اولین کارآزمایی بالینی انسانی بر روی اثربخشی رنگ‌دهی پوست گلیسینامید هیدروکلراید

مخاطب:joanna.jia@wecistanche.com/ واتساپ: 008618081934791

خلاصه:مطالعه قبلی برخی پپتیدهای ضد ملانوژنیک مولکولی پایین را شناسایی کرد که توالی مشترکی با هورمون محرک ملانوسیت (MSH) دارند و با یک نیمه گلیسینامید خاتمه می‌یابند. گلیسینامید خود نیز فعالیت ضد ملانوژنیک را در سنجش‌های مبتنی بر سلول نشان داد، اما نه گلیسین نوراستیل گلیسینامید. فعال بود که بیانگر ساختار و رابطه فعالیت خاصی بود. هدف از این مطالعه بررسی اثربخشی گلیسینامید هیدروکلراید در کاهش رنگ پوست در افراد انسانی بود. پتانسیل تحریک اولیه پوست گلیسینامید هیدروکلراید با تست پچ در 30 فرد انسانی مورد ارزیابی قرار گرفت. اثر رنگ‌زدایی پوست گلیسینامید هیدروکلراید در یک آزمایش بالینی دوسوکور در 21 فرد انسانی مورد ارزیابی قرار گرفت. محصول آزمایشی و یک محصول کنترلی دو بار در روز به مدت هشت هفته بر روی نقاط مشخص شده در سمت راست یا چپ صورت اعمال شد. پارامترهای رنگ پوست، یعنی شاخص ملانین، مقدار L* (نماینده روشنی پوست)، مقدار a* (قرمزی) و مقدار b* (زردی) با استفاده از ابزار اندازه گیری شد. زاویه فردی توپولوژی (ITAo، نشان دهنده رنگ پوست) از مقادیر L* و b محاسبه شد. درجه پوسترنگدانهبه صورت بصری توسط دو آزمایش کننده ارزیابی شد. آزمایش تحریک اولیه پوست نشان داد که محلول حاوی گلیسین آمید هیدروکلراید تا 10 درصد هیچ واکنش نامطلوبی به پوست ایجاد نمی کند. در تست اثربخشی، محصول مورد آزمایش به طور قابل توجهی شاخص ملانین را کاهش داد و ارزش L* و ITAo را پس از دو هفته استفاده نسبت به مقدار پایه در شروع آزمون. همچنین به طور قابل توجهی درجه را کاهش دادرنگدانهپس از 6 هفته استفاده، نسبت به مقدار پایه. تفاوت در شاخص ملانین، مقدار L*، ITAo، و درجهرنگدانهبین دو گروه آزمایش و کنترل پس از شش هفته یا هشت هفته استفاده از نظر آماری معنی دار شد. هیچ نشانه ای از تحریک پوستی در طول تست اثربخشی مشاهده نشد. مطالعه حاضر نشان می دهد که گلیسین آمید هیدروکلراید پتانسیل زیادی برای استفاده در کنترل هایپرپیگمانتاسیون پوست دارد.

کلید واژه ها:ملانین؛ گلیسین آمید هیدروکلراید؛ رنگ زدایی؛رنگدانه; روشن شدن پوست;سفید شدن پپتید

سیستانچ باعث بهبود سفیدی می شود

1. مقدمه

رنگ پوست انسان عمدتاً توسط محتوا و توزیع مواد رنگدانه های مختلف مانند ملانین، هموگلوبین و کاروتنوئیدها تعیین می شود [1]. عوامل ژنتیکی در درجه اول رنگ پوست را تعیین می کنند، اما به شدت تحت تأثیر عوامل اکتسابی نیز قرار دارند. ملانین از طریق فرآیندی تولید می شود که در آن یک اسید آمینه به نام L-تیروزین در یک سری واکنش های آنزیمی در ملانوزوم ها که اندامک های ملانوسیت هستند متابولیزه می شود. انواع مختلفی از ملانین مانند آسئوملانین و فئوملانین وجود دارد که رنگ های متفاوتی را ایجاد می کنند [2]. ملانوزوم ها ملانین کراتینوسیت های اطراف را تامین می کنند و در نتیجه، ملانین در سراسر پوست پخش می شود و برای تولید رنگ های مختلف پوست بیان می شود [3]. ملانین علاوه بر اثراتی که بر ظاهر بصری پوست دارد، نقش مهمی در محافظت از بدن در برابر سمیت اشعه ماوراء بنفش (UV) دارد [4]. بنابراین، متابولیسم ملانین در پوست به یک موضوع تحقیقاتی مهم از منظر فیزیولوژیکی و زیبایی شناسی تبدیل شده است [5،6].

متابولیسم غیرطبیعی ملانین می تواند باعث انواع مختلفی از بیماری های رنگدانه پوست شود که به دو دسته هیپرپیگمانتاسیون و هیپوپیگمانتاسیون تقسیم می شوند [7،8]. هایپرپیگمانتاسیون زمانی اتفاق می‌افتد که ملانین به دلیل التهاب، افزایش سن، اشعه ماوراء بنفش، آسیب فیزیکی و سایر عوامل تحریک‌کننده داخلی/خارجی، بیش از حد یا به‌طور غیریکنواخت انباشته شود [9،10]. در همین حال، نقص های ژنتیکی یا اپی ژنتیکی تولید اینملانین می تواند منجر به هیپوپیگمانتاسیون شود، مانند آلبینیسم یا ویتیلیگو [11،12].

راهبردهای پیشگیری و درمان هایپرپیگمانتاسیون شامل محافظت از نور، دارودرمانی، درمان جراحی (پیلینگ شیمیایی و درمان با لیزر) و استتار زیبایی است [13-15]. لایه برداری شیمیایی و لیزر درمانی اغلب انجام می شود، اما عوارض جانبی مانند درماتیت و عود مجدد دارند.رنگدانه[16،17]. هیدروکینون در درجه اول به عنوان یک دارو درمانی استفاده می شود، اما به طور بالقوه می تواند باعث تحریک پوست، آلرژی، جهش و سرطان شود [18]. در زمینه آرایشی و بهداشتی،روشن شدن پوستلوازم آرایشی کاربردی حاوی آربوتین، نیاسینامید و مشتقات ویتامین C غالب هستند، اما رضایت مصرف‌کنندگان در مورد ایمنی و کارایی روشن‌کنندگی پوست پایین است [19]. این تیم تحقیقاتی به جستجو پرداخته استروشن شدن پوستعواملی از منابع طبیعی مختلف و ترکیبات طبیعی متعددی مانند اسید p-کوماریک، رسوراترول و لوتئولین 7-سولفات را شناسایی کردند که سنتز ملانین سلولی را از طریق مکانیسم‌های مختلف مهار می‌کنند [20-23].

پپتیدها به طور فزاینده ای به عنوان مواد فعال در محصولات پوست و مراقبت از پوست استفاده می شوند [24،25]. هر چه پپتید کوچکتر باشد، هزینه ساخت آن کمتر است، پایداری آن بیشتر می شود و راحت تر جذب پوست می شود.

مطالعات اخیر ما پپتیدهای ضد ملانوژنیک خاصی با مولکولی کم را شناسایی کردند [26،27]. در این مطالعات، از یک الگوریتم ویژه برای پیش‌بینی توالی پپتیدهای فعال با استفاده از کتابخانه ترکیبی پپتید مصنوعی پوزیشنی استفاده شد [28،29]. با استفاده از این روش، شناسایی پپتیدهای ضد ملانوژن با ارزیابی فعالیت 80 مخزن تترا پپتیدی به جای ارزیابی فعالیت همه 160،{9}} نوع احتمالی تترا پپتید امکان پذیر شد [27]. فعالیت ضد ملانوژنیک پپتیدها ابتدا در سلول‌های ملانوم B{13}F10 تحت درمان با هورمون محرک ملانوسیت (MSH) ارزیابی شد. توالی تترا پپتید فعال R-(F/L)-(C/W)-(G/R)-NH2 پیش بینی شد. از بین تترا پپتیدهای آزمایش شده، RFWG-NH2 و RLWG-NH2 فعالیت ضد ملانوژنی بالایی را نشان دادند. تترا پپتید FRWG-NH2، که دارای همان توالی جدا از -MSH (استیل-SYSMEHFRWGKPV-NH2) است، نیز فعالیت مشابهی را نشان داد. در میان سه پپتید تست شده، FWG-NH2، LWG-NH2، و RWG-NH2 نسبتا فعال بودند. دی پپتید WG-NH2 و G-NH2 (گلیسین آمید) فعالیت ضد ملانوژنیک خود را حفظ کردند، در حالی که نه استی-G-NH2 و نه G (گلیسین) فعال بود. تصور می‌شود که این پپتیدهای ضد ملانوژنیک مولکولی پایین گیرنده بنیادکورتین 1 (MC1R) را هدف قرار می‌دهند زیرا توالی مشابهی با -MSH دارند. این پپتیدهای ضد ملانوژنیک مولکولی پایین ممکن است در مطالعه عملکردهای فیزیولوژیکی وابسته به MC1R ملانوسیت ها بسیار مفید باشند [30].

نشان داده شد که گلیسینامید با کاهش فعال‌سازی پروتئین متصل شونده به عنصر پاسخ‌دهنده به cAMP (CREB) و بیان ژن فاکتور رونویسی مرتبط با میکروفتالمیا (MITF) و تیروزیناز (TYR) در پاسخ به -MSH، تولید ملانین سلولی را بسیار موثر مهار می‌کند [27] در مطالعه حاضر، ما نتایج اولین آزمایش استفاده از گلیسینامید (به شکل نمک هیدروکلراید) را که کوچکترین پپتید ضد ملانوژنیک مولکولی کم است، گزارش می کنیم.

2. مواد و روشها

2.1. مواد

گلیسینامید هیدروکلراید از Sigma-Aldrich (سنت لوئیس، MO، ایالات متحده آمریکا)، HangzhouDayangchem Co., Ltd. (Hangzhou، چین) و Tokyo Chemical Industry Co., Ltd. (توکیو، ژاپن) خریداری شد. یک محصول آزمایشی (Melapep) ) حاوی 10 درصد گلیسین آمید هیدروکلراید به عنوان ماده موثره توسط Ruby Crown تهیه شده است. Co., Ltd. (www.rubycrown.com، Daegu، کره). محصول کنترل شامل همان فرمول بدون گلیسینامید هیدروکلراید بود.

2.2. کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC)

تجزیه و تحلیل کروماتوگرافی محصولات با استفاده از سیستم HPLC Waters Alliance (Waters, Milford, MA, USA) متشکل از یک ماژول جداسازی Waters e2695 و یک آشکارساز آرایه فوتودیود Waters 2996 انجام شد. فاز ثابت یک ستون 5 میکرومتر، 4.6 میلی‌متر × 25{{10}} میلی‌متر Hector-M C18 بود (RS Tech Co., Daejeon, Korea) و فاز متحرک 20 بود. mM اسید فسفریک حاوی 5.{19}} mM سدیم 1-اکتان سولفونات (pH 3.0). سرعت جریان فاز متحرک 0.6 میلی لیتر در دقیقه بود. طول موج تشخیص 210 نانومتر بود. یک محصول 10 بار با فاز متحرک رقیق شد و قبل از تزریق از فیلتر سرنگ (0.2 میکرومتر، cat#431219، Corning، Inc. NY، USA) عبور کرد. حجم تزریق نمونه 10 میکرولیتر بود.

2.3. تست اولیه تحریک پوستی

یک آزمایش اولیه تحریک پوست مطابق با دستورالعمل‌های شورای محصولات مراقبت شخصی (PCPC) (2014) و روش‌های عملیاتی استاندارد (SOP) شرکت Dermapro Co., Ltd. (www.dermapro.co.KR، سئول، کره) انجام شد تا مشخص شود که آیا محصولات آزمایشی پوست انسان را تحریک کردند. پروژه آزمایشی (شماره 1-220777-AN-02-DICN19165) در 1 آگوست 2019 توسط کمیته اخلاق زیستی شرکت Dermapro Co., Ltd. تأیید شد و مطابق با اصول اخلاقی مبتنی بر انجام شد. در بیانیه هلسینکی

آزمودنی ها از بین داوطلبان سالمی که معیارهای ورود و خروج را دارا بودند انتخاب شدند. ما رضایت آگاهانه کتبی از افراد دریافت کردیم.

2.3.1. معیارهای ورود

(1) متقاضیان سالم 20-60 ساله بدون بیماری پوستی. (2) متقاضیانی که پس از اطلاع از هدف و محتوای آزمون، داوطلبانه فرم رضایت نامه کتبی را قبل از آزمون امضا کردند. (4) متقاضیانی که می توانند برای کل دوره آزمون پیگیری شوند.

2.3.2. معیارهای خروج

(1) زنانی که باردار، شیرده بودند یا احتمال باردار شدن داشتند. (2) متقاضیان با سابقه بیماری های پوستی، از جمله درماتیت آتوپیک، پسوریازیس، اگزما، و آلرژی های فصلی در آخرین ماه قبل از آزمایش. (3) متقاضیان با غیر طبیعیرنگدانه، ممکن است در امتیاز دهی در محل آزمون اختلال ایجاد کند. (4) متقاضیانی که داروهای ضد التهاب، آنتی هیستامین یا سرکوب کننده سیستم ایمنی مصرف می کنند. (5) متقاضیانی که در دو هفته گذشته قبل از آزمایش از داروهای ضد التهابی موضعی در محل آزمایش استفاده کردند. (6) متقاضیان مبتلا به بیماری های پوستی که ممکن است با هدف آزمایش تداخل داشته باشند. (7) متقاضیان با سابقه بیماری های خودایمنی یا اختلالات نقص ایمنی. (8) متقاضیانی که در هفته آخر قبل از آزمایش، ایمونوتراپی دریافت کردند یا قرار بود در طول دوره آزمایش تحت درمان قرار گیرند. (9) متقاضیانی که تحت درمان بیماری های مزمن مانند آسم و دیابت بودند. (10) متقاضیانی که در چهار هفته گذشته قبل از آزمون در آزمون های دیگر شرکت کرده اند یا در آزمون مشابه شرکت کرده اند. (11) متقاضیانی که در پاسخ به نوار چسب، حساسیت پوستی را تجربه کردند.

2.3.3. شرایط شرکت

(1) آزمودنی ها در حین چسباندن پچ اجازه آب در محل آزمایش را نداشتند. (2) اگر آزمودنی نیاز به مصرف یا استفاده از داروها داشت، باید به افسر آزمایش اطلاع داده شود. (3) موضوع باید با برنامه بازرسی مطابقت داشته باشد. (4) آزمودنی‌ها باید تمام علائم غیرطبیعی پوستی را که در طول دوره آزمایش رخ داده بود، به آزمایش‌گر اطلاع دهند.

2.3.4. معیارهای حذف آزمودنی ها در طول دوره آزمون

(1) اگر آزمودنی به دلیل تصادف ناگهانی، بیماری، حاملگی و غیره داوطلبانه از آزمایش انصراف داد. (2) اگر یک واکنش نامطلوب پوستی جدی ناشی از ماده آزمایش وجود داشته باشد. (3) اگر آزمودنی از پروتکل آزمون پیروی نکرد. (4) اگر آزمایش به دلیل شرایط خاص به درستی انجام نشد، مثلاً اگر تماس با آزمودنی ممکن نبود.

2.3.5. پچ تست

مواد آزمایشی (15{7}} میکرولیتر) با استفاده از پیپت Microman M250 روی Finn Chambers® (Smart Practice، Hillerød، دانمارک) استفاده شد (Gilson، Villiers le bel، فرانسه). محفظه ها به پشت آزمودنی ها متصل شدند و با نوار Micropore (3M, St. Paul, MN, USA) به مدت 24 ساعت محافظت شدند. آزمایش‌کنندگان واکنش‌های پوستی را در آزمودنی‌ها دو بار، اول 2{17}} دقیقه ارزیابی کردند. پس از حذف پچ و سپس 24 ساعت بعد، با استفاده از سیستم درجه بندی واکنش پوستی که توسط فروش و کلیگمن [31] توضیح داده شده است، با تغییرات جزئی به شرح زیر است: 0، هیچ واکنش قابل مشاهده ای وجود ندارد. 1، اریتم خفیف لکه دار یا منتشر. 2، اریتم نسبتا یکنواخت؛ 3، اریتم شدید همراه با ادم. و، 4، اریتم شدید همراه با ادم و وزیکول. نمره پاسخ (R بر حسب درصد) به صورت R=(Σ (درجه واکنش مشاهده شده× فراوانی پاسخ)/(مجموع چهار نمره× مجموع دو برابر مشاهدات × تعداد کل افراد)) × 100 ( درصد). پتانسیل تحریک اولیه پوست مواد مورد آزمایش بر اساس R به شرح زیر توصیف شد: R < 0.87="" درصد،="" غیر="" تحریک="" کننده="" خفیف.="" 0.87="" درصد="" کمتر="" یا="" مساوی="" r="">< 2.42="" درصد،="" خفیف="" تحریک="" کننده.="" 2.42="" درصد="" کمتر="" یا="" مساوی="" r="">< 3.44="" درصد،="" نسبتاً="" تحریک="" کننده.="" و="" r="" بزرگتر="" یا="" مساوی="" 3.44="" درصد،="" به="" شدت="" تحریک="" کننده="">

2.4. تست اثربخشی رنگدانه پوست

آزمایشی برای ارزیابی اثربخشی رنگدانه پوست محصول آزمایش انجام شد. پروژه آزمایشی (شماره 1-220777-AN-02-DICN19168) در 16 اوت 2019 توسط کمیته اخلاق زیستی Dermapro Co., Ltd. تأیید شد و مطابق با اصول اخلاقی بر اساس اعلامیه هلسینکی انجام شد. آزمودنی ها از بین داوطلبان سالمی که معیارهای ورود و خروج را دارا بودند انتخاب شدند. ما رضایت آگاهانه کتبی را از بیمار (آزمودنی‌ها) دریافت کردیم.

2.4.1. معیارهای ورود

(1) مردان یا زنان 20 تا 60 ساله با هیپرپیگمانتاسیون، مانند ملاسما یا لنتیگو، روی صورت. (2) افراد سالم بدون بیماری‌های فیزیکی حاد یا مزمن، از جمله بیماری‌های پوستی. (3) افرادی که تحت نوع II، III و IV طبقه‌بندی نوع پوست فیتزپاتریک قرار دارند. (4) متقاضیانی که از هدف، محتویات و غیره آزمون مطلع شدند و داوطلبانه موافقت نامه آزمون را امضا کردند. (5) متقاضیانی که در طول آزمون قابل پیگیری بودند.

2.4.2. معیارهای خروج

(1) کسانی که باردار، شیرده بودند یا احتمال باردار شدن داشتند. (2) کسانی که سابقه حساسیت به نور یا حساسیت به نور دارند. (3) کسانی که بیش از یک ماه از داروهای خارجی حاوی استروئید برای درمان بیماری های پوستی استفاده می کردند. (4) کسانی که در آزمون های مشابه در 6 ماه قبل از آزمون شرکت کردند. (5) کسانی که پوست حساس و تحریک پذیر دارند. (6) کسانی که دارای ناهنجاری های پوستی مانند لکه ها، آکنه، اریتم، گشاد شدن مویرگ ها و غیره در محل آزمایش هستند. (7) کسانی که مواد آرایشی یا داروهای مشابه یا مشابه را در محل آزمایش ظرف سه ماه از شروع آزمایش استفاده کردند. (8) کسانی که داروها یا غذاها را برایروشن شدن پوستاثرات (9) مبتلایان به آتوپیکدرماتیت یا سایر بیماری های عفونی پوستی. (10) کسانی که درمان دارویی (لایه برداری پوست، بوتاکس، سایر محصولات مراقبت از پوست و غیره) را در مدت 6 ماه قبل از آزمایش در محل آزمایش دریافت کردند. (11) کسانی که ایمن سازی، آنتی هیستامین ها، عوامل ضد التهابی و غیره را ظرف سه ماه قبل از آزمایش دریافت کردند. (13) افراد مبتلا به بیماری‌های مصرفی مزمن (آسم، دیابت، فشار خون بالا، و غیره). (15) کسانی که داروهایی مصرف کردند که باعث ایجاد حساسیت به نور می شود. (16) کسانی که توسط آزمایش کننده برای شرکت در آزمون ناسازگار تشخیص داده شدند.

2.4.3. شرایط شرکت

(1) آزمودنی‌ها نباید در طول دوره آزمایش از لوازم آرایشی یا داروهایی که ادعای عملکرد دارند استفاده نمی‌کردند. (2) آزمودنی‌ها باید از قرار گرفتن در معرض نور خورشید بیش از حد طبیعی در زندگی روزمره در طول دوره آزمایش اجتناب می‌کردند و هنگام بیرون رفتن از کرم ضد آفتاب استفاده می‌کردند. (3) آزمودنی‌ها نباید محصولات آزمایشی را اشتباه بگیرند و باید آن‌ها را همانطور که تجویز شده به کار می‌بردند. (4) به غیر از محصولات آزمایشی، آزمودنی ها نباید محصولات آرایشی و بهداشتی را که در طول دوره آزمایش استفاده می کردند، تغییر دهند. (5) آزمودنی‌ها باید علائم غیرطبیعی را به آزمایش‌گر گزارش کنند. (6) آزمودنی‌ها باید دستورالعمل‌های مربوط به استفاده و محدودیت‌های محصولات را صادقانه دنبال کنند. (7) آزمودنی ها باید از برنامه بازرسی پیروی می کردند و استفاده از محصولات را به آزمایشگر تأیید می کردند.

2.4.4. معیارهای حذف آزمودنی ها در طول دوره آزمون

(1) اگر آزمودنی به دلیل تصادف ناگهانی، بیماری، حاملگی و غیره داوطلبانه از آزمایش انصراف داد. (2) اگر یک واکنش نامطلوب جدی ناشی از ماده آزمایشی وجود داشته باشد. (3) اگر آزمودنی با پروتکل آزمون مطابقت نداشت. (4) اگر شرایط خاصی مانع از آزمون شد، به عنوان مثال، اگر امکان ردیابی موضوع وجود نداشت. (5) اگر آزمودنی بیش از حد نوشید یا سیگار کشید یا در معرض اشعه ماوراء بنفش بیش از حد قرار گرفت.

2.4.5. کاربرد محصولات آزمایشی

محصولات آزمایش و کنترل (0.6 میلی‌لیتر) در 4 × 3 سانتی‌متر مربع ورقه‌های پارچه‌ای نبافته (نام محصول، نوع بافت پوست پنبه) خریداری شده از آبی و صورتی (Gimpo-si، کره) خیس شدند. که سپس به صورت جداگانه برای استفاده توسط آزمودنی ها بسته بندی شدند.

آزمون دو سو کور بود. نه به آزمایش کننده ها و نه به آزمودنی ها گفته نشد کدام محصول کدام است. پس از دریافت محصولات آزمایشی در همان بسته‌بندی از ارائه‌دهنده، یک مدیر محصول آزمایشی بسته‌ها را با کدهای آزمایشی در اتاق جداگانه‌ای که برای آزمایش‌کنندگان یا آزمودنی‌ها قابل دسترسی نبود برچسب‌گذاری کرد. آزمايش كنندگان محصولات آزمايشي را از مدير محصول آزمايشي در حالت كور دريافت كردند و آزمودني ها نيز محصولات را در حالت كور از تستر دريافت كردند.

برای تخصیص محصولات آزمون به آزمودنی ها از روش تصادفی بلوکی استفاده شد. یک جدول تخصیص تصادفی بلوکی (SSPP، SPSP، SPPS، PPSS، PSPS، و PSSP) به یک آزمودنی ارائه شد تا ترتیب محصولات آزمایشی، S یا P، توسط خودش و سه آزمودنی دیگر در ترتیب استفاده شود.

آزمودنی ها پس از شستن صورت و قبل از استفاده از هر گونه لوازم آرایشی، دو بار در روز، صبح ها و عصرها، به مدت هشت هفته از محصولات آزمایش استفاده کردند. آزمودنی‌ها طبق توصیه ارائه‌دهنده، آزمایش و محصولات کنترل را به ترتیب به مکان‌های تعیین‌شده در سمت چپ و راست صورت (یا بالعکس) به مدت 30 دقیقه متصل کردند.

2.4.6. ارزیابی رنگ پوست

آزمودنی ها هر دو هفته یک بار برای ارزیابی پوست خود به مرکز تحقیقات مراجعه می کردند. آزمودنی ها پس از شستن صورت خود به مدت 20 دقیقه استراحت کردند. قبل از ارزیابی پوست در آزمایشگاه در دمای 2 ± 22 و رطوبت نسبی 5 ± 50 درصد نگهداری می شود.

شاخص ملانین و شاخص اریتم با استفاده از Mexameter® MX18 (Courage plus Khazaka electronic GmbH، کلن، آلمان) اندازه‌گیری شد. کاوشگر مگزامتر سه طول موج خاص از نور ساطع می کند (سبز، λ=568 نانومتر، قرمز، λ=660 نانومتر، و مادون قرمز، λ=880 نانومتر)، و یک گیرنده نور بازتاب شده توسط پوست را اندازه می‌گیرد. . اندازه گیری ها سه بار تکرار و میانگین گیری شد.

رنگ پوست با استفاده از فضای رنگی Commission Internationale de l'Eclairage Lab بر اساس درجه روشنی (L*)، درجه سبز تا قرمز (a*) و درجه آبی به زرد (b*) بیان می شود [32]. پارامترهای رنگ پوست، L*، a* و b* با استفاده از اسپکتروفتومتر® CM{1}}d (مینولتا، توکیو، ژاپن) اندازه‌گیری شدند [32]. زاویه گونه‌شناسی فردی (ITA◦) که رنگ پوست را نشان می‌دهد با استفاده از معادله محاسبه شد: ITA◦=(مماس قوس [(L*-50)/b*])(180/3.14159) [33].

ارزیابی بصری توسط دو آزمایش کننده انجام شد. آنها به طور مستقل درجه رنگدانه پوست را در مقیاسی از {{0}} تا 9 (0، روشن؛ 9، تیره؛ افزایش، 0.5) ارزیابی کردند. اگر مقدار ضریب همبستگی درون طبقه‌ای بین دو آزمایش‌کننده بیشتر از 8/0 بود، داده‌ها پذیرفته شده و از مقادیر متوسط ​​استفاده می‌شود. عکس هایی از پوست هنگام استفاده از VISIA® (Canfield Scientific, Inc., Fairfield, New Jersey, USA) گرفته شد. برای ارزیابی ایمنی پوست، آزمایش‌کنندگان سوزش پوست را بررسی کردند و آزمودنی‌ها در هر نقطه زمانی ارزیابی، خودارزیابی تحریک پوست را انجام دادند.

2.4.7. ارزیابی عوارض جانبی پوست

در طول دوره آزمایشی هشت هفته‌ای، آزمودنی‌ها هر دو هفته یک بار از موسسه بازدید می‌کردند. در هر بازدید، آزمایش‌کنندگان علائم ذهنی را با این سؤال که آیا افراد در دو هفته گذشته واکنش‌های نامطلوب پوستی مانند خارش، سوزش، غلغلک، سوزش، سوزش، سفتی و سفت شدن را تجربه کرده‌اند، ارزیابی کردند. از آزمودنی‌ها خواسته شد در صورت بروز واکنش‌های نامطلوب پوستی بین فواصل ویزیت، فوراً گزارش دهند. آزمایش‌کنندگان همچنین هرگونه واکنش نامطلوب پوستی، مانند آسریتم، ادم، اندازه و پاپول را برای ارزیابی علائم عینی بررسی کردند.

2.5. تحلیل آماری

داده ها با استفاده از بسته نرم افزاری SPSS (IBM, Chicago, IL, USA) مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. داده ها به صورت میانگین ± انحراف استاندارد (SD) بیان می شوند. توزیع نرمال داده ها با استفاده از آزمون Shapiro-Wilks تأیید شد و در صورتی که کورتوز و چولگی در محدوده ± پیش همگنی آزمون باشند، نرمال بودن پذیرفته شد و قبل از آزمون با استفاده از آزمون Pairedt تأیید شد. تغییرات وابسته به زمان در مقایسه با مقدار پایه، و تفاوت بین گروه‌های آزمون و کنترل در هر نقطه زمانی با استفاده از آنالیز واریانس اندازه‌گیری‌های مکرر برای مقادیر پارامتریک، و آزمون رتبه‌بندی علامت‌دار پست هوک Wilcoxon برای مقادیر غیرپارامتریک مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. نرخ تغییر (درصد) از مقدار پایه به شرح زیر محاسبه شد. نرخ تغییر=[مقدار پس از درمان-مقدار پایه قبل از درمان)/مقدار پایه قبل از درمان] × 100 (درصد).

3. نتایج

3.1. محصولات تست

در این مطالعه از یک محصول آزمایشی حاوی 10 درصد گلیسینامید هیدروکلراید و یک محصول شاهد از همان فرمول بدون هیدروکلراید گلیسین آمید استفاده شد. علاوه بر ماده اصلی، محصولات حاوی گلیسیرین، 1،2-هگزان دیول و آب بودند. جدول 1 ترکیب محصول آزمایشی و محصول کنترل را نشان می دهد.

کروماتوگرام های HPLC معمولی محصولات آزمایش و کنترل در شکل 1 نشان داده شده است. پیک گلیسینامید هیدروکلراید در کروماتوگرام HPLC با یک فلش نشان داده شده است. علاوه بر این، شکل 1 ساختار شیمیایی را نشان می دهد.

در HPLC، سدیم 1-اکتان سولفونات در فاز متحرک به عنوان یک عامل جفت یونی گنجانده شد تا حفظ فرم پروتونه شده گلیسین آمید را افزایش دهد، که در غیر این صورت خیلی سریع از ستون اکتادسیل سیلیکا با فاز معکوس شسته می شد. وجود پیوند آمیدی جذب کننده اشعه ماوراء بنفش در گلیسین آمید هیدروکلراید امکان تشخیص در 210 نانومتر را فراهم می کند.

3.2. تست اولیه تحریک پوستی

در این آزمون 31 آزمودنی زن که با معیارهای ورود و خروج مطابقت داشتند در مراحل اولیه آزمون شرکت کردند. با این حال، یک آزمودنی ترک تحصیل کرد (DSA-19046-10؛ کناره گیری داوطلبانه)، بنابراین در مجموع 30 نفر کل آزمون را تکمیل کردند. میانگین سنی آزمودنی‌ها 13/7 ± 43/40 سال، مسن‌ترین شرکت‌کننده 50 سال و جوان‌ترین شرکت‌کننده 21 سال بود.

آزمایش پچ انسدادی به منظور ارزیابی ایمنی پوست محصولات انجام شد. همانطور که در جدول 2 نشان داده شده است، افراد تحت درمان با آزمایش، یک محصول کنترل و یک مرجع هیچ واکنش نامطلوب پوستی را در دو زمان مشاهده مختلف نشان ندادند. بنابراین نمره پاسخ در همه موارد صفر بود که نشان می‌دهد پتانسیل تحریک اولیه پوست این محصولات بسیار پایین است و می‌توان آن‌ها را به عنوان «غیر تحریک‌کننده/کمی تحریک‌کننده» طبقه‌بندی کرد.

3.3. تست اثربخشی رنگدانه پوست

آزمون با 23 آزمودنی زن آغاز شد، اگرچه دو نفر متعاقبا حذف شدند (#16، انصراف داوطلبانه؛ شماره 18، عدم انطباق با پروتکل)، بنابراین تعداد نهایی شرکت‌کنندگان 21 نفر بود. اطلاعات مربوط به افراد در یک نظرسنجی مبتنی بر پرسشنامه جمع‌آوری شد. میانگین سنی افراد مورد مطالعه 14/4 ± 43/48 سال بود. مسن ترین شرکت کننده 55 ساله بود. و جوانترین آنها 41 سال داشت. جدول 3 ویژگی های پوستی افراد مورد بررسی را نشان می دهد.

یک آزمایش دوسوکور به منظور ارزیابی اثربخشی رنگدانه محصول مورد آزمایش انجام شد. نه آزمایش کننده و نه آزمودنی قادر به تمایز بین محصول آزمایش و محصول کنترل نبودند و کارآزمایی بالینی طبق روش تجویز شده انجام شد. آزمودنی ها محصول آزمایش و محصول کنترل را دو بار در روز به مدت هشت هفته در سمت چپ یا راست صورت قرار دادند و هر دو هفته یک بار برای ارزیابی پوست به موسسه مراجعه کردند.

برای ارزیابی ابزاری پارامترهای رنگ پوست از دو نوع دستگاه استفاده شد. ابتدا شاخص ملانین و شاخص اریتم با استفاده از هگزامتر اندازه‌گیری شد. همانطور که در جدول 4 و شکل 2 الف نشان داده شده است، کاهش قابل توجهی در شاخص ملانین در دو، چهار، شش و هشت هفته در هر دو گروه آزمایش و کنترل در مقایسه با مقادیر پایه قبل از شروع آزمایش مشاهده شد. زمانی که محصول آزمایشی برای دو، چهار، شش و هشت هفته، کاهش قابل توجهی در شاخص ملانین در مقایسه با مقدار پایه وجود داشت. نرخ کاهش شاخص ملانین پس از دو هفته 1.48 درصد، پس از چهار هفته 2.87 درصد، پس از شش هفته 3.92 درصد و پس از هشت هفته 5.88 درصد بود. تفاوت معنی داری بین گروه آزمایش و کنترل در شش و هشت هفته پس از شروع آزمایش مشاهده شد. از سوی دیگر، هیچ تغییری در شاخص اریتم در گروه آزمایش یا گروه کنترل در مقایسه با مقادیر پایه اندازه گیری شده قبل از آزمایش مشاهده نشد. شروع آزمون (جدول 5 و شکل 2 ب).

ما همچنین از یک اسپکتروفتومتر برای اندازه گیری مقادیر L*، a* و b* استفاده کردیم که به ترتیب نشان دهنده روشنی پوست، قرمزی و زردی بودند. همانطور که در جدول 6 و شکل 2c نشان داده شده است، افزایش قابل توجهی روشنی پوست (مقدار L*) در هفته های دو، چهار، شش و هشت در هر دو گروه آزمایش و کنترل در مقایسه با مقادیر پایه قبل از شروع آزمایش مشاهده شد. در مقایسه با مقادیر پایه، محصول آزمایشی مقدار L* را به میزان 0.88 درصد پس از دو هفته، 0.85 درصد پس از چهار هفته، 1.16 درصد پس از شش هفته و 1.40 درصد پس از هشت هفته افزایش داد. . تفاوت معنی داری بین محصول آزمایشی و محصول کنترل در شش و هشت هفته پس از شروع آزمایش مشاهده شد. از سوی دیگر، اگرچه تغییراتی در مقادیر * و b* در هر دو گروه آزمایش و گروه کنترل نسبت به قبل از شروع آزمایش وجود داشت، اما این تغییرات سازگار نبودند (جدول 7 و 8، شکل 2d، e). مقدار*در هفته دوم در گروه کنترل و هفته دوم و هشتم در گروه آزمایش به طور موقت کاهش یافت. ارزش* گروه آزمایش در هفته هشتم کمتر از گروه کنترل بود. مقدار b* فقط در هفته هشتم در گروه کنترل کاهش یافت و تفاوتی در مقدار b* بین گروه کنترل و آزمون مشاهده نشد.

ITA محاسبه شده از مقادیر L* و b* برای بیان رنگ پوست استفاده شد. هر چه ITA◦ بالاتر باشد، رنگ پوست روشن تر است. همانطور که در جدول 9 و شکل 2f نشان داده شده است، تغییرات قابل توجهی در رنگ پوست در دو هفته، چهار هفته، شش هفته و هشت هفته در هر دو گروه آزمایش و گروه کنترل در مقایسه با مقادیر پایه قبل از شروع آزمایش مشاهده شد. در مقایسه با مقادیر پایه، محصول آزمایشی ITA◦ را 3.28 درصد پس از دو هفته، 4.43 درصد پس از چهار هفته، 6.48 درصد پس از شش هفته و 8.07 درصد پس از هشت هفته افزایش داد. تفاوت معنی‌داری در ITA◦ بین محصول آزمایش و محصولات کنترل در هشت هفته پس از شروع آزمایش مشاهده شد.

همانطور که در جدول 10 و شکل 3 الف نشان داده شده است، محل پوستی که محصول کنترل در آن اعمال شد، از نظر درجه تغییر چندانی نداشت.رنگدانهبه مدت هشت هفته، اما درجه رنگدانه در محل پوستی که محصول آزمایشی در آن استفاده شد، پس از شش هفته و هشت هفته به طور قابل توجهی کاهش یافت. هنگامی که محصول آزمایشی به مدت شش و هشت هفته استفاده شد، میزان رنگدانه به ترتیب 1.42 درصد و 3.45 درصد نسبت به مقدار پایه قبل از شروع آزمایش کاهش یافت. در هفته هشتم پس از شروع آزمون نیز تفاوت معنی داری در درجه وجود داشترنگدانهبین محصول آزمایشی و محصول کنترلی. شکل 3b تصاویری از دو سوژه انسانی را نشان می دهد.

هیچ واکنش نامطلوبی به محصولات آزمایش و کنترل گزارش شده توسط آزمودنی‌ها که توسط آزمایش‌کنندگان در طول هشت هفته شناسایی شده بودند، وجود نداشت.

4. بحث

این مطالعه اولین مطالعه ای است که ایمنی و اثربخشی رنگدانه گلیسین آمید هیدروکلراید اعمال شده بر روی پوست صورت انسان را گزارش می کند. در آزمایش اولیه تحریک پوست، یک محصول آزمایشی حاوی 10 درصد گلیسین آمید هیدروکلراید هیچ واکنش نامطلوبی را در 30 فرد انسانی ایجاد نکرد. در آزمون اثربخشی دوسوکور، محصول آزمون و محصول کنترل به ترتیب در سمت چپ و راست صورت در 21 آزمودنی که به طور تصادفی در گروه‌های مختلف قرار گرفتند، استفاده شد. در طول دوره آزمایشی هشت هفته‌ای، پوسته‌هایی که محصول آزمایشی در آن اعمال شد، نسبت به محل‌هایی که محصول کنترل در آن اعمال شده بود، سبک‌تر شدند. هر دو ارزیابی بصری از درجهرنگدانهو ارزیابی ابزاری شاخص ملانین، سفتی پوست، و رنگ پوست از کارآیی رنگ‌زدایی محصول آزمایشی حاوی هیدروکلراید گلیسینامید پشتیبانی کرد.

اثربخشی یک محصول بر روی پوست انسان را می توان با استفاده از مدل های برنزه سازی مصنوعی و هیپرپیگمانتاسیون طبیعی ارزیابی کرد [34-36]. در پژوهش حاضر با استفاده از یک طبیعیرنگدانهمدل، تغییرات پارامترهای رنگ پوست در گروه‌های آزمایش و کنترل در طول هشت هفته آزمایش در فواصل دو هفته‌ای پیگیری شد. محصول کنترل که حاوی گلیسینامید هیدروکلراید نبود، همچنین تغییرات قابل توجهی در شاخص ملانین، مقدار L* و ITA از دو هفته پس از شروع آزمایش ایجاد کرد. علت دقیق این امر در حال حاضر نامشخص است و عوامل متعددی ممکن است در این تغییرات نقش داشته باشند. ترکیبات موجود در محصول کنترل، مانند گلیسیرین و 1،2-هگزان دیول، ممکن است وضعیت سطح پوست را تغییر داده، تمیزی، درخشندگی و روشنایی را بهبود بخشد. با این حال، تغییرات اضافی در پارامترهای ذکر شده در بالا پس از دو هفته در گروه کنترل معنی دار نبود. علاوه بر این، درجه ازرنگدانه(از نظر بصری ارزیابی شد) در مقایسه با قبل از شروع آزمایش، محصول کنترل به طور قابل توجهی کاهش پیدا نکرد. بنابراین در نظر گرفته می‌شود که محصول کنترلی بسیار ضعیف استروشن شدن پوستاثر در صورت وجود

در مورد محصول آزمایشی، علاوه بر تغییر قابل توجهی در شاخص ملانین، مقدار L* و ITAo در دو هفته پس از شروع آزمایش، این تغییر تمایل به افزایش تدریجی پس از آن داشت. علاوه بر این، درجهرنگدانهبه سطح قابل توجهی کمتر از مقدار پایه رسیده است. این نشان می دهد که استفاده از محصول آزمایشی می تواند رنگ پوست را در مقایسه با استفاده از هیچ محصولی بهبود بخشد.

از هفته ششم شروع آزمون، تفاوت معنی داری در شاخص ملانین و مقدار L* بین گروه آزمایش و گروه کنترل وجود داشت و در هفته هشتم نیز تفاوت در ITAo و درجه وجود داشت.رنگدانه. این نتایج این نتیجه را تأیید می کند که تفاوت در اثربخشی بین محصولات آزمایش و کنترل به دلیل وجود یا عدم وجود هیدروکلراید گلیسین آمید است. بنابراین، اثربخشی رنگدانه پوست محصول آزمایشی به دلیل جزء اصلی آن، گلیسینامید هیدروکلراید بود.

در این مطالعه محلول گلیسینامید هیدروکلراید آغشته به ورقه های پارچه نبافته بر روی صورت مالیده شد و نتایج مثبتی در مورد اثربخشی رنگدانه پوستی آن به دست آمد. این روش کاربرد مؤثر بوده است، اما بررسی اینکه آیا تغییر فرمولاسیون و روش استفاده را دارد ارزش بررسی دارد. کارایی محصول را بهبود می بخشد. علاوه بر کاربرد موضعی روی پوست، روش های تجویز خوراکی و تزریق نیز باید مورد بررسی قرار گیرند تا اثربخشی بالینی آنها در مطالعات آینده مشخص شود.

تجزیه و تحلیل آماری برای تفاوت‌های بین گروه‌های آزمایش و کنترل با استفاده از ANOVA اندازه‌گیری‌های مکرر با مقایسه‌های زوجی انجام شد. علاوه بر این، تفاوت های بین گروهی شاخص ملانین، مقدار L*، ITAo ورنگدانهدرجه همگی پس از 8-درمان هفتگی از نظر آماری معنادار بودند. در مطالعه حاضر، نرخ کاهش شاخص ملانین توسط محصول آزمایشی حاوی 10 درصد گلیسین آمید هیدروکلراید 5.88 درصد بود (پایه، 22.70 ± 184.03؛ هفته هشتم، 20.79 ± 173.30). Watanabe و همکاران. گزارش شده استسفید شدن پوستاثرات گلوتاتیون اکسید شده موضعی در یک کارآزمایی بالینی دوسوکور و کنترل شده با دارونما در سی زن سالم [36]. درمان های موضعی یک محصول آزمایشی حاوی 2 درصد گلوتاتیون اکسید شده به مدت 10 هفته، شاخص ملانین را 10.7 درصد کاهش داد (پایه، 26.17±272.77؛ هفته دهم، 26.31 ± 243.47) [36]. اگرچه شرایط آزمون، مانند شاخص ملانین پایه، دوز آزمایش و مدت زمان آزمایش، با یکدیگر متفاوت است، مقایسه غیرمستقیم این دو مطالعه نشان می‌دهد که گلیسینامید هیدروکلراید این پتانسیل را دارد که به عنوان یک عامل هیپوپیگمانته مورد استفاده قرار گیرد. مطالعات بیشتر برای بهینه سازی دوز، فرمولاسیون و روش کاربرد آن برای دستیابی به عملکرد بهتر در رنگدانه پوست مورد نیاز است.

رنگ پوست در حالت ثابت نشان دهنده نسبت نسبی میزان ملانین تامین شده از ملانوسیت ها به میزان ملانین از دست رفته به دلیل لایه برداری کراتین پوست است. بنابراین، مهار سنتز ملانین یا افزایش از دست دادن ملانین دو استراتژی ممکن برای درمان هایپرپیگمانتاسیون است. گلیسینامید هیدروکلراید یک ماده مفید برای استراتژی قبلی است زیرا می تواند سنتز ملانین را با کاهش سطح TYR و سایر آنزیم هایی که در سنتز ملانین در ملانوسیت ها دخیل هستند، مهار کند [27]. در این صورت، ترکیب گلیسین آمید هیدروکلراید با عوامل لایه بردار پوست، مانند اسید گلیکولیک [37،38]، ممکن است به دلیل هم افزایی بین مواد با مکانیسم های اثر متفاوت، منجر به افزایش بیشتر اثربخشی رنگدانه شود.

بسیاری از عوامل دپیگمانتاسیون موجود، سنتز ملانین را با مهار فرآیند انتقال سیگنال درون سلولی مسئول بیان ژن TYR یا مهار فعالیت TYR به طور مستقیم کاهش می دهند [39،40]. با این حال، گلیسین آمید هیدروکلراید می تواند از اتصال یک هورمون به گیرنده های آن جلوگیری کند و از آغاز فرآیندهای انتقال سیگنال درون سلولی جلوگیری کند و در نتیجه از بیان TYR جلوگیری کند [27]. بر این اساس، گلیسین آمید هیدروکلراید می تواند از طریق مکانیسم متفاوتی از بسیاری از عوامل رنگدانه کننده موجود عمل کند و در صورت استفاده از آن در ترکیب با سایر عوامل رنگدانه، اثرات هم افزایی انتظار می رود.

هورمون های پپتیدی مشتق از پروپیوملانوکورتین، مانند -MSH، -MSH و آدرنوکورتیکوتروفیکورمون (ACTH) پوست را تنظیم می کنند.رنگدانه، التهاب و فیبروز [8،30،41]. در اتصال این آگونیست‌ها به MC1R و فعال‌سازی‌های متوالی آدنیلات سیکلاز (AC) و پروتئین کینازA (PKA) فاکتور رونویسی CREB را فسفریله می‌کند که به نوبه خود بیان MITF را القا می‌کند [42]. بیان MITF نیز توسط مسیرهای سیگنال‌دهی دیگر القا می‌شود. شامل Wnt/Frizzled/ گلیکوژن سنتاز کیناز 3 / آبشار کاتنین و فاکتور سلول های بنیادی/c-Kit/ پروتئین کینازهای فعال شده با میتوژن [43،44]. MITF نه تنها بیان ژن آنزیم های ملانوژنیک بلکه بیوژنز ملانوزوم ها را نیز هدایت می کند [2،45].

پپتیدهای ضد ملانوژنیک مولکولی پایین شناسایی شده در مطالعه قبلی شامل FRWG-NH2، RWG-NH2، WG-NH2، و G-NH2 (گلیسینامید)، که توالی های مشترکی با -MSH (استیل-SYSMEHFRWGKPV-NH2) دارند [27] . فرض بر این بود که این پپتیدهای ضد ملانوژن مولکولی کم ممکن است با اتصال گیرنده -MSH به روشی رقابتی تداخل داشته باشند و در نتیجه شروع فرآیندهای انتقال سیگنال درون سلولی را مسدود کنند (شکل 4). اگر پپتیدهای ضد ملانوژنیک مولکولی کم به عنوان آنتاگونیست MC1R عمل کنند، ممکن است از فعال شدن MC1R توسط آگونیست های دیگر مانند -MSH و ACTH نیز جلوگیری کنند و سایر رویدادهای فیزیولوژیکی مرتبط با التهاب و فیبروز و همچنین را تحت تأثیر قرار دهند.رنگدانه [30].

اگرچه شواهد مستقیم بیشتری برای مکانیسم اثر مورد نیاز است، مطالعه حاضر نشان می‌دهد که شکل نمک هیدروکلراید گلیسینامید، کوچک‌ترین بخش ضروری از پپتیدهای ضد ملانوژنیک، کارآیی رنگ‌دهی پوست را بدون ایجاد تحریک غیرانسانی پوست نشان می‌دهد. مطالعات بیشتری به منظور بررسی اثر رنگ‌زدایی سایر پپتیدهای ضد ملانوژنیک، تری پپتیدها و یک دی پپتید ذکر شده در بالا مورد نیاز است.

در نتیجه، مطالعه حاضر نشان می‌دهد که گلیسینامید هیدروکلراید پتانسیل زیادی برای استفاده در کنترل هیپرپیگمانتاسیون پوست دارد.

منابع

1. کاستین، جنرال الکتریک; شنوایی، VJ رنگدانه پوست انسان: ملانوسیت ها رنگ پوست را در پاسخ به استرس تعدیل می کنند. FASEB J. 2007، 21، 976-994. [CrossRef] [PubMed]

2. Schiaffino، MV مسیرهای سیگنالینگ در بیوژنز ملانوزوم و آسیب شناسی. بین المللی جی بیوشیم. سلول بیول. 2010،42، 1094-1104. [CrossRef] [PubMed]

3. کاردینالی، جی. سکارلی، اس. کوواکس، دی. آسپیت، ن. لوتی، LV; توریسی، MR; Picardo، M. فاکتور رشد کراتینوسیت انتقال ملانوزوم را به کراتینوسیت ها ترویج می کند. ج. تحقیق. درم. 2005، 125، 1190-1199. [CrossRef] [PubMed]

4. Epstein، JH Photocarcinogenesis، سرطان پوست و پیری. مربا. آکادمی درم. 1983، 9، 487-502. [CrossRef]

5. اسلومینسکی، ا. کیم، تی.کی. بروزینا، AA; یانجتوویچ، ز. بروکس، دی ال. شواب، ال پی. اسکوبویات، سی. Jozwicki, W.; Seagroves, TN نقش ملانوژنز در تنظیم رفتار ملانوما: ملانوژنز منجر به تحریک بیان HIF-1 و مسیرهای همراه وابسته به HIF می شود. قوس. بیوشیمی. بیوفیز. 2014،563، 79-93. [CrossRef]

6. اسلومینسکی، RM; Zmijewski، MA; اسلومینسکی، AT نقش رنگدانه ملانین در ملانوما. انقضا Derm.2015, 24, 258-259. [CrossRef]

7. فیستارول، SK; Lin, PH اختلالات رنگدانه. J. Dtsch. درماتول. Ges. 2010، 8، 187-201. [CrossRef]

8. اسلومینسکی، ا. توبین، دی جی; شیبهارا، س. Wortsman، J. رنگدانه ملانین در پوست پستانداران و تنظیم هورمونی آن. فیزیول. Rev. 2004, 84, 1155-1228. [CrossRef]

9. رز، PT اختلالات رنگدانه. پزشکی کلین N. Am. 2009، 93، 1225-1239. [CrossRef]

10. Calender, VD; سنت سورین لرد، اس. دیویس، EC; مکلین، ام. هیپرپیگمانتاسیون پس از التهاب: ملاحظات اتیولوژیک و درمانی. صبح. جی. کلین. درم. 2011، 12، 87-99. [CrossRef]

11. گنجو، ص. ناگپال، اس. محمد، MH; نیشال کومار، پ. پاندی، آر. Natarajan، VT; Mande, SS; Gokhale, RS پروفایل جامعه میکروبی دیس بیوز را در پوست ضایعه ای افراد ویتیلیگو نشان می دهد. علمی Rep.2016, 6, 18761. [CrossRef] [PubMed]

12. اسپریتز، RA; اندرسن، GH ژنتیک ویتیلیگو. درم. کلین 2017، 35، 245-255. [CrossRef] [PubMed]

13. پاولیک، وی. برکیچ، ز. مارین، اس. سیمیل، اس. گویکوف-ووکلیچ، م. Aoki، A. depigmentation ملانین لثه توسطEr: لیزر YAG: مروری بر ادبیات. J. Cosmet. لیزر وجود دارد. 2018، 20، 85–90. [CrossRef] [PubMed]

14. ساکسنا، س. اندرسن، آر.ام. Maibach، HI Pitfalls در آزمایش‌های بالینی نشان می‌دهد که نیاز به عوامل ضد رنگدانه با تحمل خوب و مؤثرتر است. جی درماتول. درمان شود. 2015، 26، 440-450. [CrossRef] [PubMed]

15. Levy, LL; Emer, JJ مزیت عاطفی استتار آرایشی در درمان بیماری های پوست صورت: تجربه و بررسی شخصی. کلین لوازم آرایشی و بهداشتی تحقیق کنید درم. 2012، 5، 173-182.

16. چو، CH; Chou، CY; Cheng, YP پیگمانتاسیون فوری پس از درمان با لیزر. جاما درم. 2015، 151،1021-1022. [CrossRef]

17. بورلی، سی. اورسین، اف. Steger، F. ظهور لایه برداری شیمیایی در پوست قرن 19 اروپا: ظهور عوامل، فرمول ها و درمان ها. J. Eur. آکادمی درم. Venereol. 2020. [CrossRef]

18. جو، ت. Hantash، BM Hydroquinone depigmentation: گزارش مورد و بررسی ادبیات. درماتیت 2014، 25، e1-e5. [CrossRef]

19. دسمدت، بی. کورسل، پی. De Beer, JO; راجیرز، وی. گروسبر، ام. دکونینک، ای. De Paepe, K. بررسی اجمالی عوامل سفید کننده پوست با بینشی از بازار غیرقانونی لوازم آرایشی در اروپا. J. Eur. آکادمی درم. Venereol.2016, 30, 943-950. [CrossRef]

20. کیم، م. پارک، جی. آهنگ، ک. کیم، اچ جی; Koh، JS; Boo, YC غربالگری عصاره های گیاهی برای اثرات مهارکننده تیروزیناز انسانی. بین المللی J. Cosmet. علمی 2012، 34، 202-208. [CrossRef]

21. پارک، جی. Boo, YC جداسازی رسوراترول از Vinifera caulis و مهار قوی آن از هومانتیروزیناز. اوید. مکمل مبتنی بر. جایگزین. پزشکی 2013، 2013، 645257. [CrossRef] [PubMed]

22. کواک، جی. سوک، جی کی. سوه، اچ. چوی، YH; هنگ، اس اس؛ کیم، دی اس؛ Boo, YC اثرات ضد ملانوژنیک لوتئولین7-سولفات جدا شده از phyllospadix iwatensis makino. برادر جی. درم. 2016، 175، 501-511. [CrossRef] [PubMed]

23. لی، سوئد; کیم، جی اچ. آهنگ، اچ. سوک، جی کی. هنگ، اس اس؛ Boo, YC Luteolin 7-سولفات سنتز ملانین را از طریق مهار بیان تیروزیناز با واسطه CREB و MITF کاهش می‌دهد. آنتی اکسیدان ها 2019، 8، 87. [CrossRef] [PubMed]

24. مالریچ، اس. برسون، دی. محصولات آرایشی و بهداشتی نسل بعدی: جدیدترین محصولات در پپتیدها، فاکتورهای رشد، سیتوکین ها و سلول های بنیادی. درم. کلین 2014، 32، 13-21. [CrossRef]

25. ژانگ، ال. Falla، TJ Cosmeceuticals و پپتیدها. کلین درم. 2009، 27، 485-494. [CrossRef]

26. Seok, JK; لی، SW; چوی، جی. کیم، YM; Boo, YC شناسایی هگزاپپتیدهای ضد ملانوژنیک جدید از طریق اسکن موقعیتی یک کتابخانه ترکیبی پپتید مصنوعی. انقضا درم. 2017، 26، 742-744. [CrossRef]

27. کیم، جی اچ. سوک، جی کی. کیم، YM; Boo, YC شناسایی پپتیدهای کوچک و گلیسین آمید که سنتز ملانین را با استفاده از یک کتابخانه ترکیبی پپتید مصنوعی اسکن موقعیتی مهار می کنند. برادر جی. درم. 2019، 181،128-137. [CrossRef]

28. پینیلا، سی. Appel, JR; بلان، پی. Houghten، RA شناسایی سریع لیگاندهای پپتیدی با میل ترکیبی بالا با استفاده از کتابخانه های ترکیبی پپتید مصنوعی اسکن موضعی. بیوتکنیک 1992، 13، 901-905.

29. Rano, TA; تیمکی، تی. پترسون، EP; روتوندا، جی. نیکلسون، DW; بکر، جی دبلیو. چپمن، KT; Thornberry، رویکرد ترکیبی NAA برای تعیین ویژگی های پروتئاز: کاربرد برای یک آنزیم مبدل اینترلوکین-1بتا (ICE). شیمی. Biol. 1997، 4، 149-155. [CrossRef]

30. اسلومینسکی، AT; اسلومینسکی، RM; Zmijewski، MA هدف قرار دادن گیرنده ملانوکورتین نوع 1 با پپتیدهای کوچک. Br. جی. درم. 2019، 181، 17-18. [CrossRef]

31. Frosch، PJ; Kligman، AM تست محفظه صابون. روشی جدید برای ارزیابی تحریک پذیری صابون ها. J. Am.Acad. درم. 1979، 1، 35-41. [CrossRef]

32. راهنمای پیرارد، GE EEMCO برای ارزیابی رنگ پوست. J. Eur. آکادمی درم. Venereol. 1998، 10، 1-11.[CrossRef]

33. ویلکس، م. رایت، سی. du Plessis، JL; Reeder، A. Fitzpatrick نوع پوست، زاویه تیپولوژی فردی، و شاخص ملانین در یک جمعیت آفریقایی: گام‌هایی به سوی ارزیابی‌های جهانی حساسیت به نور پوست. جاما درم. 2015، 151، 902-903. [CrossRef] [PubMed]

34. Boo, YC p-Coumaric acid به عنوان یک ماده فعال در لوازم آرایشی: بررسی با تمرکز بر اثرات ضد ملانوژن آن. آنتی اکسیدان ها 2019، 8، 275. [CrossRef] [PubMed]

35. Boo, YC اثر رزوراترول و آنالوگ های آن در روشن کردن پوست انسان: از مطالعات آزمایشگاهی تا کاربردهای آرایشی. آنتی اکسیدان ها 2019، 8، 332. [CrossRef] [PubMed]

36. واتانابه، ف. هاشیزومه، ای. چان، GP; Kamimura، A. اثرات سفیدکننده پوست و بهبود وضعیت پوست گلوتاتیون اکسید شده موضعی: یک کارآزمایی بالینی دوسوکور و کنترل شده با دارونما در زنان سالم. Clin. لوازم آرایشی و بهداشتی تحقیق کنید درم. 2014، 7، 267-274. [CrossRef]

37. de Villiers, MM; نرسایی، ک. ون در وات، JG پایداری فیزیکوشیمیایی کرم های ترکیبی حاوی اسیدهای هیدروکسی. بین المللی جی فارم. Compd. 2000، 4، 72-75.

38. شاراد، جی. درمان لایه برداری با اسید گلیکولیک - بررسی کنونی. کلین لوازم آرایشی و بهداشتی تحقیق کنید درم. 2013، 6، 281-288. [CrossRef]

39. پیلایار، ت. مانیکام، م. Namasivayam، V. عوامل سفید کننده پوست: دیدگاه شیمی دارویی مهارکننده های تیروزیناز. J. آنزیم. مهار کردن پزشکی شیمی. 2017، 32، 403-425. [CrossRef]

40. ذوالقدری، س. بهرامی، ع. حسن خان، MT; مونوز-مونوز، ج. گارسیا-مولینا، اف. گارسیا کانواس، اف. بررسی جامع Saboury، AAA در مورد مهارکننده‌های تیروزیناز. J. آنزیم. مهار کردن پزشکی شیمی. 2019، 34، 279–309. [CrossRef]

41. استاینهوف، م. استاندر، اس. سیلیگر، اس. Ansel, JC; اشملز، ام. Luger, T. جنبه های مدرن التهاب نوروژنیک پوستی. قوس. درم. 2003، 139، 1479-1488. [CrossRef] [PubMed]

42. بوسکا، آر. Ballotti، R. Cyclic AMP پیام رسان کلیدی در تنظیم رنگدانه های پوست است. پیگمنت سل Res.2000، 13، 60-69. [CrossRef] [PubMed]

43. تاچیبانا، M. MITF: جریانی که برای سلول های رنگدانه جریان دارد. پیگمنت سل Res. 2000، 13، 230-240. [CrossRef][PubMed]44. ایبانکس، جی پی؛ ویکت، RR; مکانیسم های Boissy، RE تنظیم کننده رنگدانه های پوست: افزایش و کاهش رنگ پوست. بین المللی جی. مول. علمی 2009، 10، 4066-4087. [CrossRef]

45. سیمون، ج.د. پلس، دی. واکاماتسو، ک. Ito، S. چالش های فعلی در درک ملانوژنز: شیمی پل زدن، کنترل بیولوژیکی، مورفولوژی و عملکرد. پیگمنت سل ملانوم Res. 2009، 22، 563-579. [CrossRef]