اثر حفاظتی Jiujiuguiyi، فرمول همولوگ دارویی و غذایی، بر موش‌های مسمومیت حاد با الکل

برای اطلاعات بیشتر:emily.li@wecistanche.com

نکات مهم در مطالعه حاضر، فرمول ترکیبی جدید دارویی گیاهی چینی، Jiujiuguiyi، با استفاده از نظریه همسانی دارو و غذا طراحی شد. هدف فرمولمحافظت کردنراکبد، از بین بردن تحریک پذیری غیر طبیعی مرکز و بهبود عقب ماندگی عضلانی در عین حال. یک مدل مسمومیت الکلی حاد در موش ساخته شد، سپس آزمایش اتیولوژی و آزمایش بیوشیمیایی برای بررسی اثربخشی فرمول در آماده‌سازی‌های مختلف انجام شد. نتایج نشان می‌دهد که JJGY می‌تواند از طریق مکانیسم‌های متعدد از موش‌های مسمومیت الکلی حاد محافظت کند و راهی جدید برای تولید غذای همولوگ داروی ضد الکل ارائه کند.

سیستانچ برای محافظت از کبد مفید است

خلاصه

مقدمه: امروزه مسمومیت حاد الکلی به سومین مشکل عمومی در چین تبدیل شده است. وضد-استنشاقمحصولات عمدتا با هدف افزایش فعالیتآنزیم هادرگیر الکلمتابولیسمکه مکانیسم واحدی است که می تواند متابولیسم الکل را تسریع کند. بنابراین، فرمول جدیدی به نام Jiujiuguivi (JJGY) که می تواند از کبد محافظت کند، تحریک پذیری غیر طبیعی مرکز را تسکین دهد و همزمان عقب ماندگی عضلانی را بهبود بخشد، توسط ما طراحی شده است. روش‌ها: مدل مسمومیت حاد الکلی با تجویز داخل معده با 0 ایجاد شد. 12 میلی‌لیتر/10 گرم الکل 50 درصد در موش‌ها، JJGY یک بار در روز به مدت 20 روز متوالی قبل از ایجاد حاد به صورت خوراکی (گاواژ) تجویز شد. مدل الکلی موش ها به طور تصادفی به 8 گروه با 8 گروه تقسیم شدند: گروه شاهد خالی (CON)، گروه مدل (M)، گروه کنترل مثبت Haiwangjinzun (HWJZ)، گروه های تجربی (AL، AH، BL.BH، AB). غول، زمان خزیدن روی روتا میله، فعالیت های آسپارتاتآمینوترانسفراز(AST)، آلانین آمینوترانسفراز (ALT) وسوپراکسیددیسموتاز(SOD) در هر دوکبدو سرم، الکل دهیدروژناز (ADH) و آلدهید دهیدروژناز (ALDH)، گلوتاتیون پراکسیداز (GSH-Px) در کبد و همچنین رنگ آمیزی HE برش های کبد، تشکیل مالون دی آلدئید (MDA) در سرم پس از مسمومیت حاد الکلی تعیین شد. . یافته‌ها: JJGY در مقایسه با گروه مدل، فعالیت AST و ALT را در کبد و سرم و فعالیت MDA در سرم را کاهش داد. در همین حال، سطح ADH و ALDH را در کبد و همچنین فعالیت کبدی و سروز SOD را افزایش داد، که نشان دهنده متابولیسم کارآمدتر الکل و کاهش ترشحات کبدی است، نتایج رنگ آمیزی HE همچنین ثابت کرد که JJGY می تواند کاهش دهد.الکلیکبدسلول ها. اینوریو تأثیر آن در گروهی که قبل از تجویز الکل دارو مصرف کرده بودند آشکارتر بود. علاوه بر این، JJGY به طور قابل توجهی زمان خزیدن روی میله چرخشی را طولانی کرد و راه رفتن موش ها را بهبود بخشید و ثابت شد که این اثر بهتر از محصول بهداشتی پرمصرف Haiwanginzun است. نتیجه گیری؛ این مطالعه نشان می دهد که JJGY می تواند محافظت کندکبد، تحریک پذیری غیر طبیعی مرکز را از بین می برد و عقب ماندگی عضلانی را پس از مسمومیت حاد الکلی بهبود می بخشد. اثر محافظتی کبد آن احتمالاً به تعدیل آنزیم های متابولیزه کننده الکل و آنتی اکسیدان مربوط می شود.

کلمات کلیدی: Jiujiuguiyi (JJGY)، مسمومیت حاد الکلی موش، همسانی دارو و غذا، آزمون رفتارشناسی

زمینه

مسمومیت حاد با الکل ناشی از تجمع اتانول در یک زمان، بیش از سرعت اکسیداسیون بدن انسان است[1]. مسمومیت با الکل یک بیماری چند سیستمی است که کل بدن را تحت تاثیر قرار می دهد، نه فقطکبد[2]. الکل می تواند به راحتی از سد خونی مغزی عبور کند و بر روی قشر مغز اثر بگذارد و تعادل ظریف بین y-aminobutyric اسید (GABA) را مختل کند و سپس باعث مهار مرکز زیر قشری، مخچه، مدولا، مرکز وازوموتور و مرکز تنفسی [4]. نارسایی تنفسی و گردش خون ممکن است در موارد شدید رخ دهد. مسمومیت با الکل همچنین می تواند منجر به میوپاتی الکلی و آمیوتروفی [5-7] شود که منجر به ضعف و درد عضلانی برای هفته ها یا ماه ها می شود [8]. همچنین، نوشیدن الکل می تواند به طور مستقیم به لایه لیپوپروتئین مخاط معده آسیب برساند و باعث آسیب به سد مخاطی معده شود. در سال های اخیر، به دلیل نیازهای اجتماعی و افزایش استرس در زندگی، گروه مصرف الکل در چین از 500 میلیون نفر فراتر رفته است. الکل و اعتیاد به الکل به سومین مشکل بهداشت عمومی در سراسر جهان تبدیل شده است [10] پس از بیماری های قلبی عروقی و سرطان |11.

طب سنتی چینی (TCM) دارای ارزش درمانی بالقوه در پیشگیری و درمان اعتیاد به الکل است [12]. برای قرن‌ها، داروهای گیاهی و مکمل‌های غذایی در چین و آسیای شرقی برای پیشگیری و درمان بیماری‌های مرتبط با الکل مورد استفاده قرار می‌گرفتند [13]. در مطالعه حاضر، ما یک فرمول ترکیبی جدید دارویی گیاهی چینی به نام Jiaiuguiyi (JGY) ایجاد کردیم که می تواند ازکبدتحریک پذیری غیر طبیعی مرکز را از بین می برد و عقب ماندگی عضلانی را بهبود می بخشد. با هدف بهبود مسمومیت حاد الکلی در دوره‌های مختلف، دو فرمول مختلف طراحی کردیم--فرمول A برای مصرف قبل از نوشیدن الکل و فرمول B برای مصرف بعد از نوشیدن الکل طراحی شده است [14]. فرمول A حاوی Carnosine، Puerariae radix، Semen Hovenia، عصاره چای کاکائو Semen Ziziphi Spinosa، پودر شیر و konjac fou است که بر پیشگیری از مسمومیت حاد الکلی تمرکز دارد. فرمول B حاوی Carnosine، Puerariae radix، Semen Hovenia، Chrysanthemum morifoliam، Hanrthorn، Rhizoma Imperative و Poria cocos است که بر بهبود علائم مسمومیت حاد الکلی تمرکز دارد [15].

کارنوزین یک آنتی اکسیدان با وزن مولکولی کوچک است [16]. Puerariae radix و Semen Hovenia اثر هوشیاری [17، 18] و همراه دارند.کبدعملکرد[19]، بر اساس خلاصه Materia Medica. گزارش شده است که چای کاکائو قادر به مقاومت در برابر اکسیداسیون و التهاب است [20]. هم چای کاکائو و هم Semen Ziziphi Spinosae [21] می توانند ذهن را آرام کنند. پودر شیر و آرد کنجاکو با هدف محافظت از مخاط معده و کاهش جذب الکل است. Chrysanthemum morifolium، Hawthorn، Rhizoma Imperative [22] و Poria cocos [23] می توانند باعث دفع متابولیت های الکل شوند.

برای دسترسی به عملکرد JJGY، و اینکه آیا پیشگیری یا درمان موثرتر است، مدل مسمومیت الکلی حاد را در موش ایجاد کردیم [24، 25].

مواد و روش ها

داروها و معرف های اصلی

Puerariae radix (شماره دسته: 171103151)، Semen Hovenia (شماره دسته: 170806301)، Semen Ziiphi Spinosae (شماره دسته: 170800501)، گل داوودی morifolium (شماره دسته: 171008681)، Hanvthornhi:1709، Hanvthornhi:1709 : 170703411)، پوریا کوکو (شماره دسته: 170905201) از شرکت داروسازی Kangmei، با مسئولیت محدود (شنژن، چین) خریداری شد. چای کاکائو از کوه نانکون، شهرستان لانگمن، استان گوانگدونگ برداشت شد. آرد کوجاکو (شماره دسته: XSD2018010205) از شرکت بیوتکنولوژی Qixiang (گوانگژو، چین) خریداری شد. Haiwangjinzun از Neptunus Medicine Group Co. Ltd. (شنژن، چین) خریداری شد. فرمول A (نسبت جرم): کارنوزین: ریشه پوراریا: سمن هوونیا: عصاره چای کاکائو: اسپینوزا زیزیفی: پودر شیر: آرد کنجاک =6:15:15:9:12:9:2

فرمول B (نسبت جرم):Carnosine: Puerariae ریشه: Semen Hovenia: Chrysanthemum morifolium زالزالک: Rhizoma ضروری: Poria cocos =6:15:15:9:9:9:9: 8 بار آب اضافه کنید و موارد فوق را بپزید گیاهان ذکر شده 2 بار، هر بار به مدت 1 ساعت. فیلتر را به مایعی معادل 1 گرم در میلی لیتر داروی خام تغلیظ کرده و برای استفاده بعدی خنک کنید.

حیوانات

موش SPF Kunming ({0}} گرم، نر) از مرکز حیوانات آزمایشگاهی پزشکی گوانگدونگ (شماره مجوز: SCXK 2013-0002) به دست آمد. تمامی حیوانات به مدت یک هفته قبل از انجام آزمایشات دارای محیط زیست محیطی با دمای 2±23 درجه و چرخه نور تا تاریکی 12:12 ساعت بودند. آنها بر روی پلت استاندارد چو و آب به صورت آزاد نگهداری شدند. تمام مراحل مراقبت از حیوانات و روش‌های آزمایشی توسط کمیته اخلاق حیوانات آزمایشگاهی دانشگاه جینان تأیید شد و از راهنمای مؤسسه ملی بهداشت برای مراقبت و استفاده از حیوانات آزمایشگاهی (ویرایش هفتم، ایالات متحده آمریکا) پیروی می‌کرد.

دستگاه آزمایشگاهی

ابزار دارای برچسب آنزیمی (MK3، سیستم آزمایشگاهی، فنلاند)، سیستم آب فوق العاده خالص (Milli Q Plus، Millipore، ایالات متحده)، میکروتوم انجمادی (Leica CM1950، Leica، آلمان) میکروسکوپ نوری (Olympus BX50، Olympus، ژاپن)، الکترونیکی تعادل (BS 210S، Sartorius، آلمان)، آنالایزر Rota-Rod (ZH، Anhui Zhenghua Biologic Apparatus Facilities، چین)، سیستم تجزیه و تحلیل catwalk (catwalk XT 9، Noldus، Holland)، هموژنایزر (IKA labortechnik، Standen، آلمان)، یخچال دار سانتریفیوژ (3-18K، Sartorius، آلمان)

گروه و مدیریت

موش‌های SPF Kunming ({0}} گرم) به‌طور تصادفی به 8 گروه با 8 گروه تقسیم شدند: گروه شاهد خالی (CON)، گروه مدل (M)، گروه کنترل مثبت Haiwangjinzun (HWJZ)، گروه آزمایش (EP) حاوی گروه دوز بالا با فرمول A (AH)، گروه با دوز کم فرمول A (AL)، گروه دوز بالا فرمول B (BH)، گروه دوز پایین فرمول B (BL)، فرمول A به علاوه گروه فرمول B (AB). موش‌های این گروه‌ها با 0.1 میلی‌لیتر/10 گرم آب تصفیه‌شده برای هر دو گروه CON و M، Haiwangjinzun (3 گرم در 10 میلی‌لیتر قبل از تجویز الکل) تجویز شدند. برای گروه کنترل مثبت، و فرمول A یا/و B(گروه با دوز بالا،{{20}}.04 گرم/10 گرم؛ گروه با دوز پایین، { {36}}.02 گرم/10 گرم) برای گروه EP به طور جداگانه. در روز بیست و یکم. موش های گروه CON، M، AL و AH با 0.12 میلی لیتر / 10 گرم الکل 50 درصد 30 دقیقه پس از تجویز 0.1 میلی لیتر / 10 گرم فرمول A (dd H, O) تجویز شدند. موش‌های گروه‌های BH و BL با 0.1 میلی‌لیتر/10 گرم فرمول B 30 دقیقه پس از تجویز 0.12 میلی‌لیتر/10 گرم الکل 50 درصد تجویز شدند. به موش‌های گروه AB 12/0 میلی‌لیتر/10 گرم الکل 50 درصد 15 دقیقه پس از تجویز 1/0 میلی‌لیتر/10 گرم فرمول A و 15 دقیقه قبل از تجویز با فرمول B داده شد.

تجزیه و تحلیل رفتارشناسی

30 دقیقه پس از تجویز، موش ها در سیستم تجزیه و تحلیل catwalk قرار گرفتند. پس از سازگاری با محیط، آزمایش شروع شد و راه رفتن ثبت شد. هر گروه از موش ها به طور متناوب مورد آزمایش قرار گرفتند تا از تأثیر زمان بر فعالیت خود به خودی موش جلوگیری شود. سپس موش ها بر روی یک دستگاه آنالایزر روتا میله ای قرار گرفتند و پس از سازگاری با محیط (1 دقیقه) آزمایش آغاز شد. زمان خزیدن موش ها روی روتا میله ثبت شد و هر موش 3 بار آزمایش شد. هر گروه از موش ها به طور متناوب مورد آزمایش قرار گرفتند تا از تأثیر زمان بر فعالیت خود به خودی موش جلوگیری شود.

تست بیوشیمیایی

پس از پایان تجزیه و تحلیل قوم شناسی، موش ها به مدت 12 ساعت ناشتا بودند. سپس خون شب جمع آوری شد و موش ها برای جمع آوری آن قربانی شدندکبد. خون با سرعت 2500 دور در دقیقه به مدت 15 دقیقه سانتریفیوژ شد و سرم جمع آوری شد. فعالیت های آسپارتات ترانس آمیناز (AST)، آلانین آمینوترانسفراز (ALT)، مالون دی آلدئید (MDA) و سوپراکسید دیسموتاز (SOD) توسط کیت های ارائه شده توسط موسسه مهندسی زیستی Nanjing Jiancheng تعیین شد. بخشی ازکبدبرای آزمایش بافت شناسی کبدی استفاده شد و بقیه در 1:9 در نرمال سالین سرد (NS) همگن شدند و در 3000 دور در دقیقه به مدت 15 دقیقه سانتریفیوژ شدند و مایع رویی برای آنالیز ترانس آمیناز (AST)، آلانین آمینوترانسفراز (ALT) جمع آوری شد. سوپراکسید دیسموتاز (SOD)، گلوتاتیون پراکسیداز (GSH-XP)، الکل دهیدروژناز (ADH) و آلدهید دهیدروژناز (ALDH) توسط کیت های ارائه شده توسط موسسه مهندسی زیستی Nanjing Jiancheng. تمام آزمایشات طبق دستورالعمل کیت انجام شد.

مشاهده تغییرات هیستوپاتولوژیک

بقیه کبد موش از گروه های مختلف به مدت 48 ساعت در محلول فرمالین 10 درصد تثبیت شدند. پس از مراحل استاندارد برش منجمد و رنگ‌آمیزی هماتوکسیلین-ائوزین (HE)، مقاطع رنگ‌آمیزی معمولی HE تهیه شد و تغییرات هیستوپاتولوژیک زیر میکروسکوپ نوری مشاهده شد.

تحلیل آماری

داده های آزمون اتیولوژی به صورت Mean± SEM و بقیه داده ها به صورت Mean± SD بیان شد. تمامی داده ها با استفاده از نرم افزار Graphpad Prism 5 و با استفاده از آنالیز واریانس یک طرفه و P<0.05 was="" considered="" statistically="">

نتایج

اثر JJGY بر فعالیت آنزیم های کبدی

افزایش AST و ALT کبدی معمولاً نشان دهنده این استصدمهازکبد. در شکل 1، در مقایسه با گروه مدل، فعالیت AST و ALT کبدی AH. گروه‌های BH.AB و گروه HWJZ به‌طور معنی‌داری کاهش یافتند (شکل la,1b). فعالیت AST گروه AH در مقایسه با گروه مدل به میزان 18.32 U/mL کاهش یافت و به 37.08 U/mL رسید و فعالیت ALT به U/mL 119.20 رسید. میلی لیتر بهتر از Haiwangjinzun (AST 39.40 U/mL، ALT 137.7 U/mL).

ADH و ALDH سیستم اتانول دهیدروژناز را تشکیل می دهند که در متابولیسم اتانول در یویو برای انسان و حیوانات نقش دارد. به عنوان یک آنزیم کلیدی برای متابولیسم اصلی الکل با زنجیره کوتاه در موجودات، نقش مهمی در بسیاری از فرآیندهای فیزیولوژیکی ایفا می کند، مانند راه اصلی متابولیسم الکل در بدن.کبد. پس از مصرف الکل، سطوح ADH و ALDH در موش ها (شکل lc، Id) به طور قابل توجهی افزایش یافت که می توان از تفاوت بین گروه کنترل و گروه مدل به دست آورد. گروه های AH، BL، BH، و AB سطوح آنزیمی بالاتری به دست آوردند. در مقایسه با گروه مدل و حتی گروه HWJZ، نشان دهنده کارایی بالاتر در متابولیسم الکل است.

GSH-PX می تواند پراکسید هیدروژن را در بدن از بین ببرد. فعالیت کبدی GSH-PX کمی تحت تاثیر درمان Bland BH قرار گرفت. با این حال، گروه‌های AL AH، AB و HWJZ افزایش معنی‌داری را نشان دادند (P< 0.001),="" compared="" with="" the="" model="" group="" (figure="" le),="" with="" the="" ah="" group="" (1324u/l)="" increased="" the="">

SOD به طور خاص می تواند رادیکال های آنیون سوپراکسید تولید شده در متابولیسم اکسیداتیو بدن را حذف کند، بنابراین پیری را به تاخیر می اندازد و خود ایمنی را افزایش می دهد. نتایج فعالیت SOD کبدی نشان داد که گروه‌های AH، BL و AB تفاوت معنی‌داری با گروه مدل داشتند (P<0.001) and="" the="" degree="" was="" greater="" than="" the="" hwjz="" group="" (figure="">

با در نظر گرفتن داده های بیوشیمیایی فوق، گروه AH و AB نسبت به گروه HWJZ برتری داشتند که نشان می دهد.

اثر JJGY بر بافت کبد

نتایج رنگ‌آمیزی HE برش‌های کبد از گروه‌های مختلف در شکل 2 نشان داده شده است. در گروه کنترل، ساختار بافت کبد کامل و نمایش داده شد، و هیچ دژنراسیون، نکروز، یا ارتشاح سلولی التهابی مشاهده نشد. با این حال، در گروه مدل، ساختار بافت کبد موش‌ها به طور قابل‌توجهی تغییر کرد-- سلول‌های کبدی متورم و تغییر شکل دادند، نکروز و واکوئل‌های چربی با اندازه‌های مختلف به صورت موضعی مشاهده شد. آسیب کبدی الکلی به طور قابل‌توجهی در گروه‌های AL، AH و HWJZ بهبود یافت زیرا بیشتر مورفولوژی سلولی نرمال بود. در مقایسه با نتایج گروهی که قبل از الکل دارو می‌کردند، نکروز موضعی، تغییر شکل سلول‌های کبدی و انفیلتراسیون التهابی در کبد در گروه BL و BH مشاهده شد. علاوه بر این، دوز بالاتر هر فرمول، همگی منجر به اثر بیشتر محافظت از سلول های کبد در برابر آسیب الکلی می شود.

شکل 1. اثر JJGY بر AST، ALT، ADH، ALDH، GSH-PX و SOD کبدی

کبدها از موش‌های مسمومیت حاد با الکل پس از آزمایش اتیولوژی جمع‌آوری شد، سپس در 1:9 در نرمال سالین سرد (NS) همگن شدند و با سرعت 3{12}}00 دور در دقیقه به مدت 15 دقیقه سانتریفیوژ شدند و مایع رویی برای مدت زمان جمع‌آوری شد. تجزیه و تحلیل ترانس آمیناز (AST، 1a)، آلانین آمینوترانسفراز (ALT، 1b)، گلوتاتیون پراکسیداز (GSH-PX، 1e)، سوپراکسید دیسموتاز (SOD، 1f)، الکل دهیدروژناز (ADH، 1c)، و آلدهید دهیدروژناز (ALDH، 1d) با سیستم میکروپلیت فلورسانس Mk3\. در مقایسه با گروه کنترل، ** P < 0.01،="" ***=""><0.001, compared="" with="" model="" group,="" #="" p="" <="" 0.05,="" ##="" p="" <="" 0.01,="" ###="" p="" <="">

شکل 2. اثر JJGY بر بافت کبد

کبد موش از گروه‌های مختلف در محلول فرمالین 10 درصد تثبیت شد و با رنگ‌آمیزی هماتوکسیلین-ائوزین (HE) پردازش شد. مقاطع رنگ آمیزی HE معمولی تهیه شد و تغییرات هیستوپاتولوژیک زیر میکروسکوپ نوری مشاهده شد.

اثر JJGY بر فعالیت جدی آنزیم

آسیب کبدی را می توان با فعالیت های سروز AST، ALT، MDA و SOD نیز تعیین کرد. در شکل 3، به جز گروه های AL و BL در تست فعالیت ALT، تمام فعالیت های سروزی AST و ALT گروه های تجربی تفاوت های قابل توجهی با گروه مدل دارند (شکل 3a, 3b). بیشترین کاهش در گروه AH با فعالیت سروزی AST و ALT آن به 41.33 U/mL و 1.70 U/Ml رسید، بهتر از داروی مثبت Haiwangjinzun (AST 47.29 U/mL، ALT 26.72 U/mL). در مقایسه با گروه مدل، محتوای سروز MDA در همه گروه‌های آزمایشی و گروه HWJZ به طور قابل‌توجهی کاهش یافت (شکل 3c، P < 0.{17}}01)،="" و="" فعالیت="" جدی="" sod="" در="" al،="" ah="" گروه="" های="" bh="" ab="" و="" hwjz="" به="" طور="" قابل="" توجهی="" افزایش="" یافتند="" (شکل="" 3d،="" p=""><0.01 یا="" p=""><0.001). فعالیت="" sod="" در="" گروه="" ah="" (317.8="" u/l)="" بیشتر="" از="" گروه="" hwjz="" (281.3="" u/l)="" افزایش="" یافت.="" اینها="" نشان="" می="" دهد="" که="" jjgy="" می="" تواند="" به="" طور="" موثر="" آسیب="" سلول="" های="" کبدی="" را="" کاهش="" دهد="" و="" نسبت="" به="" داروی="" مثبت="" haiwangjinzun="" برتری="">

تأثیر JJGY بر رفتارشناسی

تست رفتارشناسی می تواند تحریک پذیری غیر طبیعی مرکز و عقب ماندگی عضلانی را منعکس کند. در شکل 4، گروه های آزمایشی و گروه HWJZ با موفقیت زمان سقوط، کندنس و سرعت چرخش را افزایش دادند که تفاوت معنی داری را با گروه مدل نشان داد. در این میان، موش‌های گروه BL (P < 0.001)="" طولانی‌ترین="" مدت="" را="" روی="" آنالایزر="" چرخشی="" ماندند="" (شکل="" 4a).="" موش="" های="" گروه="" ah="" (p=""><0.001) بیشترین="" پیشرفت="" را="" در="" candence="" (شکل="" 4b)="" و="" سرعت="" چرخش="" (شکل="" 4c)="">

شکل 3. اثر JJGY بر AST، ALT، MDA و SOD سرم

پس از آزمایش اتولوژی، خون کامل از مدار موش‌های مسمومیت حاد با الکل جمع‌آوری شد. خون با سرعت 2500 دور در دقیقه به مدت 15 دقیقه سانتریفیوژ شد و سرم جمع آوری شد. فعالیت های آسپارتات ترانس آمیناز سرم (AST، 3a)، آلانین آمینوترانسفراز (ALT، 3b)، مالون دی آلدئید (MDA، 3c)، و سوپراکسید دیسموتاز (SOD، 3d) با سیستم میکروپلیت فلورسانس Mk3 تجزیه و تحلیل شد.

شکل 4. اثر JJGY بر هماهنگی حرکتی

پس از راه‌اندازی مدل مسمومیت الکلی حاد، موش‌ها روی یک آنالایزر روتا میله‌ای قرار گرفتند تا پس از سازگاری با محیط، زمان سقوط (4a) ثبت شود. پس از استراحت فراوان، موش‌ها پس از تطبیق با محیط برای ثبت Candence (4b) و Swing Speed ​​(4c) در سیستم تجزیه و تحلیل catwalk قرار گرفتند. در مقایسه با گروه کنترل، ** P < 0.01،="" ***="" p="">< 0.{{10}}01،="" در="" مقایسه="" با="" گروه="" مدل،="" #="" p=""><0.05، ##="" p=""><0.01، ###="" p=""><>

همانطور که در شکل 5 نشان داده شده است، در مقایسه با گروه مدل، ارقام مدت زمان دویدن، تغییرات سرعت پیاده روی و چرخه گام در گروه های آزمایشی به طور معنی داری کاهش یافت. موش های گروه AL بهترین بهبود را در مدت زمان دویدن (P < 0.001)="" و="" تغییر="" سرعت="" راه="" رفتن="" (p=""><0.01) (شکل="" 5a,="" 5b)="" داشتند،="" در="" حالی="" که="" موش="" های="" گروه="" al="" (001/0=""> P) بیشترین بهبود را در چرخه گام نشان دادند (شکل 5c). نور معرف نمای زمان بندی (شکل 5d) مدت زمان ایستادن و چرخش هر ماوس را نشان می دهد. راه رفتن موش‌های گروه کنترل نظم آشکاری به دست آورد در حالی که اندام‌های موش‌های گروه مدل زمان تماس طولانی‌تری با صفحه شیشه‌ای داشتند و زمان تعلیق را کوتاه می‌کردند که نشان‌دهنده اثرات منفی الکل بر راه رفتن است. نظم راه رفتن گروه آزمایش درجات بهبودی متفاوتی داشت، به ویژه گروه AH. الگوهای پا (شکل 5e) ترتیب موش ها را نشان می دهد که چهار پنجه خود را روی زمین می گذارند. در مقایسه با کنترل، الگوهای پای شناسایی شده توسط سیستم در گروه مدل به طور قابل توجهی کاهش یافت و دارای الگوهای قرمز زیادی بود. الگوهای پا در گروه‌های آزمایشی بیشتر از گروه‌های مدل شناسایی شد و الگوهای قرمز کمتری داشتند. در بین تمام گروه‌های آزمایشی، گروه AH بهترین پیشرفت را در الگوهای پیاده‌روی نشان داد.

در نتیجه، داده های هر دو شکل 4 و شکل 5 نشان می دهد که JJGY می تواند به طور قابل توجهی کندی حرکت و عدم تعادل راه رفتن ناشی از مسمومیت حاد با الکل را تنظیم کند و اختلال مرکزی را بهتر از داروی مثبت Haiwangjinzun بهبود بخشد.

شکل 5. اثر JJGY بر راه رفتن موش.

پس از تست هماهنگی حرکتی، موش ها استراحت زیادی داشتند. سپس، موش‌ها برای ثبت مدت زمان دویدن (5a)، سرعت پیاده‌روی (5b)، چرخه گام (5c)، نمای زمان‌بندی (5d، RF، جلو سمت راست؛ RH، عقب سمت راست؛ LF، جلوی چپ، در سیستم تجزیه و تحلیل catwalk قرار گرفتند. ؛ LH، عقب چپ) و الگوهای پا (5e، Aa، RF-RH-LF-LH؛ Ab، LF-RH-RF-LH؛ Ca، RF-LF-RH-LH؛ Cb، LF-RF-LH- RH؛ Ra، RF-LF-LH-RH؛ Rb، LF-RF-RH-LH). غول موش ها باید مقررات خاصی داشته باشند. در مقایسه با گروه کنترل، ** P < 0.01،="" ***=""><0.001, compared="" with="" model="" group,="" #="" p="" <="" 0.05,="" ##="" p="" <="" 0.01,="" ###=""><>

با در نظر گرفتن تمام نتایج تجربی، گروه دوز بالا (AH) فرمول A بهترین اثر را در محافظت از کبد و مخاط معده، تسکین تحریک پذیری غیر طبیعی مرکز و بهبود عقب ماندگی عضلانی دارد.

بحث

این مطالعه عمدتاً از آزمایش‌های in vivo برای توسعه و بررسی اثر درمانی نوع جدیدی از فرمول طبیعی ضد الکلی، JJGY استفاده می‌کند. فرمول JJGY از تئوری پزشکی و همسانی غذا استفاده می کند. ارزیابی هماهنگی حرکت موش‌های مسموم با الکل حاد و آنهاکبدعملکردارزیابی برای تعیین اثربخشی فرمول تهیه شده و مقایسه تفاوت بین تجویز قبل یا بعد از فرض الکل استفاده می شود.

در ابتدا، زمانی که مقدار زیادی الکل در مدت زمان کوتاهی وارد بدن انسان می شود، ابتدا متابولیسم آنزیمی در کبد انجام می شود. زمانی که مقدار الکل در بدن انسان از توانایی متابولیسم اکسیدان کبد بیشتر شود، در بافت مغز تجمع می یابد. در این فرآیند می توان از Puerariae radix، Semen Hovenia برای محافظت در برابر الکل استفاده کردکبدصدمه. اثر گیاهان با نتیجه در کبد گروه آزمایش به طور مثبت نشان داده می شود. فعالیت های AST و ALT به طور قابل توجهی کاهش یافت در حالی که فعالیت های ADH، ALDH، GSH-PX و SOD افزایش یافت. محتویات AST، ALT و MDA در سرم تا حد زیادی کاهش یافت در حالی که فعالیت SOD افزایش یافت، که نشان دهنده نکروز سلولی کمتر و متابولیسم الکلی کارآمدتر در جوندگان بود. نتیجه رنگ‌آمیزی HE برش‌های کبد اثربخشی JJGY را درکبدحفاظت.

مطالعات حاضر نشان داده است که ریشه Puerariae می تواند از دو جنبه از کبد محافظت کند: از نظر استرس اکسیداتیو، می تواند ظرفیت آنتی اکسیدانی را بهبود بخشد.کبدبافتکاهش غلظت اندوتوکسین (LPS) و مهار بیان سیتوکروم P4502E1 (CYP2E1) و در نتیجه کاهش تولید رادیکال های آزاد و همچنین کاهشکبدصدمهناشی از استرس اکسیداتیو؛ از نظر متابولیسم لیپید، تحت عمل فعال سازی AMPK 2، ریشه Puerariae می تواند فعالیت رونویسی پروتئین اتصال دهنده تنظیم کننده استرول lc(srebp-lc) را تا حد زیادی مهار کند و بیشتر از سنتز تری گلیسیرید (TG) جلوگیری کند[26] ]. مطالعه دیگری بر روی مکانیسم ضد فیبروز کبد عصاره سمن هونیا نشان داد که می تواند بیان mRNA TIMP{4}} را در میزان فیبروز کبدی کاهش دهد و به تدریج سیستم تخریب کلاژن کبد را بازیابی کند و در نتیجه فیبروز کبد را معکوس کند. در محافظت از کبد نقش دارد [27].

علاوه بر آسیب کبدی، بیشترین تأثیر الکل بیش از حد در سیستم عصبی مرکزی است. الکل بسته به میزان الکل مصرفی و تحمل فرد پس از اینکه الکل از طریق سد خونی مغزی به راحتی وارد مغز می شود، تأثیر متفاوتی بر سیستم عصبی می گذارد. الکل متعلق به بازدارنده سیستم عصبی مرکزی است و نوشیدن بیش از حد می تواند باعث سندرم مسمومیت حاد شود. تست چرخش میله و روش تجزیه و تحلیل راه رفتن Catwalk که می تواند بیماری یا آسیب در سیستم عصبی مرکزی و همچنین تأثیر داروها بر عملکرد هماهنگی حرکتی را منعکس کند، نتایج مثبتی را در جوندگان تحت درمان با JGY به شکل نشان می دهد. ترتیب قدم، راه رفتن، مدت زمان، طول گام هر پنجه، فشار پنجه و سایر پارامترها. این بهبود به این دلیل است که مواد تشکیل دهنده چای کاکائو اضافی و Semen Zizipi Spinosae می توانند تحریک پذیری غیر طبیعی مرکزی را خاموش کنند در حالی که ال-کارنوزین مسئول کاهش عقب ماندگی عضلانی است. ال-کارنوزین همچنین اثر محافظتی بر الکل داردکبدصدمه[28]. این اولین کاربرد استفاده از چای کاکائو به جای چای معمولی برای دستیابی به جایگزینی کافئین است که می تواند به طور موثر واکنش های نامطلوب ناشی از کافئین را کاهش دهد [29]. چندین مطالعه بر روی اثرات آرام بخش و خواب آور Semen Zizipi Spinosae نشان داده است که اثر آرام بخش آن به تنظیم انتقال دهنده های عصبی مرتبط، مانند کاهش سطح GLU، افزایش 5-ht، سطح GABA و تنظیم بیان GLU مرتبط است. گیرنده، و غیره، نشان می دهد که Semen Zizipi Spinosae می تواند بر روی گیرنده های متعدد واکنش نشان دهد، که منعکس کننده ویژگی های چند هدفی و اثرات هم افزایی طب سنتی چینی است [30]. JJGY همچنین اولین کسی است که از کارنوزین برای بهبود بی ثباتی راه رفتن پس از نوشیدن استفاده می کند. از آنجایی که شواهد در حال ظهور نشان می دهد که کارنوزین به عنوان یک مبدل Ca-H سیتوپلاسمی عمل می کند و مزدوج های پایداری را با آلدئیدهای واکنشی ناشی از ورزش تشکیل می دهد [31]. در مجموع می توانند هیجان بیش از حد قشر مغز ناشی از الکل، مانع عقل و بازداری در مرکز وازوموتور را کاهش دهند که ممکن است از بروز سفت شدن ماهیچه، تشنج و غیره جلوگیری کند.

علاوه بر این، کاهش جذب الکل از طریق دستگاه گوارش با افزودن پودر شیر و آرد کونیاک به دست می آید. زیرا مصرف خوراکی الکل می تواند مستقیماً به لایه لیپوپروتئینی اپیتلیوم مخاط معده آسیب برساند و در نتیجه به سد مخاطی معده آسیب برساند. در عین حال، یون‌های هیدروژن موجود در شیره معده می‌توانند به اپیتلیوم مخاطی نفوذ کرده و باعث بیماری‌های مختلف معده مانند پرخونی مخاطی و زخم شوند [32]. افزودن بیشتر گل داودی موریفولیوم، Hqgthorn [331. ریزوم ضروری [34]. Poria cocos [35] برای تقویت دیورز و تسریع دفع الکل است، که ممکن است اثر ضد تشنگی که در بالا توضیح داده شد را تسهیل کند و همچنین آسیب ناشی از الکل را در نهایت کاهش دهد.

نتیجه

بسیاری از محصولات ضد شوره در داخل و خارج از کشور وجود دارد. این محصول می‌تواند از طریق مکانیسم‌های متعدد از موش‌های مسمومیت الکلی حاد محافظت کند، از کبد محافظت کند، تحریک‌پذیری غیرطبیعی مرکز را از بین ببرد و همزمان عقب ماندگی عضلانی را بهبود بخشد. استفاده از دارو و تئوری همسانی غذا راه جدیدی را برای توسعه مواد غذایی همولوگ داروهای ضد الکل و داروهای گیاهی چینی ارائه می دهد.

منابع

1. Gao WL، XH Wang. درمان دارویی مسمومیت حاد ناشی از الکل: مروری بر ادبیات. Pharmaceutical and Clinical Research 2015,23:59-61.

2. Gonzalez-Reimers E، و همکاران، الکلیسم: یک وضعیت پیش التهابی سیستمیک. مجله جهانی گوارش: WJG 2014,20:14660.

3. لیانگ جی، آر دبلیو. OLSEN. اختلالات مصرف الکل و درمان های دارویی فعلی: نقش گیرنده های GABA A. Acta Pharmacologica Sinica 2014, 35:981.

4. هارپر سی. آسیب شناسی عصبی آسیب مغزی مرتبط با الکل. Alcohol & Alcoholism 2009, 44:136-140.

5. Fernandez-Sola' J, et al. رویدادهای مولکولی و سلولی در بیماری عضلانی ناشی از الکل الکلیسم: تحقیقات بالینی و تجربی 2007،31:1953-1962.

6. Preedy VR. اهمیت بیماری عضلانی ناشی از الکل مجله تحقیقات عضلانی و تحرک سلولی 2003،24:55-63.

7. سیمون ال، و همکاران. مصرف زیاد الکل مزمن بیان ژن میوژنیک را تغییر می‌دهد و پتانسیل تمایز میوژنیک در شرایط آزمایشگاهی میوبلاست‌ها را از S.American Journal of Rhesus macaques کاهش می‌دهد. Physiology-Regulatory, Integrative and Comparative Physiology 2014.306: 837-844.

8. LS، JS E، MP E. میوپاتی الکلی: مکانیسم های پاتوفیزیولوژیک و پیامدهای بالینی. تحقیقات الکل: بررسی های جاری 2017. 38:207.

9. LB. اثرات مصرف الکل بر دستگاه گوارش. مجله آمریکایی گوارش 2001، 95.

10. O'Shea RS، S Dasarathy، AJ McCullough. بیماری کبدی الکلی. کبد شناسی 2010.51: 307-328.

11. Ao X، Z Shu. پیشرفت در مطالعات محصولات ضد شوره. مجله چینی میکرواکولوژی 2012.24;1146-1149.

12. کیم ام اس، ام اونگ، ایکس کو. مدیریت بهینه برای بیماری کبد الکلی: داروهای معمولی، درمان طبیعی یا ترکیبی. مجله جهانی گوارش 2016.22: 8.

13. ون دی سی و همکاران. اثر ASF (ترکیب طب سنتی چینی) بر حساسیت رفتاری ناشی از اتانول و ترجیح مکان شرطی شده در موش طب مکمل و جایگزین مبتنی بر شواهد 2014، 2014.

14. وی ایکس. مطالعه آزمایشات حیوانی بر روی اثر هوشیاری مواد رایج برای تنظیم متابولیسم اتیل الکل و محصولات آنها، در دانشگاه کشاورزی هونان 2006، دانشگاه کشاورزی هونان: چانگشا.

15. Hongwei L، و همکاران. تأثیر مسمومیت حاد اتانول اژدها با نسخه پیچیده ضد الکلی. مجله مدرن یکپارچه سنتی چینی

and Westem Medicine 2007: 3310-3311 به علاوه 3422.

16. ناگاساوا تی، و همکاران. In vitro و in vivo مهار اکسیداسیون لیپید و پروتئین ماهیچه توسط درصد کارنوزین J Molecular and Cellular Biochemistry 2001,225:{3}}.

17. Jing W، و همکاران، استخراج Puerarin، و شناسایی شراب محلول برای محافظت از عملکرد کبد در موش. Journal of Regional Anatomy and Operative Surgery 2015.24: 358-361.

18 گائو XO.et al. اثر هوشیاری ریشه Radix Puerariae و Flos Pueraria برای درمان موش‌های مسمومیت حاد با الکل. Journal of Food Science and Biotechnology 2012, 31:621-627.

19. دو JA، و همکاران. عصاره Semen Hoveniae از آسیب حاد کبدی ناشی از الکل در موش محافظت می کند. Pharmaceutical Biology 2010,48:953-958.

20. گائو ایکس و همکاران. آنتی اکسیدان سلولی، به دام انداختن متیل گلیوکسال و فعالیت های ضد التهابی چای کاکائو (Camellia ptilophylla Chang). Food & Function 2017,8: 2836-2846.

21. ژای ایکس و همکاران. اثرات آرام بخش و خواب آور و اثرات آن بر EEG در موش های صحرایی بی خوابی سمن زیزیفی اسپینوساد خام و فرآوری شده فارماکولوژی و کلینیک های چینی ماتریا مدیکا 2015،31:94 97.

22. Chen LY، و همکاران. اثرات محافظتی عصاره‌های مختلف ریزوم Imperatae در موش‌های صحرایی مبتلا به نفروز آدریامایسین و تأثیر بر بیان TGF-بتا، و NF-kappaB p65.Zhong Yao cai=Zhongyaocai=مجله مواد دارویی چینی، 3815 :2342-2347.

23. ییمام م، و همکاران. ترکیب استاندارد شده از عصاره های Myristica Fragrans، Astragalus Membranaceus و Poria Cocos از کبد در برابر توهین حاد اتانول محافظت می کند. مجله غذای دارویی 1395,19:780.

24. Li Y, et al.Effects of Puerariae decoction granules and extracts of Pueraria Lobata بر آسیب حاد کبدی الکلی در موش. مجله دارویی ارتش آزادیبخش خلق چین 2018، 34:127-130.

25. Shuai TG M Wang، G Zhong. اثر حفاظتی آرد کونیاک بر آسیب مغزی حاد ناشی از الکل در موش. Food Science2018.39:207-213.

26. Qing GX. اثرات ریشه Pueraria و گل Pueraria بر حفاظت از الکل و کبد و مکانیسم آن، در دانشگاه Jiangnan 2013، دانشگاه Jiangnan.

27. لیو ایکس، اچ ژانگ، اف وانگ. تأثیر عصاره دانه FHD بر بیان تیپ-1 و نقشه-13 در بافت کبد موش‌های آزمایشگاهی. مجله چینی طب سنتی چینی 2006.31:1097-1100.

28. لیو دبلیو اچ. TC Liu.MC Yin، اثرات مفید هیستیدین و کارنوزین بر آسیب مزمن کبدی ناشی از اتانول. Food and chemical toxicology 2008, 46:1503-1509.

29. Xu J. مقایسه چهار ترکیب فیتوشیمیایی گروه چای و مطالعه بر روی تأثیر تاکرین بر سیستم عصبی مرکزی، در دانشگاه داروسازی Shenyang، 2006، دانشگاه داروسازی Shenyang.

30. بو جی اچ. سی ژانگ. H Wang، پیشرفت تحقیقاتی آزمایش دارویی مرکزی جوشانده suanzaoren. طب سنتی چینی هنان 2019، 39:307-311.

31. Matthews JJ، et al. The Physiological Roles of Carnosine and -Alanine in Exercising Human Skeletal Muscle % J Medicine & Science in Sports & Exercise 2019.

32. Tarnawski A, et al. آسیب الکل به مخاط طبیعی معده انسان: ارزیابی آندوسکوپی، بافت شناسی و عملکردی. پزشکی بالینی و تحقیقاتی. Medecine clinique et Experimentale 1987, 10:{3}}.

33. Rigelsky JM, BV Sweet Hawthorn: فارماکولوژی و کاربردهای درمانی. American Journal of Health-System Pharmacy 2002,59:417-422.

34. Shun LL، WJ Shi، FC Wang. مروری بر ترکیبات شیمیایی، عملکرد دارویی Rhizoma Imperatae و کاربرد آنها در توسعه محصولات مراقبت بهداشتی. Journal of Anhui Science and Technology University 2011,25:61-64.

35. RiosJL. ترکیبات شیمیایی و خواص دارویی Poria cocos. Planta Medica 2011, 77:681-691.