خلاصه

زمینه:تجمع پلاکتی و محصولات نهایی گلیکاسیون پیشرفته (AGEs) و استرس اکسیداتیو به عنوان عوامل کلیدی برای ایجاد بیماری های قلبی عروقی و عوارض دیابت شناخته می شوند. در این زمینه، مصرف میوه و سبزیجات، منابع خوب ترکیبات آنتی اکسیدانی تا حد زیادی به عنوان یک راه موثر برای پیشگیری از انسان در برابر این بیماری ها گزارش شده است. مطالعه حاضر بر ارزیابی فعالیت های آنتی اکسیدانی، ضد پلاکتی و ضد گلیکوزاسیون گل های انار (Punica granatum L.)، برگ ها (PL)، آب پوست (PP) و روغن دانه ها (PSO) تمرکز دارد. .

گلیکوزید سیستانچ همچنین می تواند فعالیت SOD را در بافت های قلب و کبد افزایش دهد و به طور قابل توجهی محتوای لیپوفوسین و MDA را در هر بافت کاهش دهد و به طور موثر رادیکال های مختلف اکسیژن فعال (OH-، H2O2 و غیره) را از بین ببرد و از آسیب DNA ناشی از آن محافظت کند. توسط رادیکال های OH گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید سیستانچ دارای توانایی مهار قوی رادیکال های آزاد، توانایی کاهش بالاتری نسبت به ویتامین C، بهبود فعالیت SOD در سوسپانسیون اسپرم، کاهش محتوای MDA و اثر محافظتی خاصی بر عملکرد غشای اسپرم هستند. پلی ساکاریدهای سیستانچ می توانند فعالیت SOD و GSH-Px را در گلبول های قرمز و بافت ریه موش های آزمایشگاهی مسن ناشی از D-گالاکتوز افزایش دهند و همچنین محتوای MDA و کلاژن را در ریه و پلاسما کاهش دهند و محتوای الاستین را افزایش دهند. اثر پاک کنندگی خوب بر روی DPPH، طولانی شدن زمان هیپوکسی در موش های پیر، بهبود فعالیت SOD در سرم، و به تاخیر انداختن انحطاط فیزیولوژیکی ریه در موش های آزمایشگاهی پیر. و این پتانسیل را دارد که دارویی برای پیشگیری و درمان بیماری های پیری پوست باشد. در عین حال، اکیناکوزید موجود در سیستانچ توانایی قابل توجهی در از بین بردن رادیکال های آزاد DPPH دارد و می تواند گونه های فعال اکسیژن را از بین ببرد، از تخریب کلاژن ناشی از رادیکال های آزاد جلوگیری کند و همچنین اثر ترمیم خوبی بر آسیب آنیون رادیکال آزاد تیمین دارد.

روی Cistanche و Tongkat Ali Reddit کلیک کنید

【برای اطلاعات بیشتر: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

مواد و روش ها: فعالیت آنتی اکسیدانی در برابر رادیکال ABTS و پراکسیداسیون لیپیدی اندازه گیری شد. فعالیت Antiglycation با استفاده از تشکیل شدت فلورسانس AGE در سیستم BSA / ریبوز تعیین شد. فعالیت ضد پلاکتی در پلاسمای غنی از پلاکت (PRP) در برابر آدنوزین دی فسفات (ADP)، کلاژن و اسید آراشیدونیک (AA) اندازه‌گیری شد.

نتایج:عصاره PF بالاترین فعالیت آنتی اکسیدانی را در برابر ABTS و پراکسیداسیون لیپیدی با مقادیر IC50 به ترتیب 0.7mg/mL و 0.63mg/mL نشان داد. برای فعالیت ضد گلیکوزیشن، PP، PF و PL در مقایسه با گروه کنترل مثبت با مقدار AGE-IC50 0.4mg/mL به طور متوسطی از تشکیل AGE های شبه پنتوزیدین جلوگیری کردند. PJ و PSO هیچ اثر ضد AGE ندارند. تمام عصاره ها بطور انتخابی تجمع پلاکتی ناشی از یک، دو یا سه القا کننده را به صورت وابسته به دوز مهار کردند. PF قوی ترین مهارکننده ایجاد شده توسط هر سه القاکننده بود، با اثرات بازدارندگی از 35.6 تا 66.6 درصد. PP و PJ اثر ضد پلاکتی در برابر ADP و کلاژن و PL و PSO فقط در برابر AA نشان دادند.

نتیجه گیری:این نتایج نشان می‌دهد که برخی از عصاره‌های انار دارای پتانسیل ضد گلیکاسیون و ضد پلاکتی در شرایط آزمایشگاهی هستند

کلید واژه ها:انار، فعالیت ضد پلاکتی، محصولات نهایی گلیکوزیشن پیشرفته، استرس اکسیداتیو، پراکسیداسیون لیپیدی

زمینه

انار (Punica granatum L.)، به طور گسترده ای به عنوان یک میوه آنتی اکسیدانی بسیار قوی شناخته شده است [1-3]. گزارش شده است که قدرت آنتی اکسیدانی آب انار 3-برابر بیشتر از شراب قرمز یا چای سبز [4] و 8- برابر بیشتر از آنهایی است که در آب پرتقال تشخیص داده شده است [5]. علاوه بر این، یکی از میوه‌های طبیعی که مورد تحقیقات زیادی قرار دارد، انار و ترکیبات آن است که فعالیت بیولوژیکی قوی و ارزش دارویی گزارش شده است. عصاره‌های آب انار، پوست، روغن دانه‌ها، برگ‌ها و گل‌ها دارای اثرات ضد دیابتی [6]، ضد التهابی [7]، آنتی‌اکسیدانی، ضد چاقی [8] و ضد توموری هستند. 9]. این اثرات مفید مربوط به وجود سطوح بسیار بالایی از آنتی اکسیدان ها مانند ترکیبات پلی فنلی، از جمله تانن های قابل هیدرولیز، آنتوسیانین ها و فلاونول ها است [10]. در مطالعات قبلی ما در مورد اثرات ضد دیابتی انار، نتایج اثرات محافظت کننده عصبی عصاره انار را برجسته می کند و نشان می دهد که مصرف طولانی مدت انار ممکن است یک استراتژی جایگزین بالقوه برای پیشگیری از HFD (رژیم غذایی پرچرب با فروکتوز بالا) ناشی از انسولین باشد. مقاومت و استرس اکسیداتیو [6، 11]. مصرف آب، برگ و پوست انار منجر به کاهش قابل توجهی در سطح گلوکز و انسولین پلاسما ناشتا شد. در نتیجه، شاخص هموستاتیک مقاومت به انسولین (HOMA-IR) که برای تعیین کمیت مقاومت به انسولین استفاده می شود به ترتیب کاهش یافت که نشان دهنده بهبود قابل توجهی در حساسیت به انسولین است.

در این زمینه، ما سعی کردیم اثر عصاره انار را در برابر شناخته شده‌ترین عوارض دیابت مانند تجمع پلاکتی و محصولات نهایی گلیکوزیون پیشرفته (AGEs) که گزارش شده است با پیشرفت دیابت و پیری مرتبط هستند، ارزیابی کنیم [12، 13]. . مهار عملکرد پلاکت برای مدت طولانی به عنوان یک استراتژی برای درمان بیماری‌های آتروترومبوتیک عروقی حاد مانند بیماری‌های قلبی عروقی دیابت و سکته مغزی ایسکمیک استفاده شده است [14، 15]. محصولات نهایی گلیکوزیشن پیشرفته (AGEs) با خطر بیشتری از عوارض دیابت مانند رتینوپاتی دیابتی، نوروپاتی و نفروپاتی مرتبط هستند [16]. علاوه بر این، گزارش های کمی در مورد اثر بازدارندگی قسمت های مختلف درخت انار بر تشکیل AGE [17] یا تجمع پلاکتی [18] صادر شده است. در این کار، ظرفیت های ضد AGE و ضد پلاکتی و برخی فعالیت های آنتی اکسیدانی آب انار (PJ)، پوست (PP)، گل ها (PF)، برگ ها (PL) و روغن دانه ها (PSO) را در شرایط آزمایشگاهی بررسی کردیم.

مواد و روش ها

مواد گیاهی و استخراج

برگ ها و میوه ها از درختان انار تونسی در اکتبر 2021 از منطقه مهدیه تونس برداشت شد. صحت تنوع توسط تاکسونومیست دکتر Faten Zaouay از گروه باغبانی، موسسه عالی زراعی، Chott-Meriem (دانشگاه سوسه، تونس) تایید شد، و یک نمونه کوپن در مجموعه ملی ما سپرده شد که در دو نسخه در Gabes و Chott-Mariem نگهداری می شود. (Sousse)، با کد "TNl، TN2، TN3، TN5، TN5".

عصاره انار همانطور که در مطالعه قبلی ما توضیح داده شد تهیه شد [11]. میوه ها شسته و با دست پوست کنده شدند. آریل ها با استفاده از یک مخلوط کن تجاری (Moulinex، فرانسه) فشرده شدند. شیره استخراج شده با سرعت 15000 دور در دقیقه به مدت 15 دقیقه سانتریفیوژ شد. سپس مایع رویی بازیابی و لیوفیلیزه شد. برگها، گلها و پوست میوه خشک، پودر شده و با متانول (MeOH) 50 گرم در 250 میلی لیتر در تاریکی به مدت 48 ساعت استخراج شد. هر عصاره از طریق کاغذ صافی Whatman شماره 42 فیلتر شد و با استفاده از یک تبخیر کننده چرخشی (Heidolph، آلمان) تحت خلاء در دمای 45 درجه تا خشک شدن تبخیر شد و برای تعیین بیشتر در دمای 20- درجه نگهداری شد. دانه های انار خشک و پودر شدند. استخراج روغن به روش سوکسله انجام شد. حدود 30 گرم بذر با 200 میلی لیتر هگزان در دمای اتاق به مدت 6 ساعت استخراج شد. حلال با تبخیر در 40 درجه حذف شد و روغن با جریان نیتروژن شسته شد و در 20- درجه در لوله های مهر و موم شده ذخیره شد.

روش مهار رادیکال ABTS

ظرفیت آنتی اکسیدانی عصاره انار با روش ABTS (2,2′-casino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) با استفاده از روش قبلی [19] اندازه گیری شد. به طور خلاصه، ABTS• plus رادیکال محلول با واکنش محلول ABTS (5 میلی‌مولار) با محلول پرسولفات پتاسیم (K2S2O8) (2.7 میلی‌مولار) تولید شد. برای ارزیابی ظرفیت آنتی‌اکسیدانی، محلول ABTS• پلاس با بافر فسفات (2{16}} میلی‌مولار) رقیق شد. pH 7.4) برای به دست آوردن جذب 0.700.700±0.020 در 660 نانومتر. ده محلول ABTS• پلاس با عصاره انار تهیه شده در غلظت های مختلف مخلوط شد. پس از انکوباسیون، جذب در طول موج 734 نانومتر اندازه گیری شد و از اسید اسکوربیک استفاده شد. به عنوان کنترل مثبت درصد مهار رادیکال ABTS• پلاس با فرمول زیر محاسبه شد:

کنترل به محلول حاوی MeOH خالص به جای نمونه و یک نمونه به جذب محلول های حاوی عصاره انار اشاره دارد. غلظت موثر نمونه برای کاهش جذب ABTS• پلاس به میزان 50 درصد (EC50) ضروری است.

پراکسیداسیون لیپیدی با استفاده از روش تیوسیانات فریک

مهار پراکسیداسیون لیپیدی توسط عصاره انار طبق روش قبلی [20] مورد سنجش قرار گرفت. لینولئیک اسید (LA) به عنوان ماتریکس لیپیدی و 2،2'-azobis (2-متیل پروپیونامیدین) دی هیدروکلراید (AAPH) به عنوان آغازگر رادیکال آزاد استفاده شد. غلظت های مختلف از هر عصاره انار تهیه شد. هر غلظت با 1.3 درصد (w/v) LA متانولی و بافر فسفات 0.2M (pH 7.0) مخلوط شد و پراکسیداسیون با افزودن محلول AAPH (55.3 میلی مولار) در بافر فسفات آغاز شد. محلول شاهد با افزودن MeOH خالص به جای نمونه تهیه شد. پس از انکوباسیون در دمای 50 درجه به مدت 24 ساعت در تاریکی، مخلوط واکنش در محلول 3:1 (v/v) H2O-MeOH حل شد. ده، محلول آبی 10 درصد NH4SCN و 20 میلی مولار FeCl2 در 3.5 درصد هیدروکلراید اضافه شد. پس از 3min انکوباسیون در دمای اتاق، جذب در 546nm در برابر خالی مربوطه اندازه گیری شد. اسید اسکوربیک به عنوان کنترل مثبت استفاده شد. نتایج به صورت درصد مهار پراکسیداسیون لیپیدی بیان می شود:

کنترل کنیدبه محلول حاوی MeOH خالص به جای نمونه و یک نمونه به جذب محلول های حاوی روغن اشاره دارد. EC50 تعیین شد.

سنجش پیشرفته مهار محصولات نهایی گلیکاسیون

مهار تشکیل AGE های شبه پنتوسیدین و مقادیر EC5{6}} با استفاده از روشی که قبلاً توسط Séro و همکارانش شرح داده شد، تعیین و محاسبه شد. 2{12}}13، با تغییرات جزئی [21]. به طور خلاصه، BSA (10mg/mL) با D-ribose (0.5M) همراه با عصاره مورد آزمایش در بافر فسفات 50 میلی مولار در pH 7.4 (NaN3، 0.02 درصد) انکوبه شد. محلول‌ها در صفحات میکروتیتر چاهی در دمای 37 درجه به مدت 24 ساعت در یک سیستم بسته قبل از اندازه‌گیری فلورسانس AGE انکوبه شدند. فلورسانس حاصل از انکوباسیون، تحت همان BSA (10mg/mL) و شرایط عصاره آزمایش شده، برای هر اندازه گیری کم شد. فلورسانس سنین شبه پنتوسیدین (λexc 335nm، λem 385nm) با استفاده از طیف‌سنج میکروپلیتی اندازه‌گیری شد. درصد تشکیل AGEs برای هر غلظت عصاره به صورت زیر محاسبه شد و مقادیر EC50 تعیین شد:

AGEs (درصد)=[شدت فلورسانس (نمونه) - شدت فلورسانس (جای خالی نمونه)] ∗100/[شدت فلورسانس (شاهد) - شدت فلورسانس (جای شاهد)]

ارزیابی در شرایط آزمایشگاهی فعالیت ضد تجمع پلاکتی

خون تازه از داوطلبان سالم با سابقه منفی مصرف داروها، نوشیدنی‌ها یا غذاهایی که ممکن است بر روی تجمع برای حداقل 10 روز تأثیر بگذارد و ترجیحاً باید یک شب ناشتا باشند، گرفته شد، زیرا وجود شیلومیکرون نیز ممکن است الگوهای تجمع را مختل کند. این مطالعه توسط کمیته اخلاق محلی بیمارستان دانشگاهی Hedi Chaker در Sfax، تونس تایید شد.

خون وریدی در یک لوله پلاستیکی حاوی تری سدیم سیترات 109 میلی مولار جمع آوری شد. PRP با سانتریفیوژ کردن در دمای اتاق به مدت 12 دقیقه در 200 × گرم به دست آمد. PRP با دقت حذف شد و از آلودگی با گلبول های قرمز یا پوشش بافی جلوگیری شد و تا زمان آزمایش در دمای اتاق نگهداری شد. تمام آزمایشات باید در عرض 3 ساعت پس از تهیه PRP انجام شود. سپس خون باقیمانده در 2000 × گرم به مدت 20 دقیقه سانتریفیوژ شد تا پلاسمای فقیر از پلاکت (PPP) بدست آید. ما از یک پانل غربالگری از عوامل تجمیع کننده استفاده کردیم: آدنوزین 5'-دی فسفات (ADP، 20μM)، کلاژن (5ug/mL)، و اسید آراشیدونیک (2mM).

PRP و PPP به ترتیب برای تنظیم 0 و 100 درصد انتقال نور در آگرگومتر استفاده شد. تجمع پلاکتی حداقل به مدت 5 دقیقه پس از افزودن آگونیست کنترل شد.

برای عصاره برگ انار (PL)، گل (PF)، آب (PJ) و پوست (PP)، غلظت‌های متفاوتی قبلاً برای هر عصاره محلول در DMSO (در {{0}}.05 درصد نهایی) تهیه شد. تمرکز). برای PSO، غلظت های مختلف در 70 درصد پلی اتیلن گلیکول (PEG) حل شد که یک حلال به طور گسترده در داخل بدن برای حل کردن ترکیبات نامحلول در آب است. ده میکرولیتر از هر عصاره به 260 میکرولیتر PRP کنترل اضافه شد و سپس مخلوط به مدت حداقل 5 دقیقه (تا 30 دقیقه) در دمای 37 درجه قبل از افزودن آگونیست انکوبه شد. ده کلاژن (5ug/mL)، AA (2mM)، یا ADP (20μmol/L) اضافه شد و تغییر شکل پلاکت و تجمع به مدت 5 دقیقه تحت نظر قرار گرفت. از DMSO (0.5 درصد حجمی در حجم) به عنوان کنترل منفی و آسپرین به عنوان کنترل مثبت استفاده شد.

D{0}}تجمع پلاکتی در حضور ترکیبات آزمایشی

تجمع پلاکتی در حضور یک حلال.

فعالیت مهاری تجمع پلاکتی در مقایسه با آنچه برای وسیله نقلیه (DMSO یا PEG) به تنهایی اندازه‌گیری می‌شود، به عنوان درصد مهار بیان شد. هر نمونه در سه تکرار اندازه گیری شد و داده ها به صورت میانگین ± انحراف معیار ارائه شد. مقادیر غلظت موثر مورد نیاز برای مهار 50 درصدی تجمع پلاکتی (EC50)، حداقل از سه اندازه گیری به دست آمد.

تحلیل آماری

نتایج به عنوان میانگین حداقل سه اندازه گیری مستقل بیان شد، مگر اینکه انحراف استاندارد گزارش شده باشد (میانگین ± انحراف معیار) و با استفاده از SPSS نسخه تجزیه و تحلیل شد. 21.0، نسخه حرفه ای. برای فعالیت آنتی اکسیدانی، از آزمون دانکن برای برآورد اهمیت اثرات اصلی در سطح احتمال 5 درصد استفاده شد (P<0.05).

نتایج و بحث

خواص آنتی اکسیدانی عصاره انار

ظرفیت آنتی اکسیدانی عصاره انار با روش ABTS و پراکسیداسیون لیپیدی اندازه گیری شد. نتایج در جدول 1 خلاصه شده و به عنوان مقدار EC50 بیان شد. EC5 پایین{{10}} نشان دهنده فعالیت آنتی اکسیدانی بالاتر است. مشخص شد که عصاره ها از نظر اثرات آنتی اکسیدانی با یکدیگر متفاوت هستند. به عنوان مثال، PF بالاترین فعالیت آنتی اکسیدانی را در برابر ABTS با مقادیر EC5{14}} 0.7 mg/ml نشان داد که حتی از اسید آسکوربیک استاندارد که دارای IC50 1.4 mg/ml بود، برتر بود. PF دومین کمترین EC50 را برای سنجش پراکسیداسیون لیپیدی (63/0 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر)، کمی بزرگ‌تر از اسید آسکوربیک استاندارد (52/0 میلی‌گرم در میلی‌لیتر) نشان داد، اما این تفاوت از نظر آماری معنی‌دار نبود (05/0 > P). عصاره PP به دنبال عصاره PL و PJ می تواند به طور موثر ABTS رادیکال آزاد را کاهش دهد. همین ترتیب در آزمایشات پراکسیداسیون لیپیدی یافت شد. با این حال، PSO ضعیف ترین فعالیت آنتی اکسیدانی را در هر دو روش آزمایشگاهی نشان داد. گزارش شده است که یک رابطه ثابت بین محتوای فنلی و ظرفیت آنتی اکسیدانی وجود دارد [22]. در مطالعه قبلی خود [23]، محتویات فنلی گل، برگ، پوست و آب انار را مورد مطالعه قرار دادیم و قدرت کاهش دهنده و فعالیت ضد DPPH آنها را مقایسه کردیم. نتایج نشان می‌دهد که تمامی اندام‌ها قدرت کاهش‌دهنده و فعالیت ضد رادیکالی مؤثری داشتند. گل ها و برگ ها از نظر فنل غنی تر بودند و ثابت کردند که قوی ترین آنتی اکسیدان ها هستند.

ظرفیت آنتی AGEs عصاره انار

The anti-glycation capacities of pomegranate extracts evaluated by their inhibition of the formation of global fluorescent AGEs in the BSA/ribose system are depicted in Fig. 1 and Table 2. PP, PF, and PL extracts demonstrated a dose-response inhibition of the pentosidine-like AGEs formation (Fig. 1) with an AGE-EC50 value of 0.4mg/ml  (Table 2). This anti-AGEs capacity is considered moderate compared to that exhibited by Aminoguanidine (AGEEC50; 0.16-0.17mg/mL) and weak compared to Rutoside trihydrate (AGE-EC50; 0.05mg/mL). However, results show that PJ and PSO haven't any anti-AGE effect (AGEEC50; >1 میلی گرم در میلی لیتر). در یک مطالعه دوسوکور، سهراب (2015) به این نتیجه رسید که آب انار (Punica granatum) پراکسیداسیون لیپیدی را کاهش می دهد، اما تاثیری بر محصولات نهایی گلیکوزیله پلاسما در بزرگسالان مبتلا به دیابت نوع 2 ندارد [24]. نتایج ما در مورد آب انار با برخی از یافته های گذشته گزارش شده توسط لیو (2014) مطابقت ندارد، که نشان می دهد عصاره میوه انار (PFE) فعالیت ضد گلیکوزیشن قوی نشان می دهد [25]. فعالیت ضد گلیکوزیایی عصاره های مختلف انار را می توان به ترکیبات فنلی آنها نسبت داد. Kumagai (2015)، نشان داد که تشکیل AGEs مشتق شده از BSA با گلوکز، فروکتوز و گلیسرآلدئید در شرایط آزمایشگاهی با افزودن عصاره میوه انار PFE و اجزای فنلی آن مانند پانیکالین، پانیکالاژین، اسید الاژیک و گالیک به طور وابسته به غلظت سرکوب شد. اسید [17].

فعالیت ضد پلاکتی عصاره انار

قطعات انار از نظر توانایی آنها در مهار تجمع پلاکتی PRP انسانی ناشی از ADP، کلاژن و AA به عنوان محرک های تجمع قوی مورد ارزیابی قرار گرفت. جدول 3 اثرات بازدارندگی عصاره های مختلف در غلظت های مختلف و آسپرین را به عنوان شاهد مثبت نشان می دهد و جدول 4 مقادیر EC50 عصاره یا ترکیبات انار را با مقادیر میانگین سه اندازه گیری خلاصه کرده است. تمام عصاره ها بطور انتخابی تجمع پلاکتی ناشی از یک، دو یا سه القا کننده را به صورت وابسته به دوز مهار کردند.

مشخص شد که عصاره گل قوی‌ترین مهارکننده تجمع پلاکتی است که توسط هر سه القاکننده ایجاد می‌شود، با اثرات بازدارندگی از 35.6 تا 66.6 درصد در 3.5 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر. در برابر تجمع پلاکتی ناشی از کلاژن با مقدار EC50 2.8 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر، سپس در برابر تجمع پلاکتی ناشی از AA با مقدار EC5{19}} 3.85 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر و با 4 فعال بود. {15}} میلی‌گرم در میلی‌لیتر وقتی تجمع توسط ADP تحریک شد. در مقایسه با آسپرین به عنوان یک کنترل مثبت، PF، PP و PJ دارای اثرات مهاری در برابر تجمع ناشی از کلاژن هستند. با این حال، آسپرین تجمع ناشی از AA و ADP را با EC50 0.42 و 0.66 میلی‌گرم در میلی‌لیتر به ترتیب مهار کرد، اما هیچ اثری بر روی کلاژن یافت نشد. در این مطالعه و مطالعه قبلی ما [23]، PF در مقایسه با PP، PL و PJ، آنتی اکسیدان ترین قسمت انار در برابر رادیکال DPPH، رادیکال ABTS و پراکسیداسیون لیپیدی است. این یافته ممکن است توضیح دهد که چرا PF بهترین بازدارنده تجمع پلاکتی بود. علاوه بر این، PF غنی از فنل ها (16.6 درصد) از جمله تانن های هیدرولیز شده (الاگیتانن) و فیبر غذایی محلول (30.2 درصد) است [26]. قبلاً نشان داده شده بود که تانن های هیدرولیز شده در مهار عملکرد پلاکت بسیار مؤثر هستند [18]. از سوی دیگر، فعالیت ضد پلاکتی فیبر رژیم غذایی نامشخص بود [27، 28]. بنابراین، ما فرض کردیم که فعالیت ضد پلاکتی قوی و چند هدفه PF را می توان به تانن های هیدرولیز شده، فنل های اصلی موجود در این اندام نسبت داد.

PP و PJ اثرات بازدارنده ای را در برابر ADP و تجمع پلاکتی ناشی از کلاژن نشان دادند. با این حال، هنگامی که AA به عنوان آگونیست استفاده شد، هیچ اثری برای هر دو عصاره نشان داده نشد. نتایج ما نتایج بدست آمده توسط Mattiello و همکاران، 2009 را تایید نمی کند که نشان می دهد هر دو عصاره پاسخ پلاکتی به AA را مهار می کنند [18]. مقایسه مقادیر EC50 نشان داد که PP باعث کاهش ADP و تجمع پلاکتی ناشی از کلاژن نسبت به PJ می‌شود.

تفاوت در اثر بازدارندگی بین هر دو عصاره را می توان با تفاوت در ظرفیت آنتی اکسیدانی توضیح داد. PP در این مطالعه آنتی اکسیدانی قوی تر از PJ در برابر رادیکال ABTS و پراکسیداسیون لیپیدی و همچنین در برابر رادیکال DPPH و قدرت کاهنده بود [23]. این توضیح با برخی گزارش‌های قبلی که نشان می‌دادند پتانسیل ضد پلاکتی میوه‌ها با فعالیت آنتی‌اکسیدانی آن‌ها نامرتبط یا مخالف است، مطابقت نداشت [29، 30]. PL و PSO قادر به مهار تجمع پلاکتی فقط با ADP بودند، در حالی که وقتی کلاژن و AA به عنوان آگونیست استفاده می‌شدند مؤثر نبودند.

نتیجه

در نتیجه، گل، برگ و پوست انار دارای اثرات بازدارنده در شرایط آزمایشگاهی بر گلیکاسیون پروتئین و تجمع پلاکتی است. این اثرات به خواص آنتی اکسیدانی چندین ترکیب فعال انار نسبت داده شد. با این حال، تحقیقات بیشتر برای تایید این نتایج و به دست آوردن درک عمیق تر از مکانیسم عمل آن، قبل از اینکه به عنوان یک مهار کننده طبیعی AGE پیشنهاد شود، ضروری است. خاصیت آنتی اکسیدانی؟ ترکیبات فعال موجود در انار به طور بالقوه به این خواص کمک می کند.

اختصارات

AA: اسید آراشیدونیک؛ AAPH: 2,2'-azobis ({3}}methylpropionamidine) dihydrochloride; ABTS: 2,2′-casino-bis (3-اتیل بنزوتیازولین-6-سولفونیک اسید؛ ADP: آدنوزین دی فسفات (ADP)؛ سنین: محصولات نهایی گلیکاسیون پیشرفته؛ BSA: آلبومین سرم بووین؛ DMSO: دی متیل سولفوکسید ؛ FeCl2: کلرید آهن؛ HCl: کلریدریک اسید؛ HFD: رژیم غذایی با فروکتوز پرچرب؛ K2S2O8: محلول پرسولفات پتاسیم؛ LA: اسید لینولئیک؛ MeOH: متانول؛ NaN3: آزید سدیم؛ NH4SCN: آمونیوم پتیل گلیکول: : پلاسمای غنی از پلاکت؛ PPP: پلاسمای ضعیف پلاکتی.

قدردانی

بیانیه دستورالعمل های گیاهی

صحت تنوع توسط تاکسونومیست دکتر Faten Zaouay از گروه باغبانی، موسسه عالی زراعی، Chott-Meriem (دانشگاه سوسه، تونس) تایید شد، و یک نمونه کوپن در مجموعه ملی ما سپرده شد که در دو نسخه در Gabes و Chott-Mariem نگهداری می شود. (Sousse)، با کد "TNl، TN2، TN3، TN5، TN5". این مطالعه با دستورالعمل ها و قوانین نهادی، ملی و بین المللی مرتبط مطابقت دارد و مجوز جمع آوری Punica granatum L. از مرکز تحقیقات منطقه ای در تاریخ دریافت شد. باغبانی و ارگانیک Chott-Mariem، IRESA-University of Sousse، 8.P.57-4042، تونس.

مشارکت نویسندگان

ZA و IA; روش شناسی، ZA; و IA; نرم افزار، AZ، ​​و RC. اعتبارسنجی، منابع، ZA; نوشتن - آماده سازی پیش نویس اصلی، JG; نظارت، MH، و SH. نوشتن - بررسی و ویرایش. همه نویسندگان نسخه منتشر شده نسخه خطی را خوانده و با آن موافقت کرده اند.

منابع مالی

این کار توسط وزارت آموزش عالی و تحقیقات علمی - تونس تمویل شد.

در دسترس بودن داده ها و مواد

مجموعه داده‌های تولید شده در طول مطالعه فعلی و/یا تجزیه‌وتحلیل‌شده در طول مطالعه جاری در صورت درخواست معقول از نویسنده مربوطه در دسترس است.

اعلامیه ها

تایید اخلاق و رضایت برای شرکت

این مطالعه توسط کمیته اخلاق محلی بیمارستان دانشگاهی Hedi Chaker در Sfax، تونس تایید شد. تمامی آزمایش ها بر اساس دستورالعمل ها و مقررات مربوطه انجام شد. رضایت آگاهانه از همه افراد و/یا قیم(های) قانونی آنها اخذ شد.

رضایت برای انتشار

قابل اجرا نیست.

منافع رقابتی

نویسندگان هیچ تضاد منافعی را اعلام نمی کنند.

مشخصات نویسنده

1 آزمایشگاه بیوشیمی، LR12ES05 "تغذیه-غذاهای کاربردی و سلامت عروق"، دانشکده پزشکی، دانشگاه المنستیر، 5019 مناستیر، تونس. 2 Center Régional de Transfusion Sanguine de Sfax, Route El-Ain Km 0.5, CP 3003 Sfax, Tunisia.

منابع

1. حنفی س.م، عبد الشفعه ی.م.، صالح و.د.، فتحی ا.م. پروفایل شیمیایی، فعالیت ضد میکروبی و آنتی اکسیدانی in vitro عصاره پوست انار، پرتقال و موز در برابر میکروارگانیسم های بیماری زا. J Genet Eng Biotechnol. 2021؛ 19:80.

2. Benchagra L، Berrougui H، اسلام MO، Ramchoun M، بولبارود S، حجاجی A، و همکاران. اثر آنتی اکسیدانی عصاره انار مراکشی (Punica granatum L. Sefri) غنی از پونیکالاگین در برابر فرآیند استرس اکسیداتیو. خوراکی ها. 2021؛ 10:2219.

3. Akuru EA، Chukwuma CI، Oyeagu CE، Erukainure OL، Mashile B، Setlhodi R، و همکاران. مشخصات تغذیه‌ای و فیتوشیمیایی پوست انار (تنوع شگفت‌انگیز) و اثرات آن بر استرس اکسیداتیو کبدی و تغییرات متابولیک. جی فود بیوشیمی. 2022:46.

4. گیل MI، توماس-باربران FA، هس-پیرس B، Holcroft DM، Kader AA. فعالیت آنتی اکسیدانی آب انار و ارتباط آن با ترکیب و فرآوری فنلی J Agric Food Chem. 2000؛ 48:4581-9.

5. Rosenblat M, Hayek T, Aviram M. اثرات آنتی اکسیدانی مصرف آب انار (PJ) توسط بیماران دیابتی بر سرم و ماکروفاژها. آترواسکلروز. 2006؛ 187:363-71.

6. امری ز، بن خضر MR، زیبی ام اس، خروبی دبلیو، ترکی م، ایادی ف، و همکاران. اثرات ضد دیابتی عصاره انار در موشهای صحرایی تغذیه شده با چربی با فروکتوز بالا Clin Phytoscience. 2020؛ 6:55.

7. Harzallah A, Hammami M, Kępczyńska MA, Hislop DC, Arch JRS, Cawthorne MA, et al. مقایسه اثرات بالقوه پیشگیرانه گل، پوست و روغن هسته انار بر مقاومت و التهاب به انسولین در مدل موش چاقی ناشی از رژیم غذایی پرچرب و پر ساکارز. Arch Physiol Biochem. 2016؛ 122:75-87.

8. المعمر م.ن، خان ف. چاقی: نقش پیشگیرانه انار (Punica granatum). تغذیه. 2012؛ 28:595-604.

9. Amri Z، Kharroubi W، Fidanzi-Dugas C، Leger DY، Hammami M، Liagre B. اثرات بازدارنده رشد و پیش آپوپتوز عصاره های زینتی انار در سلول های سرطانی پروستات انسان Du145. سرطان نوتر. 2020؛ 72:932-8.

10. Arlotta C، Puglia GD، Genovese C، Toscano V، Karlova R، Beekwilder J، و همکاران. MYB5-و bHLH بر ترکیب فلاونوئیدها در انار تأثیر می‌گذارند. علوم گیاهی 2020؛ 298:110563.

11. امری ز، غوربل ع، ترکی م، آکروت اف ام، ایادی ف، الفکی ع، و همکاران. تأثیر عصاره انار بر نشانگرهای آنتی اکسیدانی مغز و فعالیت کولین استراز در چاقی ناشی از رژیم غذایی با فروکتوز بالا در مدل موش صحرایی. BMC Complement Altern Med. 2017؛ 17:339.

12. Okura T، Ueta E، Nakamura R، Fujioka Y، Sumi K، Matsumoto K، و همکاران. محصولات نهایی گلیکاسیون پیشرفته سرم با کاهش ترشح انسولین در بیماران مبتلا به دیابت نوع 2 مرتبط است: یک گزارش کوتاه. J Diabetes Res. 2017؛ 2017.

13. Al-Sofani ME، Yanek LR، Faraday N، Kral BG، Mathias R، Becker LC، و همکاران. دیابت و پاسخ پلاکتی به آسپرین با دوز پایین. جی کلین اندوکرینول متاب. 2018؛ 103:4599-608.

14. McEwen BJ. تاثیر رژیم غذایی و مواد مغذی بر عملکرد پلاکت. سمین ترومب هموست. 2014؛ 40:214-26.

15. Lim ST، Coughlan CA، Murphy SJX، Fernandez-Cadenas I، Montaner J، Thijs V، و همکاران. آزمایش عملکرد پلاکت در حمله ایسکمیک گذرا و سکته مغزی ایسکمیک: یک بررسی سیستماتیک جامع از ادبیات پلاکت ها 2015؛ 26:402-12.

16. Dhananjayan K، Forbes J، Münch G. گلیکاسیون پیشرفته، دیابت، و دمانس. در: دیابت نوع 2 و زوال عقل; 2018. ص. 169-93.

17. Kumagai Y، Nakatani S، Onodera H، Nagatomo A، Nishida N، Matsuura Y، و همکاران. اثرات ضد گلیکوزیایی عصاره میوه انار (Punica granatum L.) و اجزای آن در شرایط in vivo و in vitro. J Agric Food Chem. 2015؛ 63: 7760-4.

18. Mattiello T، Trifrò E، Jotti GS، Pulcinelli FM. اثرات آب انار و پلی فنل های عصاره بر عملکرد پلاکت ها. جی مد غذا. 2009؛ 12:334-9.

19. دلگادو-آندراد سی، مورالس اف جی. کشف سهم ملانوئیدین در فعالیت آنتی اکسیدانی دم کرده قهوه. J Agric Food Chem. 2005؛ 53: 1403-7.

20. Olszewska MA، Presler A، Michel P. پروفایل ترکیبات فنلی و فعالیت آنتی اکسیدانی عصاره های خشک از گونه های انتخابی Sorbus. مولکول ها. 2012؛ 17:3093-113.

21. Séro L، Sanguinet L، Blanchard P، Dang BT، Morel S، Richomme P، و همکاران. تنظیم یک روش 96-چاهی مبتنی بر فلورسانس صفحه میکروتیتر برای شناسایی بازدارنده‌های AGE در عصاره‌های خام گیاهی. مولکول ها. 2013؛ 18:14320-39.

22. Piluzza G، Bullitta S. همبستگی بین محتوای فنولیک و خواص آنتی اکسیدانی در بیست و چهار گونه گیاهی استفاده سنتی ethnoveterinary در منطقه مدیترانه. فارم بیول. 2011؛ ​​49:240-7.

23. امری ز، زائوی اف، لازرگ عارف اچ، سلطانا اچ، منری آ، مارس ام، و همکاران. محتوای فیتوشیمیایی، ترکیب اسیدهای چرب و پتانسیل آنتی اکسیدانی بخش‌های مختلف انار: مقایسه بین گونه‌های خوراکی و غیرخوراکی رشد یافته در تونس Int J Biol Macromol. 2017؛ 104:274-80.

24. سهراب جی، انگورانی ص، توحیدی مریم، طبیبی ح، کیمیاگر محمد، نصرالله زاده ج. آب انار (Punicagranatum) پراکسیداسیون لیپیدی را کاهش می دهد، اما بر محصولات نهایی گلیکوزه شده پلاسما در بزرگسالان مبتلا به دیابت نوع 2 تأثیر نمی گذارد: یک تصادفی دوگانه- کارآزمایی بالینی کور غذا. Nutr Res. 2015:59.

25. لیو دبلیو، ما اچ، فراست ال، یوان تی، داین جی، سیرام NP. فنولیک های انار با از بین بردن گونه های کربونیل فعال از تشکیل محصولات نهایی گلیکاسیون پیشرفته جلوگیری می کنند. عملکرد غذا 2014؛ 5: 2996-3004.

26. Aviram M، Volkova N، Coleman R، Dreher M، Reddy MK، Ferreira D، و همکاران. فنولیک‌های انار از پوست، آرل‌ها و گل‌ها ضدآتروژن هستند: مطالعات in vivo در موش‌های دارای آپولیپوپروتئین E-کمبود آترواسکلروتیک (E0) و در شرایط آزمایشگاهی در ماکروفاژها و لیپوپروتئین‌های کشت‌شده. مجله ی کشاورزی و شیمی غدا. 2008؛ 56: 1148-57.

27. Hannan JMA, Rokeya B, Faruque O, Nahar N, Mosihuzzaman M, Azad Khan AK, et al. اثر بخش فیبر خوراکی محلول گیاه Trigonella foenum graecum بر وضعیت گلیسمی، انسولینمی، لیپیدمیک و تجمع پلاکتی موش‌های مدل دیابتی نوع 2. جی اتنوفارماکول. 2003؛ 88:73-7.

28. باگر ام، اندرسن او، نیلسن جی بی، ریتیگ کی آر. فیبرهای غذایی باعث کاهش فشار خون، کلسترول تام سرم و تجمع پلاکتی در موش صحرایی می شود. برادر جی نوتر. 1996؛ 75:483-93.

29. Dutta-Roy AK، Gordon MJ، Kelly C، Hunter K، Crosbie L، Knight-Carpentar T، و همکاران. اثر مهاری عصاره جینکو بیلوبا بر تجمع پلاکتی انسان. پلاکت ها 1999؛ 10:298-305.

30. دوتا-روی AK، کراسبی ال، گوردون ام جی. اثرات عصاره گوجه فرنگی بر تجمع پلاکتی انسان در شرایط آزمایشگاهی. پلاکت ها 2001؛ 12:218-27.

یادداشت ناشر 

Springer Nature در مورد ادعاهای قضایی در نقشه های منتشر شده و وابستگی های سازمانی بی طرف باقی می ماند.

【برای اطلاعات بیشتر: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】