مطالعه عملکرد سیستم ایمنی عصبی سیستانش دسرتیکولا و محصولات بخارپز شراب برنج آن در مدل موش صحرایی القا شده با گلوکوکورتیکوئید-Ⅱ

3.2.4. ایمونوهیستوشیمی

آپوپتوز عصبی توسط بسیاری از ژن های آپوپتوز و ضد آپوپتوز کنترل می شود، به طور عمده ژن تقویت کننده آپوپتوز Bax و ژن های آنتی آپوپتوز از خانواده ژن Bcl-2. Bcl{2}} در اندامک‌های فعال تولیدکننده اکسیژن مانند میتوکندری، شبکه آندوپلاسمی و غشای هسته‌ای قرار دارد. Bcl{4}} تأثیر کمی بر رادیکال های آزاد اکسیژن دارد اما می تواندجلوگیری از آسیب اکسیداتیو در سلول ها. Bax از سیتوپلاسم به غشای میتوکندری منتقل می شود، ساختار غشای میتوکندری را تغییر می دهد و باعث آزاد شدن سیتوکروم c و القای آپوپتوز می شود.

توبولوزای طبیعی سیستانچ برای بهبود عملکرد جنسی PHGS75% ECH 30% ACT 12%

بیانی در سیتوپلاسم آدرنال پروتئین Bax و Bcl-2 وجود داشت. رنگ آمیزی تمام ذرات زرد را نشان داد. در مقایسه با گروه BC، میانگین چگالی نوری پروتئین Bax در گروه MC به طور قابل توجهی افزایش یافت (P< 0.01). Compared to that of the MC group, the average optical density in the CD-LD and WCD-LD groups decreased significantly (P < 0.01) (Figure 5(a)).

شکل 5(b) نشان می دهد که در مقایسه با گروه BC، میانگین چگالی نوری پروتئین Bcl-2 در گروه MC به طور قابل توجهی کاهش یافته است (P< 0.05). Compared to that of the MC group, the average optical density in the WCD-HD and CD-HD groups increased significantly (P < 0.01), while those of the WCD-MD and CD-MD groups increased (P < 0.05).

پروتئین کاسپاز{0}} عمدتاً در سیتوپلاسم به شکل اصلی خود در بافت‌های طبیعی قرار دارد و بیان کمی دارد. سیگنال های مثبت به رنگ زرد کم رنگ یا زرد مایل به قهوه ای هستند. در مقایسه با گروه BC، بیان کاسپاز{1}} در گروه MC به طور قابل توجهی افزایش یافت (P< 0.05). Compared to that of the MC group, the expression of caspase-3 in the WCD-HD and WCD-MD groups increased (P < 0.05) (Figure 5(c)).

در بافت های نرمال، بیان ژن Fas کاهش یافت و سیگنال مثبت برای هیبریداسیون درجا زرد مایل به قهوه ای بود. همانطور که در شکل 5 (d) نشان داده شده است، در مقایسه با گروه BC، میانگین چگالی نوری پروتئین Fas در گروه MC افزایش یافت (P< 0.05). Compared to that of the MC group, the average optical density in the WCD-HD and WCD-LD groups improved (P < 0.05) (Figure 5(d)).

پروتئین FasL عمدتاً در غشای سلولی یا سیتوپلاسم قرار دارد و سیگنال های مثبت آن قهوه ای است. در مقایسه با گروه BC، میانگین چگالی نوری ژن FasL در گروه MC به طور قابل توجهی افزایش یافت (P< 0.05). Compared to that of the MC group, the average optical density of the FasL gene in the WCD-HD, WCD-MD, CDHD, and CD-MD groups increased significantly (P < 0.01) (Figure 5(e)).

نتایج نشان داد که CD و WCD می توانندالقای آپوپتوز در سلول های التهابیو با تقویت بیان پروتئین FasL و اتصال به پروتئین Fas، فعال کردن پروتئین کاسپاز{0}} و ایجاد آبشار کاسپاز، آسیب آدرنال را کاهش دهید. اثر گروه WCD-HD بهترین بود.

3.3. تعیین عملکرد ایمنی

3.3.1. شاخص اندام ایمنی

در مقایسه با گروه BC، ضریب تیموس و شاخص طحال در گروه MC به طور معنی داری کاهش یافت (P< 0.01). Compared to the MC group, the WCD-MD group had the greatest difference (P < 0.05). The thymus coefficient was almost back to the normal level. For the spleen index, the WCDMD, WCD-LD, and CD-MD groups showed significant differences compared with that of the MC group (P < 0.01) (see Figure 6). Therefore, WCD and CD treatment could protect the immune organs, and the effects of WCD were better. 

توبولوزای طبیعی سیستانچ برای بهبود عملکرد جنسی PHGS75% ECH 30% ACT 12%

3.3.2. تشخیص زیرمجموعه های لنفوسیت T در خون محیطی

درصد سلول‌های CD{0}} در ربع بالا سمت چپ و سلول‌های CD8+ در ربع پایین سمت راست در سال قبل از میلاد و هر گروه دارویی بیشتر از گروه MC بود. در مقایسه با گروه BC، نسبت CD4+ThCD8+ به طور قابل توجهی در گروه MC کاهش یافت (P< 0.01). Compared to that of the MC group, the ratio of CD4+ThCD8+ increased significantly in the PC group, the WCD group, and the CD-HD group (P < 0.01) (Figure 7).

3.3.3. تعیین سطح IL-10، IL-6، IL-2، TNF-Α و IFN-C در سرم

شکل 8 نشان می دهد که در مقایسه با گروه BC، سطح IL{1}}، TNF- و IFN-c به طور قابل توجهی افزایش یافته است (P< 0.01). The level of IL-10 and IL-2 decreased in the MC group. Compared to that of the MC group, the level of IL-6, TNF-α, and IFN-c decreased and IL-10 and IL-2 increased in serum in each of the drug groups. The effect of WCD was better than the effect of CD, especially in the WCD-MD group, in which the effect was close to that of the PC group.

3.3.4. نتایج آزمایش مشاهده میکروسکوپ بافت Lymus

شکل 9 نشان می دهد که در گروه BC، تعداد زیادی لنفوسیت وجود داشت. لنفوسیت ها و رتیکولوسیت ها در مرکز با تیموسیت های گرد یا بیضی شکل پراکنده قرار گرفتند. هیچ نکروز، انفیلتراسیون سلولی التهابی و هیچ تغییر غیرطبیعی وجود نداشت.

گروه MC مقدار زیادی بافت نکروز لنفوئیدی را نشان داد، با آرایش نامنظم لنفوسیت ها و رتیکولوسیت ها در مرکز. تیموسیت‌های گرد یا بیضی ناپدید شدند، دژنراسیون یا نکروز سلولی عظیم مشهود بود و انفیلتراسیون سلولی التهابی با تغییرات پاتولوژیک غیرطبیعی وجود داشت.

در گروه‌های CD، ویژگی‌های مورفولوژیکی لنفوسیت‌ها به حالت عادی بازگشته بود و چینش لنفوسیت‌های مرکزی و رتیکولوسیت‌ها تقریباً نرمال بود. تیموسیت های گرد یا بیضی شکل بهبود یافته بودند، اما تعداد کمی از لنفوسیت های دژنراتیو یا نکروزه و سلول های التهابی نفوذی باقی مانده بودند.

در گروه های WCD و گروه PC، ویژگی های مورفولوژیکی لنفوسیت ها بهتر ترمیم شد. لنفوسیت‌ها و رتیکولوسیت‌ها در مرکز به خوبی هم‌تراز بودند، تیموسیت‌های گرد یا بیضی تقریباً طبیعی بودند، اما تعداد کمی از لنفوسیت‌های نفوذی و دژنراتیو باقی ماندند.

3.4. بیان ژن پروتئین بادامک

مقدار RQ (CaM mRNA - mRNA اکتین) برای بررسی بیان mRNA بادامک در نظر گرفته شد. RQ گروه BC 1 بود. بیان mRNA CaM در هیپوتالاموس در گروه MC به طور قابل توجهی افزایش یافت (P< 0.01), while the value decreased in the WCD-HD, WCD-MD, WCDLD, and CD-HD groups (P < 0.05) (Figure 10). The expression of CaM mRNA in the hypophysis in the MC group was lower than that in the BC group (P < 0.01). The expression in the WCD-HD, WCD-MD, WCD-LD, CD-HD, and CD-LD groups increased (P < 0.05), and the effect in the WCD groups was better than the effect in the CD groups.

4. بحث

فارماکوپه چینی [2] ثبت می کند که CD و WCD را می توان در کلینیک به عنوان انواع اصلی قطعات جوشانده استفاده کرد. پس از بخارپز شدن با شراب برنج،اثرات ضد پیری و تقویت کننده کلیه یانگتقویت شدند. از طریق UPLC-QqQ-MS، ما تغییرات کمی را در پایه مواد شیمیایی در طول فرآیند بخار دادن شراب برنج شناسایی کردیم. گلیکوزیدهای ایریدوئید ناپایدار بودند و محتوای این گلیکوزیدها کاهش یافت و حتی غیرقابل تشخیص شد. محتوای گلیکوزیدهای فنیل اتانول نیز تغییر کرد، که می تواند تغییراتی را در فارماکودینامیک و اثر بالینی ایجاد کند.

توبولوزای طبیعی سیستانچ برای بهبود عملکرد جنسی PHGS75% ECH 30% ACT 12%

مدل کلاسیک کمبود کلیه یانگ با تزریق زیر جلدی کورتیکوسترون تکرار شد [19]. مصرف بیش از حد کورتیکوسترون می تواند از راز CRH در هیپوتالاموس جلوگیری کند. در همین حال، راز ACTH نیز مهار شد. سطح هورمون قشر آدرنال کاهش یافت و در نتیجه عملکرد محور HPA کاهش یافت. ناکارآمدی محور HPA یکی از مشخصه های شایع کمبود کلیه یانگ است [20]. سپس موش‌ها پدیده «تخلیه» را نشان می‌دهند و علائم با علائم کمبود کلیه یانگ در کلینیک مطابقت دارد.

در گروه MC، سطح CRH، ACTH، T و CORT در سرم موش به طور معنی داری کاهش یافت (P< 0.01). After being treated by CD and WCD, the content of CRH, ACTH, T, CORT, and cortisol all increased to some degree, and the effect of WCD-MD was the best, almost equal to that in the PC group. These results indicated that the relative hormone balance in the HPA axis had been destroyed in the MC group, CD and WCD could improve the functional recovery of abnormal adrenal axis hormone levels, but the effect of WCD was better.

تعدیل نسبت اعضای خانواده Bcl-2 یکی از مکانیسم‌های اصلی است که توسط آن FasThFasL مسیر گیرنده مرگ را واسطه می‌کند، و خانواده Bcl-2 مسیر میتوکندری را تنظیم می‌کند [21]. فاکتور مهارکننده آپوپتوز Bcl-2 و عوامل القاکننده آپوپتوز، مانند Bax، همه متعلق به خانواده Bcl-2 هستند [22]. آپوپتوز سلولی ممکن است با نسبت نسبی عوامل بازدارنده آپوپتوز و عوامل القا کننده آپوپتوز تعیین شود [23]. میتوکندری ها وظیفه ایست های بازرسی مرکزی را برای بسیاری از اشکال آپوپتوز دارند [24]. مطالعه حاضر نشان داد که CD-MD و WCD ها می توانند بیان Bax را استنتاج کرده و Bcl{13}} را بهبهبود کمبود کلیه یانگ. Fas گیرنده اصلی مرگ است که با بستن با لیگاند Fas (FasL) آپوپتوز را القا می کند [25]. بیان Fas و FasL در گروه MC افزایش یافت، در حالی که این بیان در گروه WCD-MD به طور قابل توجهی افزایش یافت (P< 0.01) compared with the MC group. Both FasThFasL and BaxThBcl-2 systems transduce apoptotic signals to the caspase family [26]. Caspase-3 is one of the pivotal proteinases that initiate cell apoptosis. The activation of caspase-3 indicates that apoptosis enters an irreversible stage [27]. The expression of caspase-3 in the MC group increased and increased significantly in the WCD-HD and WCD-MD groups (P < 0.05).

نقص عملکرد سیستم ایمنی یکی از تظاهرات مهم کمبود کلیه یانگ است [28]. در این مطالعه، ما دریافتیم که شاخص طحال و تیموس گروه WCD-MD به طور قابل توجهی بهبود یافته است (P< 0.01, P < 0.05). The immune response of the immune system is regulated mainly by the Th subgroups [29]. IL-2 is the growth factor for T cells, secreted by T cells and macrophages, participates in inflammatory regulation, regulates immunity, and increases infection resistance [30]. The level of IL-2 in the MC group decreased (P < 0.01), and after treatment with CD and WCD, the level of IL-2 recovered. IL-6 and TNF-α are proinflammatory cytokines. Increased levels of IL-6 and TNF-α cytokines cause cytokine imbalances and exacerbate inflammation. The levels of IL-6 and TNF-α increased in the MC group, while after treatment, the levels of IL-6 and TNF-α decreased. T cells are divided into CD4 cells and CD8 cells, and the CD4+ThCD8+ ratio can be used as an important index of immune regulation [31]. CD4+ThCD8+ in the MC group decreased (P < 0.01), while in the WCD and CDHD groups increased (P < 0.01).

محور HPA مهمترین سیستم تنظیمی است زیرا ترشح گلوکوکورتیکوئید و سیستم غدد درون ریز را برای حفظ عملکرد ترشحی قشر آدرنال تنظیم می کند [32]. بیان بیش از حد mRNA بادامک در بافت هیپوتالاموس با کمبود یانگ کلیه مرتبط بود. CD و WCD می‌توانند کانال‌های کلسیم را مسدود کنند، بیان mRNA CaM را در هیپوتالاموس مهار کنند، و هجوم کلسیم را کاهش دهند، بنابراین فعالیت کمپلکس Ca2+·CaM را کاهش می‌دهند.

تشکیل کمبود کلیه یانگ یک فرآیند توسعه بیماری مزمن است. کلیه دیگر مفهومی صرفاً آناتومیکی نیست و یک اصطلاح کلی برای سیستم ایمنی عصبی- غدد و دستگاه تناسلی است. شبکه عصبی غدد درون ریز (NEI) یک سیستم نظارتی یکپارچه مهم است [33]. CD و WCD می توانند عملکرد محور HPAT را تنظیم کرده و بهبود کمبود کلیه یانگ را بهبود بخشند. این نتیجه مبنای تجربی برای پیشگیری و درمان بالینی کمبود کلیه یانگ را فراهم می کند.

توبولوزای طبیعی سیستانچ برای بهبود عملکرد جنسی PHGS75% ECH 30% ACT 12%