4.6. مواد واکنش دهنده به اسید تیوباربیتوریک (TBARs)

محتوای TBARs به عنوان شاخص لیپوپراکسیداسیون استفاده شد. در بافت مغز، 5{9}} میلی مولار بافر فسفات (pH 7.4) به غلظت 25 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر (وزن / حجم) اضافه شد و سوسپانسیون به مدت 10 ثانیه با فراصوت همگن شد. به 30 میکرولیتر هموژنه، 250 میکرولیتر اسید فسفریک 1 درصد و 75 میکرولیتر تیوباربیتوریک اسید 0.6 درصد (TBA) اضافه شد. مخلوط معرف در دمای 100 درجه سانتیگراد در یک حمام آب به مدت 45 دقیقه انکوبه شد، سپس در یک حمام یخ خنک شد و سپس در 3000 × گرم به مدت 10 دقیقه در دمای 4 درجه سانتیگراد سانتریفیوژ شد. حجم 150 میکرولیتر مایع رویی از هر نمونه گرفته شد. فلورسانس با استفاده از یک میکروپلیت خوان FLUOSTAR (BMG LABTECH، Ortenberg، بادن-وورتمبرگ، آلمان) با فیلتر تحریک روی 485 نانومتر (پهنای باند 5 نانومتر) و فیلتر انتشار روی 530 نانومتر (پهنای باند 5 نانومتر) اندازه‌گیری شد. منحنی کالیبراسیون با استفاده از مالون دی آلدئید (MDA) به عنوان استاندارد تهیه شد. نتایج در pmol MDA/mg پروتئین بیان شد.

گلیکوزید سیستانچ همچنین می تواند فعالیت SOD را در بافت های قلب و کبد افزایش دهد و به طور قابل توجهی محتوای لیپوفوسین و MDA را در هر بافت کاهش دهد و به طور موثر رادیکال های مختلف اکسیژن فعال (OH-، H2O2 و غیره) را از بین ببرد و از آسیب DNA ناشی از آن محافظت کند. توسط رادیکال های OH گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید سیستانچ دارای توانایی مهار قوی رادیکال های آزاد، توانایی کاهش بالاتری نسبت به ویتامین C، بهبود فعالیت SOD در سوسپانسیون اسپرم، کاهش محتوای MDA و اثر محافظتی خاصی بر عملکرد غشای اسپرم هستند. پلی ساکاریدهای سیستانچ می توانند فعالیت SOD و GSH-Px را در گلبول های قرمز و بافت ریه موش های آزمایشگاهی مسن ناشی از D-گالاکتوز افزایش دهند و همچنین محتوای MDA و کلاژن را در ریه و پلاسما کاهش دهند و محتوای الاستین را افزایش دهند. اثر پاک کنندگی خوب بر روی DPPH، طولانی شدن زمان هیپوکسی در موش های پیر، بهبود فعالیت SOD در سرم، و به تاخیر انداختن انحطاط فیزیولوژیکی ریه در موش های آزمایشگاهی پیر. و این پتانسیل را دارد که دارویی برای پیشگیری و درمان بیماری های پیری پوست باشد. در عین حال، اکیناکوزید موجود در سیستانچ توانایی قابل توجهی در از بین بردن رادیکال های آزاد DPPH دارد و توانایی حذف گونه های فعال اکسیژن و جلوگیری از تخریب کلاژن ناشی از رادیکال های آزاد را دارد و همچنین اثر ترمیم خوبی بر آسیب آنیون رادیکال آزاد تیمین دارد.

روی Where Can I Buy Cistanche کلیک کنید

【برای اطلاعات بیشتر:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

4.7. فعالیت آنزیمی آنزیم های آنتی اکسیدانی اصلی

برای تعیین فعالیت آنزیم در بافت مغز، یک بافر لیز حاوی 50 میلی مولار بافر فسفات (pH 7.4) و آنتی پروتئازها (1 میلی مولار EDTA، 1 میلی‌مولار PMSF، 1 گرم در میلی‌لیتر پپساتین و 1 گرم در میلی‌لیتر لئوپتین) به یک بافر اضافه شد. غلظت 50 میلی گرم در میلی لیتر (وزن / حجم). سپس، سوسپانسیون به مدت 30 ثانیه در یک حمام یخ فراصوت شد و هموژن در 10،{10}}× گرم به مدت 15 دقیقه در دمای 4 ◦C سانتریفیوژ شد. سوپرناتانت برای تعیین فعالیت آنزیمی آنزیم های آنتی اکسیدانی جمع آوری شد.

فعالیت سوپراکسید دیسموتاز (SOD) با دنبال کردن مهار اتوکسیداسیون پیروگالول در 420 نانومتر اندازه‌گیری شد [69]. یک واحد آنزیم به عنوان مقدار آنزیم مورد نیاز برای مهار سرعت اتوکسیداسیون پیروگالول تا 50 درصد تعریف شد. فعالیت آنزیمی SOD به صورت واحد بین المللی (IU)/mg پروتئین بیان شد. فعالیت کاتالاز (CAT) در سوپرناتانت‌های تیمار شده با Triton-X (1 درصد، حجم/حجم) با ناپدید شدن پراکسید هیدروژن (H2O2) در 240 نانومتر اندازه‌گیری شد [70]، و فعالیت آنزیم به عنوان سوبسترا گزارش شد. میکرومول H2O2) تبدیل شده در دقیقه · میلی گرم پروتئین. گلوتاتیون پراکسیداز کل (GPx) به دنبال اکسیداسیون NADPH در 340 نانومتر در حضور GR، GSH و هیدروپراکسید کومن اضافی تعیین شد [71]. فعالیت GPx به عنوان سوبسترا (nmol NADPH) تبدیل شده / دقیقه پروتئین میلی گرم بیان شد. فعالیت گلوتاتیون ردوکتاز (GR) به دنبال اکسیداسیون NADPH در 340 نانومتر در حضور GSSG [72] مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت و به عنوان سوبسترا (nmol NADPH) تبدیل شده در دقیقه · میلی گرم پروتئین بیان شد. GR و هر دو فعالیت GPx برای واکنش خود به خودی در غیاب نمونه های بیولوژیکی (در صورت عدم وجود آنزیم) تصحیح شدند.

4.8. تست فعالیت BACE1

پروتکل آزمایش BACE1 شامل استفاده از یک سوبسترا (پپتید) خاص سکراز است که به دو مولکول گزارشگر، یعنی EDANS و DABCYL کونژوگه شده است، که منجر به انتشار یک سیگنال فلورسنت می شود [73،74]. فعالیت BACE1 هر دو در lysates قشر و هیپوکامپ اندازه گیری شد. واکنش در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 1 ساعت با استفاده از بستر 10 میکرومولار در بافر استات سدیم 50 میلی مولار (PH 4.5) انجام شد. اندازه‌گیری‌های شدت فلورسانس با استفاده از یک میکروپلیت‌خوان FLUOSTAR (BMG LABTECH، Ortenberg، BadenWürttemberg، آلمان) با فیلتر تحریک روی 360 نانومتر (پهنای باند 5 نانومتر) و فیلتر انتشار روی 530 نانومتر (پهنای باند 5) انجام شد. سطح فعالیت آنزیمی سکرتاز متناسب با واکنش فلورومتریک است و داده ها به صورت افزایش x برابر فلورسانس نسبت به کنترل های پس زمینه (واکنش ها در غیاب بستر یا بافت) بیان می شوند. فعالیت BACE1 با غلظت پروتئین نرمال شد. فعالیت BACE1 موشها، کوئرستین یا تحت درمان با روتین، به عنوان درصد فعالیت موشهای کنترل TgAPP بیان شد.

4.9. بیان ژن RT-PCR آنزیم های اصلی آنتی اکسیدان، APP، BACE1، ADAM10، کاسپاز-3 و کاسپاز-6 و سیتوکین های التهابی

4.9.1. استخراج و خالص سازی RNA کل

ما نواحی مختلف مغز، یعنی قشر و هیپوکامپ را که در دمای 8-0 ◦C ذخیره شده بودند، تجزیه و تحلیل کردیم. به مقدار مشخصی از بافت مغز، بافر لیز Triomol® با نسبت 1:10 (w/v) اضافه شد. نمونه ها به مدت 30 ثانیه با استفاده از یک موتور بی سیم (Pellet pestle، Sigma-Aldrich) همگن شدند و به مدت 5 دقیقه در دمای 25 درجه سانتیگراد انکوبه شدند تا امکان تفکیک کامل کمپلکس های نوکلئوپروتئینی فراهم شود. سپس به ازای هر میلی لیتر بافر لیز Triomol® 0.2 میلی لیتر کلروفرم اضافه شد. لوله ها به مدت 15 ثانیه به شدت تکان داده شدند و در دمای 25 درجه سانتیگراد به مدت 3 دقیقه انکوبه شدند. سپس در دمای 11،{13}}×g به مدت 15 دقیقه در دمای 4◦C سانتریفیوژ شدند. پس از سانتریفیوژ، سه فاز با RNA در فاز بالایی به دست آمد.

برای جداسازی RNA، فاز بالایی به لوله دیگری منتقل شد و با افزودن {0}.5 میلی‌لیتر ایزوپروپانول رسوب داده شد. پس از اختلاط کامل ایزوپروپانول و محلول آبی با وارونگی، مخلوط به مدت 10 دقیقه در دمای اتاق انکوبه شد تا رسوب را افزایش دهد و در 12،{4}}× گرم به مدت 10 دقیقه در دمای 4 ◦C سانتریفیوژ شد. مواد رویی برداشته شده و گلوله ها با اتانول 75 درصد شسته و در 7500× گرم به مدت 5 دقیقه در دمای 4 درجه سانتیگراد سانتریفیوژ شدند. گلوله ها در دمای اتاق خشک شدند و در 50 میکرولیتر آب تیمار شده با DEPC حل شدند. برای حذف آثار DNA، 2.5 میکرولیتر DNase (بدون RNase) اضافه شد و در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 30 دقیقه انکوبه شد. در نهایت، نمونه ها در دمای 64 درجه سانتیگراد به مدت 5 دقیقه انکوبه شدند تا DNase غیرفعال شود.

پس از آن، غلظت RNA در یک اسپکتروفتومتر UV-VIS (BMG LABTECH، Ortenberg، بادن-وورتمبرگ، آلمان) در 260 نانومتر اندازه‌گیری شد و خلوص با در نظر گرفتن نسبت جذب در 260 و 280 نانومتر (A8060/A2) ارزیابی شد.

تعیین یکپارچگی و خلوص RNA توسط الکتروفورز در ژل آگارز 1 درصد رنگ‌آمیزی شده با GelRed انجام شد و در زیر نور UV مشاهده شد، جایی که اگر RNA دست نخورده بود، دو باند فوقانی مربوط به RNA ریبوزومی (28S و 18S) و دو باند پایین‌تر مشاهده شد. مربوط به انتقال RNA (tRNA) و 5S RNA ریبوزومی باید مشاهده شود.

4.9.2. سنتز DNA مکمل (cDNA).

cDNA بسیار پایدارتر از RNA است و بنابراین امکان جابجایی راحت تر و ایمن تر نمونه را فراهم می کند. cDNA از mRNA با رونویسی رترو با استفاده از کیت سنتز cDNA رشته اول برای RT-qPCR (Fermentas Life Sciences) سنتز شد.

برای انجام رونویسی رترو برای سنتز cDNA به 2 میکروگرم RNA، 11 میکرولیتر آب تیمار شده با DEPC و 1 میکرولیتر پرایمرهای تصادفی 10X اضافه شد. سپس مخلوط در دمای 65 درجه سانتیگراد به مدت 10 دقیقه انکوبه شد تا RNA دناتوره شود. پس از این زمان، لوله ها بلافاصله به مدت 5 دقیقه به دمای 4 درجه سانتیگراد رساندند تا از تغییر شکل RNA جلوگیری شود. ترکیب معرف برای سنتز cDNA در جدول S1 (داده های تکمیلی) نشان داده شده است.

هشت میکرولیتر از مخلوط واکنش به هر نمونه اضافه شد. کل حجم به کف لوله ها آورده شد و در دمای 42 درجه سانتیگراد به مدت 60 دقیقه انکوبه شد. در نهایت، واکنش با غیرفعال کردن ترانس کریپتاز معکوس با حرارت دادن آن در دمای 70 درجه سانتیگراد به مدت 10 دقیقه متوقف شد.

4.9.3. Real-Time PCR

ویژگی اصلی Real-time PCR این است که تجزیه و تحلیل محصولات در طول فرآیند تقویت با تعیین فلورسانس انجام می شود. به این ترتیب، فرآیندهای تقویت و تشخیص به طور همزمان در یک لوله یا ویال بدون نیاز به هیچ اقدام بعدی انجام می شود. برای PCR بلادرنگ، از سیکلرهای حرارتی استفاده می شود که می توانند فلورسانس را به طور همزمان تقویت و تشخیص دهند. ما از چرخشگر حرارتی بلادرنگ LightCycler (Roche Diagnostics، مانهایم، آلمان) استفاده کردیم.

جدول S2 (داده های تکمیلی) معرف های مورد نیاز برای PCR بلادرنگ را با استفاده از پرایمرهای توالی خاص و رنگ اتصال به DNA (SYBR Green I, Roche Molecular Systems, Inc., Rotkreuz, Switzerland) به عنوان یک سیستم تشخیص فهرست می کند.

برای طراحی پرایمرها برای نشانگرهای مختلف کمی، از برنامه بیوانفورماتیک Primer3Plus استفاده شد که برای آن توالی های cDNA ژن های مورد نظر را از پایگاه داده دسترسی باز Medline گرفتیم. پرایمرها توسط Merck (Sigma-Aldrich) عرضه شدند. دمای هیبریداسیون و توالی پرایمرهای مختلف مورد استفاده در جدول S3 (داده های تکمیلی) نشان داده شده است.

شرایط واکنش برای تکثیر ژن های مورد نظر در جدول S4 (داده های تکمیلی) نشان داده شده است.

در نهایت، نمونه‌ها تحت یک برنامه ذوب قرار گرفتند: دمای 95 درجه سانتی‌گراد برای 15 ثانیه، 65 درجه سانتی‌گراد برای 3{5}} ثانیه، و تا دمای 98 درجه سانتی‌گراد با سرعت 1/0 درجه سانتی‌گراد بر ثانیه با ضبط مداوم فلورسانس.

برای کمی سازی سطوح cDNA، از روش مقایسه آستانه چرخه (Ct) [75] با استفاده از GADPH به عنوان یک خانه دار استفاده شد. تکثیر خانه داری موازی با ژن مورد تجزیه و تحلیل انجام شد. مقادیر Ct با استفاده از نرم افزار 4.{2}} ارائه شده توسط LightCycler (Roche Diagnostics، Mannheim، آلمان) محاسبه شد. این نرم افزار امکان تمایز بین فلورسانس را به دلیل تقویت نمونه و پس زمینه فراهم می کند. منحنی های ذوب نیز ثبت شد. تعیین دمای ذوب قطعه تقویت شده برای مشخصه محصول تقویت شده امکان پذیر است. اندازه باندها روی ژل آگارز 1.5 درصد بررسی شد.

تنوع بیان ژن مورد مطالعه با درمان کوئرستین یا روتین به عنوان تابعی از TgAPP کنترل (موش‌های بدون درمان) و نرمال کردن این بیان با سطوح GADPH بیان شد. تغییر تا (2−∆∆Ct) نشان‌دهنده تعداد دفعاتی است که ژن مورد نظر تحت درمان خاص مربوط به موش‌های کنترل اصلاح می‌شود.

4.10. تحلیل های آماری

تمام آزمایشات حداقل به صورت تکراری و در سه آزمایش مختلف انجام شد. نتایج به دست آمده به صورت میانگین ± خطای استاندارد بیان می شود. تجزیه و تحلیل واریانس یک طرفه (ANOVA) پس از آزمایش داده ها انجام شد و نشان داد که با توزیع نرمال مطابقت دارد. تست‌های مقایسات چندگانه نیومن-کولز اجرا شد و تفاوت‌های میانگین بین گروه‌ها را بررسی کرد. مقادیر p < 0.{5}}5 معنی دار در نظر گرفته شد. برای تجزیه و تحلیل آماری از نرم افزار SigmaPlot 11.0 استفاده شد.

5. نتیجه گیری ها

عادات غذایی و مکمل ها می توانند بر وضعیت ردوکس سلولی تأثیر بگذارند. بر این اساس، هدف ما بهبود هموستاز ردوکس سلولی در یک مدل موش AD با یک رژیم غذایی فلاونوئیدی حاوی کوئرستین یا روتین برای کاهش آسیب شناسی آمیلوئید، با در نظر گرفتن تداخل بین وضعیت ردوکس سلولی و ویژگی‌های آمیلوئید وابسته به پروتئازوم در AD بدون علامت بود. مجموعه داده‌های ما مرتبط هستند زیرا اثرات فلاونوئیدی نشان‌داده‌شده در مدل موش TgAPP با مواردی که قبلاً در مدل‌های in vitro و ex vivo ما گزارش شده‌اند سازگار است.

در نتیجه، یافته‌های ما نشان می‌دهد که شروع یک درمان رژیم غذایی در مرحله بدون علامت یا شروع علائم مشابه AD ممکن است وضعیت ردوکس سلولی و پردازش فیزیولوژیکی APP را از طریق منظم‌سازی همزمان بیان APP و فعالیت BACE1 بازگرداند.

اگرچه تعمیم یافته‌های ما به شرایط انسانی دشوار است، اما ممکن است پیامدهای گسترده‌ای برای پاسخ انسان به درمان‌های آینده داشته باشند. از بین دو فلاونوئید، روتین، با اثرات در داخل بدن برجسته تر، به نظر می رسد برای گنجاندن در یک رژیم غذایی روزانه به عنوان درمان کمکی در AD، بر اساس افزایش هموستاز ردوکس درون سلولی مغز، مناسب ترین باشد.

مواد تکمیلی:اطلاعات پشتیبانی زیر را می توان در وب سایت دانلود کرد. مرجع [76] در مواد تکمیلی ذکر شده است.

مشارکت نویسنده:PB-B. و SM-A. ایده و طرح آزمایشی را در نظر گرفت، در آزمایش ها کمک کرد، نتایج به دست آمده را تفسیر کرد و دست نوشته را نوشت. KLJ-A. آزمایش ها را انجام داد، داده ها را تجزیه و تحلیل کرد و نتایج به دست آمده را تفسیر کرد. JB به تجزیه و تحلیل داده ها و بازنگری نسخه خطی کمک کرد. تمام داده ها در داخل تولید شدند و از کارخانه کاغذسازی استفاده نشد. همه نویسندگان موافقت می کنند که در قبال تمام جنبه های کار پاسخگو باشند و یکپارچگی و دقت را تضمین کنند. همه نویسندگان نسخه منتشر شده نسخه خطی را خوانده و با آن موافقت کرده اند.

منابع مالی:این تحقیق توسط بنیاد تحقیقات پزشکی «Mutua Madrileña» (ویرایش چهارم کمک‌های مالی برای پروژه‌های تحقیقاتی پزشکی)، وزارت آموزش و علم اسپانیا (مرجع AGL2008-04892-C03-02) و وزارت علوم و نوآوری اسپانیا (مرجع CTQ2010-16170).

بیانیه هیئت بررسی نهادی:پروتکل های حیوانات توسط کمیته مراقبت و استفاده از حیوانات سازمانی (IACUC) در دانشگاه Complutense مادرید تأیید شد و مطابق با دستورالعمل اروپایی 2010/63/در مورد حمایت از حیوانات مورد استفاده برای اهداف علمی و قوانین اسپانیا در مورد رفاه حیوانات بود. فرمان سلطنتی 53/2013، 1 فوریه 2013).

بیانیه رضایت آگاهانه:قابل اجرا نیست.

بیانیه در دسترس بودن داده ها:داده‌هایی که یافته‌های این مطالعه را پشتیبانی می‌کنند، در صورت درخواست معقول از نویسنده مسئول در دسترس هستند.

قدردانی ها:ما از Foundation Folch برای کمک هزینه پیش دکتری به KLJA تشکر می کنیم.

تضاد علاقه:نویسندگان اعلام می کنند که هیچ تضاد منافع وجود ندارد.

اختصارات

AD، بیماری آلزایمر؛ ADAM{0}}، A Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 10; APP، پروتئین پیش ساز آمیلوئید؛ APPswe، جهش سوئدی پروتئین پیش ساز آمیلوئید. A، آمیلوئید- ; BACE1, -site APP cleaving anzyme 1; CAT، کاتالاز؛ GPx، گلوتاتیون پراکسیداز؛ GR، گلوتاتیون ردوکتاز. GSH، گلوتاتیون کاهش یافته؛ GSSG، گلوتاتیون اکسیده. SOD، سوپراکسید دیسموتاز.

منابع

1. Ebenau، JL; پلکمنز، دبلیو. Verberk، IMW; Verfaillie, SCJ; ون دن بوش، کالیفرنیا؛ ون لیوونستین، م. Collij، LE; شلتنز، پی. Prins، ND; برخوف، ف. و همکاران ارتباط نشانگرهای CSF، پلاسما و تصویربرداری تخریب عصبی با پیشرفت بالینی در افراد مبتلا به زوال شناختی ذهنی. عصب شناسی 2022، 98، e1315-e1326. [CrossRef] [PubMed]

2. Dominguez، LJ; ورونز، ن. ورنوچیو، ال. کاتانیز، جی. اینزریلو، اف. سالمی، گ. بارباگالو، ام. تغذیه، فعالیت بدنی و سایر عوامل سبک زندگی در پیشگیری از زوال شناختی و زوال عقل. مواد مغذی 2021، 13، 4080. [CrossRef]

3. Tsarbopoulos، A. بیماری آلزایمر: کاوش در "سینه دارویی" طبیعت برای عوامل درمانی جدید. بیومول. مفاهیم 2020، 11، 201–208. [CrossRef] [PubMed]

4. آش، خ. Zahs، KR بررسی بیولوژی بیماری آلزایمر در موش. نورون 2010، 66، 631-645. [CrossRef] [PubMed]

5. Zahs، KR; Ashe, KH «خبر بسیار خوب»—آیا مدل‌های موش آلزایمر به ما می‌گویند چگونه از بیماری آلزایمر پیشگیری کنیم، نه درمان کنیم؟ گرایش های عصبی. 2010، 33، 381-389. [CrossRef]

6. فولی، AM; عمار، ز.ام. لی، RH; میچل، CS بررسی سیستماتیک رابطه بین سطوح آمیلوئید و معیارهای نقص شناختی تراریخته موش در بیماری آلزایمر. جی. آلزایمر دیس. 2015، 44، 787-795. [CrossRef]

7. آناند دیوید، ا. ارولمولی، ر. Parasuraman، S. مروری بر اهمیت بیولوژیکی کورستین: یک فلاونوئید فعال زیستی. فارم. Rev. 2016, 10, 84-89.

8. Habtemariam، S. Rutin به عنوان یک درمان طبیعی برای بیماری آلزایمر: بینش در مورد مکانیسم های عمل آن. Curr. پزشکی شیمی. 2016، 23، 860-873. [CrossRef]

9. Martín-Aragón، S. Jiménez-Aliaga، K. بندی، جی. Bermejo-Bescós، P. پاسخ عصبی کورستین و روتین در یک رده سلولی که بیش از حد پروتئین پیش ساز آمیلوئید (سلول های APPswe) را بیان می کند. فیتومدیسین 2016، 23، 1285-1294. [CrossRef]

10. ژو، دبلیو. چینگ، اچ. تانگ، ی. آهنگ، بیان ژن W. BACE1 و تخریب پروتئین. ان آکادمی نیویورک علمی 2004، 1035، 49-67. [CrossRef]

11. گاتبیر، س. اسپرنگ، ع. دلپ، جی. شیلدکنشت، اس. کارمن، سی. سوسیو، آی. برونر، تی. گروتروپ، ام. Leist، M. پیشگیری از آپوپتوز عصبی توسط آستروسیت ها از طریق مدولاسیون پاسخ استرس با واسطه تیول و بهبودی سریع از استرس پروتئوتوکسیک. مرگ سلولی متفاوت است. 2018، 25، 101-117. [CrossRef] [PubMed]

12. Aoyama، K. گلوتاتیون در مغز. بین المللی جی. مول. علمی 2021، 22، 5010. [CrossRef] [PubMed]

13. Scholey، A. مواد مغذی برای شناخت عصبی در سلامت و بیماری: اندازه‌گیری‌ها، روش‌شناسی و مکانیسم‌ها. Proc. Nutr. Soc. 2018، 77، 73-83. [CrossRef] [PubMed]

14. آپلت، ج. بیگل، م. واندرلیچ، پی. Schliebsm, R. افزایش مرتبط با افزایش سن در استرس اکسیداتیو با الگوی رشدی فعالیت بتا-سکرتاز و تشکیل پلاک بتا آمیلوئید در موش های تراریخته Tg2576 با آسیب شناسی شبه آلزایمر مرتبط است. بین المللی جی. دیو. نوروسک. 2004، 22، 475-484. [CrossRef] [PubMed]

15. Howlett, DR; ریچاردسون، جی سی آسیب شناسی موش های تراریخته APP: مدلی از بیماری آلزایمر یا به سادگی بیان بیش از حد APP؟ هیستول. هیستوپاتول. 2009، 24، 83-100. [PubMed]

16. سنسیونی، سی. اسپالوتا، اف. مارتلی، اف. والنته، اس. مای، ا. Zeiher، AM; Gaetano، C. استرس اکسیداتیو و تنظیم اپی ژنتیک در پیری و بیماری های مرتبط با سن. بین المللی جی. مول. علمی 2013، 14، 17643-17663. [CrossRef]

17. تسانگ، ق. چانگ، KK استرس اکسیداتیو و نیتروزاتیو در بیماری پارکینسون. بیوشیم. بیوفیز. Acta 2009، 1792، 643-650. [CrossRef]

18. ماندال، PK; صحرا، س. تریپاتی، م. موراری، جی. سطوح گلوتاتیون مغز - نشانگر زیستی جدید برای اختلالات شناختی خفیف و بیماری آلزایمر. Biol. روانپزشکی 2015، 78، 702-710. [CrossRef]

19. چن، جی جی; تیاگاراجه، م. آهنگ، جی. چن، سی. هرمان، ن. گالاگر، دی. راپوپورت، ام جی. سیاه، SE; رامیرز، جی. Andreazza، AC; و همکاران تغییر گلوتاتیون مرکزی و خون در بیماری آلزایمر و اختلال شناختی خفیف: یک متاآنالیز. آلزایمر Res. آنجا 2022، 14، 23. [CrossRef]

20. Pocernich, CB; باترفیلد، DA افزایش گلوتاتیون به عنوان یک استراتژی درمانی در بیماری آلزایمر. بیوشیم. بیوفیز. Acta (BBA) -Mol. پایه دیس. 2012، 1822، 625-630. [CrossRef]

21. رضا، ع. زی، دبلیو. کیم، KH; Dronamraju، VR; ویلیامز، جی. وینس، آر. بیشتر، SS Dipeptide ψ-GSH استرس اکسیداتیو و التهاب عصبی را در مدل موش مبتلا به آلزایمر مهار می کند. آنتی اکسیدان ها 2022، 11، 1075. [CrossRef] [PubMed]

22. یانگ، اچ. زی، ز. وی، ال. دینگ، ام. وانگ، پی. Bi, J. Glutathione-mimetic D609 کمبود حافظه را کاهش می دهد و رسوب آمیلوئید را در مدل موش تراریخته A PP/PS1 کاهش می دهد. نورورپورت 2018، 29، 833-838. [CrossRef] [PubMed]

23. گوئررو-گومز، دی. مورا-لورکا، جی. Sáenz-Narciso، B. نارانجو-گالیندو، FJ; مونوز-لوباتو، اف. پارادو-فرناندز، سی. گویکولیا، جی. Cedazo-Minguez، Á. لینک، سی دی; نری، سی. و همکاران از دست دادن هموستاز ردوکس گلوتاتیون، پروتئوستاز را با مهار تخریب پروتئین وابسته به اتوفاژی مختل می کند. مرگ سلولی متفاوت است. 2019، 26، 1545–1565. [CrossRef] [PubMed]

24. لفاکی، م. پاپااوگنیو، ن. Chondrogianni، N. تنظیم ردوکس عملکرد پروتئازوم. ردوکس بیول. 2017، 13، 452-458. [CrossRef] [PubMed]

25. Bonet-Costa، ​​V. Pomatto، LC; دیویس، کی جی پروتئازوم و استرس اکسیداتیو در بیماری آلزایمر. آنتی اکسیدان سیگنال ردوکس 2016، 25، 886–901. [CrossRef]

26. بلکاسمی، ع. راماسامی، سی. توالی زمانی استرس اکسیداتیو در مغز از مدل‌های موش تراریخته بیماری آلزایمر مربوط به آبشار آمیلوئید. رادیک آزاد. Biol. پزشکی 2012، 52، 593-600. [CrossRef]

27. تانیگاوا، س. فوجی، م. عمل Hou، DX Nrf2 و Keap1 در بیان NQO1 با واسطه ARE توسط کوئرستین. رادیک آزاد. Biol. پزشکی 2007، 42، 1690-1703. [CrossRef]

28. کندروگیانی، ن. کاپتا، اس. چینو، آی. واسیلاتو، ک. پاپاسیدری، آی. گونوس، ES اثرات ضد پیری و جوان کننده کورستین. انقضا جرونتول. 2010، 45، 763-771. [CrossRef]

29. بودندورف، U.; دانر، اس. فیشر، اف. استفانی، م. استورچلر-پیرات، سی. Wiederhold، KH; استافنبیل، م. Paganetti, P. بیان بتا-سکرتاز انسانی در مغز موش باعث افزایش سطح حالت پایدار بتا آمیلوئید می شود. جی. نوروشیم. 2002، 80، 799-806. [CrossRef]

30. یاماکاوا، اچ. یاگیشیتا، اس. فطایی، ای. قدرت بازدارنده Ishiura، S. beta-Secretase با محل برش نابجای بتا پروتئین پیش ساز آمیلوئید "جهش یافته سوئدی" کاهش می یابد. جی. بیول. شیمی. 2010، 285، 1634-1642. [CrossRef]

31. کلر، دی. ارو، سی. مارکرام، اچ. تراکم سلولی در مغز موش: بررسی سیستماتیک. جلو. نورونات. 2018، 12، 83. [CrossRef] [PubMed]

32. Mladenovic Djordjevic، AN; کاپتانو، م. لونکارویچ-واسیلکوویچ، ن. تودوروویچ، اس. آتاناسوپولو، س. یوویچ، ام. پروولوویچ، ام. تاوفیک، ای. ماتساس، آر. کنارزیر، س. و همکاران مداخله دارویی در یک مدل موش تراریخته، فنوتیپ پاتولوژیک مرتبط با آلزایمر را بهبود می بخشد: دخالت در فعال سازی پروتئازوم. رادیک آزاد. Biol. پزشکی 2021، 162، 88-103. [CrossRef] [PubMed]

33. تاماگنو، ای. باردینی، پ. گوگلیلموتو، ام. دنی، او. Tabaton، M. حالت‌های مختلف تجمع بتا آمیلوئید 1-42 تأثیرات متفاوتی را بر استرس اکسیداتیو، تخریب عصبی، و بیان BACE{3}} واسطه می‌کنند. رادیک آزاد. Biol. پزشکی 2006، 41، 202-212. [CrossRef] [PubMed]

34. جوریسن، ای. پروکس، ج. برنروتر، سی. وبر، اس. شوانبک، آر. سرنیلز، ال. اسنلینکس، ای. کرایسرتس، ک. تاحیه، ع. تسور، آی. و همکاران دی اینتگرین/ متالوپروتئیناز ADAM10 برای استقرار قشر مغز ضروری است. J. Neurosci. 2010، 30، 4833-4844. [CrossRef]

35. کوهن، پی اچ. وانگ، اچ. دیسلیچ، بی. کلمبو، آ. زایتشل، یو. الوارت، جی دبلیو. کرمر، ای. روزنر، اس. Lichtenthaler، SF ADAM10 از نظر فیزیولوژیکی مرتبط، ترشح تشکیل دهنده پروتئین پیش ساز آمیلوئید در نورون های اولیه است. EMBO J. 2010، 29، 3020-3032. [CrossRef]

36. پوستینا، ر. شرودر، آ. دیواچتر، آی. بول، جی. اشمیت، یو. کوجرو، ای. پرینزن، سی. اندرس، ک. هیمکه، سی. برکت، م. و همکاران دیس اینتگرین- متالوپروتئیناز از تشکیل پلاک آمیلوئید و نقص هیپوکامپ در مدل موش بیماری آلزایمر جلوگیری می کند. جی. کلین. تحقیق کنید 2004، 113، 1456-1464. [CrossRef]

37. الفیکی، ع.م. محمود، ع.ا. الریدی، HA; ابراهیم، ​​ک.س. Ghazy، MA Quercetin مسیر غیر آمیلوئیدوژن را از طریق فعال سازی بیان ژن ADAM10 و ADAM17 در مدل موش بیماری آلزایمر ناشی از کلرید آلومینیوم تحریک می کند. زندگی علمی. 2021، 285، 119964. [CrossRef]

38. کوپاناکی، ای. چانگ، اس. ولاچوس، ا. Tschäpe، JA; مولر، UC; کوگل، دی. Deller، T. sAPPalpha با انحطاط دندریتیک و مرگ نورون ناشی از استرس پروتئازومی مخالفت می کند. مول. سلول عصبی. 2010، 44، 386-393. [CrossRef]

39. Renziehausen, J. هیبل، سی. ناگل، اچ. کندو، ا. کینز، اس. کوگل، دی. بهل، سی. Hajieva، P. محصول برش پیش‌ساز پروتئین آمیلوئید-بتا sAbetaPPalpha، تشکیل آگرزوم وابسته به BAG را تعدیل می‌کند و فعالیت پروتئازومی سلولی را افزایش می‌دهد. جی. آلزایمر دیس. 2015، 44، 879-896. [CrossRef]

40. لیوینگستون، RW; Elder، MK; سینگ، آ. Westlake, CM; تیت، WP؛ آبراهام، WC; پروتئین آلفای پیش ساز آمیلوئیدی ترشح شده ویلیامز، JM، LTP را از طریق سنتز و قاچاق گیرنده های AMPA نفوذپذیر Ca2 به علاوه نفوذپذیر افزایش می دهد. جلو. مول. نوروسک. 2021, 14, 660208. [CrossRef]

41. کرافورد، HC; دمپسی، پی جی؛ براون، جی. آدام، ال. Moss, ML ADAM10 به عنوان یک هدف درمانی برای سرطان و التهاب. Curr. فارم. دس 2009، 15، 2288-2299. [CrossRef] [PubMed]

42. صافیگ، ص. Lichtenthaler, SF آلفا سکرتاز ADAM10: متالوپروتئاز با عملکردهای متعدد در مغز. Prog. نوروبیول. 2015، 135، 1-20. [CrossRef] [PubMed]

43. بورهکا، ا. جیرونی، ک. آمادورو، جی. Ammassari-Teule، M. اختلال در تنظیم مخالف پروتئین عقب ماندگی ذهنی شکننده-X و پروتئین ریبونوکلئوپروتئین C هترونوکلئر با ترجمه پیشرفته APP در بیماری آلزایمر. مول. نوروبیول. 2016، 53، 3227-3234. [CrossRef] [PubMed]

44. آگوستین، اس. ریمباخ، جی. آگوستین، ک. شلیبز، آر. ولفرام، اس. Cermak, R. اثر یک درمان کوتاه مدت و طولانی مدت با عصاره جینکو بیلوبا بر سطوح پروتئین پیش ساز آمیلوئید در یک مدل موش تراریخته مرتبط با بیماری آلزایمر. قوس. بیوشیمی. بیوفیز. 2009، 481، 177-182. [CrossRef] [PubMed]

45. Borreca، A. والری، ف. دی لوکا، ام. ارنست، ال. روسو، آ. نوبیلی، ا. کوردلا، ا. کورستی، وی. آمادورو، جی. مرکوری، NB; و همکاران تنظیم مثبت گذرا بازده ترجمه در موش های Tg2576 پرودرومال و زودرس علامت دار به آسیب شناسی A کمک می کند. نوروبیول. دیس 2020, 139, 104787. [CrossRef] [PubMed]

46. ​​داملیو، م. شنگ، م. Cecconi، F. Caspase-3 در سیستم عصبی مرکزی: فراتر از آپوپتوز. گرایش های عصبی. 2012، 35، 700-709. [CrossRef]

47. ارتورک، ا. وانگ، ی. Sheng، M. هرس موضعی دندریت‌ها و خارها با مکانیسم‌های وابسته به کاسپاز{1} و محدود به پروتئازوم. J. Neurosci. 2014، 34، 1672-1688. [CrossRef]

48. داملیو، م. کاوالوچی، وی. میدی، س. مارکتی، سی. Pacioni، S. فری، ا. دیامانتینی، ا. دی زیو، دی. کارارا، پی. باتیستینی، ال. و همکاران کاسپاز{1}} باعث ایجاد اختلال در عملکرد سیناپسی اولیه در مدل موش مبتلا به آلزایمر می شود. نات نوروسک. 2011، 14، 69-76. [CrossRef]

49. Gervais, FG; خو، دی. رابرتسون، جی اس. Vaillancourt، JP; زو، ی. هوانگ، جی. لبلانک، آ. اسمیت، دی. ریگبی، م. شیرمن، ام اس; و همکاران مشارکت کاسپازها در برش پروتئولیتیک پروتئین پیش ساز آمیلوئید بتا آلزایمر و تشکیل پپتید بتا آمیلوئیدوژنیک. سلول 1999، 97، 395-406. [CrossRef]

50. پارک، جی. نان، اچ اس. Tyan، SH; کاواکاتسو، ی. ژانگ، سی. ناوارو، ام. Koo، EH Caspase Activation and Caspase-mediate Cleavag of APP با از دست دادن سیناپس ناشی از پروتئین آمیلوئید در بیماری آلزایمر مرتبط است. Cell Rep. 2020, 31, 107839. [CrossRef]

51. لو، دی سی; ربیع زاده، س. چاندرا، اس. Shayaya, RF; الربی، ال ام. بله، X. Salvesen، GS; کو، ای اچ. Bredesen، DE دومین پپتید پروتئولیتیک سیتوتوکسیک مشتق شده از پیش ساز آمیلوئید بتا پروتئین. نات پزشکی 2000، 6، 397-404. [CrossRef] [PubMed]

52. LeBlanc، AC Caspase{1}} به عنوان یک هدف جدید در درمان بیماری آلزایمر. یورو J. Neurosci. 2013، 37، 2005–2018. [CrossRef]

53. آلبرشت، اس. بوگدانوویچ، ن. گتی، بی. وینبلاد، بی. فعال سازی LeBlanc، AC Caspase-6 در مغزهای بیماری آلزایمر خانوادگی حامل پروتئین پیش ساز آمیلوئید یا جهش های پرسنیلین I یا پرسنیلین II. J. نوروپاتول. انقضا نورول. 2009، 68، 1282-1293. [CrossRef] [PubMed]

54. موریهارا، ت. تتر، بی. یانگ، اف. لیم، GP; بودینو، اس. Boudinot، FD; Frautschy، SA; Cole، GM ایبوپروفن القای اینترلوکین-1بتا آلفای پرو آمیلوئیدوژنیک1-آنتی کیموتریپسین را برای بهبود آسیب شناسی بتا آمیلوئید (آبتا) در مدل های آلزایمر سرکوب می کند. نوروسیکوفارماکولوژی 2005، 30، 1111-1120. [CrossRef] [PubMed]

55. Niu، YL; ژانگ، WJ; وو، پی. لیو، بی. Sun، GT; یو، دی.ام. دنگ، JB بیان پروتئین‌های مرتبط با آپوپتوز کاسپاز{2}} و NF-kappaB در هیپوکامپ موش‌های Tg2576. نوروسک. گاو نر 2010، 26، 37-46. [CrossRef]

56. فولر، اس. استیل، م. Munch، G. آستروگلیا را در طول التهاب مزمن در بیماری آلزایمر فعال کرد - آیا آنها نقش های حمایتی عصبی خود را نادیده می گیرند؟ موتات. Res. 2010، 690، 40-49. [CrossRef]

57. لی، م. چو، تی. جانتاراتنوتای، ن. وانگ، YT; مک گیر، ای. مک گیر، PL کاهش GSH در سلول های گلیال باعث ایجاد سمیت عصبی می شود: ارتباط با پیری و بیماری های عصبی دژنراتیو. FASEB J. 2010, 24, 2533-2545. [CrossRef]

58. Hensley، K. التهاب عصبی در بیماری آلزایمر: مکانیسم ها، پیامدهای پاتولوژیک، و پتانسیل برای دستکاری درمانی. جی. آلزایمر دیس. 2010، 21، 1-14. [CrossRef]

59. لو، ج. وو، دی.ام. ژنگ، ییل. هو، بی. ژانگ، ZF; شان، Q. ژنگ، ژ. لیو، سی ام؛ Wang، YJ Quercetin پروتئین کیناز فعال شده با AMP را با کاهش بیان PP2C فعال می کند و از مغز موش پیر در برابر سمیت عصبی ناشی از کلسترول بالا محافظت می کند. جی. پاتول. 2010، 222، 199-212. [CrossRef]

60. Chen, JC; هو، اف ام؛ چائو، PDL؛ چن، CP; Jeng، KC; Hsu، HB; لی، ST; ون تونگ، دبلیو. لین، WW مهار بیان ژن iNOS توسط کورستین با مهار IkappaB کیناز، فاکتور هسته ای کاپا B و STAT1 انجام می شود و به القای هم اکسیژناز{3}} در میکروگلیاهای BV{4} موش بستگی دارد. یورو J. Pharmacol. 2005، 521، 9-20. [CrossRef]

61. دوویدی، د. مگه، ک. میشرا، ر. ماندال، PK گلوتاتیون در مغز: مروری بر ترکیبات، عملکردها، ویژگی‌های بیوشیمیایی، کمیت و نقش بالقوه درمانی در اختلالات مغزی. نوروشیمی. Res. 2020، 45، 1461-1480. [CrossRef] [PubMed]

62. راسنر، اس. ساستره، م. بورن، ک. Lichtenthaler، SF تنظیم رونویسی و ترجمه بیان BACE1 - مفاهیم برای بیماری آلزایمر. Prog. نوروبیول. 2006، 79، 95-111. [CrossRef] [PubMed]

63. Westerman، MA; کوپر-بلکتر، دی. ماریاش، ا. کوتیلینک، ال. کاوارابیاشی، تی. یونکین، LH; کارلسون، GA; یونکین، اس جی. Ashe, KH رابطه بین Abeta و حافظه در مدل موش Tg2576 بیماری آلزایمر. J. Neurosci. 2002، 22، 1858-1867. [CrossRef] [PubMed]

64. Irizarry، MC; لوکاسیو، جی جی. بیان mRNA آنزیم شکافنده Hyman، BT Beta-site APP در موش های تراریخته APP: همپوشانی تشریحی با بیان تراریخته و سطوح ایستا با افزایش سن. صبح. جی. پاتول. 2001، 158، 173-177. [CrossRef] [PubMed]

65. هسیائو، ک. چپمن، پی. نیلسن، اس. اکمن، سی. هاریگایا، ی. یونکین، اس. یانگ، اف. کول، جی. نقص حافظه همبستگی، افزایش آبتا، و پلاک های آمیلوئید در موش های تراریخته. علوم 1996، 274، 99-102. [CrossRef] [PubMed]

66. Hsiao، K. موش های تراریخته بیان کننده پروتئین های پیش ساز آمیلوئید آلزایمر. انقضا جرونتول. 1998، 33، 883-889. [CrossRef]

67. سیمون، AM; شیاپارلی، ال. سالازار-کولوچو، پ. کوادرادو-تجدور، ام. اسکریبانو، ال. لوپز د ماتورانا، آر. دل ریو، جی. پرز-مدیاویلا، آ. Frechilla، D. بیان بیش از حد APP انسانی نوع وحشی در موش باعث نقص شناختی و ویژگی های پاتولوژیک غیرمرتبط با سطوح Abeta می شود. نوروبیول. دیس 2009، 33، 369-378. [CrossRef]

68. Senft, AP; دالتون، تی پی؛ Shertzer، HG تعیین گلوتاتیون و گلوتاتیون دی سولفید با استفاده از پروب فلورسانس افتالالدئید. مقعدی بیوشیمی. 2000، 280، 80-86. [CrossRef]

69. مارکلوند، اس. Marklund، G. دخالت رادیکال آنیون سوپراکسید در خوداکسیداسیون پیروگالول و یک روش مناسب برای سوپراکسید دیسموتاز. یورو جی بیوشیم. 1974، 47، 469-474. [CrossRef]

70. Aebi، H. کاتالاز در شرایط آزمایشگاهی. روش ها آنزیمول. 1984، 105، 121-126.

71. Barja de Quiroga, G. پرز-کامپو، آر. لوپز تورس، M. دفاع آنتی اکسیدانی و پراکسیداسیون در کبد و مغز موش های صحرایی مسن. بیوشیمی. J. 1990, 272, 247-250. [CrossRef] [PubMed]

72. مسی، وی. Williams, CH, Jr. در مورد مکانیسم واکنش گلوتاتیون ردوکتاز مخمر. جی. بیول. شیمی. 1965، 240، 4470-4480. [CrossRef]

73. جاش، ک. گوندالیا، پ. سونکاریا، ا. Kalia، K. MicroRNA-29b فعالیت ترشحی را در رده سلولی SH-SY5Y و مغز موش دیابتی تعدیل می کند. سلول مول. نوروبیول. 2020، 40، 1367-1381. [CrossRef] [PubMed]

74. خیمنز-آلیاگا، ک. برمجو-بسکوس، پ. بندیدی، ج. مارتین-آراگون، اس. کوئرستین و روتین اثرات ضد آمیلوئیدوژنیک و تجزیه فیبریلی در شرایط آزمایشگاهی و فعالیت آنتی اکسیدانی قوی در سلول های APPswe نشان می دهند. زندگی علمی. 2011، 89، 939-945. [CrossRef] [PubMed]

75. راموس، کالیفرنیا; بومن، TA; Boles، NC; بازرگان، AA; ژنگ، ی. پارا، آی. فوکوا، SA; شاو، کالیفرنیا؛ گودل، MA شواهدی برای تنوع در پروفایل های رونویسی سلول های بنیادی خونساز منفرد. PLoS Genet. 2006، 2، e159.

76. Schmued, LC; Stowers, CC; Scallet، AC; Xu, L. Fluoro-Jade C منجر به وضوح و کنتراست فوق العاده بالای نورون های در حال انحطاط می شود. Brain Res. 2005، 1035، 24-31. [CrossRef] [PubMed]

سلب مسئولیت/یادداشت ناشر:اظهارات، نظرات، و داده های موجود در همه نشریات صرفاً متعلق به نویسنده(ها) و مشارکت کننده(ها) است و نه MDPI و/یا ویرایشگر(ها). MDPI و/یا ویرایشگر(های) مسئولیت هرگونه آسیب به افراد یا دارایی ناشی از هر ایده، روش، دستورالعمل، یا محصولاتی را که در محتوا ذکر شده است، سلب می‌کنند.

【برای اطلاعات بیشتر:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】