" is="" decreased="" in="" all="" three="" lavers="" of="" the="" retina="" compared="" to="" stz="" (p=""><0.05). the="" ng="" group="" showed="" the="" lowest="" values="" of="" the="" percentage="" of="" nf-kb="" staining="" in="" the="" three="" layers="" of="" the="" retina=""><0.01). the="" data="" (mean±="" sd)="" are="" included="" in="" appendix="" a(table="" a3).="" retinal="" vegf="" staining="" (figure="" 4a)="" and="" the="" percentage="" of="" positive="" cells="" were="" evaluated="" in="" the="" experimental="" groups="" (figure="" 4c).vegf="" staining="" was="" mainly="" localized="" to="" gcl="" (figure="" 4a).in="" stz,="" the="" percentage="" of="" vegf="" positive="" cells="" is="" increased(42.1="" ±="" 4.42)="" compared="" to=""><><0.01),and><0.01).however, there="" was="" no="" significant="" difference="" between="" smes="" and="" ag.="" the="" percentage="" of="" vegf="" staining="" in="" the="" ng="" group="" was="" the="" lowest="" of="" all=""><>

شکل 4. اثر SME در التهاب شبکیه STZ. (A) تصاویری از رنگ آمیزی ایمنی برای NF-kB هسته ای (نمایش داده شده توسط فلش ​​های قرمز)، فاکتور رشد اندوتلیال عروقی (VEGF؛ نشان داده شده با فلش های زرد)، و فیبریلاری گلیال پروتئین اسیدی (GFAP؛ فلش‌های قرمز و سفید به ترتیب حداکثر و حداقل شدت رنگ‌آمیزی را نشان می‌دهند) در گروه‌های NG، STZ، STZ-AG و STZ-SME. (B, C) نمودارهای جعبه و ویسکر درصد رنگ‌آمیزی مثبت را برای NF-kB هسته‌ای (GCL، INL، و ONL) و VEGF (در GCL) نشان می‌دهند. در (D)، IOD برای رنگ آمیزی GFAP در امتداد شبکیه نشان داده شده است.*p<0.01 compared="" to=""><0.01 compared="" to="" stz;="" andβ=""><0.01 compared="" to="" stz-ag.magnification="" 200×.="">التهاب شبکیه نیز با رنگ‌آمیزی GFAP به‌عنوان نشانگر آستروگلیوز تعیین شد (شکل 4A)، و توزیع آن در امتداد لایه‌های شبکیه با استفاده از IOD (شکل 4D) اندازه‌گیری شد. در شبکیه STZ، حضور GFAP از GCL به INL (IOD{2}}± 1018) مشاهده شد، در حالی که در گروه NG، GFAP عمدتا در لایه فیبر عصبی (IOD=1160 ±) مشاهده شد. 561; ص<0.01). in="" stz-sme,="" gfap="" staining="" was="" decreased="" (iod="2192±752)" compared="" to=""><0.01)and compared="" to="" stz-ag(iod=""><0.0018). however,="" there="" were="" no="" significant="" differences="" between="" stz="" and="">

3.2.4. اثر SME بر سطوح S100 پروتئین B (S100B) متصل شونده به کلسیم در شبکیه چشم STZ

پروتئین S100B مربوط به التهاب شبکیه است که توسط درونی سازی هسته ای NF-kB تنظیم می شود. از این رو، برای بررسی اینکه آیا SME بر بیان S100 در شبکیه STZ تأثیر می گذارد، رنگ آمیزی ایمنی (IOD) برای این پروتئین انجام شد. در همه گروه‌ها، رنگ‌آمیزی S100B از GCL به ONL توزیع شد (شکل 5A). شکل 5B نشان می‌دهد که در NG، IOD رنگ‌آمیزی S100B در ONL در مقایسه با گروه‌های تیمار شده بالاترین میزان بود (p<0.01), but="" was="" lower="" in="" gcl="" and=""><0.01).in sme,="" the="" iod="" of="" s100b="" staining="" was="" decreased="" in="" the="" three="" layers="" compared="" to=""><0.01 for="" all="" layers).="">چه مقدار سیستانچ مصرف کنیمدر SME، رنگ‌آمیزی S100B در GCL و INL کمتر از AG بود (هر دو، p<0.01); however,="" in="" onl,="" there="" was="" no="" difference.="" the="" data="" (mean="" ±="" sd)="" are="" included="" in="" appendix="" a="" (table="">

3.2.5. اثر SME بر دژنراسیون شبکیه در STZ

اثر محافظتی SME در انحطاط شبکیه از GCL، INL، و ONL STZ توسط سنجش ترانسفراز دئوکسی نوکلئوتیدیل ترانسفراز (TdT)-mediated deoxyuridine triphosphate (dUTP) Nick-end labeling (TUNEL) مورد ارزیابی قرار گرفت.

شکل 6A تصاویر نماینده توزیع آپوپتوز در شبکیه گروه های مورد مطالعه (NG، STZ، STZ-AG و STZ-SME) را نشان می دهد. شکل 6B یک نمودار جعبه و سبیل از IOD برای رنگ آمیزی TUNEL در GCL، INL، و ONL را نشان می دهد. در STZ-SME و STZ-AG، آپوپتوز به طور قابل توجهی در همه لایه ها در مقایسه با STZ کاهش می یابد (p<0.01). stz-ag="" had="" a="" more="" significant="" decrease="" in="" apoptosis="" compared="" to=""><0.01).in the="" three="" retinal="" layers="" of="" ng,="" the="" tunel="" staining="" is="" lower="" than="" those="" treated="" with="" stz=""><0.01). in="" onl,="" stz-ag="" and="" ng="" did="" not="" show="" significant="" differences.="" the="" data="" (mean="" ±="" sd)="" are="" included="" in="" figure="">

4. بحث

این مطالعه اثرات مفید عصاره متانولی اسفناج (SME) را در لایه‌های شبکیه موش‌های دیابتی مرتبط با محصولات نهایی ضد گلیکوزیشن پیشرفته (AGEs)، آنتی‌اکسیدانی و خواص ضد التهابی آن گزارش می‌کند. نشان داده شده است که SME گلیکاسیون پروتئین را کاهش می دهد، هموگلوبین گلیکوزیله، فروکتوزامین و آلدوز ردوکتاز را در گورخرماهی مبتلا به دیابت القایی کاهش می دهد، که نشان دهنده فعالیت ضد گلیکوزیشن است [11]. آزمایش‌های آزمایشگاهی ما با استفاده از آلبومین سرم گاوی (BSA) نشان داد که SME تشکیل گروه‌های AGEs، فروکتوزامین و کربونیل و کاهش گروه‌های تیول کاهش‌یافته در BSA را کاهش می‌دهد که با قندهای کاهنده یا متیل گلیوکسال (MGO) انکوبه شده است. این نتایج نشان می‌دهد که SME می‌تواند گلیکاسیون پروتئین را با مکانیسم آنتی‌اکسیدانی مهار کند، که می‌تواند با تشکیل MGO نیز تداخل داشته باشد. نشان داده شده است که MGO باعث تولید کربوکسی متیل لیزین (CML) روی پروتئین ها در شرایط آزمایشگاهی می شود [43]. افزایش سطح CML نشان داده شده است که یک واسطه در عوارض دیابت است [44،45].

بنابراین، کار حاضر ارزیابی می‌کند که آیا درمان SME از تجمع CML در شبکیه موش‌های دیابتی ناشی از استرپتوزوتوسین (STZ)، مرتبط با پاسخ‌های اکسیداتیو و پیش التهابی ناشی از فعال‌سازی احتمالی گیرنده AGEs (RAGE) جلوگیری می‌کند. نتایج نشان داد که درمان با SME باعث کاهش رنگ‌آمیزی CML در لایه سلول گانگلیونی (GCL)، لایه هسته‌ای داخلی (INL) و لایه هسته خارجی (ONL) شد. اگرچه SMEها سطوح بالاتری از CML را در INL و ONL نسبت به آمینوگوانیدین (AG) و بدون تفاوت در GCL نشان دادند، نتایج نشان می‌دهد که درمان SME می‌تواند تولید این AGE را در شبکیه دیابتی مهار کند. علاوه بر این، مشاهده شد که افزایش CML در لایه‌های شبکیه دیابتی موازی با افزایش سطوح رنگ‌آمیزی RAGE بود.

افزایش RAGE و تجمع AGE با آسیب شبکیه مرتبط است. یکی از پیامدهای تعامل CML-RAGE، تولید گونه‌های فعال اکسیژن (ROS) است که به نوبه خود باعث بیان بیش از حد ژن‌های پیش‌التهابی می‌شود [46]. در نتایج ما، شبکیه‌های دیابتی تحت درمان با SME کاهشی در CML و RAGE ادغام شده (CML/RAGE)، عمدتاً در لایه‌های GCL و INL نشان دادند، که نشان می‌دهد کاهش CML/RAGE می‌تواند فعال شدن پایین دست مسیرهای استرس اکسیداتیو را کاهش دهد. و پاسخ های التهابی که برای فعال سازی RAGE توضیح داده شده است [46].

استرس اکسیداتیو ناشی از AGEs-RAGE با فعال کردن آنزیم‌های اکسیداز NADPH، که تولیدکننده آنیون سوپراکسید هستند و در سلول‌های شبکیه دیابتی افزایش می‌یابند، واسطه می‌شود [46،47]. اکسیدازهای NADPH، Nox1/Nox4، به افزایش ROS، التهاب و نئوواسکولاریزاسیون شبکیه کمک می کنند [48]. علاوه بر این، سوپراکسید تولید شده با اکسید نیتریک (NO) واکنش می دهد و پراکسی نیتریت تولید می کند، رادیکال آزاد دیگری که در آسیب شبکیه دیابتی شرکت می کند [49،50]. افزایش سطح NO در شبکیه‌های دیابتی با افزایش فعالیت اکسید نیتریک سنتاز القایی (iNOS) انجام می‌شود که باعث افزایش تراکم مویرگ‌های سلولی و ضخیم شدن شبکیه، گلیوز و افزایش سطوح نیترات/نیتریت می‌شود [51]. در اینجا، نتایج نشان می دهد که درمان SME باعث کاهش ایمونوهیستوشیمی Nox4 در GCL، INL و ONL در مقایسه با STZ شد. علاوه بر این، در مقایسه با AG، SME کاهش قابل توجهی در رنگ‌آمیزی Nox4 در سه لایه شبکیه ارائه کرد.

با توجه به سطح رنگ‌آمیزی iNOS، کاهشی در سه لور شبکیه در گروه SME نسبت به STZ وجود داشت. هنگامی که رنگ‌آمیزی iNOS در AG با STZ مقایسه شد، نتایج کاهش قابل‌توجهی نسبت به SME در لایه‌های GCL، INL و ONL نشان داد، که نشان می‌دهد AG یک مهارکننده قوی iNOS است همانطور که در رتینوپاتی دیابتی (DR) گزارش شده است. 29].

در مورد رنگ آمیزی ایمنی برای 3-نیتروتیروزین، SME این نشانگر را در هر سه لایه در مقایسه با STZ کاهش داد. از سوی دیگر، پراکسیداسیون لیپیدی و تشکیل AGEs در DR [13] ارتباط نزدیکی دارند. CML همچنین توسط اکسیداسیون اسیدهای چرب غیراشباع چندگانه (PUFAs)[52] که به وفور در شبکیه یافت می شود، تولید می شود. واکنش‌های اکسیداسیون PUFA منجر به تشکیل گونه‌های کربنیل فعال مانند مالون دی‌آلدئید (MDA) می‌شود که متعاقباً با باقی‌مانده‌های سیستئین، هیستیدین و لیزین پروتئین‌ها واکنش می‌دهند و ترکیب‌های افزایشی نسبتاً پایداری تولید می‌کنند [53]. نتایج ما نشان می دهد که رنگ آمیزی CML در لایه های پلاسشبکیه دیابتی با درمان SME کاهش یافت که با کاهش پراکسیداسیون لیپیدی سازگار است.

برهمکنش AGE-RAGE در شبکیه های دیابتی وضعیتی است که تولید عوامل التهابی را افزایش می دهد که به نوبه خود در دژنراسیون شبکیه شرکت می کنند. این تعامل منجر به فعال شدن NF-kB هسته ای می شود که باعث بیان بیش از حد عوامل پیش التهابی مانند iNOS و فاکتور رشد اندوتلیال عروقی (VEGF)54 می شود. VEGF یک فعال کننده میتوژنیک قوی و ارکستراتور مرکزی رگزایی در DR است. Nox4 همچنین بیان VEGF را تحت شرایط استرس اکسیداتیو و هیپرگلیسمی تنظیم می کند [55]. بنابراین، مسدود کردن تعامل AGE-RAGE ممکن است در کاهش بیان VEGF در پاتوژنز DR مهم باشد.

از سوی دیگر، پروتئین اسیدی فیبریلاری گلیال (GFAP) پروتئینی است که در سلول‌های گلیال شبکیه (سلول‌های گانگلیونی)، آستروسیت‌ها، سلول‌های مولر و میکروگلیا وجود دارد و افزایش آن نشان‌دهنده تشکیل گلیوز عصبی در شبکیه است [56]. بنابراین، انتقال هسته ای NF-kB و بیان بیش از حد VEGF و GFAP عوامل پیش التهابی مرتبط با پاتوژنز DR هستند [13]. این عوامل به نوبه خود با تشکیل AGEs و تعامل AGEs-RAGE تولید می شوند [4557,58]. در اینجا، نشان داده شد که درمان SME باعث کاهش CML-RAGE ادغام شده در لایه‌های شبکیه دیابتی علاوه بر کاهش NF-kB، VEGF و گلیوز هسته‌ای شد. این نتایج نشان می‌دهد که SMEها می‌توانند پاسخ التهابی را با مهار تعامل CML-RAGE کاهش دهند.

پاسخ التهابی نیز با رنگ آمیزی S100 پروتئین اتصال دهنده کلسیم B (S100B) ارزیابی شد. S100B پروتئینی است که استرس اکسیداتیو را افزایش می دهد و پاسخ التهابی و تخریب عصبی را در DR تحریک می کند [58،59]. نتایج نشان می دهد که رنگ آمیزی S100B در سه لایه شبکیه در STZ توزیع شده است. گزارش شده است که در INL، سلول‌های گلیال مولر [58] یافت می‌شود که می‌تواند با حساسیت گلیوز مرتبط باشد. رنگ‌آمیزی S100B در INL با درمان SME در مقایسه با STZ و AG کاهش یافت، که نشان می‌دهد SME در این لایه پاسخ التهابی را مهار می‌کند. .

در موش‌های سالم، سطوح S100B در ONL بالاتر از گروه‌های STZ بود. احتمالاً در موش‌های نورموگلیسمی، سطوح S100B می‌تواند در تنظیم مسیر سیگنالینگ مبتنی بر گوانیلات سیکلاز متصل به غشاء در گیرنده‌های نوری نقش داشته باشد [60]. در گروه‌های دیابتی، کاهش سطح S100B می‌تواند باعث از دست دادن انتقال نوری در سلول گیرنده نوری شود که از cGMP به عنوان پیام‌رسان دوم برای جفت کردن جذب نور با تغییرات در هدایت کانال‌های کاتیونی در غشای پلاسمایی استفاده می‌کند [61. بنابراین، SME ها می توانند سطح پروتئین S100B را با خواص آنتی اکسیدانی خود کاهش دهند [62]. با این حال، مطالعات بیشتری برای توصیف عملکرد و تعامل S100B در لایه‌های مختلف شبکیه مورد نیاز است.در دیابت قندی (DM)، مرگ سلولی در انواع مختلفی از سلول های شبکیه، مانند سلول های گانگلیون، سلول های گلیال (سلول های مولر و آستروسیت ها) و میکروگلیا مشاهده شده است [63]. AGEs/RAGE می تواند با واسطه افزایش استرس اکسیداتیو یا فعال شدن سیتوکین های پیش التهابی، آپوپتوز را در سلول های عصبی شبکیه القا کند. در این مطالعه، نتایج ثابت می کند که در GCL، INL و ONL، آپوپتوز توسط SME کاهش یافته است.

5. نتیجه گیری ها

این مطالعه نشان داد که مصرف SME مشخصات پاتولوژیک ناشی از دیابت را در لایه‌های شبکیه موش‌های دیابتی ناشی از استرپتوزوتوسین (STZ) بهبود بخشید. در مطالعه آزمایشگاهی، SME فعالیت آنتی‌اکسیدانی را با مهار واسطه‌های واکنش میلارد (فروکتوزامین و دی کربنیلیک) نشان داد. ترکیبات)، از تشکیل AGE ها و کاهش گروه های تیول کاهش یافته در BSA جلوگیری می کند. در شبکیه دیابتی، درمان SME تشکیل CML، تعامل CML-RAGE و فعال شدن پاسخ های پیش التهابی (VEGF، GFAP، S100B و RAGE) را کاهش داد. علاوه بر این، SME باعث کاهش نشانگرهای استرس اکسیداتیو (iNOS، Nox4 و NT) و آپوپتوز شد. در نهایت، نتایج نشان می‌دهد که SMEs اثر محافظتی بر دژنراسیون شبکیه STZ دارند.

این مقاله از Antioxidants 2021, 10, 717 استخراج شده است. https://doi.org/10.3390/antiox10050717 https://www.mdpi.com/journal/antioxidants