روش HPTLC فاز معکوس بسیار حساس و پایدار از نظر زیست محیطی برای تعیین هیدروکینون در کرم های سفید کننده تجاری

تماس:ali.ma@wecistanche.com

محمد اچ القرنی 1، پرویز عالم 1، فیاض شکیل 2، احمد اول فوده 1 و سلطان الشهری 2،*

خلاصه: هیدروکینون(HDQ) یک عامل بی رنگ کننده طبیعی است که معمولاً در آماده سازی های رنگ دهنده پوست استفاده می شود. ایمنی و سبز بودن روش های تحلیلی کمی سازی HDQ در ادبیات قبلی در نظر گرفته نشده است. بنابراین، یک روش کروماتوگرافی لایه نازک با عملکرد بالا (RP-HPTLC) با فاز معکوس بسیار حساس و سبزتر از نظر زیست محیطی برای تخمین HDQ در چهار تجاری مختلف ایجاد شد.سفید کردنکرم ها (CWCs). مخلوط دوتایی اتانول-آب (6{13}}:40، v·v-1) به عنوان سیستم حلال سبز مورد استفاده قرار گرفت. تخمین HDQ در 291 نانومتر انجام شد. سنجش مبتنی بر RP-HPTLC حاضر در محدوده باند-1 0 نانوگرم 2{19}}-24{22}} خطی بود. روش تحلیلی حاضر بر اساس داده های تشخیص و کمی سازی بسیار حساس بود. سایر پارامترهای اعتبارسنجی، مانند دقت، دقت، و استحکام نیز برای تعیین HDQ مناسب بودند. حداکثر مقادیر HDQ در CWC A (1.23 درصد وزنی · وزن 1) به دست آمد و سپس CWC C (0.81 درصد وزن · وزن 1)، CWC D (0.43 درصد وزن · وزن 1) و CWC B (0.37 درصد وزن · 1) به دست آمد. w-1). امتیاز تجزیه و تحلیل (AGREE) برای روش تحلیلی حاضر 0.91 برآورد شد که نشان دهنده ویژگی‌های سبزتر عالی سنجش RP-HPTLC فعلی است. این نتایج نشان می‌دهد که روش تحلیلی حاضر برای اندازه‌گیری کمی HDQ در فرمول‌های تجاری آن بسیار حساس و از نظر اکولوژیکی پایدار است.

کلید واژه ها:موافق؛هیدروکینون; RP-HPTLC پایدار از نظر زیست محیطی؛ اعتبار سنجی

عصاره سیستانچمی تواند رادیکال های آزاد را از بین ببرد و از تجمع تیروزیناز جلوگیری کند.

کلیک کنید تااثرات سیستانچ برای سفید کردن

1. مقدمه

هیدروکینون(HDQ) یک ترکیب طبیعی است که در چندین فرمول تجاری رنگ دهنده پوست برای درمان ملاسما (بیماری ناشی از تجمع بیش از حد ملانین در پوست انسان) وجود دارد [1،2]. این یک عامل رنگدانه قوی است و به عنوان جایگزینی برای تیروزیناز استفاده می شود [3]. این یکی از رایج ترین عوامل مورد استفاده در درمان هایپرپیگمانتاسیون پوست انسان است [4،5]. غلظت موثر HDQ در فرمولاسیون های تجاری رنگ کننده پوست از 1.5 تا 2.{11}} درصد w·w-1[6] متغیر است. غلظت بالای HDQ (بالاتر از 5 درصد w·w-1) باعث تحریک موضعی و لوکودرما در پوست انسان می شود [5،6]. به دلیل عوارض جانبی بحث برانگیز آن، بسیاری از کشورها HDQ را به عنوان یک ممنوع کرده اندسفید کردنعامل در فرمولاسیون موضعی [7]. با این وجود، چندین تحقیق بالینی اثرات محافظتی مختلفی را پیشنهاد کرده‌اندHDQدر مدیریت اختلالات مختلف هیپرپیگمانتری پوست مانند ملاسما، کک و مک، لنتیژین و غیره [8،9]. با در نظر گرفتن مزایا و خطرات HDQ، تجزیه و تحلیل کمی آن در فرمول‌های مختلف رنگ‌کننده پوست ضروری است.

سنجش های دارویی مختلف برای تعیین کمیت HDQ به تنهایی یا در ترکیب با سایر روش ها استفاده می شود.سفید کردنعوامل در کرم‌های سفیدکننده به بازار (CWCs). انواعی از سنجش‌های مبتنی بر طیف‌سنجی فرابنفش (UV) برای تجزیه و تحلیل کمی HDQ در محصولات سفیدکننده تجاری (CWPs) و آماده‌سازی‌های دارویی مستند شده است [10-13]. طیف گسترده‌ای از سنجش‌های مبتنی بر کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) برای تعیین HDQ همراه با اترهای آن در انواع CWC و CWP مستند شده است [14-23]. روش‌های ولتامتری مختلفی نیز برای تعیین همزمان HDQ و مشتقات اتر آن در CWPs ایجاد شده‌اند [24-29]. برخی از سنجش‌های تحلیلی دیگر مانند الکتروشیمیایی تزریق جریان [30]، کروماتوگرافی الکتروکینتیک میسلی [31]، الکتروکروماتوگرافی مویرگی [32]، و سنجش‌های مبتنی بر نانوکامپوزیت [33] نیز برایHDQتجزیه و تحلیل همراه با مشتقات اتر آن و غیرهسفید کردنعوامل در CWP ها برخی از نانوحسگرهای مبتنی بر الکتروشیمیایی نیز برای تجزیه و تحلیل HDQ گزارش شده اند [34،35]. یک روش مبتنی بر کروماتوگرافی لایه نازک با عملکرد معمولی (HPTLC) نیز برای تجزیه و تحلیل کمی و کیفی HDQ در CWC توسط گروه تحقیقاتی ما استفاده شد [1].

پس از تجزیه و تحلیل جامع مقالات گزارش شده در مورد تجزیه و تحلیل HDQ، مشاهده شد که ایمنی و پایداری زیست‌محیطی روش‌های دارویی در ادبیات ارزیابی نشده و برای ارزیابی در نظر گرفته نشده است. علاوه بر این، روش‌های مبتنی بر فاز معکوس سبز/اکولوژیکی پایدار (RP-HPTLC) هنوز برای تخمین استفاده نشده است.HDQدر CWC های آن سنجش‌های مبتنی بر HPTLC پایدار/سبز از نظر زیست‌محیطی مزایای زیادی مانند سادگی، اقتصادی بودن، هزینه عملیات کم، زمان تحلیل کوتاه، آنالیز موازی نمونه‌های متعدد، وضوح تشخیص، و کاهش سمیت محیطی نسبت به HPLC و سایر روش‌های تحلیلی را ارائه می‌دهند [36-39]. بر این اساس، یک روش RP-HPTLC برای تعیین HDQ برای این مطالعه انتخاب شد. روش‌های مختلفی برای ارزیابی نمایه سبزی سنجش‌های دارویی استفاده می‌شود [38-43]. با این وجود، تنها رویکرد متریک GREenness تحلیلی (AGREE) همه 12 اصل شیمی تحلیلی سبز (GAC) را برای ارزیابی سبز بودن اعمال می کند [42].

رویکرد متریک AGREE برای ارزیابی سبز بودن روش presentRP-HPTLC [42] استفاده شد. بنابراین، کار حاضر برای توسعه یک روش RP-HPTLC بسیار حساس و سبز/اکولوژیکی پایدار برای تخمین انجام شد.HDQدر چهار CWC مختلف نمایه سبزی روش RP-HPTLC فعلی توسط AGREE: The Analytical Greenness Calculator بدست آمد. سنجش تحلیلی حاضر برای تجزیه و تحلیل HDQ بر اساس دستورالعمل های شورای بین المللی هماهنگ سازی (ICH) Q2 (R1) [44] تایید شد.

2. مواد و روشها

2.1. مواد

استاندارد مرجع HDQ (خلوص: 99 درصد) از Fluka Chemica (دارمشتات، آلمان) تهیه شد. متانول با درجه HPLC (MeOH) و اتانول (EtOH) از Alfa Aesar (Tewksbury، MA، ایالات متحده آمریکا) تهیه شد. آب درجه HPLC (H2O) از سیستم تصفیه آب Milli-Q (E-Merck، دارمشتات، آلمان) جمع آوری شد. سایر حلالها و معرفهای مورد استفاده از درجه تحلیلی بودند. چهار CWC مختلف HDQ از بازار دارویی در الخرج، عربستان سعودی، در ماه ژوئن 2021 به دست آمد.HDQقبل از شروع آزمایش در مکانی خنک و تاریک در دمای 22 درجه سانتیگراد نگهداری شد. CWCها حدود یک ماه قبل از شروع آزمایش نگهداری شدند.

2.2. کروماتوگرافی

کمیت سنجی چگالی RP-HPTLC HDQ در استاندارد مرجع و چهار CWC مختلف با استفاده از ابزار HPTLC (CAMAG، Muttenz، سوئیس) انجام شد. تجزیه و تحلیل کمی HDQ بر روی صفحات 10 × 20 سانتی‌متر مربع با پشت شیشه‌ای که از قبل با صفحات سیلیکا ژل RP 60 F254S پوشش داده شده بودند (E-Merck، دارمشتات، آلمان) انجام شد. نمونه‌ها روی صفحات TLC به صورت نوارهای 6 میلی‌متری مشاهده شدند با استفاده از یک اپلیکاتور خودکار سمپلر 4 (ATS4) (CAMAG، ژنو، سوئیس). اپلیکاتور نمونه با یک سرنگ میکرولیتری CAMAG (همیلتون، بونادوز، سوئیس) نصب شد. نرخ کاربرد برای تجزیه و تحلیل کمی ازHDQدر 15{12}} nL s-1 ثابت نگه داشته شد. صفحات در یک محفظه در حال توسعه خودکار 2 (CAMAG، Muttenz، سوئیس) در فاصله 80 میلی‌متری توسعه یافتند. سیستم حلال سبز برای تجزیه و تحلیل HDQ EtOHH2O (60:40، v · v-1) بود. محفظه در حال توسعه قبلاً با بخارات فاز متحرک به مدت 30 دقیقه در دمای 22 درجه سانتیگراد اشباع شد. HDQ در 291 نانومتر شناسایی شد. ابعاد شکاف 4 × 0.45 mm2 و سرعت اسکن 20 mm s-1 بود. هر آزمایش در سه تکرار انجام شد. نرم افزار مورد استفاده برای پردازش داده ها WinCATs (نسخه 1.4.3.6336, CAMAG, Muttenz, Switzerland) بود.

2.3. منحنی کالیبراسیون HDQ و تهیه نمونه های کنترل کیفیت

مقدار مشخص شده HDQ (10 میلی‌گرم) در 100 میلی‌لیتر از سیستم‌های حلال سبز EtOH-H2O (60:40، v·v-1) برای دستیابی به محلول ذخیره با غلظت 100 میکروگرم در میلی‌لیتر در لیتر توزیع شد. حجم‌های مختلف محلول‌های موجود با استفاده از سیستم‌های EtOH-H2O (60:40، v·v-1) برای دستیابی به غلظت HDQ در محدوده باند 20-2400 نانوگرم رقیق شدند. راه حل های به دست آمده ازHDQحاوی غلظت های مختلف بر روی صفحات HPTLC خال خال شد. ناحیه پیک HPTLC برای HDQ برای هر محلول HDQ با استفاده از روش دارویی حاضر به دست آمد. منحنی کالیبراسیون HDQ با رسم غلظت HDQ در برابر ناحیه HPTLC آن ایجاد شد. علاوه بر این، سه نمونه کنترل کیفیت مختلف (QC)، مانند نمونه‌های QC پایین (LQC؛ باند 20 نانوگرم -1)، QC متوسط ​​(MQC؛ باند 600 نانوگرم -1) و QC بالا (HQC؛ باند 2400 نانوگرم -1) ، به منظور تعیین پارامترهای اعتبار سنجی مختلف برای سنجش دارویی حاضر به طور جداگانه به دست آمد.

2.4. پردازش نمونه برای تعیین HDQ در CWC

HDQ از چهار CWC مختلف با اتخاذ رویه گزارش شده در ادبیات [1] استخراج شد. مقادیر دقیق (5.{2}} گرم) چهار CWC مختلف شامل A، B، C و D به طور جداگانه به قیف جداکننده منتقل شد. هر CWC در قیف جداسازی با MeOH (3×70 میلی‌لیتر) به مدت 30 دقیقه در دمای 22 درجه سانتیگراد تکان داده شد. بقایای به‌دست‌آمده با 10 میلی‌لیتر MeOH بازسازی و تا ارزیابی بیشتر در یخچال نگهداری شدند.

2.5. پارامترهای اعتبارسنجی

سنجش RP-HPTLC حاضر برای تجزیه و تحلیل HDQ برای پارامترهای اعتبارسنجی مختلف با پیروی از دستورالعمل‌های ICH-Q2 (R1) اعتبارسنجی شد [44]. راHDQخطی بودن با رسم غلظت HDQ در برابر مساحت پیک اندازه گیری شده آن ارزیابی شد. خطی بودن HDQ در 11 نمونه QC مختلف 20، 40، 60، 100، 200، 300، 400، 500، 600، 1200 و 2400 نانوگرم باند-1 برای سنجش دارویی حاضر ارزیابی شد. پارامترهای بازده سیستم برای روش تحلیلی حاضر از نظر ضریب تاخیر (Rf)، ضریب عدم تقارن (As)، و تعداد صفحات نظری در هر متر (Nm-1) مورد ارزیابی قرار گرفت. همانطور که قبلاً در ادبیات گزارش شده بود، Rf، As و Nm-1 در MCQ (باند 600 نانوگرم-1) به دست آمدند [45].

دقت روش RP-HPTLC کنونی به عنوان درصد بازیابی تعیین شد. درصد بازیابی در LQC (باند 20 نانوگرم-1)، MQC (باند 600 نانوگرم-1)، و HQC (باند 2400 نانوگرم-1) برای به دست آمد. روش تحلیلی حاضر

دقت برای روش تحلیلی حاضر به عنوان دقت درون / بین روز ارزیابی شد. دقت درون روز با تجزیه و تحلیل HDQ در LQC، MQC و HQC در همان روز برای سنجش تحلیلی حاضر تعیین شد. دقت بین روز با تجزیه و تحلیل HDQ در LQC، MQC و HQC در سه روز مختلف برای سنجش حاضر تحلیلی تعیین شد [44]. هر دقت شش بار (n=6) اندازه‌گیری شد.

استحکام با معرفی برخی تغییرات کوچک در سیستم حلال‌های سبز برای روش RP-HPTLC فعلی ارزیابی شد. برای ارزیابی استحکام، سیستم حلال اصلی EtOH H2O (60:40، v·v-1) به EtOH-H2O (62:38، v·v-1) و EtOHH2O (58:42، v·v-1) تغییر یافت. ) سیستم های حلال، و پاسخ خاص HPTLC و مقادیر Rf ثبت و تفسیر شدند [44].

حساسیت برای روش تحلیلی حاضر به عنوان محدودیت های تشخیص (LOD) و کمی سازی (LOQ) با استفاده از روش انحراف استاندارد ارزیابی شد. همانطور که در ادبیات گزارش شده است، LOD و LOQ ofHDQ برای روش تحلیلی حاضر محاسبه شد [44،45].

اوج خلوص/ویژگی با مقایسه مقادیر Rf و طیف UV HDQ ​​در CWCs A، B، C و D با HDQ استاندارد برای سنجش دارویی حاضر ارزیابی شد.

2.6. تجزیه و تحلیل کمی HDQ در CWCs

نمونه‌های به‌دست‌آمده از CWC A، B، C و D بر روی صفحات HPTLC مشاهده شدند و پاسخ‌های TLC آنها مشخص شد. منطقه اوج برایHDQدر CWC ها ثبت شد. محتوای HDQ در CWCها با استفاده از منحنی کالیبراسیون HDQ برای روش تحلیلی حاضر محاسبه شد.

2.7. ارزیابی سبزی

ویژگی های سبزی برای روش تحلیلی حاضر با استفاده از رویکرد متریک AGREE [42] به دست آمد. امتیازات AGREE (0.0–1.0) روش تحلیلی حاضر با استفاده از AGREE: The Analytical Greenness Calculator (نسخه0.5، دانشگاه گدانسک) ثبت شد. فناوری، گدانسک، لهستان، 2020).

3. نتایج و بحث

3.1. توسعه روش

بر اساس روش‌های تحلیلی ادبیات، مشخص شده است که روش RP-HPTLC پایدار/سبز برای تجزیه و تحلیل HDQ در لوازم آرایشی تجاری وجود ندارد. بنابراین، مطالعه حاضر به منظور توسعه سریع، بسیار حساس و پایدار از نظر اکولوژیکی انجام شد. روش RP-HPTLC برای تجزیه و تحلیل HDQ در CWCها.

برای تجزیه و تحلیل RP-HPTLC HDQ، نسبت های مختلف EtOH و H2O، از جمله EtOH-H2O (50:50، v·v-1)، EtOH-H2O (60:40، v·v-1)، EtOH-H2O (70:30، v·v-1)، EtOH H2O (80:20، v·v-1)، و EtOH-H2O (90:10، v·v-1)، به عنوان ترکیبات حلال سبز برای توسعه یک باند قابل اعتماد برای تجزیه و تحلیل HDQ. مخلوط حلال ها تحت شرایط اشباع محفظه ایجاد شدند. از داده های ثبت شده، مشاهده شد که EtOH-H2O (50:50، v·v-1)، EtOH-H2O (70:30، v·v-1)، EtOH-H2O (80:20، v·v- 1) و مخلوط‌های حلال سبز EtOH-H2O (90:10، v·v-1) کروماتوگرام ضعیفی ازHDQبا مقدار غیر قابل قبول As (As {{0}}.29). با این حال، ترکیب حلال سبز EtOH-H2O (60:40، v·v-1) نشان داده بود که کروماتوگرام حل شده خوبی از HDQ atRf=0.83 ± 0.02 با مقدار As قابل قبول (به عنوان {{ 12}}.03) (شکل 1). بنابراین، EtOH H2O (60:40، v·v-1) به عنوان مخلوط حلال سبز برای تجزیه و تحلیل HDQ در CWCs بهینه شد. باندهای طیفی UV برای روش فعلی RP-HPTLC به روش چگالی سنجی ثبت شد و حداکثر پاسخ HPTLC در 291 نانومتر برای روش presentRP-HPTLC یافت شد. بنابراین، کل آنالیز HDQ در 291 نانومتر انجام شد.

3.2. پارامترهای اعتبارسنجی

سنجش دارویی حاضر برای کمی سازی HDQ برای محدوده خطی بودن، پارامترهای بازده سیستم، دقت، دقت، استحکام، حساسیت و خلوص/ویژگی اوج با پیروی از توصیه‌های ICH تأیید شد [44]. نتایج برای تحلیل رگرسیون حداقل مربعات منحنی کالیبراسیون HDQ برای روش RP-HPTLC حاضر در جدول 1 ارائه شده است.HDQمنحنی کالیبراسیون خطی در محدوده باند 20-2400 نانوگرم با ضریب تعیین 0.9997 برای روش تحلیلی حاضر بود. این داده ها خطی خوبی را بین غلظت HDQ و پاسخ آن پیشنهاد می کند.

پارامترهای کارآیی سیستم روش دارویی حاضر در MQC (600 ng-1) مورد مطالعه قرار گرفت و نتایج در جدول 2 آمده است. مقادیر Rf، As، و Nm-1 برای روش تحلیلی حاضر به ترتیب 02/0 ± 83/0، 03/0 ± 03/1 و 87/2 ± 4987 پیش‌بینی شد. این نتایج نشان داد که روش تحلیلی حاضر برای تجزیه و تحلیل HDQ در CWCs قابل اعتماد بود.

نتایج مربوط به تجزیه و تحلیل دقت برای روش تحلیلی حاضر در جدول 3 فهرست شده است. درصد بازیابی HDQ برای روش RP-HPTLC حاضر به ترتیب 101.80 درصد، 98.16 درصد و 99.38 درصد در LQC، MQC و HQC تعیین شد. . مقادیر بالای درصد بازیابی دقت روش RP-HPTLC حاضر را برای تجزیه و تحلیل HDQ در CWCها نشان داد.

دقت به عنوان درصد ضریب تغییرات (درصد CV) تعیین شد و نتایج در جدول 4 نشان داده شده است. 59، و 0.26 درصد در LQC، MQC، و HQC، به ترتیب، برای دقت درون روز. درصد CVهای HDQ برای روش RP-HPTLC کنونی به ترتیب 0.98،{{1{12}}}}.69، و 0.32 درصد در LQC، MQC و HQC برای دقت بین روز مقادیر پایین درصد CV نشان‌دهنده دقت روش RP-HPTLC حاضر برای آنالیز HDQ در CWCها بود.

نتایج تجزیه و تحلیل استحکام برای روش تحلیلی حاضر در جدول 5 نشان داده شده است. درصد CVها برای تجزیه و تحلیل استحکام برای روش تحلیلی حاضر به صورت 0.59-. مقادیر Rf HDQ برای روش تحلیلی حاضر در محدوده 0.82-0.84 یافت شد. تغییرات باریک در مقادیر Rf HDQ و درصد پایین تر CV ها استحکام روش تحلیلی حاضر را برای کمی سازی HDQ در CWC ها نشان داد.

حساسیت برای روش تحلیلی حاضر به صورت "LOD و LOQ" ثبت شد و مقادیر فیزیکی آنها در جدول 1 نشان داده شده است. "LOD و LOQ" برای روش تحلیلی حاضر به صورت 6.91 ± 0.23 و 2 پیش‌بینی شد. 0.73 ± 0.68 ng band-1، به ترتیب، برایHDQکمی سازی این مقادیر فیزیکی "LOD و LOQ" برای روش تحلیلی حاضر نشان‌دهنده حساسیت آنالیز HDQ در CWCها است.

اوج خلوص/ویژگی برای روش تحلیلی حاضر با مقایسه طیف‌های UV همپوشانی HDQ در چهار CWC مختلف با طیف‌های HDQ استاندارد ارزیابی شد. طیف UV همپوشانی HDQ و HDQ استاندارد در چهار CWC مختلف در شکل 2 نشان داده شده است. بالاترین پاسخ کروماتوگرافی برای HDQ در HDQ استاندارد و CWCهای مطالعه شده در 291 نانومتر برای روش تحلیلی حاضر مشاهده شد. طیف UV یکسان، مقادیر Rf و طول موج HDQ در HDQ و CWCهای استاندارد، خلوص/ویژگی پیک را برای روش تحلیلی حاضر نشان می‌دهد.

3.3. تجزیه و تحلیل محتوای HDQ در CWC

کاربرد روش تحلیلی حاضر در تخمین کمی HDQ در CWCها تأیید شد. کروماتوگرام ازHDQاز CWCها با مقایسه نقطه TLC آن در Rf {{0}}.83 ± 0.02 با HDQ استاندارد برای روش تحلیلی حاضر شناسایی شد. کروماتوگرام HDQ در CWCs A و B برای روش تحلیلی حاضر در شکل 3 خلاصه شده است. کروماتوگرام های HPTLC HDQ در CWCها با کروماتوگرام های HDQ خالص یکسان بودند. برخی از پیک‌های اضافی نیز در کروماتوگرام‌های CWCها ظاهر می‌شوند که ممکن است با مواد جانبی مختلف موجود در CWCها مرتبط باشند. روش HPTLC پایدار از نظر زیست محیطی برای تجزیه و تحلیل HDQ در Rf=0.83 بدون تداخل سایر اجزای CWCها انتخابی بود. مقدار Rf ({17}}.83) HDQ در CWCها با مقدار HDQ استاندارد ({{0}}}.83) یکسان است، که نشان می‌دهد هیچ تعاملی بین HDQ و مواد تشکیل دهنده CWC از این رو، هیچ تاثیری از مواد تشکیل دهنده بر روی کیفیت کروماتوگرام HDQ، LOD، و کارایی روش HPTLC حاضر برای آنالیز HDQ وجود نداشت. وجود پیک های اضافی در کروماتوگرام های CWC ها نشان داد که روش RP-HPTLC حاضر برای تخمین HDQ در حضور اجزای فرمولاسیون قابل اعتماد است. محتویات HDQ CWCها از منحنی کالیبراسیون HDQ تعیین شد و نتایج در جدول 6 آمده است. جدول 6 همچنین مقدار برچسب گذاری شده HDQ و مواد تشکیل دهنده آن را خلاصه می کند. محتوای HDQ در CWC A (1.23 درصد w·w-1) و سپس CWC C (0.81 درصد w·w-1)، CWC D (0}.43 درصد w·w-1) بالاترین میزان بود. -1)، و CWC B (0.37 درصد w·w-1). محتویات ضبط شده HDQ بسیار کمتر از مقدار برچسب گذاری شده (2.{27}} درصد w·w-1) HDQ در CWCهای مورد مطالعه بود. محتوای HDQ در دو CWC مختلف (A و B) با استفاده از روش HPTLC فاز نرمال در ادبیات، به ترتیب 0.69 درصد w·w-1 و 0.34 درصد w·w-1 ثبت شد. محتوای گزارش شده HDQ نیز بسیار کمتر از مقدار برچسب گذاری شده (2.{38}} درصد w·w-1) HDQ در ادبیات [1] بود. چندین CWC یا CWP با این ادعا که کاملاً طبیعی هستند به بازار عرضه می شوند. با این حال، یافتن برخی از مواد شیمیایی مصنوعی به عنوان مواد تقلبی با همان اثراتی که در CWCها یا CWP ها یافت می شود به عنوان تقلب رایج است. مقدار HDQ ثبت شده در این کار و موارد ثبت شده در ادبیات نشان می دهد که CWC های مورد مطالعه دارای مقدار کمی HDQ هستند و با ادعاهای برچسب مطابقت ندارند [1]. از این رو، انتظار می رود که CWC های مورد مطالعه حاوی برخی از مواد شیمیایی مصنوعی به عنوان مواد تقلبی باشند. به طور کلی، روش تحلیلی حاضر را می توان برای تجزیه و تحلیل HDQ در آماده سازی های آرایشی و دارویی استفاده کرد.

3.4. ارزیابی سبزی

روش‌های مختلفی برای ارزیابی سبزی سنجش‌های دارویی استفاده می‌شود [38-43]. با این حال، تنها رویکرد AGREE از تمام 12 اصل GAC برای ارزیابی سبز بودن استفاده می کند [42]. بنابراین، نمایه سبزی روش تحلیلی حاضر با استفاده از ماشین حساب AGREE به دست آمد. امتیاز AGREE پیش بینی شده با استفاده از 12 اصل مختلف GAC برای سنجش تحلیلی حاضر در شکل 4 ارائه شده است. امتیاز AGREE برای اصول مختلف GAC به شرح زیر ثبت شد: درمان نمونه: 0.61موقعیت دستگاه تحلیلی: 1.{{ 9}}مراحل آماده‌سازی نمونه: 1.{11}}درجه اتوماسیون: 0.8{22}}مشتق‌سازی: 1.{15}}میزان ضایعات: 1.{17} }توان عملیاتی تجزیه و تحلیل: 1.{19}}مصرف انرژی: 1.{21}}تحلیل نمونه: 0.51 منبع معرف: 1.{25}}سمیت حلال‌ها: 1.{27}} ایمنی اپراتور: 1.{29}}

امتیاز کلی AGREE برای روش تحلیلی حاضر به صورت 0.91 ثبت شد که نشان دهنده روش تحلیلی سبز عالی برایHDQکمی سازی

4. نتیجه گیری

روش RP-HPTLC-دانسیتومتری برای تجزیه و تحلیل HDQ در چهار CWC مختلف HDQ توسعه داده شد. روش RP-HPTLC حاضر برای پارامترهای اعتبارسنجی مختلف تایید شد. روش تحلیلی حاضر بسیار حساس، سریع و از نظر اکولوژیکی پایدار بودHDQتحلیل و بررسی. امتیاز AGREE برای روش تحلیلی حاضر، یک سنجش تحلیلی عالی را برای کمی‌سازی HDQ پیشنهاد کرد. R حاضرروش P-HPTLC برای تجزیه و تحلیل HDQ در چهار CWC مختلف مناسب بود. این نتایج نشان داد که سنجش تحلیلی حاضر می‌تواند برای آنالیز HDQ در فرآورده‌های آرایشی و دارویی مختلف استفاده شود.