نشانگر زیستی تشخیصی برای ناراحتی کلیه دیابتی: بیان MicroRNAs

تماس:joanna.jia@wecistanche.com/ واتساپ: 008618081934791

PART I.: MicroRNA Expression Profiling in Diabetic Kidney Disease

HIROKIISHII,SHOHEI KANEKO,KATSUNORI YANAl,AKINORI AOMATSU,KEIJ HIRAl, SUSUMU OOKAWARA, & YOSHIYUKI MORISHITA

مقدمه

شیوع بیماری کلیوی دیابتی (DKD) به سرعت در سراسر جهان در حال رشد است و مربوط به بارهای اقتصادی و اجتماعی قابل توجهی است زیرا عامل اصلی بیماری کلیوی مرحله پایانی است و با توسعه عوارض مختلف عروقی همراه است¹. برای بهبود پیش آگهی DKD(بیماری کلیوی دیابتی)، تشخیص زود هنگام آن و عوامل درمان خاص مورد نیاز است. با این حال هر دو تثبیت نشده اند.

تشخیص قطعی DKD (بیماری کلیوی دیابتی) نیاز به تجزیه و تحلیل هستولوژیک بیوپسی کلیوی دارد. با این حال، بیوپسی کلیوی تهاجمی است، به دست آوردن نمونه های تشخیصی دشوار است، و برای روش های تکرار مناسب نیست. از این رو چندین مولکول سرم یا ادرار مانند کلاژن چهارم، پروپپتید COOH-terminal کلاژن VI و گیرنده فاکتور نکروز تومور 1 از 2 برای استفاده به عنوان نشانگر تشخیصی DKD مورد ارزیابی قرار گرفته اند.(بیماری کلیوی دیابتی),^2-4اما هیچ کدام هنوز برای استفاده بالینی تاسیس شده است.^5-7

در مورد درمان DKD(بیماری کلیوی دیابتی)، داروهای متعددی مانند مسدودکننده های سیستم رنین-آنژیوتانسین، مهارکننده کوترانسپورتر سدیم-گلوکز ۲، و آنالوگ های پپتید-۱ شبیه گلوکاگون نشان داده شده اند که اثرات حفاظتی در DKD دارند(بیماری کلیوی دیابتی),^8-10اما هیچ کدام ایده آل نیست. بنابراین، نیاز فوری به شناسایی نشانگرهای زیستی تشخیصی و عوامل درمانی برای DKD وجود دارد(بیماری کلیوی دیابتی).

گیاهان اژدها سیستانچه

میکروRNAها(miRNAs)توجه را به عنوان نشانگرهای زیستی خاص بیماری و اهداف درمانی برای بیماری های مختلف مانند سرطان و چندین بیماری التهابی به خود جلب کرده است.^11,12miRNAs(میکروRNAها) RNAs کوچک، غیر کدکننده از حدود 22 لوکلئوتید در طول است که به عنوان تنظیم کننده پس از رونویسی از ژن های هدف و پروتئین های مشتق شده خود را با القای پیام رسان RNAmiR- تخریب و / یا سرکوب ترجمه ای عمل می کنند.^13,14تصور بر این است که NAs مسئول تنظیم >۶۰٪ از کل سطوح بیان پروتئین است و در نتیجه نقش های محوری و متنوعی را در فرایندهای پاتوپسیولوژیک در بیماری های مختلف ایفا می کند¹⁵.

مطالعات قبلی نشان داده اند که چندین miRNAs(میکروRNAها)در بیماری زا شدن DKD نقش دارند(بیماری کلیوی دیابتی)، و در نتیجه، آنها ممکن است نشانگرهای زیستی مفید از یا اهداف درمانی برای DKD نشان می دهد(بیماری کلیوی دیابتی).^16.17با این حال، مطالعات بیشتر برای بررسی نقش های نظارتی miRNAs(میکروRNAها)in DKD(بیماری کلیوی دیابتی)لازم هستند و این miRNAs(میکروRNAها)ممکن است به عنوان نشانگرهای زیستی تشخیصی و عوامل درمانی برای DKD توسعه یافته(بیماری کلیوی دیابتی). از این رو در مطالعه حاضر به بررسی miRNAs های مورد بررسی قرار گرفتیم.(میکروRNAها)درگیر در DKD(بیماری کلیوی دیابتی)و تعیین پتانسیل خود را به عنوان نشانگرهای زیستی خاص و یا عوامل درمانی برای DKD(بیماری کلیوی دیابتی).

مزایای ساقه سیستانچه

مواد و روش ها

مدل حيوون .موش ها در اتاقی با دما و رطوبت کنترل شده در شرایط میکروازولاتور ضد ویروسی و بدون آنتی بادی قرار داشتند. موش های نر db/db(C57BLKS/J lar -+Leprdb/+Leprdb)و موش های معمولی littermate m/m(C57BLKS/J Iar-m+/m+)از مؤسسه تولید مثل حیوانات (ایباراکی ژاپن) خریداری شدند. موش های نر آکیتا (C57BL/6-Ins2Akita/J) و بسترهای طبیعی آنها (C57BL/6J) از SLC ژاپن، شرکت (توکیو، ژاپن) به دست آمد.

ایشمی کلیوی و ریپرفوزیون همان طور که قبلاً توصیف شده بود انجام شد.¹⁸به طور خلاصه موش های C57BL/6J نر (علوم حیوانات آزمایشگاهی توکیو، توکیو، ژاپن) با ایزوفلوران بی حس شدند و پدیکل راست کلیه شناسایی، لیگاته و یک نفرکتومی راست انجام شد. سپس پديکل کليوی چپ به مدت ۴۵ دقيقه با يک کليپ ميکروواسکولار غير تراوماتیک شناسايی و گيره شد. گیره ها پس از پایان دوره ایشمی برداشته شدند و ریپرفسون موفق به صورت بصری تأیید شد. موش های تحت عمل شام تحت همان عمل جراحی، بدون گیره شدن پدیکل کلیوی قرار گرفت. حیوانات ۲۴ ساعت پس از تزریق مجدد قربانی شدند.

انسداد حال به صورت یک طرفه به صورت پیش از ویوس گزارش شده انجام شد.¹⁹به طور خلاصه، موش های C57BL/6J نر (علوم حیوانات آزمایشگاهی توکیو) با استفاده از ایزوفلوران بی حس شدند، و سپس حالدار چپ از طریق برش شکمی خط میانی در معرض دید قرار گرفت، به طور کامل با ابریشم 4-0 در دو نقطه رباط داده شد، و بین این ها بخش شد. گروه تحت عمل شام تحت رباط قرار ن گرفت. موش ها قربانی شدند و کلیه های آنها 7 روز پس از عمل جراحی جمع آوری شد.

موش های تسریع کننده حساسیت مردانه (SAMP1/YitFcsJ) و موش های کنترل (SAMR/YitFcsJ) از SLC ژاپن خریداری شدند.²⁰این موش ها در ۴۸ هفته سالگی قربانی شدند. موش های HIGA نر (HIGA/NscSlc)و موش BALB/cCrSlc که به دلیل غلظت IgA سرم پایین به عنوان سویه کنترل انتخاب شدند، از SLC ژاپن به دست آمد.

کلیه ها و خون جمع آوری و سرم به دست آمد و اکثریت بافت ها در دمای 80- درجه سانتی گراد ذخیره شدند. کليه های چپ برای تجزيه و تحليل هيتولوژيک مورد استفاده قرار گرفت و کليه های راست برای mRNA و miRNA مورد استفاده قرار گرفت.(میکروRNAها)کمی سازی. برای تجزیه و تحلیل های بیوشیمیایی، موش ها برای جمع آوری نمونه های ادرار 24 ساعت به قفس های متابولیک منفرد منتقل شدند. غلظت آلبومین ادراری و کراتینین به ترتیب با استفاده از یک کیت آلبومین سنجش ادراری LBIS Mouse(S-type)(فوجی فیلم واکو، شیبایاگی، گوما، ژاپن) و یک کیت کراتینین Lab-Assay (فوجی فیلم واکو، اوساکا، ژاپن) اندازه گیری شد.

بیماران و افراد سالم.ما بیماران مبتلا به بیماری مزمن کلیوی را که بین ماه های مه ۲۰۱۶ تا مه ۲۰۱۹ در دانشگاه پزشکی سایتوما جیچی تحت بیوپسی کلیوی قرار گرفته بودند، جذب کردیم. بیست و پنج بیمار به DKD جذب شدند(بیماری کلیوی دیابتی)گروه و با بيماران مبتلا به بيماری کليه غير از DKD (50 نفر) مقايسه شدند. نفروپاتی 17، نفروپاتی غشایی 9، سندرم نفروتیک حداقل تغییر 6، نفروسکلروز 4، نفریت بین راهی 3، نفروپاتی مرتبط با IgG4 3، لوپوس نفریت 2 و سایر بیماری های کلیوی 6) و برای ویژگی های پایه خود همسان شدند. هر مورد توسط چند آسیب شناس با تجربه مورد بررسی قرار گرفت تا اطمینان حاصل شود که نمونه های بیوپسی تغییرات پاتولوژیک مناسب با رده بیماری را نشان می دهند و ویژگی تغییرات قابل توجهی از بیماری های دیگر نشان نمی دهند. دی کی دی(بیماری کلیوی دیابتی)با استفاده از يافته های مشخصه افزايش ماتريس مگانژيال، گلومرولوسکلروز ندوولار، کلفت شدن غشای زيرزمين گلومرولار منتشر، و هيالينوز همسايه آرتريول های افرینت و افرانت تشخيص داده شد.²¹دیابت با استفاده از criteeGFR انجمن دیابت آمریکا با استفاده از رژیم غذایی در ریا کلیوی تخمین زده شد.²²روش بیماری ها (MDRD)، اصلاح شده برای ژاپنی ها (ml/min/follows: population, eGFR,as;1x serum creatinine1.73m²)=0.881×186.3×age-0.203×(×0.742 for women).^23,24

تحليل ميکرواراي .تجزیه و تحلیل miRNA(میکروRNAها)expression توسط Hokkaido System Science (Hokkaido, Japan) انجام شد. جزئیات تجزیه و تحلیل میکروارای سیس در جای دیگر توصیف شده است.²⁵به طور خلاصه، RNA دفوفوریلاسیون بود و سپس با استفاده از miRNA به Cy3-pCp لیگا شد(میکروRNAها)کامل برچسب گذاری Reagent و Hyb کیت (چابک فن آوری ، کالیفرنیا ، ایالات متحده آمریکا) و miRNA(میکروRNAها)اسپایک در کیت (فن آوری های چابک). miRNA(میکروRNAها)برای هيبريديزه کردن CRNAها از ريجنت برچسب گذاری کامل و هيب کيت استفاده شد.پس از هيبريديزه شدن، اشعه های ميکروار با استفاده از يک بسته شستشوی بيان ژن (تکنولوژی های چابک) شسته شدند و با يک اسکنر ميکروآری چابک اسکن شدند. شدت سیگنال با استخراج ویژگی چابکی ver.12.0.3.1 ارزیابی شد.mRNA تجزیه و تحلیل بیان نیز توسط علوم سیستم هوکایدو انجام شد. RNA با استفاده از یک کیت برچسب گذاری سریع با ورودی پایین، یک رنگ (فناوری های چابک) با برچسب Cy3 بود. نمونه های cRNA برچسب دار به miRNA موش هیبریدیزه شدند(میکروRNAها)Microarray 8×60K rel.21.0(Agilent Technologies) at 65°C for 17h using a Gene Expression Hybridization Kit(Agilent Technologies). پس از هیبریدیزاسیون، میکروارای ها با اجزای بسته بافرهای شستشوی بیان ژن (فناوری های چابک) شسته شدند و با اسکنر میکروارای چابک اسکن شدند. شدت سیگنال با استفاده از استخراج ویژگی چابک ver.12.0.3.1 ارزیابی شد.نرمال سازی با استفاده از روش شیفت صدک 90، یک روش معمولا مورد استفاده برای میکروارای، همانطور که قبلا توصیف شده بود، به دست آمد.²⁶نتایج با استفاده از نرم افزار GeneSpring v12.1(فن آوری های چابک) مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. تجزیه و تحلیل آماری با استفاده از ANOVA یک طرفه با یک آزمون تفاوت پس از hoc Tukey صادقانه معنی دار انجام شد. تغییرات را با مقدار برش>4 و یک مقدار P برابر کنید<0.05 were="" considered="" to="" indicate="" statistically="" significant="" differences.="" the="" genespring="" single="" experiment="" analysis="" (sea)bioinformatics="" tool="" was="" used="" for="" computational="" analysis="" to="" identify="" potential="" curated="" canonical="" pathways="" that="" were="" enriched="" in="" the="" transcript="" list="" showing="" a="" significant="" gene="" expression="" difference="" between="" the="" control="" mice,db/db="" mice,db/db="">(میکروRNAها)-181b-5p-mimic-PEI-NPs, and db/db mice+control-miRNA(میکروRNAها)-گروه های PEI-NPs با استفاده از پایگاه داده WikiPathways هدف پیش بینی شده. FmRNAs های miRNAs با استفاده از نرم افزار Target Scan مورد جستجو قرار گرفتند.

ميز من .فهرست miRNAs(میکروRNAها)به صورت دیالي در کليه موش های آکيتا با استفاده از تحليل ميکروارايي بيان شد

کمی زمان واقعی معکوس رونویسی - PCR.جزئیات کمی زمان واقعی معکوس transcrip-tion-PCR(qRT-PCR) اندازه گیری mRNA و miRNA(میکروRNAها)بیان در کلیه موش ها قبلا توصیف شده است.²⁷برای اندازه گیری miRNA(میکروRNAها)بيان، نمونه کليه با استفاده از يک هموژنيزر شيشه ای و پاره کننده ستون فيلتر (QIA shredder column) همگن شد. Qiagen,Hilden, Germany), then RNA was extracted using an miRNeasy Mini Kit(Qiagen). یک میکروگرم از هر نمونه RNA با استفاده از سیستم MIRScript PCR (Qiagen) به cDNA معکوس رونویسی شد. سپس qRT-PCR با استفاده از یک کیت MIScript SYBR Green PCR و پریمرها خاص برای miRNA-20a-5p انجام شد، miRNA-34a-5p,miRNA-125b-5p,miRNA-129-1-3p, miRNA-129b-5p,miRNA-142a-3p,miRNA-142a-5p, miRNA-181b-5p, miRNA-223-3p,miRNA-146a-5p, rmiRNA-455-5p,miRNA-652-3p,miRNA-342-3p,rmiRNA-6401,and miRNA-6980-5p(miScript Primer Assays; Qiagen) ، با توجه به دستورالعمل تولید کننده است. سطح بیان به سطح U6-snuRNA نرمال شد و به عنوان تفاوت برابر (2-△ACT) از سطوح بیان کنترل طبیعی محاسبه شد. سطح بیان U6 از نظر آماری بین همه گروه ها در این مطالعه متفاوت نبود.

برای اندازه گیری miRNA(میکروRNAها)سطح سرمی انسان و موش، RNA از 300 میکرولیتر سرم با استفاده از یک ستون پلاسمایی NucleoSpin miRNA (Macherey-Nagel, Duren, Germany) و یک کیت سرم/پلاسمای miRNeasy (Qiagen) تهیه شد. سپس RNA جداسازی شده با استفاده از کیت miScript I RT (Qiagen)، qRT-PCR با استفاده از کیت PCR سبز MiScript SYBR (Qiagen) انجام شد. Primers for miRNA-20a-5p,miRNA-34a-5p,miRNA-125b-5p,miRNA-129-1-3p,

miRNA(میکروRNAها)-142a-3p,miRNA-1129b-5p,miRNA-142a-5p,miRNA-146a-5p,miRNA-181b-5p,miRNA-455-5p,miRNA-342-3p,n miRNA-223-3p, miRNA-652-3p,miRNA-6401,and miRNA-6980-5p از Qiagen خریداری شد. سطح هر miRNA به عنوان کنترل اندوژن به miRNA-16 نرمال شد. سطح بیان سرمی miRNA-16a-5p بین همه گروه ها در این مطالعه تفاوت آماری نداشت.

برای اندازه گیری بیان mRNA، نمونه های کلیه با استفاده از یک هموژنیزر شیشه ای و یک پاره کننده کول اومن فیلتر (ستون پاره کننده QIA) همگن شدند. Qiagen). RNA با استفاده از کیت جداسازی RNA توتال RNeasy (Qiagen) جدا شد و 1μg از هر نمونه RNA با استفاده از سیستم سنتز رشته اول SuperscriptII (فناوری های زندگی، MA، ایالات متحده آمریکا) رونویسی معکوس شد.qRT-PCR با استفاده از SYBR GreenER qPCR SuperMix (فناوری های زندگی) انجام شد. پرایمرها برای زنجیره کلاژن نوع اول آلفا 1 موش، زنجیره کلاژن نوع چهارم آلفا 1 از تاکارا بیو (شیگا، ژاپن) خریداری شد. بیان هر mRNA هدف به بتا آکتین به عنوان ژن مرجع طبیعی شد.

انجیر ۱.نقشه حرارت از miRNAs دیال بیان شده(میکروRNAها)در کليه موش آکيتا . نقشه گرما خوشه بندی سلسله مراتبی و تغییرات سیستمیک در بیان miRNAs را نشان می دهد(میکروRNAها)در کلیه موش ها از هر گروه (4 نفر در هر گروه). miRNAs نشان داده شده در قرمز نشان داد بیان بالا و کسانی که در سبز نشان داده شده بیان نسبتا کم است. (نسخه رنگی فیفیگور به صورت آنلاین در دسترس است.)

آماده سازی miRNA(میکروRNAها)-181b-5p تقلید.miRNA(میکروRNAها)-181b-5p و درهم RNA کوچک (کنترل- miRNA)توسط Ajinomoto Bio-Pharma Services (اوساکا،ژاپن) سنتز شدند. توالی تقلید miRNA-181b-5p 5'-AACAUUCAUUGCUGUGGUGG-GUU-3 و کنترل-miRNA بود(میکروRNAها)5'-GGUUCGUACGUACACUGUUCA-3'.

تحویل miRNA(میکروRNAها)-181b-5p-PEI-NPs to the kidneys.برای بررسی اثرات miRNA(میکروRNAها)-181b-5p mimic treat-ment,linear PEI-based NPs(in vivo jet PEI; Polyplus-transfection,llkirch-graffenstaden, France) همان طور که قبلاً شرح داده شده بود، مورد استفاده قرار گرفت.²⁷به طور خلاصه، miRNA(میکروRNAها)-PEI-NPs (miRNA∶ 50μg,ratio of nitrogen (N) in the polymer to phosphate (P)in the nucleic acids=6)were dissolved in 200μL of 5٪ glucose solution and injected into db/dbice via a tail vein,according to the manufacturer's protocol. گروه های زیر به عنوان کنترل:(1)littermates طبیعی (m/m)، (2) موش db/db درمان نشده، و (3)موش db/db تزریق شده با کنترل-miRNA(میکروRNAها)-PEI-NPs با استفاده از پروتکل مشابه. بررسی پتانسیل درمانی miRNA-181b-5p برای DKD(بیماری کلیوی دیابتی), ما به مدت 10 هفته به موش های 10 هفته ای db/db به موش های 5p-PEI-181b-181b-PEI-NPs یا کنترل-miRNA-PEI-NPs تزریق شدیم.

انجیر ۲.نقشه حرارت از miRNAs دیال بیان شده(میکروRNAها)در کلیه های موش های db/db. نقشه گرما خوشه بندی سلسله مراتبی و تغییرات سیستمیک در بیان miRNAs در کلیه های هر گروه را نشان می دهد (n=4 در هر گروه). قرمز، بیان بالاتر؛ آبي ، بيان پايين تر . (نسخه رنگی فیفیگور به صورت آنلاین در دسترس است.)

هيستولوژي،فلورسانس، و منmmunohistochemistry.پس از قطع کلیه ها، یک بخش نماینده از هر کلیه بلافاصله در پارافورمالدهید بافر PBS 4 درصد ثابت و در پارافین تعبیه شد. بخش (5 میکرومتر) برای رنگ آمیزی ایمن سازی و اسید شیف دوره ای (PAS) مورد استفاده قرار گرفت. انبساط مثانی در بخش های رنگ آمیزی شده با PAS با محاسبه شاخص مزانگ (M) بر اساس مدل حیوانی Plications Com-plications دیابتی (AMDCC)پروتکل: مساحت (تعداد پیکسل) رنگ آمیزی PAS/مساحت کل (تعداد پیکسل) گلومرولی مورد ارزیابی قرار گرفت. MI حداقل برای 20 گلومرولی در هر گروه (4-3 گلومرولی در هر موش و شش موش دو رشته e در هر گروه) محاسبه شد. Cy3-labeled oligonucleotides(Cy3-miRNA(میکروRNAها); Takara Bio) برای بررسی توزيع کليه miRNA تزريقی وریدی مورد استفاده قرار گرفت.(میکروRNAها)-PEI-NPs، همانطور که قبلا شرح داده شده است.²⁷Brifly,Cy3-miRNA(میکروRNAها)با پي پي ان پيچيده شد و به صورت داخل وریدی به موش های db/db تزريق شد و سپس کليه ها 1 ساعت بعد برداشته شدند. بخش های (ضخامت 5 میکرومتر) به مدت 2 ساعت در دمای اتاق با لوتوس تتراگونولوبوس لکتین با برچسب فلورسین (آزمایشگاه های بردار، CA، ایالات متحده آمریکا) و DAPI به عنوان کان ترستین مورد استفاده قرار گرفت. سپس سطح فلورسانس با استفاده از ميکروسکوپ فلورسانس (BZ-X710) مورد ارزيابی قرار گرفت. Keyence, Osaka, Japan) and BZ-X_Analyzer software(Keyence). برای مطالعه ایمونوشیمیایی، mAbs موش در برابر کلاژن I (NB600-408، Novus Biologicals، CO، USA) و IV (NB120-6586، Novus Biologicals)، و آنتی بادی ثانویه پلی کلونال بز در برابر موش و خرگوش HRP(PI-1000، آزمایشگاه های بردار) استفاده شد. نمونه های بافتی در ترکیب Tissue-Tek OCT (ساکورا فاینتک ژاپن، توکیو، ژاپن) تعبیه شد و در نیتروژن مایع منجمد شد. بخش های کرایاستات (به ضخامت 5 میکرومتر) بر روی اسلایدهای شیشه ای پوشیده از سیلان (ایند شیشه ماتسونامی، اوساکا، ژاپن) نصب شدند.

در هیبریدیزاسیون در جا.ISH for miRNA(میکروRNAها)-125b-5p و miRNA-181b-5p با استفاده از پروب های تشخیص دو دیگوکسیژنین با برچسب miRCURY LNA (Qiagen) انجام شد. یک کاوشگر درهم به عنوان یک کنترل منفی خدمت کرد و U6 به عنوان یک کنترل مثبت خدمت کرد. این رویه بر اساس پروتکل تولیدکننده انجام شد.²⁸بخش های کلیوی موشی پارافین جاسازی شده با پارافین (5 میکرومتر) در PBS دپارافینیزه، شسته و با پروتئیناز K به مدت 10 دقیقه در 37 درجه سانتی گراد درمان شدند. سپس اسلایدها با یک کاوشگر برچسب دار LNA-digoxigenin (40 nM) در یک محفظه مرطوب یک شبه در 60 درجه سانتی گراد انکوبه شدند. پس از شستشو، بخش ها یک شبه با آنتی بادی آنتی دی گوکسیژنین مزدوج به فسفاتاز قلیایی در 4 درجه سانتی گراد انکوبه شدند. سپس اسلایدها با استفاده از کلرید تتراازولیم نیتروبلو/5-بروم-4-کلرو-3'-ایندولی فسفاتاز محلول نمک پتولویدین (Life Tech-nologies)یک شبه در تاریکی در دمای اتاق توسعه داده شدند. سپس فتومیکروگراف ها در زیر میکروسکوپ نوری (BZ-X710؛ BZ-X710) به دست آمد. Keyence).

جدول دوم.فهرست miRNAs(میکروRNAها)به صورت دیاليال در کليه موش های db/db با تجزيه و تحليل ميکروارايي بيان شد

تاييديه مطالعه .این مطالعه مطابق با اصول اعلامیه هلسینکی انجام شد و به تصویب متعهد اخلاق دانشگاه پزشکی جیچی رسید (شماره تایید 17-023، 20 مهر 1396). رضایت آگاهانه کتبی از همه شرکت کنندگان به دست آمده است. آزمایش های حیوانی توسط کمیته اخلاق حیوانات دانشگاه پزشکی جیچی تصویب شد و مطابق با دستورالعمل استفاده و مراقبت از حیوانات تجربی از راهنمای دانشگاه پزشکی جیچی برای حیوانات آزمایشگاهی انجام شد.

آمار.داده ها با استفاده از نرم افزار JMP (نسخه 13.0.0) مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. SAS موسسه Inc,Cary, NC, ایالات متحده آمریکا). نتایج به عنوان وسیله ای برای اس ± بیان می شوند. ابزار مورد بررسی با استفاده از تحليل واريانس يک طرفه مقايسه شد و در صورت وجود تفاوت آماری معنی دار، آزمون توکوی برای مقايسه ابزار دو گروه مختلف انجام شد. برای متغیرهای دسته بندی، تفاوت ها با استفاده از آزمون کای دو مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. رگرسیون لجستیک انجام شد و AUCs محاسبه شد. P<0.05 was="" considered="" to="" represent="" statistical="">

CLICK HERE TO PART II. & III.

اختصارات:BMI= شاخص توده بدن؛ DAPI=4,6-diamidino-2-phenylindole; FITC= fluorescein isothiocyanate; DKD=بیماری کلیوی دیابتی; eGFR= تخمین زده شده میزان فلتراسیون گلومرولار; لیپوپروتیین با چگالی بالا HDL؛ HIGA= ایمونوگلوبولین بالا A; IRI= ischemia-reperfusion injury; LDL= لیپوپروتئين با چگالی کم؛ ns= قابل توجه نیست; PEI-NPs= نانوذرات پلی اتیلنیمین؛ RNU6=U6 هسته ای کوچک 1; SAMP=senescence-accelerated mouse; SAMR=کنترل برای موش حساسیت شتاب; UACR= ادرار نسبت آلبومین به کراتینین; UUO = انسداد ادراری یک طرفه

گیاه سیستانچه

توجه: سنتی چینی گیاهان دارویی cistanche (همچنین به عنوان "گیاهان اژدها" و "جینسنگ بیابان" شناخته می شود)، تنها در بیابان های خشک و گرم رشد می کند. به عنوان یکی از نه گیاهان جاودانه، Cistanche (cistanche tubulosa/cistanche deserticola/desertliving cistanche/cistanche salsa)محتویات با مواد موثر غنی مانند echinacoside، acteoside, گلیکوساید فنیلتانوئید کل, فلاونوئیدها, پلی ساکریدها, و غیره این مواد موثر ساخته شده cistanche یک گیاه تغذیه گرانبها و مواد غذایی برای ایمنی مردم, اندام های داخلی, و سلول های مغزی و سلول های عصبی, و غیره. مطالعات فارماکولوژیک مدرن اثرات زیر از سیستانچه (مزایای سیستانچه) تایید: بهبود ایمنی; بهبود عملکرد جنسی و عملکرد کلیه; ضد خستگی؛ ضد پیری; بهبود حافظه; بیماری ضد پارکینسون؛ بیماری ضد آلزایمر؛ آنتی اکسیدانی؛ سهولت یبوست; ضد التهاب؛ ترویج رشد استخوان, سفید کردن پوست; محافظت از کبد; غیره.

چه سیستانچه ای است