سیستانچ می تواند از آسیب ایسکمی-پرفیوژن مجدد کلیه محافظت کند

تماس: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 ایمیل:audrey.hu@wecistanche.com

Jan H. Lindeman1، Leonie G. Wijermars1، Sarantos Kostidis2، Oleg A. Mayboroda2، Amy C. Harms3، و همکاران.

تابع پیوند تاخیری استتظاهرات آسیب خونرسانی مجدد ایسکمیدر زمینه پیوند کلیه در حالی که صدها مداخلهبا موفقیت آسیب خونرسانی مجدد ایسکمی را کاهش می دهددر مدل های تجربی، تمام مداخلات بالینی شکست خورده است. این ارزیابی بالینی اکتشافی منشأ متابولیکی احتمالی آسیب خونرسانی مجدد ایسکمی بالینی را با ترکیب داده‌های 18 نمونه‌برداری بافت قبل و بعد از خونرسانی مجدد با 36 نمونه خون شریانی وریدی متوالی بر روی پیوند در سه گروه مطالعه بررسی کرد. این گروه ها شامل پیوندهای اهداکننده زنده و متوفی با و بدون عملکرد پیوند تاخیری بودند. تخصیص گروه بر اساس نتایج بالینی بود. از NMR زاویه جادویی برای آنالیز بافت و پلت فرم های مبتنی بر طیف سنجی جرمی برای آنالیز پلاسما استفاده شد. همهکلیه هابه مدت یک سال قابل استفاده بودند. ادغام داده‌های متابولومیک، یک نمایه تبعیض آمیز را برای تشخیص عملکرد پیوند تاخیری در آینده شناسایی کرد. این نمایه با کاتابولیسم ATP/GTP پس از خونرسانی مجدد (به طور قابل توجهی در بازیابی فسفوکراتین مختل شده و تولید مداوم (هیپو)گزانتین قابل توجه) و آسیب مداوم بافتی مشخص شد. با وجود گلیکولیز فعال، اکسیداسیون اسیدهای چرب، گلوتامینولیز، و اتوفاژی، شکست در بازیابی فسفات با انرژی بالا و مربوط به نقص در سطح کمپلکس oxoglutarate دهیدروژناز در چرخه کربس رخ داد. عملکرد بالینی تاخیری پیوند به دلیل آسیب خونرسانی مجدد ایسکمی مرتبط با فروپاشی متابولیک پس از خونرسانی مجدد. بنابراین، تلاش‌ها برای رفع تاخیر عملکرد پیوند به دلیل آسیب خونرسانی مجدد ایسکمی باید بر حفظ صلاحیت متابولیک تمرکز کند، یا با حفظ یکپارچگی چرخه کربس و/یا با به‌کارگیری مسیرهای نجات متابولیک. کلیه بین المللی (2020) 98، 1476-1488؛ https://doi.org/10.1016/ j.kint.2020.07.026

کلمات کلیدی: ATP; عملکرد پیوند تاخیری؛ گلیکولیز؛ آسیب جریان خون مجدد ایسکمی؛ متابولیسم؛ فسفوریلاسیون اکسیداتیو

اثرات cistanche: جلوگیریآسیب ایسکمی خونرسانی مجدد

آسیب خونرسانی مجدد ایسکمی (IRI)پدیده افزایش آسیب بافتی پس از خونرسانی مجدد بافت ایسکمیک قبلی است. 1،2 عامل اصلی آسیب اندام پس از انفارکتوس میوکارد یا مغز 3 و آسیب پیوند پس از پیوند عضو است. بنابراین، یک شکاف انتقالی بین مدل های پیش بالینی و زمینه بالینی به نظر می رسد.

عملکرد پیوند تاخیری (DGF) تظاهر IRI در شرایط استکلیهپیوند. 5 DGF به عنوان نیاز به دیالیز در هفته اول یا هفته‌های پس از پیوند تعریف می‌شود. اگرچه DGF در زمینه روش‌های پیوند اهداکننده زنده بسیار نادر است، اما تا 90 درصد پیوندهای پیوند اهداکننده متوفی را تحت تأثیر قرار می‌دهد.6 قبلی کار ارتباطی بین DGF اتفاقی و گلیکولیز نورموکسیک پس از پرفیوژن مجدد را نشان داد.7 این مشاهدات نشان می‌دهد که DGF به نقصی در هموستاز انرژی پیوند در نتیجه اختلال عملکرد میتوکندری در فاز خونرسانی مجدد مربوط می‌شود. بر این اساس، ما فرض کردیم که DGF بالینی شامل و ممکن است ناشی از نقص (یا نقص) متابولیک باشد. هدف از این مطالعه انجام یک تجزیه و تحلیل عمیق از پاسخ متابولیک بهایسکمی خونرسانی مجددبا و بدون IRI (DGF). این ارزیابی متابولیک اکتشافی مبتنی بر یک رویکرد یکپارچه و حل‌شده با زمان است که شامل ارزیابی متوالی تفاوت‌های غلظت شریانی وریدی (AV) نسبت به پیوندهای خونرسانی مجدد و نمایه‌سازی موازی بیوپسی‌های پیوند (بافت) است. سه گروه مورد مطالعه قرار گرفتند: گرافت از پیوندهای اهداکننده متوفی با و بدون پیوند IRI بعدی و پیوند اهداکننده زنده. تخصیص گروهی پیوندهای اهداکننده مرده (به ترتیب þDGF و -DGF) به صورت گذشته نگر بر اساس پیامد بالینی آنها انجام شد. پیوندهای اهداکننده زنده به عنوان مرجع در نظر گرفته شد زیرا این پیوندها با بهبود عملکردی آنی پس از خونرسانی مجدد همراه هستند. برای پوشش جنبه‌های اولیه هموستاز متابولیک، تمرکز در این مطالعه بر روی خوشه‌های متابولیک ناخالص زیر بود: متابولیسم نوکلئوتید تری فسفات، اسید چرب (b)-اکسیداسیون، گلیکولیز/گلوتامینولیز، اتوفاژی، چرخه کربس (نقایص) و آسیب سلولی. داده ها بر این اساس ارائه می شوند.

(مکاتبات: Jan H. Lindeman، گروه جراحی، مرکز پزشکی دانشگاه لیدن، صندوق پستی 9600، 2300 RC Leiden، هلند. ایمیل: Lindeman@lumc.nl دریافت در 20 ژانویه 2020؛ بازبینی شده در 8 ژوئن 2020؛ پذیرش در 2 ژوئیه 2020؛ منتشر شده به صورت آنلاین در 8 اوت 2020)

اثرات cistanche: جلوگیریآسیب ایسکمی خونرسانی مجدد

نتایج

نمونه مورد مطالعه شامل 53 بیمار بود. بیوپسی بافت زوجی از 18 بیمار به دست آمد و نمونه برداری متوالی AV در 36 بیمار انجام شد. یک بیمار هر دو بیوپسی گرفته شد و تحت نمونه برداری AV قرار گرفت. جزئیات بالینی برای 3 گروه مطالعه در جدول تکمیلی S1A (بیوپسی های بافتی) و S1B (نمونه برداری AV) نشان داده شده است. همه موارد DGF به چندین دیالیز در طی یک دوره زمانی حداقل 7 روزه نیاز داشتند و همه بهبود عملکردی کافی را نشان دادند. هیچ یک از اهداکنندگان متوفی بدون DGF پس از پیوند نیاز به دیالیز نداشتند. بقای پیوند یک ساله 100 درصد بود.

ما ابتدا تفاوت‌های احتمالی را در امضاهای متابولیک برای 3 گروه اهداکننده (گرافت‌های اهداکننده زنده [مرجع]، پیوندهای اهداکننده مرده -DGF، و پیوندهای اهداکننده متوفی þDGF [IRI]) با نقشه‌برداری متابولوم پلاسما (تفاوت‌های AV) برای { {1}}دقیقه نقطه زمانی پس از خونرسانی مجدد (شکل 1a) ومتابولوم بافت(نمونه‌برداری‌های بافتی) برای مدت زمان 40-دقیقه پس از خونرسانی مجدد (شکل 1b). این نقاط زمانی برای جلوگیری از تداخل ناشی از شستشوی متابولیت‌هایی که در طول ایسکمی یا ذخیره‌سازی سرد انباشته شده‌اند یا اجزای تشکیل‌دهنده مایع نگهدارنده بودند (مثلاً تخلیه هیستیدین از پیوندهای اهداکننده زنده؛ شکل تکمیلی S1 استفاده انتخابی از H [هیستیدین) را نشان می‌دهد، انتخاب شدند. مایع نگهدارنده TK در این پیوندها. 7 نتایج (نمرات z) برای این نقاط زمانی در نقشه های حرارتی در شکل 1a (تفاوت های AV) و 1b (بافت) خلاصه شده است. گروه‌بندی داده‌ها بر اساس 6 خوشه انجام شد که همه داده‌های متابولیک را پوشش می‌دهند: (1) کاتابولیسم نوکلئوزید تری فسفات، (ب) اکسیداسیون b، (iii) گلیکولیز/گلوتامینولیز، (IV) اتوفاژی، (v) نقص چرخه کربس، و (vi) آسیب سلولی.

نقشه‌های حرارتی برای تفاوت‌های AV نشانه‌های متابولیکی موازی را برای پیوندهای اهداکننده زنده و -DGF و یک امضای کاملاً متمایز برای پیوندهای þDGF نشان می‌دهند (شکل 1a). یک الگوی مشابه، اگرچه کمتر مشخص بود، اما برای متابولیت های بافتی مشاهده شد (شکل 1b). نگاشت انحصاری پیوندهای -DGF و þDGF (بدون پیوند اهداکننده زنده) به نتایج مشابهی منجر شد (نشان داده نشده)، که نشان می‌دهد گنجاندن داده‌های اهداکننده زنده (مرجع) در تجزیه و تحلیل با نتیجه‌گیری تجزیه و تحلیل تداخلی نداشت. در مجموع، داده ها یک امضای متابولیک ناخالص برای IRI کلیه ارائه می دهند.

برای وضوح، داده‌های متابولیت‌های منفرد بر حسب 6 خوشه متابولیک ارائه شده‌اند. برای جلوگیری از تداخل ناشی از شستشوی اولیه متابولیت‌هایی که در طول ذخیره‌سازی سرد در اولین دقیقه خونرسانی مجدد جمع شده‌اند، تخمین‌ها برای آزادسازی یا جذب خالص پس از پرفیوژن بر اساس ادغام تفاوت‌های AV برای 10-تا {{3 است. }}دقیقه فواصل زمانی پس از خونرسانی مجدد (منطقه بین منحنی ها).

اولین خوشه متابولیت ها ("کاتابولیسم نوکلئوزید تری فسفات") سیگنالمداوم پس از خونرسانی مجددناتوانی متابولیک ("خاموش شدن برق") در گرافت هایی با DGF بعدی (þDGF). این نتیجه گیری بر اساس اختلال در بازیابی پس از خونرسانی مجدد فسفوکراتین بافر فسفات با انرژی بالا در پیوندهای þDGF (P < 0.001؛="" شکل="" 2a)="" و="" توسط="" پست="" مداوم="" است.="" -="" کاتابولیسم="" خونرسانی="" مجدد="" آدنوزین="" تری="" فسفات/گوانوزین="" تری="" فسفات="" (atp/gtp).="" دومی="" در="" ادامه="" انتشار="" (تفاوت="" های="" av)="" هیپوگزانتین="" و="" گزانتین="" (شکل="" 2b="" و="" c،="" p=""><0.0001 و="" 0.02،="" به="" ترتیب)،="" محصولات="" تخریب="" نهایی="" atp="" و="" gtp="" از="" این="" پیوندها="" بازتاب="" می="" یابد.="" داده‌های="" مربوط="" به="" نمونه‌برداری‌های="" بافتی="" قبل="" از="" خونرسانی="" مجدد،="" درجات="" درجه‌بندی="" تجمع="" اینوزین="" و="" هیپوگزانتین="" را="" در="" پایان="" دوره="" ذخیره‌سازی="" ایسکمیک="" نشان="" داد،="" با="" کمترین="" مقدار="" در="" پیوند="" زنده="" و="" بالاترین="" آن="" در="" پیوندهای="" اهداکننده="" متوفی="" (شکل="" 2d="" و="" e).="" محتوای="" بافت="" هیپوگزانتین="" و="" اینوزین="" پس="" از="" خونرسانی="" مجدد="" (t="" ¼="" 40="" دقیقه)="" در="" هر="" 3="" گروه="" اهداکننده="" مشابه="" و="" کم="" بود="" (شکل="" 2d="" و="">

کاتابولیسم ATP پس از خونرسانی مجدد در پیوندهای þDGF علیرغم ترمیم ظاهری اکسیداسیون اسید چرب b پس از خونرسانی مجدد (شکل S2 تکمیلی)، گلیکولیز فعال/گلوتامینولیز (شکل 3) و اتوفاژی (شکل 4) رخ داد. هر 3 نوع پیوند بازیابی یکنواخت محتوای b-hydroxybutyrate بافتی (شکل تکمیلی S2A) و پاکسازی انتخابی (جذب) اسیدهای چرب با زنجیره متوسط ​​(C8-C12) از گردش خون را نشان دادند (شکل های تکمیلی S1 و S2B-E)، که نشان دهنده یکنواختی است. بازگرداندن اکسیداسیون b با این حال، تجمع بافتی استیل کارنیتین در پیوندهای اهداکننده مرده –DGF و þDGF (تصویر تکمیلی S2F)، و شستشو (تفاوت های AV) استیل کارنیتین از پیوندهای þDGF (تصویر تکمیلی S2G، P <{18}.03). نقص="" درجه="" بندی="" شده="" در="" دفع="" گروه="" های="" استیل="" تشکیل="" شده="" در="">

گیاه سیستانچ

نقشه برداری از شبکه های گلیکولیز/گلوتامینولیز (شکل 3) سطوح گلوکز بافتی برابر را نشان داد (شکل 4a) و گلیکولیز نرموکسیک پس از خونرسانی مجدد را به عنوان یک ویژگی انحصاری پیوندهای دهنده þDGF (به عنوان مثال انتشار لاکتات و پیرووات پایدار و c) تایید کرد (شکل، P33).<0.0001 and=""><0.04, respectively)="" and="" release="" of="" the="" transamination="" products="" alanine="" and="" aspartate="" (figure="" 3e="" and="" f,="" p="" <="" 0.02="" and="" <="" 0.0001,="" respectively).="" serine="" (figure="" 4b)="" and="" phosphoserine="" (supplementary="" figure="" 3d)="" released="" from="" þdgf="" grafts="" may="" (partially)="" reflflect="" transamination="" of="" the="" glycolysis="" intermediate="" phosphoglycerate.="" persistent="" post-reperfusion="" glutamate="" release="" (figure="" 3k,="" p="" <="" 0.002),="" selective="" release="" of="" the="" transamination="" products="" alanine="" and="" aspartate="" (figure="" 3e="" and="" f),="" and="" exhaustion="" of="" the="" tissue="" asparagine="" pool="" (figure="" 3j,="" p="" <="" 0.03)="" in="" þdgf="" grafts="" imply="" continued="" post-reperfusion="" glutaminolysis="" (alanine)="" and="" glutamine="" shuttling="" (asparagine="" aspartate)8="" in="" the="" post-reperfusion="" phase="" of="" these="" grafts.="" moreover,="" the="" exclusive="" release="" of="" serine,="" methionine,="" and="" tyrosine="" (figure="" 4a–c,="" all="" ps="" <="" 0.0005),="" along="" with="" disposal="" of="" butyryl="" carnitine="" and="" isovaleryl="" carnitine="" (figure="" 4d="" and="" e,="" p=""><0.006 and=""><0.003, respectively),="" deamination="" products="" of="" the="" branched-chain="" amino="" acids9,10="" from="" þdgf="" grafts,="" but="" not="" from="" the="" other="" graft="" types="" (figure="" 4a–e),="" implies="">پس از خونرسانی مجدداتوفاژی در این گرافت ها.11.

شکل 1|نقشه های حرارتی خوشه ای برای تفاوت غلظت متابولیت شریانی-وریدی نسبت به پیوند دهنده در 30 دقیقه و محتوای متابولیت بافتی 40 دقیقه پس از خونرسانی مجدد. (الف) نقشه حرارتی خوشه‌ای برای غلظت متابولیت شریانی-وریدی در t¼ 30 دقیقه پس از خونرسانی مجدد. ستون‌ها 3 گروه اهداکننده را نشان می‌دهند (گرافت‌های اهداکننده زنده [گروه مرجع، n ¼ 10]؛ پیوندهای اهداکننده متوفی بدون عملکرد پیوند دیرتر [DGF {–DGF، n ¼ 10}]، و پیوندهای اهداکننده مرده با DGF بعدی [þDGF، n ¼ 16]). ترکیبات بر اساس 5 خوشه متابولیک و در هر خوشه بر اساس z-score گروه اهداکنندگان زنده رتبه بندی می شوند. سبز منعکس کننده جذب خالص توسط پیوند و قرمز منعکس کننده آزاد شدن خالص از پیوند است. (ادامه دارد)

شکل 1 (ادامه) (ب) نقشه حرارتی خوشه‌ای برای متابولیت‌های بافتی شناسایی‌شده در آنالیز تشدید مغناطیسی هسته‌ای با زاویه جادویی HR از بیوپسی‌های پیوند گرفته شده 40 دقیقه پس از خونرسانی مجدد. ستون‌ها 3 گروه اهداکننده را نشان می‌دهند (گروه اهداکننده زنده [گروه مرجع، n ¼ 6، پیوند اهداکننده مرده بدون DGF بعدی [–DGF، n ¼ 6]، و پیوند اهداکننده مرده با DGF بعدی [þDGF، n ¼ 6]). رنگ قرمز محتوای بافت را در بالا و سبز نشان دهنده محتوای بافت زیر میانگین هندسی 3 گروه است.

تجمع (بافت) استیل-کارنیتین پس از خونرسانی مجدد در -DGF و þDGF گرافت (شکل 2f) و اولیه (گرافت دهنده زنده و پیوند -DGF) و ادامه (þDGF grafts) استیل کارنیتین (P < 0).="" }}3)="" نشان="" دهنده="" اختلال="" گذرا="" (گرافت="" های="" dgf)="" یا="" پایدار="" (گرافت="" های="" þdgf)="" استیل="" کوآنزیم="" a="" پس="" از="" خونرسانی="" مجدد="" است="" (شکل="" تکمیلی="" 2g).="" اگرچه="" این="" تجمع="" ممکن="" است="" ناشی="" از="" گلیکولیز="" و="" اکسیداسیون="" ب="" باشد،="" اما="" ممکن="" است="" نشان="" دهنده="" اختلال="" در="" دفع="" استیل="" در="" نتیجه="" نقص="" چرخه="" کربس="" باشد.="" برای="" پیوندهای="" þdgf،="" مکانیسم="" دوم="" با="" انتشار="" انتخابی="" و="" مداوم="" a-ketoglutarate="" میانی="" چرخه="" کربس="" (شکل="" 5c،="" p=""><0.0005) به="" عنوان="" یک="" ویژگی="" انحصاری="" در="" این="" پیوندها="" و="" با="" اختلال="" در="" بازیابی="" سوکسینات="" بافت="" در="" پیوندهای="" þdgf="" پشتیبانی="" می="" شود.="" (شکل="">

آخرین خوشه متابولیت های تبعیض آمیز به آسیب سلولی مداوم مربوط می شود. این خوشه شاملپس از خونرسانی مجددانتشار اوراسیل، نشانگر تثبیت شده آسیب سلولی12،13 (شکل تکمیلی S3A، P < 0.0001)="" و="" مشتقات="" اسید="" آمینه="" که="" با="" هیدرولیز="" پلاسمالوژن="" ها="" (یعنی="" فسفو="" اتانول="" آمین،="" اتانول="" آمین،="" و="" فسفو="" سرین؛="" شکل="" تکمیلی="" s3bd،="" p=""><{15}}.{19}}01؛ شکل="" تکمیلی="" s1).="" اگرچه="" هیچ="" تفاوت="" av="" برای="" کولین="" در="" گروه="" þdgf="" وجود="" نداشت="" (60/0="" ¼="" p)،="" این="" مشاهدات="" برخلاف="" جذب="" خالص="" کولین="" در="" اهداکننده="" زنده="" و="" گروه="" -dgf="" است="" (به="" ترتیب="" 0001/0="" و="" 02/0="" p=""><). از="" این="" رو،="" در="" پیوندهای="" þdgf،="" هیدرولیز="" پلاسمالوژن="" های="" کولین="" ممکن="" است="" با="" جذب="" کولین="" پوشانده="" شود.="" چنین="" مکانیسمی="" با="" انتشار="" انتخابی="" و="" پیشرونده="" بتائین،="" محصول="" اکسیداسیون="" کولین="" 14="" در="" گروه="" þdgf="" پشتیبانی="" می="" شود="" (شکل="" های="" تکمیلی="" s3g،="" p=""><>

مشاهدات قبلی حادثه IRI را با پایداری مرتبط می داندپس از خونرسانی مجددکاتابولیسم ATP و آسیب مداوم سلولی در زمینه نارسایی میتوکندری و فعال شدن مسیرهای گلیکولیتیک و لیپولیتیک (شکل 6). با توجه به نقش حیاتی ATP در هموستاز سلولی و بقا، استدلال شد که به کارگیری مسیرهای احیا کننده ATP کمکی (به عنوان مثال مستقل از تنفس میتوکندریایی) مفید خواهد بود. در این زمینه، ما اینوزین را در نظر گرفتیم، یک نوکلئوزیدی که می تواند ATP را از طریق مسیرهای غیر سنتی تولید کند. همانطور که در شکل 7 نشان داده شده است، نه تحویل اینوزین پیشگیرانه و نه نجات دهنده (در غلظت های تا 10 میلی مول در لیتر) خستگی ATP را به دنبال فلج متابولیک ناشی از مواد شیمیایی نجات نداد.

شکل 3|گلیکولیز و گلوتامینولیز پس از خونرسانی مجدد. منحنی هایی برای تفاوت های وریدی شریانی (منحنی قرمز شریانی است، منحنی آبی وریدی است). بیوپسی بافتی (نمودار میله ای): نوارهای سفید نشان دهنده بیوپسی های قبل از خونرسانی مجدد هستند. نوارهای خاکستری نشان دهنده بیوپسی های پس از خونرسانی مجدد است (t ¼ 40 دقیقه پس از خونرسانی مجدد). *P <0.05. (الف)="" محتویات="" گلوکز="" بافت.="" (ب-i)="" واسطه="" های="" گلیکولیز:="" لاکتات،="" پیرووات،="" آلانین،="" آسپارتات="" و="" آسپاراژین.="" (ک،="" ل).="" گلوتامینولیز="" واسطه="" گلوتامین="" و="" گلوتامات="" است.="" رزونانس="" مغناطیسی="" هسته="" ای="" بافت="" (nmr؛="" n="" ¼="" 6="" در="" هر="" گروه):="" (الف)="" بازیابی="" گلوکز="" بافت="" در="" اهدا="" کننده="" زنده.="" (d،="" f،="" h)="" محتویات="" بافت="" لاکتات،="" آلانین="" و="" آسپارتات="" پایدار="" منعکس="" کننده="" شستشوی="" این="" واسطه="" ها="" هستند="" (ادامه="">

شکل 3 (ادامه) از کلیه. (j) آسپاراژین بافت غیر قابل اندازه گیری در بیوپسی های پس از خونرسانی مجدد þ تابع پیوند تاخیری (DFG). تفاوت غلظت شریانی وریدی (AV) (n¼ 10، 10 و 16 به ترتیب در گروه های زنده، -DGF و þDGF): (b،c) لاکتات پایدار پس از خونرسانی مجدد (P < 0.0001)="" و="" پیرووات="" (p=""><0.04) از="" این="" پیوندها="" آزاد="" می‌شوند.="" (ه)="" آلانین="" (p=""><0.02)، (گرم)="" اسید="" آسپارتیک="" (p=""><0.0001)، و="" (þk)="" گلوتامات="" رهاسازی="" (عملکرد="" پیوند="" تاخیری="" (گرافت="" های="" dgf="" نشان="" دهنده="" گلیکولیز="" نرموکسیک="" در="" p=""><0.002) از="" پیوندهای="" þdgf="" نشان="" دهنده="" اکسیداسیون="" مداوم="" در="" گلوتامین="" است.="" هیچ="" تفاوت="" معنی="" داری="" در="" av="" برای="" گلوتامین="" (i)="" مشاهده="">

اثرات cistanche: جلوگیریبیماری های کلیوی

بحث

از این مطالعه، که در زمینه پیوند کلیه بالینی انجام شد، تصویر IRI (DGF) نتیجه یک شکست تقریباً آنی و مداوم پس از خونرسانی مجدد فسفوریلاسیون اکسیداتیو و گلیکولیز نرموکسی فعال شده است که قادر به حفظ هموستاز انرژی نیست. به نوبه خود، استخرهای فسفات پرانرژی به تدریج تمام می شوند و یکپارچگی سلولی نمی تواند حفظ شود و در نتیجه آسیب بافتی مداوم به وجود می آید.

این مطالعه بالینی مبتنی بر ادغام داده‌های متابولیک به دست آمده از بیوپسی‌های بافتی است که بلافاصله قبل و 40 دقیقه پس از خونرسانی مجدد و از ارزیابی متوالی تفاوت‌های AV بر روی پیوند خونرسانی مجدد شده گرفته شده است. این تفاوت‌های AV نه تنها نشانه‌ای برای سرعت و مدت زمان سازگاری‌های متابولیکی (نادرست) فراهم می‌کنند، بلکه امکان هدایت روند مشاهده‌شده در بیوپسی‌های بافت جفتی و ارزیابی کلیرانس متابولیت (مثلا لاکتات) یا جذب از (مثلاً متوسط) را فراهم می‌کنند. -اسیدهای چرب زنجیره ای) گردش خون. 15،16 وضوح رویکرد AV به وضوح توسط داده های آسیل کارنیتین نشان داده شده است، که نه تنها جذب انتخابی اسیدهای چرب با زنجیره متوسط ​​را نشان می دهد، بلکه نشان می دهد که گونه های غیر اشباع کارنیتین C14 تترادسنویل و تترادکادینیل کارنیتین رفتاری مشابه اسیدهای چرب با زنجیره متوسط ​​(داده‌های تکمیلی S1) دارند و ممکن است به انتقال‌دهنده‌های اسید چرب خاص متکی نباشند. در واقع، در فرآیند تجزیه و تحلیل داده‌ها، مشاهده شد که تنها تکیه بر بیوپسی‌های بافتی، بیشتر نتیجه‌گیری‌ها در این مطالعه را پنهان کرده است. زیرا اکثر متابولیت های تشکیل شده به طور موثر در گردش خون پاک می شوند. غلظت پایدار خون شریانی نشان می‌دهد که هموستاز خون حفظ می‌شود، و در نتیجه، متابولیت‌های آزاد شده یا جذب شده به طور موثر در جاهای دیگر دفع یا دوباره پر می‌شوند. توجه داشته باشید که در زمینه کلیه های اهداکننده متوفی و ​​بازه زمانی مطالعه، کلیرانس ادراری یک عامل تداخلی نیست زیرا تمام پیوندهای اهداکننده متوفی برای فاصله اندازه گیری 40- دقیقه آنوریک بودند.

نقشه برداری از داده ها ردپای متابولیکی را مشخص می کند که برای IRI کاملاً تبعیض آمیز است. به طور خاص، فاز خونرسانی مجدد پیوندها با DGF آینده به طور یکنواخت و مشخص با فسفوریلاسیون اکسیداتیو شدید مختل شده (هیپوکسی هیستوتوکسیک) و گلیکولیز نرموکسیک جبرانی مشخص می شود که قادر به حفظ بازسازی ATP نیست. نتیجه گیری دوم بر اساس بازیابی ناقص بافر فسفات با انرژی بالا فسفوکراتین 19 و کاتابولیسم مداوم پس از خونرسانی مجدد ATP/GTP است که با ادامه انتشار (هیپو)گزانتین منعکس شده است. در واقع، تقریب تلفات آدنوزین برای پیوندهای þDGF بر اساس آزادسازی هیپوگزانتین (تفاوت AV) در 30 دقیقه پس از خونرسانی مجدد (تقریبا بر اساس نرخ جریان پس از خونرسانی مجدد گزارش شده، 20 میانگینبافت کلیهتوده، 21 و محتوای ATP کلیوی 22) نشان می دهد که استخر ATP پیوند تقریباً خسته شده است 30 دقیقهپس از خونرسانی مجدد. فرسودگی بحرانی مخزن ATP ممکن است منجر به یک قفل کاتابولیک شود که سلول را نسبت به استقرار مجدد نیروهای محرکه پروتون که تولید ATP را هدایت می‌کنند، واکنش نشان نمی‌دهد و سلول را نسبت به استراتژی‌های نجات واکنش نشان نمی‌دهد.

کمبود ATP پس از خونرسانی مجدد و هیپوکسی هیستوتوکسیک در پیوندهای þDGF ممکن است زمینه ساز آزادسازی انتخابی اسیدهای آمینه مرتبط با هیدرولیز فسفولیپیدها (پلاسمالوژن ها) در پیوندهای þDGF باشد. مطالعات تجربی هیدرولیز پلاسمالوژن‌ها و فسفولیپیدها را به‌عنوان مشخصه اولیه هیپوکسی بافتی شناسایی کردند، و هیدرولیز پلاسمالوژن‌ها در زمینه آسیب کلیوی ایسکمیک توصیف شده است. از نظر مکانیکی، این پدیده با جابه‌جایی غشاء و فعال‌سازی کلسیم سیتوزولی مرتبط است. فسفولیپاز A2 مستقل ناشی از تشکیل کمپلکس ناشی از هیپوکسی بین فسفولیپاز و یک عنصر تنظیم کننده فسفوفروکتوکیناز. 25،26 معکوس هیپوکسی یا درمان ATP، کمپلکس فسفولیپاز-فسفوفروکتوکیناز را جدا می کند و فعالیت فسفولیپاز را لغو می کند. توجه داشته باشید که پویایی توقف آزادسازی اتانول آمین (فسفو-) پس از خونرسانی مجدد از اهداکننده زنده و پیوند -DGF، و همچنین انتشار مداوم در پیوندهای þDGF، ممکن است درجات و نرخ های مختلف بهبود متابولیک را منعکس کند. با این حال، در حالی که گزارش‌های قبلی حاکی از نقش یک فسفولیپاز A2،25،26 مستقل از کلسیم سیتوزولی، تفاوت‌های مشاهده‌شده AV برای بتائین و (فسفو) اتانول آمین است که حاکی از فعال‌سازی جامع‌تر فسفولیپازها است که شامل نوع C-phospholipases (phosphoehanolamin) نیز می‌شود. و D-فسفولیپازها (اتانولامین/کولین). به طور مشابه، کاهش آسپاراژین بافتی (شکل 4j) و آزادسازی آسپارتات (شکل 4g) از پیوندهای þDGF ممکن است منعکس کننده اختلال در فعالیت آسپاراژین سنتاز به دلیل کاهش ATP باشد.

شکل 4|اتوفاژی پس از خونرسانی مجدد فعال در پیوندهای عملکرد پیوند تاخیری D (DGF). منحنی هایی برای تفاوت های شریانی و وریدی (منحنی قرمز شریانی است، منحنی آبی وریدی است). بیوپسی بافتی (نمودار میله ای): نوارهای سفید نشان دهنده بیوپسی های قبل از خونرسانی مجدد هستند. نوارهای خاکستری نشان دهنده بیوپسی های پس از خونرسانی مجدد است (t ¼ 40 دقیقه پس از خونرسانی مجدد). *P <0.05. (الف-ج)="" آزادسازی="" متیونین،="" سرین="" و="" تیروزین="" پس="" از="" خونرسانی="" مجدد="" (ادامه="">

شکل 5|نقص چرخه کربس پس از خونرسانی مجدد در گرافت هایی با عملکرد پیوند تاخیری در آینده (DGF). منحنی هایی برای تفاوت غلظت شریانی-وریدی (AV) (منحنی قرمز شریانی است، منحنی آبی وریدی است). بیوپسی بافتی (نمودار میله ای): نوارهای سفید نشان دهنده بیوپسی های قبل از خونرسانی مجدد هستند. نوارهای خاکستری نشان دهنده بیوپسی های پس از خونرسانی مجدد هستند (t ¼ 40 دقیقه پس از خونرسانی مجدد). *P < {{10}}.05.="" (a-h)="" تفاوت="" های="" av="" برای="" واسطه="" های="" چرخه="" کربس="" (n="" ¼="" 10،="" 10="" و="" 16="" در="" گروه="" های="" زنده،="" -dgf،="" و="" þdgf،="" به="" ترتیب):="" انتشار="" مداوم="" a-ketoglutarate="" (از="" پیوند="" þdgf؛="" p=""><0.001) .="" (به="" عنوان="" مثال)="" عدم="" وجود="" بازیابی="" سوکسینات="" بافت="" پس="" از="" خونرسانی="" مجدد="" در="" پیوندهای="" þdgf="" (p=""><>

کاتابولیسم ATP پس از خونرسانی مجدد در پیوندهای þDGF علیرغم فعالسازی جامع مسیرهای کاتابولیک رخ داد: گلیکولیز، اکسیداسیون b اسیدهای چرب با زنجیره متوسط ​​(به طور یکنواخت در همه انواع پیوند فعال می شوند)، گلوتامینولیز (همچنین به صورت موقتی پس از خونرسانی مجدد در پیوندهای اهداکننده GGF فعال می شود -D) ) و اتوفاژی فعال شد. در واقع، انتشار پس از خونرسانی مجدد ایزووالریل- و بوتیریل کارنیتین، محصولات دآمیناسیون اسیدهای آمینه شاخه دار ایزولوسین و لوسین، 11، به عنوان نشانگرهای زیستی تبعیض آمیز برای DGF آینده شناسایی شدند.

انتشار مداوم استیل کارنیتین و پیروات از پیوندهای þDGF نشان می دهد که شارهای ایجاد شده توسط مسیرهای کاتابولیک فعال شده از ظرفیت اکسیداتیو فراتر رفته است. آزادسازی کتوگلوتارات پس از خونرسانی مجدد، جذب خالص سیترات و ایزوسیترات پیش ساز آن از گردش خون، و ناتوانی در بازیابی سوکسینات بافت نشان می دهد که اختلال در فسفوریلاسیون اکسیداتیو شامل نقص در سطح کمپلکس oxoglutarate دهیدروژناز است. به طور خاص، ردپای متابولیک مشاهده شده و بازه زمانی اختلالات متابولیک نقشی را برای هدایت معکوس چرخه کربس نشان نمی دهد27،28 در اختلالات متابولیک مداوم، شواهد بیشتری ارائه می دهد که مکانیسم مشاهده شده برای IRI در جوندگان28 به طور کامل به انسان ترجمه نمی شود. زمینه.29.

اختلال در فعالیت اکسوگلوتارات دهیدروژناز ممکن است به دلیل آسیب ناشی از ایسکمی به کمپلکس ایجاد شود، اما ممکن است باعث اختلال شود یا در اثر آن اغراق شود.پس از خونرسانی مجدداختلال در فعالیت اکسوگلوتارات دهیدروژناز ممکن است ناشی از آسیب ناشی از ایسکمی به کمپلکس باشد، اما ممکن است شامل اختلال در دسترسی پس از خونرسانی مجدد به کوفاکتورهای آن استیل کوآنزیم A، FADþ و NADþ نیز باشد. برای پیوندهای þDGF، چنین کمبودهایی ممکن است به دلیل تخلیه استیل کوآنزیم A پس از خونرسانی مجدد و وضعیت ردوکس سلولی به خطر بیفتد (تنش کاهشی با اختلال در دسترس بودن NADþ)، مفهومی که توسط نسبت لاکتات به پیرووات پایین در پیوندهای þDGF پشتیبانی می شود. 32.

این رویکرد متابولیک امکان ارزیابی درگیری زنجیره تنفسی را نمی دهد. با این حال، ما قبلاً نقایص مربوط به خونرسانی مجدد ایسکمی را در هر دو کمپلکس تنفسی I و II شناسایی کردیم. 7،29 بر اساس داده های این مطالعه و کارهای قبلی میتوکندری، تصویری از IRI کلیوی بالینی ظاهر می شود که یک پیامد اولیه (یا برانگیختن توهین(ها) به شاتل چرخه ردوکس کربس میتوکندری که قبل یا در اولین دقیقه از جریان خون مجدد رخ می دهد. شکست در بازگرداندن سطوح ATP منجر به فعال‌سازی پایدار و جامع مسیرهای کاتابولیک می‌شود، که بحران انرژی را با فرسودگی تدریجی مخزن NADþ و FADþ سلولی (استرس کاهش‌دهنده) تداوم می‌بخشد. . برخلاف آدنوزین، اینوزین 34 در پلاسما پایدار است. به عنوان منبع جایگزین ATP در سلول‌های گلیکولیتیک اجباری (یعنی سلول‌های فاقد میتوکندری) مانند گلبول‌های قرمز (35) و در سلول‌های هیپوکسیک کلیه (36) شناسایی شده است و به دنبال خونرسانی مجدد خسته می‌شود. متأسفانه، مکمل اینوزین کاهش ATP سلولی را پس از یک خاموشی اجباری متابولیک نجات نداد، و فضای کمی برای استراتژی‌های نجات متابولیک با هدف خاموش کردن IRI باقی گذاشت و بر اتکا به استراتژی‌های پیشگیرانه برای محدود کردن IRI تأکید کرد.

تقویت کننده سیستانچ کلیه

محدودیت در این مطالعه وجود دارد. با توجه به تعداد زیادی از مقایسه ها، پتانسیل یافته های قابل توجه به دلیل شانس تصادفی در تنظیم مقایسه های چندگانه زیاد است. اگرچه نتایج ما توسط روابط بیولوژیکی صحیح پشتیبانی می شود، نتایج ممکن است با مسائل مربوط به مقایسه های متعدد مخدوش شوند.

محدودیت دیگر این است که مطالعه بر اساس نمونه های بالینی است. به این ترتیب، انجماد گیره مورد نیاز برای ارزیابی مستقیم وضعیت ATP و ردوکس ممکن نبود. از آنجا که متابولوم مشاهده شده به وضوح از آنچه در مدل های حیوانی گزارش شده است متمایز است و منعکس کننده نقص سیستم است، ما قادر به انجام ارزیابی های دقیق تر در مدل های حیوانی یا سیستم های خارج از بدن مانند سیستم تنفس سنجی نبودیم. نتایج در این مطالعه برایکلیه; بنابراین، نتیجه گیری برای سایر اندام ها ممکن است متفاوت باشد. سن نسبتاً بالا اهداکننده در این مطالعه بازتابی از جمعیت اهداکننده در هلند است. نکته مهم، 10-نتایج پیوند سالانه برای هلند حداقل با کشورهای دارای اهداکنندگان جوان‌تر، مانند ایالات متحده برابر است. همانطور که انتظار می‌رفت، اکثر موارد þDGF پیوند DCD بودند. مشابه آن را متوجه شدیمپروفایل های متابولیکبرای پیوندهای DBD و DCD؛ با این حال، قدرت این مطالعه اکتشافی آشکارا برای تشخیص تفاوت‌های ظریف بین این دو نوع اهداکننده بسیار کم است.

شکل 7|درمان با اینوزین پیشگیرانه و نجات دهنده در بازیابی سطوح آدنوزین تری فسفات (ATP) شکست خورده است.. رده سلولی PK{0}} به طور پایدار با حسگر زیستی فلورسنت PercevalHR نسبت ATP به آدنوزین دی فسفات (ADP) ترانسفکت شد.

فلج متابولیک ناشی از مواد شیمیایی با افزودن روتنون/اکتینومایسین/2-دئوکسی گلوکز القا شد و نسبت ATP به ADP (فلورسانس نسبی) بررسی شد. قهوه ای، کنترل؛ سیاه، کنترل فلج متابولیک؛ سبز، درمان با اینوزین پیشگیرانه (10 میلی مول در لیتر)؛ قرمز، نجات اینوزین در t ¼ 15 دقیقه پس از القای فلج متابولیک.

در نتیجه، این مطالعه نشان می دهد که IRI کلیوی بالینی با یک فروپاشی متابولیک تقریباً آنی و یک بحران فسفات با انرژی بالا همراه است. این نقص عمیق و مداوم متابولیک و ماهیت آنی آن (و در نتیجه حداقل فرصت درمانی) با هر مداخله دارویی که به در دسترس بودن ATP متکی باشد، تداخل خواهد داشت. این ممکن است ترجمه پذیری ضعیف یافته های پیش بالینی را به محیط بالینی توضیح دهد. متابولوم مشاهده شده DGF بالینی به شدت با پاسخ های متابولیکی گزارش شده برای موش ها، 28 موش، 38 و خوک ها، 39،40 تضاد دارد که همگی نشان دهنده بازگرداندن فسفوریلاسیون اکسیداتیو در داخل هستند. دقیقه خونرسانی مجدد این ممکن است به تفاوت‌های اساسی در فیزیولوژی میتوکندری یا متابولیک بین جوندگان و پستانداران بزرگ‌تر مربوط باشد (مثلاً تجمع سوکسینات ناشی از ایسکمی در کلیه‌های اهداکننده انسان رخ نمی‌دهد). بهخونرسانی مجدد ایسکمیو اینکه فقط یک زیر گروه از پیوندها IRI (DGF) را ایجاد می کند. تخصیص گروهی (þDGF یا -DGF) در این مطالعه به صورت گذشته نگر انجام شد و بنابراین بین خونرسانی مجدد ایسکمی و IRI تمایز قائل شد. نمی توان رد کرد که خونرسانی مجدد ایسکمی در مدل های تجربی 28،38-40 برای تحریک IRI کافی نیست.

علیرغم صدمات شدید وارده، تمام پیوندهای þDGF در نهایت بهبود یافتند، که حاکی از پتانسیل بهبود قابل توجهی است، مشروط بر اینکه مداخلات پل زدن (مانند دیالیز) در دسترس باشد. شایان ذکر است، اگرچه متابولوم های مشابه برای DGF در گرافت های مشتق شده از اهداکنندگان متوفی پس از مرگ مغزی یا مرگ قلبی حاکی از مکانیسم یکنواختی است، تأثیر متضادی DGF بر بقای طولانی مدت پیوند برای دو نوع اهداکننده وجود دارد.41 در واقع، اگرچه DGF به وضوح بر بقای پیوند از اهداکنندگان متوفی پس از مرگ مغزی تأثیر می‌گذارد، اما در چنین پیوندهایی از اهداکنندگان قلب تأثیری ندارد. به نظر می رسد این تضاد نشان دهنده پتانسیل بهبودی برتر پیوند از اهداکنندگان مرگ قلبی است.

مواد و روش ها

کمیته اخلاق پزشکی مرکز پزشکی دانشگاه لیدن پروتکل مطالعه را تایید کرد. رضایت نامه کتبی آگاهانه از هر بیمار به دست آمد. این مطالعه تک مرکزی شامل 53 بیمار بود که تحت درمان قرار گرفتندکلیهپیوند: 37 مورد تحت عمل پیوند اهداکننده مرده و 16 مورد یک عمل اهداکننده زنده قرار گرفتند. بر اساس نتیجه بالینی (DGF)، گیرندگان پیوند اهداکننده مرده به گروه þDGF (16 ¼ n) یا -DGF (n ¼ 10) اختصاص داده شدند. DGF با نیاز به دیالیز در هفته اول پس از پیوند تعریف شد

این مطالعه بر اساس ادغام داده‌های متابولومیک به‌دست‌آمده از نمونه‌گیری متوالی خون شریانی وریدی (AV) در طی نیم ساعت اول خون‌رسانی مجدد، و از نمونه‌برداری‌های بافت جفتی که بلافاصله قبل و 40 دقیقه پس از آن جمع‌آوری شده است، است.

خونرسانی مجدد

نمونه گیری متوالی خون AV از روی پیوند در 36 بیمار انجام شد (جدول تکمیلی S1A). نمونه خون ورید کلیوی در 3{8}} ثانیه و 3، 5، 10، 20 و 30 دقیقه و نمونه های شریانی در 0، 10 و 30 دقیقه پس از خونرسانی مجدد جمع آوری شد. بیوپسی بلافاصله قبل و 40 دقیقه پس از خونرسانی مجدد از 6 پیوند دهنده زنده و 12 پیوند دهنده مرده به دست آمد (جدول تکمیلی S1B؛ 1 بیمار هر دو بیوپسی و AV نمونه برداری شد).

آنالیزهای متابولومیک هدفمند با استفاده از روش‌های عملیاتی استاندارد با استفاده از پلت‌فرم‌های مبتنی بر طیف‌سنجی جرمی یا رزونانس مغناطیسی هسته‌ای با زاویه جادویی (بیوپسی‌های بافتی) انجام شد.

پتانسیل اینوزین برای نجات نقص متابولیک در طی یک فروپاشی متابولیک در رده سلولی لوله پروگزیمال (LLC PK1) که به طور پایدار با حسگر زیستی آدنوزین دی فسفات ATP فلورسنت PercevalHR ترانسفکت شده بود مورد آزمایش قرار گرفت.

با توجه به آمار، نقشه های حرارتی بر اساس امتیاز z برای هر یک ساخته شدمتابولیت. تغییرات درون گروهی در محتوای متابولیت بافت با آزمون من ویتنی و تفاوت بین گروهی با آزمون ویلکاکسون مورد آزمایش قرار گرفت. تفاوت AV با استفاده از یک مدل خطی مخلوط برآورد شد. تصحیح برای آزمایش چندگانه انجام نشد زیرا همه مشاهدات بخشی از شبکه های نظری بودند. جزئیات در مورد بیماران و روش ها در روش های تکمیلی ارائه شده است.

عصاره سیستانچ

افشای

همه نویسندگان هیچ علاقه رقیبی را اعلام نکردند.

سپاسگزاریها

مرکز اصلی تشدید مغناطیسی توسط دانشکده پزشکی در NTNU Trondheim، نروژ تامین می شود. این مطالعه تا حدی توسط بنیاد کلیه هلند (راهبردهای نجات متابولیک برای بهبود نتیجه پیوند، پروژه 17O/11) تامین شده است.

مواد تکمیلی

فایل تکمیلی (PDF)

بیماران تکمیلی و روش ها.

جدول S1. ویژگی‌های بیمار و پیوند رویه‌هایی که در آن بیوپسی‌های بافت جفتی جمع‌آوری شد (A) و در آن نمونه‌برداری AV انجام شد (B).

جدول S2. پلتفرم ها و متابولیت های آنها برای نمونه های AV استفاده می شود.

شکل S1. داده های متابولومیک کامل

شکل S2. بازگرداندن اکسیداسیون b (اسیدهای چرب با زنجیره متوسط) پس از خونرسانی مجدد.

شکل S3. شستشوی انتخابی و مداوم اسیدهای آمینه مرتبط با اوراسیل و فسفولیپید (پلاسمالوژن) پس از خونرسانی مجدد از پیوند با DGF آینده.

مکمل داده 1. داده های خام AV برای استیل کارنیتین، اسیدهای آلی، و سیستم عامل های اسید آمینه.

مکمل داده 2. داده های خام AV برای پلت فرم پورین و پیریمیدین.

منابع

1. Gutterridge JMC، Halliwell B. گونه های واکنشی در بیماری: دوستان یا دشمنان؟ در: Halliwell B, Gutterridge JMC, eds. رادیکال های آزاد در زیست شناسی و پزشکی آکسفورد، انگلستان: انتشارات دانشگاه آکسفورد; 2015: 511-638.

2. دیویدسون اس ام، فردیناندی پی، آندرئو اول، و همکاران. استراتژی های چند هدف برای کاهش آسیب ایسکمی میوکارد / جریان خون مجدد: موضوع هفته بررسی JACC. جی ام کول کاردیول. 2019؛ 73:89–99.

3. Lefer DJ، Bolli R. توسعه یک کنسرسیوم NIH برای ارزیابی پیش بالینی درمان‌های محافظت کننده قلبی (CAESAR): یک تغییر پارادایم در مطالعات محدودیت اندازه انفارکتوس. J Cardiovasc Pharmacol Ther. 2011؛ ​​16:332-339.

4. Cavaillé-Coll M، Bala S، Velidedeoglu E، و همکاران. خلاصه کارگاه FDA در مورد آسیب خونرسانی مجدد ایسکمی در پیوند کلیه. پیوند Am J. 2013؛ 13:1134-1148.

5. Schröppel B, Legendre C. تاخیر در عملکرد پیوند کلیه: از مکانیسم تا ترجمه. کلیه بین المللی 2014؛ 86: 251-258.

6. Mallon DH، Summers DM، Bradley JA، و همکاران. تعریف عملکرد تاخیری پیوند پس از پیوند کلیه: ساده ترین، بهترین است. پیوند. 2013؛ 96:885-889.

7. Wijermars LG، Schaapherder AF، de Vries DK، و همکاران. بازیابی متابولیک پس از پرفیوژن معیوب به طور مستقیم با عملکرد پیوند تاخیری مرتبط است. کلیه بین المللی 2016؛ 90: 181-191.

8. Zhang J، Fan J، Venneti S، و همکاران. آسپاراژین نقش مهمی در تنظیم سازگاری سلولی با کاهش گلوتامین دارد. سلول مول. 2014؛ 56: 205-218.

9. Holecek M. ارتباط بین گلوتامین، اسیدهای آمینه شاخه دار و متابولیسم پروتئین. تغذیه. 2002؛ 18:130-133.

10. نیوگارد سی بی، آن جی، بین جی آر، و همکاران. یک علامت متابولیک مرتبط با آمینو اسیدهای شاخه دار که انسان های چاق و لاغر را متمایز می کند و به مقاومت به انسولین کمک می کند. سلول متاب. 2009؛ 9:311-326.

11. Drake KJ، Sidorov VY، McGuinness OP، و همکاران. اسیدهای آمینه به عنوان سوبستراهای متابولیک در طول ایسکمی قلبی Exp Biol Med (Maywood). 2012؛ 237: 1369–1378.

12. دی جونگ جی دبلیو، هویزر تی، یانسن ام، و همکاران. فسفات های پرانرژی و کاتابولیت های آنها در: Piper HM، Preusse CJ، eds. ایسکمی- پرفیوژن مجدد در جراحی قلب. دوردرخت، هلند: Springer; 1993: 295-315.

13. van Os S، de Abreu R، Hopman J، و همکاران. متابولیسم پورین و پیریمیدین و فعالیت الکتریکی مغز در طی هیپوکسمی در بره های کوتاه مدت Pediatr Res. 2004؛ 55: 1018-1025.

14. بلوم اچ جی، دی وریسه AS. چرا سطح هموسیستئین در نارسایی کلیه افزایش می یابد؟ رویکرد متابولیک J Lab Clin Med. 2002؛ 139:262-268.

15. Ivanisevic J، Elias D، Deguchi H، و همکاران. متابولومیک خون شریانی وریدی: بازخوانی متابوستاز داخل بافتی. Sci Rep. 2015؛ 5:12757.

16. جانگ سی، هوی اس، زنگ ایکس، و همکاران. تبادل متابولیت بین اندام های پستانداران در خوک ها اندازه گیری شده است. سلول متاب. 2019؛ 30:594–606.

17. برمر J. کارنیتین - متابولیسم و ​​عملکردها. Physiol Rev. 1983؛ 63: 1420-1466.

18. Siggaard-Andersen O، Fogh-Andersen N، Gøthgen IH، Larsen VH. وضعیت اکسیژن خون شریانی و وریدی مختلط. Crit Care Med. 1995؛ 23: 1284- 1293.

19. Stoica SC. فسفات های پرانرژی و قلب اهداکننده انسان. J پیوند ریه قلب. 2004؛ 23: S244–S246.

20. Lisik W، Gontaczyk G، Kosieradzki M، و همکاران. اندازه گیری جریان خون حین عمل در آلوگرافت اندام می تواند عملکرد بعد از عمل را پیش بینی کند. پروسه پیوند 2007؛ 39:371-372.

21. مولینا دی کی، دی مایو وی جی. وزن طبیعی اندام در مردان: بخش دوم - مغز، ریه ها، کبد، طحال و کلیه ها. Am J Forensic Med Pathol. 2012؛ 33:368-372.

22. Hems DA، Brosnan JT. اثرات ایسکمی بر محتوای متابولیت ها در کبد و کلیه موش صحرایی در داخل بدن. Biochem J. 1970؛ 120:105-111.

23. De Medio GE، Goracci G، Horrocks LA، و همکاران. تأثیر ایسکمی گذرا بر متابولیسم اسیدهای چرب و لیپید در مغز ژربیل. ایتال جی بیوشیم. 1980؛ 29:412-432.

24. رائو اس، والترز کی بی، ویلسون ال، و همکاران. تغییرات اولیه چربی در آسیب حاد کلیه با استفاده از لیپیدومیکس SWATH همراه با تصویربرداری بافت MALDI. Am J Physiol Renal Physiol. 2016؛ 310: F1136–F1147.

25. Portilla D، Shah SV، Lehman PA، و همکاران. نقش فسفولیپاز A2 انتخابی پلاسمالوژن مستقل از کلسیم سیتوزولی در آسیب هیپوکسیک به لوله های پروگزیمال خرگوش جی کلین سرمایه گذاری. 1994؛ 93: 1609-1615.

26. Hazen SL، Wolf MJ، Ford DA، Gross RW. ارتباط سریع و برگشت پذیر فسفوفروکتوکیناز با غشاهای میوکارد در طول ایسکمی میوکارد FEBS Lett. 1994؛ 339:213-216.

27. Chinopoulos C. چرخه اسید سیتریک در طول هیپوکسی به کدام سمت می چرخد؟ نقش حیاتی کمپلکس a-ketoglutarate دهیدروژناز. J Neurosci Res. 2013؛ 91:1030-1043.

28. Chouchani ET، Pell VR، Gaude E، و همکاران. تجمع ایسکمیک سوکسینات آسیب خونرسانی مجدد را از طریق ROS میتوکندری کنترل می کند. طبیعت. 2014؛ 515:431-435.

29. Wijermars LG، Schaapherder AF، Kostidis S، و همکاران. تجمع سوکسینات و آسیب ایسکمی-پرفیوژن مجدد: موش ها اما نه مردان، مطالعه ای در ایسکمی-پرفیوژن مجدد کلیه. پیوند Am J. 2016؛ 16:2741-2746.

30. Tretter L، Adam-Vizi V. آلفا کتوگلوتارات دهیدروژناز: هدف و مولد استرس اکسیداتیو. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2005؛ 360: 2335-2345.

31. هیکل AA. کوآنزیم های داخل سلولی به عنوان نشانگرهای زیستی طبیعی برای فعالیت های متابولیکی و ناهنجاری های میتوکندریایی Biomark Med. 2010؛ 4:241-263.

32. سان اف، دای سی، زی جی، و همکاران. مسائل بیوشیمیایی در برآورد نسبت NAD / NADH آزاد سیتوزولی. PLoS One. 2012؛ 7: e34525.

    ---