سلول های دندریتیک نوع 1 (DCs) در بیماری های کلیوی

برای اطلاعات بیشتر:ali.ma@wecistanche.com

سلول های دندریتیک نوع 1 معمولی (cDC1) در بیماری های کلیوی انسان: همبستگی های بالینی - آسیب شناختی

تیتی چن، چی کائو و همکاران.

چکیده

زمینه: سلول های دندریتیک نوع 1(cDC1) زیرمجموعه ای از DCهای معمولی است که شناخته شده ترین عملکرد آنها ارائه متقابل به سلول های CD8 به علاوه T است. ما این مطالعه را برای بررسی تعداد و مکان انجام دادیمسلول های دندریتیک نوع 1(cDC1s) در انسان های مختلفبیماری های کلیویو همچنین ارتباط آنها با ویژگی های بالینی آسیب شناسی و سلول های CD8 T.

روش ها: ما 135 مورد را تجزیه و تحلیل کردیمکلیهنمونه های بیوپسیبیماری های کلیویشامل: نکروز لوله ای حاد (ATN)، نفریت بینابینی حاد (AIN)، گلومرولونفریت پرولیفراتیو (GN) (نفروپاتی IgA، نفریت لوپوس، GN ایمنی پائوسی، بیماری ضد GBM)، GN غیر تکثیری (بیماری تغییر حداقلی، نفروپات غشایی و نفروپاتی دیابتی. رنگ آمیزی ایمونوفلورسانس غیرمستقیم برای تعیین کمیت cDC1 ها استفاده شد.سلول های دندریتیک نوع 1)، CD1ct DCها، و CD8 به علاوه سلولهای T.

نتایج:سلول های دندریتیک نوع 1(cDC1s) به ندرت در حالت عادی وجود داشتکلیه ها. تعداد آنها به طور قابل توجهی در ATN و GN پرولیفراتیو، به نسبت بسیار بیشتر از CD1ct های DC افزایش یافت. cDC1s (سلول های دندریتیک نوع 1)عمدتاً در بینابینی یافت شدند، به جز در نفریت لوپوس، GN با ایمنی پائوسی و بیماری ضد GBM، که در مناطق گلومرولی و اطراف گلومرولی برجسته بودند. تعداد cDC1 ها (سلول های دندریتیک نوع 1)با شدت بیماری در ATN، تعداد هلال در GN با ایمنی پائوسی، فیبروز بینابینی در نفروپاتی lgA، و نفریت لوپوس، و همچنین پیش آگهی در نفروپاتی IgA مرتبط است. تعداد سلول های CD8 به علاوه T نیز در این شرایط و cDC1 به طور قابل توجهی افزایش یافت (سلول های دندریتیک نوع 1)تعداد با CD8 به علاوه تعداد Tcell در نفریت لوپوس و GN با ایمنی پائوسی در ارتباط است، با بسیاری از آنها از نزدیک با هم موضعی. نتیجه گیری: cDC1 (سلول های دندریتیک نوع 1)تعداد با ویژگی‌های آسیب‌شناسی بالینی مختلف و پیش آگهی مرتبط است که نقش احتمالی در این شرایط را منعکس می‌کند. ارتباط آن‌ها با سلول‌های CD8 پلاس T نشان‌دهنده یک مکانیسم ترکیبی در مطابقت با نتایج در مدل‌های حیوانی است.

مقدمه

سلول های دندریتیک(DCs) ارکستراتورهای مرکزی ایمنی مؤثر هستند. این سلول ها ناهمگن هستند و می توان آنها را بر اساس فنوتیپ و عملکرد به زیر مجموعه های مجزا تقسیم کرد. سلول های دندریتیک را می توان به طور کلی به DC های پلاسماسیتوئید طبقه بندی کرد (سلول های دندریتیک)(pDC) و DCهای معمولی (سلول های دندریتیک)(cDC).cDC از دو زیر مجموعه اصلی تشکیل شده است: cDC1 (سلول های دندریتیک نوع 1)(CD141*های DC (سلول های دندریتیک) در انسان و CD103t یا CD8ot DCها در جوندگان) و cDC2 (DCs CD1c در انسان و CD1 lbt DCها در جوندگان) (1).cDC1 (سلول های دندریتیک نوع 1)ابتدا در موش ها و سپس در انسان ها کشف شد و با توانایی برتر آنها در فاگوسیتوز کردن سلول های نکروزه از طریق گیرنده Clec9A الگوی مولکولی مرتبط با آسیب (DAMP) و ارائه متقاطع به سلول های CD8 به علاوه T مشخص شد. در مقابل، cDC2 ها فعال کننده سلول های CD4* T موثر هستند اما در فعال سازی سلول های T CD8t پایین تر هستند (2).

دی سی ها (سلول های دندریتیک)در انسان مورد مطالعه قرار گرفته استبیماری کلیویو تعداد آنها در گلومرولونفریت (GN) افزایش یافته است (3، 4). پس از کشف cDCl، مطالعات حیوانی انباشته نشان داده است که آنها نقشی محوری در آن دارندبیماری های کلیویمانند نفروپاتی آدریامایسین و GN هلالی، از طریق تعامل با سلول های T (5-8). با این حال، چنین مطالعاتی در انسان وجود نداردبیماری کلیویتنها یک مطالعه نشان داد که تعداد cDCها افزایش یافته است (مرسومسلول های دندریتیک)در GN (9). ما این مطالعه را برای ارائه تجزیه و تحلیل زیرمجموعه های کلیدی cDC، cDC1 انجام دادیم (سلول های دندریتیک نوع 1)و cDC2، در طیف وسیعی از انسانبیماری های کلیویاز جمله بیماری‌های غیرگلومرولی [نکروز حاد توبولار (ATN)، نفریت بینابینی حاد (AIN)]، GN پرولیفراتیو (نفروپاتی IgA، نفریت لوپوس، GN پاوسی ایمنی، بیماری ضد GBM)، GN غیر پرولیفراتیو (بیماری تغییر حداقلی ( MCD)، نفروپاتی غشایی) و نفروپاتی دیابتی. ما دریافتیم که cDC به طور قابل توجهی با ویژگی های پاتولوژیک از جمله شدت ATN، تشکیل هلال در GN با ایمنی پائوسی و فیبروز بینابینی در GN با واسطه ایمنی مرتبط است. مدل‌ها، ما همچنین ارتباط آنها را با سلول‌های T CD8t در این نمونه‌ها نشان دادیم. این یافته‌ها انگیزه‌ای برای کشف اهداف درمانی جدید است که این سلول‌ها را برای درمان دستکاری می‌کنندکلیهبیماری ها.

برای بیماری کلیوی روی ساقه سیستانچ کلیک کنید

مواد و روش ها

بیماران و نمونه های بافت

این مطالعه مطابق با اصول اعلامیه هلسینکی انجام شد و توسط کمیته اخلاق تحقیق انسانی منطقه بهداشت محلی غرب سیدنی تایید شد. رضایت آگاهانه بیمار اخذ شد. ما 176 تشخیصی منجمد را تجزیه و تحلیل کردیمکلیهbiopsy samples taken from non-pregnant adult patients(>18 ساله) بین 18 ژوئن 2016 تا 30 ژوئن 2017 در بیمارستان Westmead، سیدنی، استرالیا.کلیهبافت‌ها در OCTcompound (Tissue-Tek Sakura، ایالات متحده آمریکا) منجمد شدند و در درجه {2}} نگهداری شدند. چهل و یک (41) نمونه کیفیت بافت ضعیفی داشتند و از مطالعه حذف شدند. داده‌های اولیه بیمار شامل سن، جنسیت، تخمین میزان فیلتراسیون گلومرولی (eGFR) و درجه پروتئینوری در زمان ابتلا جمع‌آوری شد.کلیهbiopsy.eGFR با استفاده از فرمول CKD-EPI محاسبه شد. تشخیص توسط پاتولوژیست کلیه بر اساس نور، ایمونوفلورسانس (IF) و میکروسکوپ الکترونی و همچنین سابقه بالینی انجام شد.

انواع بیماری‌ها از جمله بیماری‌های غیرگلومرولی (ATN، AIN)، GN پرولیفراتیو (نفروپاتی IgA، نفریت لوپوس، GN ایمنی پائوسی، بیماری ضد GBM)، GN غیر پرولیفراتیو (MCD، نفروپاتی غشایی) و دیابتی مورد بررسی قرار گرفتند. نفروپاتی برای ATN، ما فقط موارد غیر سپتیک را وارد کردیم زیرا ATN سپتیک پاتوفیزیولوژی متفاوتی دارد. ATN بیشتر به بیماری خفیف تا متوسط ​​طبقه بندی شد (تعریف شده به عنوان<50%cortical tubules="" showing="" injury)and="" severe="" disease="" (="">=50 درصد لوله‌های قشری که آسیب را نشان می‌دهند). نفروپاتی IgA بر اساس نمره MEST آکسفورد (هیپرسلولاریت مزانژیال M، هیپرسلولاریت اندوکاپیلاری E، گلومرولواسکلروز سگمنتال S، آتروفی توبولار T/فیبروز بینابینی) طبقه بندی شد. ما همچنین ارتباط بین cDC1 را تجزیه و تحلیل کردیم (سلول های دندریتیک نوع 1) number and prognosis (defined a priori as >20% reduction in eGFR on or before 31t December 2019)in IgA nephropathy by dividing patients into 2 groups according to cDC number with a cut-off point at the upper quartile(>=15). نفریت لوپوس بر اساس سطح فیبروز بینابینی به 2 گروه طبقه بندی شد.<25%,>=25 درصد درگیری بینابینی قشر مغز). Pauci-Immune GN به 2 گروه با توجه به درصد گلومرول ها با هلال طبقه بندی شد.<40%,>=40 درصد).

طبق معمولکلیهدر گروه شاهد، از 5 قشر کلیوی طبیعی از نمونه های نفرکتومی و همچنین 2 اهداکننده استفاده کردیم.کلیه هابرای پیوند مناسب نیست برای نفرکتومی تومور، نمونه ها از قطب مقابل تومور و حداقل 5 سانتی متر از حاشیه تومور گرفته شد. این بافت ها ظاهر ماکروسکوپی طبیعی داشتند. از نظر میکروسکوپی هیچ کدام از اینها نیستکلیهنمونه‌ها شواهدی از التهاب یا آسیب گلومرولی یا لوله‌ای بینابینی داشتند. ما از بافت طحال اهداکننده بالغ به عنوان کنترل مثبت برای آزمایش آنتی بادی ها استفاده کردیم.

رنگ آمیزی ایمونوفلورسانس

مقاطع کرایوستات سریال در 5μm برش داده شد و بر روی لام های شیشه ای Superfrost Ultra Plus (Thermo Scientific، ایالات متحده آمریکا) قرار گرفت. اسلایدها در درجه -80 ذخیره شدند. مقاطع بافت با متانول 100 درصد به مدت 10 دقیقه در درجه {3}} ثابت و سپس در هوا خشک شدند. رنگ آمیزی ایمونوفلورسانس غیرمستقیم با استفاده از روش زیر انجام شد: مقاطع بافتی در DPBS (Lonza، ایالات متحده آمریکا) شسته و با 2 درصد سرم آلبومین گاوی (سیگما آلدریچ، ایالات متحده آمریکا) به مدت 15 دقیقه مسدود شدند. سپس با آنتی بادی اولیه در دمای 4 درجه یک شبه رنگ آمیزی شدند و سپس آنتی بادی های ثانویه به مدت 40 دقیقه در دمای اتاق رنگ آمیزی شدند. جدول 1 فهرستی از آنتی بادی های اولیه و ثانویه مورد استفاده و رقت های آنها است. قبل از اینکه نمونه‌ها روی روکش‌هایی با محیط نصب فلورسانس نصب شوند، هسته‌ها با DAPI (1:250،{14}}، ThermoFisher، USA) رنگ‌آمیزی شدند (داکو، ایالات متحده). رنگ‌آمیزی غیر اختصاصی و واکنش متقاطع بین آنتی‌بادی‌های اولیه و ثانویه مختلف بررسی و حذف شد.

جدول 1|آنتی بادی های اولیه و ثانویه مورد استفاده در مطالعه

cDC ها با رنگ آمیزی برای نشانگر Clec9A شناسایی شدند. در انسان، بیان Clec9A به شدت به cDCs در خون و بافت محدود می شود (10، 11). برای تایید این موضوع درکلیه هارنگ آمیزی مضاعف Clec9A و HLA-DRB1 و همچنین Clec9A و CD1lc را در شرایط عادی و بیمار منتخب انجام دادیم. بیشتر، اگر نگوییم همه Clec9A با HLA-DRB1 (شکل تکمیلی 1) و CD1lc (تصویر تکمیلی 2) همپوشانی داشتند.

شکل 1|cDC1 کلیه طبیعی (سلول های دندریتیک نوع 1)سلول های cDC2 و CD8 به علاوه T.

دی سی ها (سلول های دندریتیک)به ندرت در حالت عادی وجود داشتندکلیه هاو اعداد cDC2 تقریباً 7 برابر تعداد cDC1 بود (سلول های دندریتیک نوع 1). (نوار=100 میلی متر).

نتایج

ویژگی های پایه بیمار.ویژگی های پایه بیماران در گروه های کنترل و بیماری در جدول 2 خلاصه شده است. در مجموع 135 بیمار در مطالعه وارد شدند. طیف وسیعی از بیمارانکلیهبیماری هااز جمله بیماری‌های غیرگلومرولی [ATN (22)، AIN (10)]، نفروپاتی GN[gA (44)، نفریت لوپوس (12)، GN-ایمنی پائوسی (12)، بیماری ضد GBM (4)] تجزیه و تحلیل شدند. ، GN غیر پرولیفراتیو [MCD(5)، نفروپاتی غشایی(5)] و نفروپاتی دیابتی (21). تعداد زنان در گروه نفریت لوپوس بیشتر بود و سن آنها در مقایسه با سایرین جوان تر بودکلیهبیماری هاکه با ادبیات همخوانی دارد(12). بیماران مبتلا به GN ایمنی پائوسی و بیماری ضد GBM کمترین eGFR را داشتند. سطح پروتئینوری در MCD و نفروپاتی غشایی بالاترین میزان بود.

جدول 2|ویژگی های پایه

تعداد و محل DCها (سلول های دندریتیک)در کنترل و بیماریcDC ها به ندرت در حالت عادی وجود داشتندکلیه ها(شکل 1) و اعداد cDC2 تقریباً 7 برابر تعداد cDC1 بودند (سلول های دندریتیک نوع 1)تعداد cDC1 (سلول های دندریتیک نوع 1)به طور قابل توجهی در ATN و GN پرولیفراتیو افزایش یافت (شکل 2A)، در حالی که تعداد آنها در مقایسه با شاهد در AIN، نفروپاتی غشایی، MCD و نفروپاتی دیابتی بدون تغییر باقی ماند (شکل تکمیلی 3). تعداد cDC2 نیز به طور قابل توجهی در ATN و GN پرولیفراتیو افزایش یافت (شکل 2B). کاهش در cDC2 وجود دارد (سلول های دندریتیک نوع 2)/cDC1 (سلول های دندریتیک نوع 1)نسبت نشان دهنده cDCl (سلول های دندریتیک نوع 1)به نسبت بیشتر از cDC2 افزایش یافت (شکل 2C).

شکل 2|تعداد cDC1 (سلول های دندریتیک نوع 1)و cDC2، نسبت cDC2/cDC1، و CD8 به علاوه سلول T در کنترل و بیماری های منتخب.

P-value برای هر بیماری در مقابل کنترل محاسبه می شود. هر دو cDC1 (سلول های دندریتیک نوع 1)و cDC2 به طور قابل توجهی در ATN، IgA، نفریت لوپوس، GN ایمنی پائوسی و بیماری ضد GBM (A, B) افزایش یافت.

با cDC1 (سلول های دندریتیک نوع 1)نسبت به cDC2 در ATN، نفریت لوپوس، GN ایمنی پائوسی، و بیماری ضد GBM (C) بیشتر از cDC2 افزایش یافت.

سلول های CD8 به علاوه T در ATN، IgA، نفریت لوپوس، GN ایمنی پائوسی و بیماری ضد GBM (D) به طور قابل توجهی افزایش یافت.

اکثر cDC ها در بینابینی قرار داشتند، به جز در نفریت لوپوس، GN ایمنی پائوسی، و بیماری ضد GBM که در مناطق اطراف گلومرولی و داخل گلومرولی نیز یافت شدند (شکل 3A). تعداد سلول های CD8t T در نواحی اطراف گلومرولی و داخل گلومرولی (شکل 3A) و بسیاری از آنها با cDCls هم موضعی شده اند (شکل 3B). از سوی دیگر، cDC2s به ندرت در نواحی داخل گلومرولی یافت شد حداقل هم محلی سازی با سلول های CD8 به علاوه T.

شکل 3|(الف) cDC1 (سلول های دندریتیک نوع 1)و سلول های CD8 پلاس T در نواحی داخل گلومرولی. (B) cDC1 هم محلی سازی با سلول های CD8 به علاوه T. (نوار=100 میلی متر). * P < 0.05،="" **="" p=""><>

ارتباط بین cDC1 (سلول های دندریتیک نوع 1)با ویژگی‌های بالینی - پاتولوژیک و سلول‌های CD8 به علاوه T، همبستگی بین cDCl را تجزیه و تحلیل کردیم. (سلول های دندریتیک نوع 1)و ویژگی های بالینی آسیب شناسی و همچنین سلول های CD8 به علاوه T. 22 مورد ATN (بیماری خفیف مود n=12، بیماری شدید n=10) وجود داشت. بیماری شدیدتر با تعداد بالاتر cDC1 همراه بود (سلول های دندریتیک نوع 1)(p{0}}.032)، اما نه cDC2 (شکل 4A).cDC1 (سلول های دندریتیک نوع 1)نسبتاً بیشتر از cDC2 افزایش یافت (نسبت cDC2/cDC1 2.5، p{5}}.019). تعداد سلول های CD8 به علاوه T نیز در ATN به طور قابل توجهی افزایش یافت (005/0=0) ​​(جدول 3، شکل 2D). تعداد cDC1 (سلول های دندریتیک نوع 1)با شماره سلول T CD8* در ATN همبستگی نداشت.

جدول 3|CD8 به علاوه تعداد سلول T و ضریب همبستگی بین cDC1 (سلول های دندریتیک نوع 1)و تعداد سلول های CD8 به علاوه T در کلیه های کنترل و بیمار.

چهل و چهار مورد نفروپاتی IgA مورد بررسی قرار گرفت. با استفاده از نمره MEST طبقه بندی آکسفورد (هیپرسلولاریت مزانژیال M، هیپرسلولیری اندوکاپیلاری E، گلومرولواسکلروز سگمنتال S، آتروفی توبولار T/فیبروز بینابینی)، تعداد بالاتر cDC1 (سلول های دندریتیک نوع 1)با نمره T بالاتر (p{0}}.008)، اما نه امتیاز MES (شکل 4B) همراه بود. 7 مورد با هلال وجود داشت و تعداد cCD1 با تعداد هلال ارتباط نداشت. تعدادکلیهسلول های CD8* T در نفروپاتی IgA به طور قابل توجهی بیشتر از گروه شاهد بود (ص<0.001) (table="" 3,="" figure="" 2d).="" there="" was="" no="" correlation="" between=""> (سلول های دندریتیک نوع 1) and CD8+ T cell numbers. Thirty-five(35)patients had follow-up data on or before 31sf December 2019, of whom9experienced>کاهش 20 درصدی در eGFR. تقسیم بیماران به 2 گروه بر اساس cDCl (سلول های دندریتیک نوع 1) number with a cut-off point at the upper quartile(>=15)، cDC1 بالاتر است (سلول های دندریتیک نوع 1)گروه شماره با پیامدهای بدتری همراه بود (شکل 4E).

شکل 4|همبستگی بین cDC1 (سلول های دندریتیک نوع 1)، cDC2 و CD8 به اضافه تعداد سلول T و شدت بیماری (A-D).

منحنی کاپلان مایر بقای نفروپاتی IgA (E). امتیاز T 0 به درصد ناحیه ای که آتروفی لوله‌ای/فیبروز بینابینی را نشان می‌دهد <=25>

نمره T 1 به درصد ناحیه ای که آتروفی توبولار/فیبروز بینابینی را نشان می دهد 26 - 50 درصد، T امتیاز 2 به درصد ناحیه نشان دهنده آتروفی لوله/فیبروز بینابینی > 50 درصد اشاره دارد.

بقا به عنوان کاهش > 20 درصدی در eGFR در 31 دسامبر 2019 یا قبل از آن تعریف شد. NS، معنی دار نیست.

12 مورد نفریت لوپوس وجود داشت. همانند نفروپاتی IgA، تعداد cDCl بالاتر با فیبروز شدیدتر همراه بود (p{1}}.020) (شکل 4C). علاوه بر این، تعداد سلول های CD8 به علاوه T نیز به طور قابل توجهی افزایش یافت (P<0.001) (table="" 3,="" figure="" 2d)="" and="" this="" correlated="" with="" the="" number="" of="" cdcl="" cells="" (r="0.614," p="0.034)" (table="" 3).a="" significant="" number="" of=""> (سلول های دندریتیک نوع 1)و سلول های CD8t T در اطراف گلومرولی و همچنین درون گلومرولی یافت شدند که نشان می دهد ممکن است در این وضعیت نقش داشته باشند، دوم، در بیماری ناشی از سیستم ایمنی مرتبط با فیبروز بینابینی (نفروپاتی IgA و نفریت لوپوس)، ما دریافتیم که cDC1 (سلول های دندریتیک نوع 1)تعداد با شدت فیبروز و همچنین پیش آگهی نفروپاتی IgA مرتبط است، در حالی که چنین همبستگی در بیماری فیبروتیک با واسطه غیر ایمنی (نفروپاتی دیابتی) یافت نشد. سوم، یک ارتباط قوی بین تعداد cDCl و تشکیل هلال در GN با ایمنی پاوسی وجود داشت و cDCl به تعداد زیاد در نواحی اطراف گلومرولی و داخل گلومرولی وجود داشت که نشان دهنده نقش احتمالی آنها در تشکیل هلال است. چهارم، تعداد cDC1 با تعداد سلول های CD8 به علاوه T در نفریت لوپوس و GN با ایمنی پائوسی مرتبط است، با cDC های متعددی که با سلول های CD8 به علاوه T هم موضعی شده اند که برهمکنش احتمالی آنها را نشان می دهد. این با یافته های ما در مدل های حیوانی مطابقت داردکلیهمرضکه همولوگ های موشی cDC1 را نشان می دهد (سلول های دندریتیک نوع 1)سلول ها ترجیحا سلول های CD8t T را فعال می کنند. روی هم رفته، این یافته‌ها نشان می‌دهند که cDCl نقش مهمی را در طیف وسیعی از موارد ایفا می‌کندکلیهبیماری هااز جمله ATN، فیبروز بینابینی در بیماری با واسطه ایمنی، و تشکیل هلال و اینکه آنها ممکن است به طور بالقوه از طریق فعال سازی سلول های T CD8t عمل کنند.

cDC1 (سلول های دندریتیک نوع 1)تعداد مرتبط با شدت بیماری در ATN. در ATN غیر سپتیک، برای اولین بار، ما افزایش قابل توجهی تعداد DCها را نشان دادیم (سلول های دندریتیک)به خصوص cDCs در مقایسه با cDC2s. نکته مهم، cDC1 (سلول های دندریتیک نوع 1)تعداد مرتبط با شدت بیماری علاوه بر این، تعداد سلول های CD8 به علاوه T نیز افزایش یافت. ATN معمولاً در اثر آسیب ایسکمی-پرفیوژن مجدد (IRI)، نفروتوکسین ها یا سپسیس ایجاد می شود. به طور سنتی، IRI و سموم باعث التهاب استریل می شوند و ایمنی ذاتی، که در آن سلول های DC و T از اهمیت کمتری برخوردار هستند، نقش غالب در نظر گرفته می شد. با این حال، شواهد فزاینده از مطالعات حیوانی نشان داده است که هر دو سلول های cDCl و CD8 به علاوه T بازیگران مهمی هستند. مطالعات قبلی در IRI حیوانی و سمیت کلیوی سیس پلاتین نشان داد که تعداد کل سلول‌های DCand T افزایش یافته است (13-17). مطالعات قبلی ما نشان داد که در نفروپاتی آدریامایسین، تعداد cDCl به طور قابل توجهی افزایش یافته است (5). در IRI، زیرمجموعه‌ای از سلول‌های دندریتیک فعال شده ظرفیت افزایش یافته برای آنتی ژن متقاطع سلول‌های CD8t را نشان می‌دهند (18). در نفروپاتی آدریامایسین، ما همچنین دریافتیم که cDCls یک پاسخ سلول CD8 به علاوه T منجر به آسیب می شود (5). عدم وجود ارتباط بین cDC1 (سلول های دندریتیک نوع 1)و سلول T CD8 در ATN انسان بر خلاف یافته‌های مدل‌های حیوانی ممکن است مسیرهای غیرایمونولوژیکی آسیب در ATN انسان را در مقایسه با IRI در مدل‌های موش منعکس کند که در آنها cDCls از طریق سلول‌های CD8* T نقش مهمی بازی می‌کنند. علاوه بر این، در جوندگان نشان داده شده است که cDCl توسط شیمی‌کشنده XCLl تولید شده توسط سلول‌های کشنده طبیعی به بافت جذب می‌شود (19). بنابراین، مطالعه بیشتر در این زمینه ممکن است ارزشمند باشدکلیهمرض.

cDC1 (سلول های دندریتیک نوع 1)تعداد مرتبط با فیبروز بینابینی با واسطه ایمنی. دومین یافته مهم در این مطالعه این است که تعداد cDCl با شدت فیبروز بینابینی مرتبط با بیماری ناشی از سیستم ایمنی (نفروپاتی IgA و نفریت لوپوس)، اما در بیماری فیبروتیک با واسطه غیر ایمنی (نفروپاتی دیابتی) ارتباط دارد، مطالعه قبلی نشان داد. افزایش تعداد cDCls و cDC2s در فیبروز بینابینی (9). ما برای اولین بار نشان دادیم که این فقط در بیماری های ناشی از سیستم ایمنی و cDC1 صادق است (سلول های دندریتیک نوع 1)تعداد به نسبت بیشتر از cDC2 افزایش یافت. علاوه بر این، ما همچنین cDC1 را نشان دادیم (سلول های دندریتیک نوع 1)تعداد همبستگی با پیش آگهی و تعداد سلول های CD8* T نیز در نفروپاتی IgA به طور قابل توجهی افزایش یافت. این توسط مطالعات حیوانی که DCها را نشان می دهد پشتیبانی می شود (سلول های دندریتیک)به طور مستقیم به فیبروز کمک می کند. به عنوان مثال، آمفیرگولین مشتق شده از DC باعث افزایش فیبروز می شود (20). همچنین این امکان وجود دارد که cDC ها از طریق سلول های CD8 به علاوه T به فیبروز کمک کنند، که به فیبروز در سایر اندام ها کمک می کنند (21-23). از آنجایی که فیبروز بینابینی با پیشرفت مزمن مرتبط استکلیهمرض، جای تعجب نیست که cDC1 را پیدا کردیم (سلول های دندریتیک نوع 1)این عدد یک نشانگر پیش آگهی خوب در نفروپاتی IgA است. مطالعات دیگر نشان داده اند که سلول های CD8t T با پیش آگهی نفروپاتی IgA مرتبط هستند (24)، که ممکن است نتیجه ارائه متقابل از cDCls باشد. در نفریت لوپوس، ما ارتباط بین cDC1 را نشان دادیم (سلول های دندریتیک نوع 1)تعداد و فیبروز بینابینی و همچنین تعداد سلولهای T CD8t. مطالعات قبلی نیز افزایش را نشان داده استکلیهcDC1 (سلول های دندریتیک نوع 1)تعداد نفریت لوپوس (25)، به ویژه نفریت لوپوس کلاس III و VI، با کاهش متناظر در تعداد گردش آنها (26). ما این یافته ها را با نشان دادن اینکه آنها همچنین با تغییرات مزمن همبستگی دارند گسترش دادیم. به خوبی ثابت شده است که التهاب بینابینی، که از سلول‌های T، سلول‌های B، سلول‌های دندریتیک و ماکروفاژها تشکیل شده است، نقش غالبی در پیشرفت نفریت لوپوس دارد (27). از راه ها اول، فعال شدن اینترفرون نقش کلیدی در پاتوژنز نفریت لوپوس (28-30) دارد و cDCls تولید کننده برجسته IFN-入 هستند. (31) دوم، cDC1 (سلول های دندریتیک نوع 1)ممکن است به پیشرفت نفریت لوپوس از طریق سلول‌های T CD8t (32-37) کمک کند و یافته‌های ما از ارتباط بین cDCls و CD8 به علاوه T بیشتر از تعامل احتمالی آنها پشتیبانی می‌کند. نقش سلول های CD8 به علاوه T در نفریت لوپوس قبلا نشان داده شده است. سلول های CD8 پلاس T با آزادسازی مولکول های سیتوتوکسیک، ایمنی خود واکنشی را کنترل می کنند. سلول‌های CD8 به علاوه T در نفریت لوپوس، عملکرد سیتوتوکسیک را کاهش می‌دهند، که می‌تواند باعث ایجاد خودایمنی شود (38). علاوه بر این، این سلول ها همچنین می توانند اتوآنتی ژن لوپوس تولید کنند (39). شواهد فراوانی وجود دارد که سلول های CD8* T در هر دو را نشان می دهدکلیه(32،33) و ادرار (34-36) با فعالیت بیماری و آسیب بافتی در نفریت لوپوس ارتباط دارد. علاوه بر این، فرسودگی سلول های T CD8 برای پیش بینی پیش آگهی مطلوب نشان داده شد (37).

cDC1 (سلول های دندریتیک نوع 1)تعداد مرتبط با تعداد هلال در Pauci-Immune GN. در GN با ایمنی پائوسی، ما cDCls را در نواحی اطراف گلومرولی و داخل گلومرولی تجمع یافتیم و تعداد آنها با تعداد هلال‌ها و سلول‌های CD8 به علاوه T مرتبط بود. مطالعات قبلی نشان داد که DCها (سلول های دندریتیک)به ندرت در داخل گلومرول (3،4،9) و یا فقط به تعداد بسیار کم (40) وجود دارند. از طرف دیگر، سلول های T در ناحیه بینابینی، اطراف گلومرولی و داخل گلومرولی برجسته بودند ({6} }). ما دریافتیم که سلول‌های cDCls و CD8* T در نواحی اطراف گلومرولی و داخل گلومرولی برجسته هستند و بسیاری از آنها به صورت مشترک موضعی هستند. علاوه بر این، cDC1 (سلول های دندریتیک نوع 1)تعداد با هلال و CD8 به علاوه اعداد سلول T در ارتباط است. همه این یافته‌ها نقش cDCl را در تشکیل هلال از طریق تعامل با سلول‌های CD8* T نشان می‌دهند. نقش بیماری‌زایی سلول‌های CD8t T در تشکیل GN و هلال ایمنی پائوسی قبلاً در مدل‌های حیوانی نشان داده شده است (45،46). مطابق با یافته های ما در انسان، در هلال حیوانی GN، cDC1 (سلول های دندریتیک نوع 1)و سلولهای CD8* T به ویژه در ناحیه پری گلومرولی یافت شدند (47،48). نشان داده شده است که کپسول بومن با جلوگیری از دسترسی DCها و سلولهای سیتوتوکسیک CD8 به علاوه T به فضای بومن و در نتیجه پادوسیتها، یک طاقچه ایمنی محافظت شده را فراهم می کند (45،47). با این حال، هنگامی که کپسول بومن شکسته شد، این سلول های التهابی دسترسی پیدا کردند و سلول های پادوسیت را از بین بردند و در نتیجه GN به سرعت پیشرونده شدند (47).

یکی از محدودیت‌های این مطالعه این است که تکنیک رنگ‌آمیزی IF امکان استفاده از تعداد محدودی نشانگر را می‌دهد. سودمند است که یافته های خود را با استفاده از فناوری مانند فلوسیتومتری گسترش دهیم، که می تواند چندین نشانگر را برای تجزیه و تحلیل بیشتر فنوتیپ این DCها ترکیب کند. (سلول های دندریتیک)و مشخصات سیتوکین و کموکاین مربوطه آنها. با این حال، اطلاعات مکان از بین خواهد رفت. تکنیک‌های دیگری مانند ایمونوهیستوشیمی مالتیپلکس و نانواسترینگ را نیز می‌توان در مطالعات آینده برای بررسی بیشتر این سلول‌ها در نظر گرفت.کلیهمرض. علاوه بر این، هنگام رنگ آمیزی cDC2 ها با استفاده از CD1c، HLA-DRB1 و CD1lc، ممکن است درصد کمی از سلول های B وجود داشته باشد که این نشانگرها را نیز بیان می کنند، که رد نشده است.

نتیجه گیری

حتی اگر cDC1 (سلول های دندریتیک نوع 1)شامل یک زیر مجموعه کوچک از DCها است (سلول های دندریتیک)در شرایط هموستاتیک، این مطالعه ارتباط معنی داری بین این جمعیت سلولی و ویژگی های بالینی پاتولوژیک در انسان را نشان می دهد.کلیهمرض. این نشان دهنده اهمیت احتمالی آنها در فرآیندهای بیماری مانند ATN، تشکیل هلال در GN پرولیفراتیو، و فیبروز بینابینی در GN با واسطه ایمنی است. علاوه بر این، هم‌محلی‌سازی و همبستگی آن‌ها با سلول‌های T CD8t ممکن است توضیحی برای مکانیسم عمل آن‌ها ارائه دهد و داده‌های مدل‌های حیوانی را تأیید کند. این یافته‌ها انگیزه‌ای برای کشف اهداف درمانی جدید است که این سلول‌ها را برای درمان دستکاری می‌کنندکلیهبیماری هاهمانطور که در مطالعات حیوانی انجام داده ایم (6) و برای بررسی استفاده از آنها به عنوان یک نشانگر پیش آگهی. برای بررسی نقش cDC1 به مطالعات بیشتری در انسان و حیوان نیاز است (سلول های دندریتیک نوع 1)مکانیسم عمل آنها و بهترین روش برای هدف قرار دادن آنها از نظر درمانی.

منابع

1. Pakalniskyte D, Schraml BU. تنوع بافتی و عملکرد سلول های دندریتیک معمولی. Adv Immunol(2017)134:89-135.doi:10.1016/bs.ai.2017.01.003

2. Merad M, Sathe P, Helft J, Miller J, Mortha A. The Dendritic Cell Lineage: Ontogeny and Function of Dendritic Cells and Subsets their in Staady State and the Inflamed Setting. Annu Rev Immunol (2013)31:563-604.doi:10.1146/annual immunol-020711-074950

3. Segerer S, Heller F, Lindenmeyer MT, Schmid H, Cohen CD, Draganovici D, et al. بیان اختصاصی محفظه نشانگرهای سلولی دندریتیک در گلومرولونفریت انسانی.کلیهInt (2008)74(1):37-46.doi:10.1038/ki.2008.99

4. Woltman AM, de Fiter JW, Zuidwijk K, Vlug AG, Bajema IM, van der Kooij SW, et al. تعیین کمیت زیرمجموعه های سلولی دندریتیک در بافت کلیه انسان در شرایط طبیعی و پاتولوژیک.کلیهInt (2007)71(10):1001-8. doi: 10.1038/sj.ki.5002187

5. Cao Q، Lu J، LiQ، Wang C Wang XM، Lee VW، و همکاران. سلول های دندریتیک Cd103 پلاس پاسخ سلول های Cd8 به علاوه T را برای تسریع ایجاد می کنندکلیهجراحتدر نفروپاتی آدریامایسین J Am Soc Nephrol (2016) 27(5):1344-60.doi: 10.1681/ASN.2015030229

6. وانگ آر، چن تی، وانگ سی، ژانگ زی، وانگ ایکس ام، لی کیو و همکاران، مهار Flt3 را کاهش می دهد.مزمنکلیهمرضبا سرکوب CD103 به علاوه فعال سازی سلول های T با واسطه سلول های دندریتیک. Nephrol Dial Transplant(2019)34(11):1853-63. DOI: 10.1093/gfy385

7. Evers BD، Engel DR، Bohner AM، Tittel AP، Krause TA، Heuser C، و همکاران Cd103 plusکلیهسلول‌های دندریتیک با حفظ Il-10-تولید سلول‌های T تنظیم‌کننده در برابر GN هلالی محافظت می‌کنند. J Am Soc Nephrol (2016)27(11):3368-82. DOI: 10.1681/ASN.2015080873

8. کیچینگ AR، Ooi JD. سلول های دندریتیک کلیه: جاده طولانی و پر پیچ و خم. J Am Soc Nephrol (2018)29(1):4-7.doi: 10.1681/ASN.2017101145

9. Kassianos AJ، Wang X، Sampangi S، Muczynski K، Healy H، Wilkinson R. افزایش جذب توبولو بینابینی انسان CD141(hi)CLEC9A(+) و CD1c(+) زیر مجموعه سلول های دندریتیک میلوئید در فیبروز کلیه و BکلیهB. Am J Physiol Renal Physiol (2013)305(10): F1391-401. doi:10.1152/adrenal.00318.2013

10. Guilliams M، Dutertre CA، Scott CL، McGovern N، Sichien D، Chakaro S، و همکاران. تجزیه و تحلیل بدون نظارت با ابعاد بالا، سلول های دندریتیک را در سراسر بافت ها و گونه ها تراز می کند. Immunity (2016)45(3):669-84.doi: 10.1016/j.immuni.2016.08.015

11. Villani AC، Satija R، Reynolds G، Sarkizova S، Shekhar K، Fletcher J، و همکاران. RNA-seq تک سلولی انواع جدیدی از سلول های دندریتیک خون انسان، مونوسیت ها و اجداد را نشان می دهد. Science(2017)356(6335):4-6. DOI: 10.1126/science.aah4573

12. المعانی س، معرا ع، رویین بی.اچ. به روز رسانی در مورد نفریت لوپوس Clin I Am Soc Nephrol (2017)12(5):825-35.doi: 10.2215/CJIN.05780616

توجه داشته باشید:موارد فوق یک لیست مرجع کامل نیست