اثرات مکمل گلایسین در رژیم غذایی بر عملکرد رشد، پارامترهای ایمونولوژیکی و آنتی اکسیدانی گلبول قرمز در ماهی کپور معمولی، Cyprinus Carpio

خلاصه ساده:

اسیدهای آمینه نقش مهمی در رشد و سلامت ماهی دارند. در این میان، اسیدهای آمینه غیر ضروری کمتر در آبزی پروری مورد مطالعه قرار گرفته اند، اما نقش های فیزیولوژیکی زیادی دارند. گلیسین یک اسید آمینه غیر ضروری است که در ساختار گلوتاتیون نقش دارد و همچنین در سیستم آنتی اکسیدانی ماهی نقش دارد. علاوه بر این، گلیسین سیستم ایمنی را تحریک می کند. این مطالعه نشان می دهد که یک دوره 8 هفته ای تغذیه با جیره های مکمل با 5 گرم بر کیلوگرم گلیسین می تواند عملکرد رشد، ثبات گلبول های قرمز و ایمنی هومورال و مخاطی را در ماهی کپور معمولی بهبود بخشد. بنابراین، نتایج حاضر را می توان در تولید رژیم غذایی کپور برای حمایت از رشد و سلامت بالاتر استفاده کرد.

خلاصه:

اثرات مکمل گلیسین رژیمی، 0 (شاهد)، 5 (5 GL) و 10 (10 GL) گرم بر کیلوگرم، بر عملکرد رشد، پارامترهای خونی، ظرفیت آنتی اکسیدانی گلبول قرمز، ایمنی هومورال و مخاطی بررسی شده است. در ماهی کپور معمولی، Cyprinus carpio. پس از هشت هفته تغذیه، تیمار 5 GL در مقایسه با تیمار شاهد، بهبود قابل توجهی در عملکرد رشد و اثربخشی خوراک نشان داد. تعداد گلبول‌های قرمز (RBC) و گلبول‌های سفید (WBC)، هموگلوبین، هماتوکریت، نوتروفیل‌ها و تعداد/درصد مونوسیت‌ها، RBC باعث کاهش محتوای گلوتاتیون (GSH) و فعالیت‌های آلکالین فسفاتاز مخاطی پوست، پراکسیداز، پروتئاز و لیزوزیم مشابه بود. در ماهی های تیمار شده با گلیسین و به طور قابل توجهی بالاتر از تیمار شاهد بود. درصد لنفوسیت خون در ماهیان تیمار شده با گلیسین کاهش یافت، اما تعداد لنفوسیت ها نسبت به ماهی شاهد افزایش یافت. فعالیت گلوتاتیون ردوکتاز RBC در ماهی تحت درمان با گلیسین مشابه و به طور قابل توجهی کمتر از تیمار شاهد بود. بیشترین فعالیت لیزوزیم پلاسما و مکمل جایگزین در تیمار GL مشاهده شد.

ماهی تیمار شده با گلیسین، به ویژه 5 GL، به طور قابل توجهی مقاومت در برابر شکنندگی اسمزی RBC را بهبود بخشید. گلیسین رژیم غذایی تأثیر معنی داری بر فعالیت گلوتاتیون پراکسیداز RBC، ایمونوگلوبولین پلاسما، درصد/تعداد ائوزینوفیل و شاخص های خونی نداشت. در نتیجه، بیشتر مزایای مکمل گلیسین در رژیم غذایی ممکن است به واسطه افزایش سنتز گلوتاتیون و قدرت آنتی اکسیدانی باشد.

کلمات کلیدی: اسید آمینه گلوتاتیون؛ تغذیه؛ سلولهای خونی؛ مخاط پوست

ایمونوگلوبولین های پلاسما یکی از مهم ترین اجزای سیستم ایمنی بدن هستند. ایمونوگلوبولین‌ها می‌توانند پاتوژن‌ها را شناسایی کرده و به آن‌ها متصل کنند، در نتیجه باعث حذف آنها، اعمال عملکردهای ایمنی و حفظ سلامتی می‌شوند. ایمونوگلوبولین های پلاسما عمدتاً شامل سه نوع IgG، IgM و IgA هستند و محتوای و نسبت آنها ارتباط تنگاتنگی با ایمنی انسان دارد. در شرایط عادی، محتوای ایمونوگلوبولین در افراد سالم نسبتاً بالا است و این نسبت هماهنگ است. این حالت متعادل می تواند به طور موثر در برابر تهاجم پاتوژن های خارجی مقاومت کند. هنگامی که بدن در حالت ایمنی قرار دارد، تغییرات در محتوای و نسبت ایمونوگلوبولین ها می تواند مبنای مهمی برای پیشگیری و درمان بیماری ها باشد. به عنوان مثال، IgM نقش مهمی در شناسایی اولیه و اتصال عفونت حاد پاتوژن ایفا می کند، بنابراین افزایش آن می تواند نشان دهنده عفونت حاد یا دوره نقاهت باشد. سطح پایدار و پایدار IgG نشان می دهد که وضعیت فیزیولوژیکی بدن بهتر است و توانایی بهتری برای حفظ و بهبود عملکرد ایمنی دارد.

بنابراین ایمنی بدن ارتباط تنگاتنگی با محتوا و نسبت ایمونوگلوبولین پلاسما دارد و نظارت و تنظیم دقیق میزان و نسبت ایمونوگلوبولین پلاسما یکی از اقدامات مهم برای حفظ سلامت و ایمنی قوی است. از اینجا می توان دریافت که باید به بهبود ایمنی خود توجه کنیم. علاوه بر یک رژیم غذایی سالم و ورزش در زندگی روزمره، سیستانچ همچنین می تواند ایمنی را بهبود بخشد. سیستانچ حاوی انواع مختلفی از اجزای فعال بیولوژیکی مانند پلی ساکارید، قارچ، هوانگلی و غیره است که این مواد می توانند سلول های مختلف سیستم ایمنی را تحریک کرده و فعالیت ایمنی آنها را افزایش دهند.

روی فواید سلامتی سیستانچ کلیک کنید

1. معرفی

آمینو اسیدهای غذایی نقش مهمی در رشد و سلامت ماهی دارند. ماهی برای تامین نیاز به اسیدهای آمینه خاصی که اسیدهای آمینه ضروری نامیده می شوند، به تامین رژیم غذایی بستگی دارد. این اسیدهای آمینه را نمی توان در بدن ماهی سنتز کرد [1]. با این حال، اگر سوبستراها، آنزیم ها و کوفاکتورهای خاصی در دسترس باشند، اسیدهای آمینه دیگر را می توان توسط ماهی سنتز کرد. بیشتر مطالعات در مورد نیاز به اسیدهای آمینه در ماهی بر روی اسیدهای آمینه ضروری متمرکز شده است، اما باید روی اسیدهای آمینه غیر ضروری نیز تمرکز شود. این اسیدهای آمینه، اگرچه می توانند در بدن ماهی سنتز شوند، نقش های فیزیولوژیکی مهمی برای سلامت و رفاه ماهی دارند [2،3]. بنابراین، تعریف مرسوم اسیدهای آمینه ضروری/غیر ضروری اخیراً توسط محققان به چالش کشیده شده است.

گلیسین یکی از اسیدهای آمینه غیر ضروری در ماهی مانند سایر حیوانات است، اما عملکردهای فیزیولوژیکی بسیار مهمی دارد [2]. گلیسین در کلاژن سازی شرکت می کند و 33 درصد کلاژن از این اسید آمینه ساخته می شود [4]. علاوه بر این، گلیسین، با همکاری گلوتامات و سیستئین، در سنتز گلوتاتیون، یک مولکول آنتی اکسیدانی قوی و مهم شرکت می کند [5]. بنابراین، گلیسین سیستم آنتی اکسیدانی را تعدیل می کند. این اسید آمینه نقش های مختلفی در عملکرد سیستم ایمنی دارد. ثابت شده است که کاهش غلظت گلیسین سرم خون مقاومت سرم پاتوژن های مختلف انسانی را افزایش می دهد [6]. مطالعه ای بر روی تیلاپیا نیل، Oreochromis niloticus، نشان داده است که مسیرهای متابولیسم گلیسین مهمترین مسیر در پیشگیری از مرگ و میر در ماهیان آلوده به ادواردسیلا تاردا است [7].

مطالعات کمی در مورد اثرات گلیسین رژیم غذایی بر روی ماهی وجود دارد، اما نتایج یکسان نیستند. به عنوان مثال، تیلاپیا نیل افزایش قابل توجهی در عملکرد رشد نشان داده است، زمانی که رژیم غذایی مکمل با 5 گرم / کیلوگرم گلیسین تغذیه شود. گلیسین رژیم غذایی بر سطوح مختلف پلاسما و/یا متابولیت های کبدی، فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدانی، فعالیت های لیزوزیم/میلوپراکسیداز و محتوای مالون دی آلدئید (MDA) تاثیری نداشته است. چالش تجربی با استرپتوکوکوس اینیا نشان داده است که گلیسین نتوانست مقاومت بیماری را بهبود بخشد، و سایر پاسخ‌های آنتی‌اکسیدانی/ایمونولوژیک مشابه قبل از چالش بودند، به جز افزایش سوپراکسید دیسموتاز پلاسما (SOD)، گلوتاتیون ردوکتاز (GR) و میلوپراکسیداز. فعالیت ها [8].

مطالعه‌ای بر روی باس‌های دهان بزرگ، Micropterus salmoides، نشان داد که یک رژیم غذایی گیاهی همراه با 20 گرم به ازای هر کیلوگرم گلیسین برای جلوگیری از کندی رشد و کمبود پرزهای روده در مقایسه با رژیم غذایی مبتنی بر پودر ماهی مفید است. با این حال، هیچ تغییری در فعالیت‌های SOD کبدی و گلوتاتیون پراکسیداز (GPx) و افزایش محتوای MDA کبدی و فعالیت آلانین آمینوترانسفراز پلاسما نشان‌دهنده مشکلات احتمالی کبدی در ماهی است [9]. حسینی و مقدم [10] نشان داده اند که مکمل گلیسین تأثیر معنی داری بر عملکرد رشد گیاه بلوگا، هوسو هوسو ندارد. تعداد گلبول‌های سفید (WBC)، سطح گلوتاتیون (GSH) پلاسما کاهش می‌یابد، فعالیت‌های GPx، لیزوزیم و مکمل در سطوح گلیسین 2.5 و/یا 5 گرم در کیلوگرم افزایش یافته است، که دلالت بر اثرات آنتی‌اکسیدانی و تعدیل‌کننده ایمنی گلیسین دارد. با این حال، افزایش قابل توجهی در محتوای MDA پلاسما در 5 و 10 گرم بر کیلوگرم گلیسین، باور اثرات آنتی اکسیدانی گلیسین بر روی این گونه را سخت می کند.

مطالعه قبلی ما روی ماهی کپور معمولی، Cyprinus carpio، نشان داده است که یک دوره 3-هفته ای تغذیه با 2.5-10 گرم بر کیلوگرم گلیسین در بهبود لیزوزیم پلاسما (5 و 10 گرم بر کیلوگرم گلیسین)، GPx ( فعالیت های 2.5-10 گرم بر کیلوگرم گلیسین)، گلوتاتیون-s-ترانسفراز (GST؛ 10 گرم بر کیلوگرم گلیسین) و محتوای GSH (5 و 10 گرم بر کیلوگرم گلیسین)، اما کاتالاز پلاسما (CAT؛ 5 و 10 گرم) را کاهش می دهد. / کیلوگرم گلیسین) فعالیت می کند و تأثیر قابل توجهی بر MDA پلاسما ندارد [11]. یک 8-تغذیه هفته‌ای با همان رژیم‌های غذایی نشان داده است که گلیسین هیچ تأثیری بر رشد ماهی نداشته است، اگرچه پیشرفت‌های عددی 10.5 و 12.5 درصدی به ترتیب در نرخ رشد ماهی و بازده غذا مشاهده شد. SOD، CAT، GPx و GST پلاسما بدون تغییر باقی ماندند، اما GSH و MDA پلاسما به ترتیب افزایش و کاهش یافت [12]. این مطالعات نشان می دهد که ارزیابی های بیشتری برای بهبود دانش فعلی در مورد اثرات گلیسین رژیم غذایی در ماهی مورد نیاز است.

به عنوان مثال، مطالعات ذکر شده در بالا بر روی تعداد محدودی از پارامترهای ایمنی ذاتی هومورال (لیزوزیم، مکمل، میلوپراکسیداز، فعالیت‌های انفجار تنفسی و WBC) تمرکز کرده‌اند و سایر موارد مانند پارامترهای ایمنی مخاطی پوست را نادیده گرفته‌اند. این موضوع با توجه به چندین نقش ایمونولوژیک گزارش شده گلیسین در پستانداران [13] و نقش خاص آن در ایمنی مخاطی مشاهده شده در خوک ها [14] مهم است. علاوه بر این، اثرات آنتی اکسیدانی گلیسین فقط در خون و کبد ماهی ارزیابی شده است، اما نشان داده شده است که گلبول های قرمز خون (RBC)، چه در پستانداران و چه در ماهی، به طور فعال گلیسین را به سیتوپلاسم خود پمپ می کنند [15،16] برای حمایت از سنتز گلوتاتیون. و ظرفیت آنتی اکسیدانی داخلی را حفظ می کند. گلیسین همچنین با مشارکت در تولید اسید آمینه لوولینیک جزء کلیدی سنتز هم است. مهار واردات گلیسین توسط اریتروئید منجر به اختلال در سنتز هم در پستانداران شد [17].

با توجه به اطلاعات محدود در مورد نقش گلیسین جیره در ماهی (در مقایسه با پستانداران)، مطالعه حاضر به منظور بررسی اثرات گلیسین جیره بر عملکرد رشد، پارامترهای ایمنی مخاطی پوست و هومورال، پارامترهای خونی، ظرفیت آنتی اکسیدانی RBC و تمایل به همولیز در ماهی کپور معمولی

2. مواد و روشها

2.1. رژیم های غذایی

با توجه به مطالعات قبلی [11،12]، ما 5 (5 GL) و 10 (10 GL) گرم بر کیلوگرم گلیسین را برای مکمل انتخاب کردیم، اما با کاهش سطح گلیسین پایه (درون زا) (از 19.8 به 16.1 گرم در کیلوگرم) را کاهش دادیم. مقدار محصول جانبی طیور در جیره برای یافتن اینکه آیا مکمل گلیسین در جیره های گیاهی (محصول جانبی کم طیور) می تواند حداکثر رشد را پشتیبانی کند یا خیر. یک رژیم غذایی کنترل بدون مکمل گلیسین (CTL) نیز گنجانده شد. خوراک (کنجاله ذرت، کنجاله گندم، کنجاله سویا، کنجاله پنبه دانه، محصول جانبی کنسرو ماهی و محصول جانبی طیور) الک شد (200μ) و به نسبت های دلخواه مخلوط شد (جدول 1).

سپس روغن سویا، پیش مخلوط ویتامین/ مواد معدنی، اسیدهای آمینه، سلولز و گلیسین به مخلوط اضافه شد. حدود 400 میلی لیتر به ازای هر کیلوگرم آب به مخلوط اضافه شد و خمیری تهیه شد که با استفاده از چرخ گوشت گندله شد. ترکیب تقریبی جیره (سه نمونه در هر جیره) بر اساس روش‌های استاندارد (روش کجلدال برای پروتئین، استخراج اتر برای لیپید، خشک کردن آون در دمای 70 درجه سانتیگراد برای رطوبت، احتراق کوره برای خاکستر، و هضم اسید/باز برای فیبر) تعیین شد. به کوشش حسینی، مقدم [10]. مشخصات اسید آمینه رژیم غذایی توسط یک سیستم HPLC (Waters Corporation، Milford، MA، USA) تعیین شد. نمونه‌ها با n-هگزان چربی زدایی شدند و توسط HCl هضم شدند، به دنبال آن مشتق‌سازی با فنیزوتیوسیاناز و جداسازی با ستون PICO.TAG و شناسایی در یک آشکارساز جذب دوگانه λ [10].

2.2. پرورش ماهی

دویست بچه ماهی کپور معمولی از یک مزرعه محلی خریداری و در یک مخزن 1 مترمکعبی به مدت 7 روز نگهداری شدند و در طی آن با جیره CTL تغذیه شدند. سپس 9{6}} ماهی سالم (21/21 ± 5/24 گرم) با اندازه یکنواخت انتخاب و به‌طور تصادفی در 9 آکواریوم شیشه‌ای توزیع شدند. آکواریوم ها با 50-L آب لوله کشی دکلره شده با هوادهی مداوم پر شدند. تراکم جوراب بر اساس مطالعه قبلی روی همان گونه ماهی بود [12]. ماهیان به مدت 8 هفته با هر یک از جیره های فوق الذکر، دو بار در روز (2 درصد زیست توده) تغذیه شدند. یک هفته در میان، ماهی های هر آکواریوم به صورت فله ای صید می شدند و در یک مخزن پر از آب در مقیاس دیجیتالی قرار می گرفتند تا زیست توده مخزن و تنظیم مقدار خوراک ثبت شود. آب آکواریوم هر روز 30 درصد تجدید می‌شد و زباله‌ها خارج می‌شد. دمای آب، pH، اکسیژن محلول و آمونیاک کل به ترتیب 23.8 ± 0.85 ◦C، 7.74 ± 0.68، 6.78 ± 0.74 mg/L و 1.53 ± 0.33 mg/L بود. .

پس از 8 هفته پرورش، افزایش وزن (WG)، نرخ رشد ویژه (SGR) و ضریب تبدیل خوراک (FCR) به شرح زیر ثبت شد:

2.3. جمع آوری و پردازش نمونه

در پایان دوره پرورش، سه ماهی از هر آکواریوم صید و در 100 µL/L اوژنول بیهوش شدند. سپس از ورید دمی ماهی با استفاده از سرنگ های هپارینه شده، نمونه خون (1 میلی لیتر به ازای هر ماهی) گرفته شد. مقدار 300 میکرولیتر از نمونه های خون تازه برای معاینات هماتولوژیک استفاده شد. بخش دیگری از 200 میکرولیتر از نمونه های خون تازه برای تست شکنندگی اسمزی RBC استفاده شد. برای ساخت لیزات سلولی، RBC بسته بندی شده نمونه ها در دمای -70 درجه سانتیگراد منجمد شد و با دو حجم بافر فسفات (pH 7.0) اضافه شد. پس از گرداب، سوسپانسیون ها سانتریفیوژ شدند (6000 × گرم؛ 7 دقیقه؛ 4 ◦C) و سوپرناتانت ها تا تجزیه و تحلیل RBC GSH، GR و GPx در دمای -70 درجه سانتیگراد نگهداری شدند. برای به دست آوردن پلاسما، 350 میکرولیتر از نمونه های خون تازه سانتریفیوژ شد (6000× گرم؛ 7 دقیقه؛ 4 درجه سانتیگراد) و نمونه های پلاسما در دمای 70- درجه سانتیگراد تا تجزیه و تحلیل لیزوزیم، مکمل جایگزین (ACH50) و ایمونوگلوبولین کل نگهداری شدند. (Ig).

نمونه های مخاطی پوست از سه ماهی در هر تانک جمع آوری شد. ماهی ها همانطور که در بالا ذکر شد بیهوش شدند و نمونه های مخاطی از سطح پشتی جانبی با مالش دادن کاردک جمع آوری شد. نمونه‌های مخاطی جمع‌آوری‌شده با حجم مساوی از نمک تریس بافر (TBS، 5{4}} میلی‌مولار Tris-HCl، 150 میلی‌مولار NaCl، pH 8.0) مخلوط شدند. پس از گرداب، مخلوط ها سانتریفیوژ شدند (13،000× گرم؛ 15 دقیقه، 4 درجه سانتیگراد) و مواد رویی تا زمان سنجش ایمونولوژیک مخاطی در دمای 70- درجه سانتیگراد نگهداری شدند.

2.4. تحلیل و بررسی

2.4.1. معاینات هماتولوژی

RBC و WBC با استفاده از محفظه Neubauer، پس از رقیق شدن با محلول Dacie شمارش شدند. هماتوکریت (Hct) و هموگلوبین (Hb) به ترتیب با روش سانتریفیوژ و سیانومتهموگلوبین اندازه گیری شد. میانگین حجم جسمی (MCV)، میانگین هموگلوبین جسمی (MCH) و میانگین غلظت هموگلوبین جسمی (MCHC) بر اساس Dacie و Lewis [18] محاسبه شد. با تهیه لام های خونی رنگ آمیزی شده توسط Giemsa، شمارش افتراقی لکوسیت ها انجام شد.

2.4.2. پارامترهای ایمونولوژیک پلاسما

فعالیت لیزوزیم پلاسما بر اساس روش کدورت سنجی، همانطور که توسط الیس [19] توضیح داده شد، تعیین شد. میکروکوکوس لوتئوس به عنوان هدف مورد استفاده قرار گرفت و در بافر فسفات (pH 6.2) معلق شد. به 1 میلی لیتر از این سوسپانسیون، 25 میکرولیتر از نمونه پلاسما اضافه شد و میانگین کاهش چگالی نوری در دقیقه طی 5 دقیقه در 45{7}} نانومتر ثبت شد. هر 001/0 کاهش در چگالی نوری در دقیقه یک واحد فعالیت لیزوزیم در نظر گرفته شد.

فعالیت ACH5{3}} پلاسما بر اساس روش همولیتیک [20]، با استفاده از RBC گوسفند به عنوان هدف در بافر ورونال حاوی منیزیم و ژلاتین (pH 7.0) اندازه‌گیری شد. نمونه‌های پلاسمای رقیق‌شده سریال به سوسپانسیون RBC در بافر اضافه شدند و در دمای اتاق به مدت 60 دقیقه انکوبه شدند. مقدار پلاسما منجر به همولیز 50 درصد برآورد شد و برای محاسبه فعالیت ACH50 در هر میلی لیتر پلاسما استفاده شد.

غلظت کل Ig پلاسما پس از رسوب با پلی اتیلن گلیکول تعیین شد [21]. مقادیر مساوی از پلاسما و محلول پلی اتیلن گلیکول (12 درصد) مخلوط شد و در دمای اتاق تحت همزن قرار گرفت. پس از 2 ساعت، مخلوط سانتریفیوژ شد (6000× گرم؛ 7 دقیقه؛ 4◦C) تا Ig رسوب کند. تفاوت پروتئین نمونه قبل و بعد از سانتریفیوژ برابر با غلظت کل Ig نمونه بود.

2.4.3. آنزیم های آنتی اکسیدان RBC

پارامترهای آنتی اکسیدانی RBC بر اساس یوسفی و حسینی [22] ارزیابی شد. لیزهای سلول های RBC ذوب شدند و محلول ها برای رسوب هر دربی سانتریفیوژ شدند. مواد رویی برای سنجش آنزیمی استفاده شد. کیت های تجاری (Zellbio Co., GmbH, Deutschland, Germany) برای سنجش فعالیت آنزیم ها استفاده شد. غلظت GSH بر اساس واکنش با 5،50 -دیتیوبیس-({4}}نیتروبنزوئیک اسید) در 412 نانومتر اندازه‌گیری شد. اصل سنجش GPx بر اساس افزودن GSH به نمونه ها و تبدیل GSH به گلوتاتیون اکسید شده (GSSG) توسط نمونه GPx بود. GSSG حاصل توسط فعالیت GR به GSH بازیافت می شود که از NADPH استفاده می کند. کاهش غلظت NADPH متناسب با فعالیت GPx است و در طول موج 340 نانومتر قابل اندازه گیری است. از همین پروتکل برای تعیین فعالیت GR استفاده می شود، اما GSSG به جای GSH به نمونه ها اضافه می شود. سطح هموگلوبین محلول اندازه گیری شد و فعالیت آنزیم ها بر اساس آن بیان شد.

2.4.4. تست شکنندگی اسمزی

آزمایش شکنندگی اسمزی RBC طبق گفته گائو، لیو [23] انجام شد. به طور خلاصه، 25 میکرولیتر از RBC تازه بسته بندی شده به 1 میلی لیتر از 0.1، 0.2، 0.3، 0.4، {{ اضافه شد. 11}}.5، 0.6، 0.7، 0.85 درصد محلول کلرید سدیم و به مدت 90 دقیقه در دمای اتاق قرار دهید. سپس سوسپانسیون ها سانتریفیوژ شدند (6000× گرم؛ 7 دقیقه؛ 4◦C) و جذب مایع رویی در طول موج 492 نانومتر اندازه گیری شد. چگالی نوری بر اساس شمارش RBC و MCH اصلاح شد. بالاترین دانسیته نوری همولیز 100 درصد در نظر گرفته شد و نرخ همولیز سایر چگالی های نوری بر اساس آن محاسبه شد.

2.4.5. پارامترهای ایمونولوژیک مخاط پوست

غلظت پروتئین محلول نمونه های مخاطی پوست بر اساس برادفورد [24] تعیین شد. فعالیت موکوس پراکسیداز پوست بر اساس Quade و Roth [25] با استفاده از 3،30،5،{5}}تترا متیل بنزیدین هیدروکلراید و پراکسید هیدروژن به عنوان بستر در 450 نانومتر تعیین شد. فعالیت پروتئاز موکوس پوست با توجه به Zhang، Hu [26]، با استفاده از AZOcasein به عنوان بستر در 350 نانومتر تعیین شد. فعالیت لیزوزیم مخاط پوست همانطور که در بالا توضیح داده شد تعیین شد. به گفته حسینی فر، روستا [27]، فعالیت آلکالین فسفاتاز مخاط پوست (ALP) با استفاده از کیت شرکت پارسامون (تهران، ایران) تعیین شد.

2.5. تحلیل آماری

قبل از تجزیه و تحلیل، میانگین داده ها در هر آکواریوم محاسبه و برای تجزیه و تحلیل آماری (n {0}}) استفاده شد. پس از تایید توزیع نرمال داده ها با استفاده از آزمون شاپیرو ویلک و همگنی واریانس با آزمون لوین، داده ها تحت آنالیز واریانس یک طرفه قرار گرفتند. تفاوت معنی داری بین تیمارها با آزمون توکی مشخص شد. P <0.05 معنی دار در نظر گرفته شد و تمام تجزیه و تحلیل ها در SPSS v.22 انجام شد.

3. نتایج

عملکرد رشد ماهی در جدول 2 ارائه شده است. FCR در تیمارهای 5 GL و 10 GL به طور قابل توجهی کمتر از تیمار CTL بود. وزن نهایی، WG و SGR در تیمار 5 GL به طور قابل توجهی بیشتر از تیمار CTL بود. هیچ مرگ و میر در بین درمان ها وجود نداشت.

پارامترهای آنتی اکسیدانی RBC در جدول 3 نشان داده شده است. محتوای GSH به طور قابل توجهی افزایش یافت، زیرا فعالیت GR به طور قابل توجهی در تیمارهای 5 GL و 10 GL نسبت به تیمار CTL کاهش یافت. تفاوت معنی داری در فعالیت GPx در بین تیمارها وجود نداشت.

نتایج آزمون شکنندگی اسمزی در جدول 4 ارائه شده است. هیچ تفاوت معنی داری در میزان همولیز در بین تیمارها در غلظت NaCl 0.1، 0.2، 0 وجود نداشت. 7 و 0.85 درصد . در غلظت NaCl از 0.3-0.5 درصد، میزان همولیز تیمار 5 GL به طور قابل توجهی کمتر از تیمار CTL بود. نرخ همولیز ماهی های تیمار شده با گلیسین در غلظت NaCl 6/6 درصد به طور قابل توجهی کمتر از تیمار CTL بود.

پارامترهای ایمونولوژیک مخاط پوست ماهی در جدول 6 ارائه شده است. هیچ تفاوت معنی داری در محتوای پروتئین محلول مخاطی، لیزوزیم، پراکسیداز، پروتئاز و فعالیت های ALP بین تیمارهای 5 و 10 GL وجود نداشت. هر دو مقادیر قابل توجهی بالاتری را در مقایسه با درمان CTL نشان دادند.

4. بحث

گلیسین به سنتز پروتئین های ساختاری کمک می کند و تقریباً 9 درصد از پروتئین کل بدن در کپور معمولی را تشکیل می دهد [28]. در مطالعه حاضر، مکمل گلیسین در رژیم غذایی به طور قابل توجهی عملکرد رشد و کارایی تغذیه در ماهی کپور معمولی را بهبود بخشید که مشابه مطالعه قبلی ما روی همان گونه نیست [12]. دلایل دقیق چنین تفاوتی روشن نیست. انتظار می‌رفت که سطح پایین‌تر گلیسین در جیره شاهد این مطالعه (61/1 درصد)، نسبت به رژیم قبلی (98/1 درصد)، تفاوت را ایجاد کند. با این حال، عملکرد رشد ماهی شاهد در دو مطالعه تقریبا مشابه بود.

بنابراین، عوامل دیگری ممکن است به چنین تفاوتی کمک کنند. یک توضیح ممکن است تغییر در ترکیب اسیدهای آمینه رژیم غذایی بین دو مطالعه باشد. لیزین و متیونین، دو آمینو اسید اصلی محدودکننده رشد، در مطالعه حاضر بالاتر از مطالعه قبلی بودند و سطوح زیر بهینه رژیم غذایی این اسیدهای آمینه منجر به احتباس نیتروژن، آمینو اسید و گلیسین می‌شود [29،30] . نتایج حاضر مطابق با مطالعات قبلی بر روی تیلاپیا نیل [8] و باس دهان بزرگ [9] است که مکمل گلیسین رژیمی عملکرد رشد ماهی را بهبود بخشیده است. اگرچه اسیدهای آمینه غیر ضروری را می توان در بدن ماهی سنتز کرد، اما سرعت سنتز آنها ممکن است برای برآوردن نیازهای بیولوژیکی کافی نباشد. از این رو، بهبود عملکرد رشد در تیمارهای گلیسین در مطالعه حاضر می تواند به دلیل در دسترس بودن بالاتر گلیسین برای برآوردن نیازهای رشد و نگهداری باشد.

مطالعات هماتولوژیکی سلامت ماهی و وضعیت بسیج گاز را نشان می دهد. کاهش تعداد RBC و محتوای هموگلوبین مانع از اکسیژن رسانی بافت و پاکسازی دی اکسید کربن می شود [31]. بنابراین، چندین مطالعه نقش دستکاری های تغذیه ای [32-34]، از جمله مکمل اسید آمینه [35-37] را بر روی پارامترهای خونی در گونه های مختلف ماهی ارزیابی کرده اند. اطلاعات کمی در مورد نقش گلیسین در پارامترهای خونی در ماهی وجود دارد. مطالعه ای بر روی گربه ماهی کانالی، Ictalurus punctatus، نشان داده است که RBC به طور فعال گلیسین را به سیتوپلاسم منتقل می کند، که می تواند برای سنتز گلوتاتیون استفاده شود [15]، همانطور که در پستانداران مشاهده شد [17]. به دلیل وجود هموگلوبین، گلبول های قرمز دائماً در معرض خطر اکسیداسیون هستند و گلوتاتیون نقش مهمی در پیشگیری از استرس اکسیداتیو RBC دارد [15].

با توجه به نتایج حاضر، بهبود پارامترهای آنتی اکسیدانی مرتبط با گلوتاتیون (افزایش محتوای GSH و کاهش فعالیت GR) می‌تواند مسئول افزایش تعداد گلبول‌های قرمز و مقاومت به همولیز در ماهی‌های تیمار شده با گلیسین باشد. مشخص شده است که گلبول های قرمز ماهی به شرایط اکسیداتیو بسیار حساس هستند، که تحت آن کاهش قابل توجهی در محتوای GSH (که به دلیل اکسیداسیون بوده است) و افزایش GPx، پراکسیداسیون لیپیدی و همولیز رخ می دهد [38-40]. بدون تغییر در فعالیت GPx در مطالعه حاضر احتمالاً هیچ تفاوتی در شرایط اکسیداتیو در بین تیمارها وجود ندارد. بنابراین، محتوای GSH بالاتر در تیمارهای GL 5 و 10 GL می تواند به دلیل بهبود سنتز گلوتاتیون تحت در دسترس بودن گلیسین باشد. افزایش سنتز GSH می تواند نیاز بیولوژیکی سلول را برآورده کند، بنابراین نیازی به بازیافت بیشتر GSSG نیست، که کاهش فعالیت GR را در تیمارهای 5 GL و 10 GL توضیح می دهد.

لکوسیت ها سلول های ایمنی مهم با عملکردهای متنوع هستند که به میزبان در مبارزه با میکروب های خارجی کمک می کنند [41]. افزایش WBC پس از مکمل های غذایی باعث افزایش مقاومت بیماری در گونه های مختلف ماهی می شود [42،43]. در مورد گلیسین، مکمل های غذایی برای افزایش WBC در بلوگا [10]، مشابه نتایج حاضر، یافت شده است. نوتروفیل ها اولین لکوسیت های مدافع هستند که ماهی ها با حملات پاتوژن مواجه می شوند. آنها پاتوژن ها را با فاگوسیتوز می کشند، که منجر به تشکیل مولکول های واکنشی می شود [44]. مونوسیت ها دیگر سلول های ایمنی با عملکرد فاگوسیتی هستند [45].

به دلیل تولید مولکول های مختلف پرواکسیدانی توسط این سلول ها، آنها برای بقای خود به سیستم آنتی اکسیدانی قوی نیاز دارند. مطالعات روی سلول های انسانی نشان داده است که گلوتاتیون برای زنده ماندن و عملکرد نوتروفیل ها و مونوسیت ها ضروری است [46،47]، اما اطلاعات محدودی در مورد این موضوع در ماهی وجود دارد. مطالعات روی کپور نشان داده است که محتوای گلوتاتیون در نوتروفیل ها در طول فاگوسیتوز یا القای لیپوپلی ساکارید افزایش می یابد [48]. قرار گرفتن مونوسیت های تیلاپیا نیل در معرض یک عامل پرواکسیدان (نانوذره مس) باعث القای آپوپتوز، استرس اکسیداتیو و کاهش محتوای GSH شده است [45].

بر این اساس، حدس زده می‌شود که نوتروفیل‌ها و تعداد/درصد مونوسیت‌های خون بالاتر در ماهی‌های تیمار شده با گلیسین در مطالعه حاضر نتیجه بهبود محتوای GSH سلول باشد. با این حال، گلیسین هیچ اثر قابل توجهی بر جمعیت لنفوسیت خون ندارد و کاهش درصد لنفوسیت در ماهی تیمار شده با گلیسین در نتیجه افزایش درصد سایر انواع لکوسیت بود. در مجموع، این نتایج نشان می دهد که مکمل های غذایی گلیسین قدرت سیستم ایمنی ذاتی را بهبود می بخشد.

لیزوزیم به عنوان یک عامل باکتری کشی عمل می کند که توسط نوتروفیل های خون در گردش ترشح می شود [49]. بنابراین، حدس زده می شود که افزایش لیزوزیم پلاسما در ماهی های تحت درمان با گلیسین به دلیل افزایش جمعیت نوتروفیل خون یا تولید لیزوزیم آنها باشد. به طور مشابه، افزایش فعالیت لیزوزیم پلاسما با افزایش جمعیت نوتروفیل خون، پس از افزودن مواد افزودنی مختلف به جیره غذایی ماهی، همراه بوده است [50،51].

مشابه مطالعه حاضر، مکمل گلیسین رژیمی به طور قابل توجهی فعالیت لیزوزیم پلاسما را در بلوگا [10] و کپور معمولی [11] افزایش داده است. سیستم کمپلمان به عنوان یک عامل کشتن میکروب و اپسونیزاسیون در ماهی عمل می کند که از چندین پروتئین تولید شده در کبد تشکیل شده است [52]. مشخص شده است که مکمل های غذایی گلیسین باعث افزایش فعالیت ACH50 پلاسما در بلوگا می شود [10]. با این حال، یک دوره کوتاه مدت تغذیه با جیره های حاوی گلیسین، هیچ تغییر قابل توجهی در فعالیت ACH50 پلاسما در کپور معمولی ایجاد نکرد [11]. مکانیسم دقیقی که گلیسین از طریق آن فعالیت ACH50 پلاسما را بهبود می‌بخشد، مشخص نیست، اما GSH ممکن است نقش داشته باشد، زیرا مکمل‌های گلوتاتیون رژیمی به طور قابل‌توجهی غلظت پروتئین‌های مکمل را در همولنف خرچنگ دستی، Eriocheir sinensis افزایش داده است، که ممکن است در نتیجه سلامت بالاتر هپاتوپانکراس باشد. و سنتز پروتئین ناشی از در دسترس بودن GSH [53].

بنابراین، حدس زده می شود که گلیسین رژیم غذایی می تواند غلظت GSH را افزایش دهد، که به نوبه خود ممکن است مسئول فعالیت بالاتر ACH50 در مطالعه حاضر باشد. علاوه بر این، پروپردین، یک مولکول غنی از گلیسین که فعالیت مکمل را تنظیم می کند، در بافت های مختلف ماهی مانند کبد، پوست، نوتروفیل و مونوسیت شناسایی شده است [54،55]. این مولکول در ماهی کپور معمولی [56] شناسایی شده است، بنابراین حدس زده می شود که در دسترس بودن گلیسین ممکن است از تولید پروپردین بالاتر و افزایش فعالیت ACH50 در مطالعه حاضر پشتیبانی کند.

ایمنی مخاطی پوست برای جلوگیری از بیماری ها در عمل آبزی پروری بسیار مهم است، زیرا آب به عنوان انتقال دهنده اصلی بیماری زا عمل می کند و ایمنی مخاطی قوی می تواند از ورود عوامل بیماری زا به ماهی های جدید جلوگیری کند [57]. لیزوزیم مخاطی پوست مانند لیزوزیم پلاسما به عنوان یک عامل باکتری کش عمل می کند [49]. پروتئاز موجود در مخاط پوست پاتوژن ها را از بین می برد، یکپارچگی مخاط را کاهش می دهد، ریزش لایه مخاطی را افزایش می دهد و سایر پارامترهای ایمنی را فعال می کند [58]. پراکسیداز مخاطی پوست در تشکیل کمپلکس پراکسیداز – H2O2 – هالید، یک عامل باکتری کش قوی و سیتوتوکسیک شرکت می کند [58]. فعالیت ALP در مخاط پوست می تواند ترکیبات پیش التهابی ایجاد شده توسط میکروب ها را سم زدایی کند [59]. هیچ مطالعه مشابهی برای مقایسه وجود ندارد، اما نتایج حاضر نشان می‌دهد که مکمل‌های غذایی گلیسین می‌تواند ایمنی مخاطی پوست را در ماهی کپور معمولی بهبود بخشد.

5. نتیجه گیری ها

در نتیجه، مکمل‌های گلیسین رژیمی می‌توانند از سنتز GSH پشتیبانی کنند که ظرفیت آنتی‌اکسیدانی و مقاومت همولیز در RBC را بهبود می‌بخشد. علاوه بر این، مکمل گلیسین در رژیم غذایی باعث افزایش جمعیت نوتروفیل ها و مونوسیت های خون می شود که می تواند به دلیل نقش محافظتی GSH در این سلول ها باشد. جالب توجه است که گلیسین می تواند ورود به بدن ماهی را بهبود بخشد. بر اساس این مزایا، مکمل گلیسین 5 گرم در کیلوگرم برای مکمل های خوراکی معمولی کپور توصیه می شود.

مشارکت نویسنده:

مفهوم سازی، ATM، SMH و HVD. روش شناسی، کارشناسی ارشد و منابع انسانی؛ نرم افزار، SHH; تجزیه و تحلیل رسمی، SHH و SMH. تحقیق، MA و SMH. مدیریت داده، دستگاه خودپرداز؛ نوشتن - آماده سازی پیش نویس اصلی، MA و SMH. نوشتن-بررسی و ویرایش، SMH; تجسم، منابع انسانی؛ نظارت، SMH; مدیریت پروژه، ATM، SMH؛ کسب بودجه، HVD همه نویسندگان نسخه منتشر شده نسخه خطی را خوانده و با آن موافقت کرده اند.

منابع مالی:

هیچ بودجه ای برای این مطالعه دریافت نشد.

بیانیه هیئت بررسی نهادی:

پروتکل مطالعه حیوانی توسط هیئت بازبینی نهادی مرکز تحقیقات منابع آبزیان داخلی (ET.CG/2؛ 9 سپتامبر 2021)" برای مطالعات مربوط به حیوانات تایید شد.

بیانیه رضایت آگاهانه:

قابل اجرا نیست.

بیانیه در دسترس بودن داده ها:

داده های این مطالعه به درخواست نویسنده مسئول در دسترس است.

قدردانی ها:

این کار تحقیقاتی تا حدی توسط دانشگاه چیانگ مای پشتیبانی شد.

تضاد علاقه:

نویسندگان هیچ تضاد منافع را اعلام نمی کنند.

منابع

1. مای، ک. ژو، ام. او، جی. Xie, SQ; Kaushik، SJ فصل 4 - پروتئین و اسیدهای آمینه. در تغذیه ماهی، ویرایش چهارم. Hardy، RW، Kaushik، SJ، Eds. مطبوعات آکادمیک: آکسفورد، انگلستان، 2022; ص 181-302.

2. لی، پی. مای، KS; تروشنسکی، جی. Wu, GY تحولات جدید در تغذیه اسیدهای آمینه ماهی: به سوی آبزیان کاربردی و سازگار با محیط زیست. آمینو اسید. 2009، 37، 43-53. [CrossRef] [PubMed]

3. حسینی، س.م. Reverter، M. اثرات ارتقاء سلامت آمینو اسیدها در ماهی. در پیشرفت های بیوتکنولوژیکی در مدیریت سلامت آبزی پروری؛ Gupta، SK، Giri، SS، Eds. Springer Singapore: سنگاپور، 2021; صص 493-533.

4. لی، پی. وو، جی. نقش گلیسین، پرولین، و هیدروکسی پرولین غذایی در سنتز کلاژن و رشد حیوانات. آمینو اسید. 2018، 50، 29-38. [CrossRef] [PubMed]

5. پرز تورس، آی. ماریا زونیگا-مونوز، آ. Guarner-Lans، V. اثرات مفید اسید آمینه گلیسین. مینی. Rev. Med. شیمی. 2017، 17، 15-32. [CrossRef] [PubMed]

6. کو، ت.- س. وو، J.-H. چن، X.-W. چن، ز.-جی. ژنگ، جی. پنگ، بی. گلیسین اگزوژن اکسیداسیون گلوتاتیون را ترویج می کند و حساسیت پاتوژن های باکتریایی را به مرگ سلولی ناشی از سرم باز می گرداند. ردوکس بیول. 2022, 58, 102512. [CrossRef]

7. یانگ، D.-X. یانگ، ام.-جی. یین، ی. کو، T.-S. پنگ، L.-T. چن، ز.-جی. متابولیسم سرین پاسخ های ایمنی را تنظیم می کند تا بقای Oreochromis niloticus را پس از عفونت Edwardsiella tarda افزایش دهد. mSystems 2021، 6، e{8}}. [CrossRef]

8. زی، اس. ژو، دبلیو. تیان، ال. نیو، جی. لیو، ی. اثر N-استیل سیستئین و مکمل گلیسین بر عملکرد رشد، سنتز گلوتاتیون، توانایی آنتی اکسیدانی و ایمنی ماهی تیلاپیا نیل، Oreochromis niloticus. صدف ماهی. ایمونول. 2016، 55، 233-241. [CrossRef]

9. روسی، دبلیو، جونیور. آلن، KM; Habte-Tsion، H.-M.; میسالا، ک.-م. مکمل گلیسین، پری بیوتیک و نوکلئوتید در رژیم غذایی مبتنی بر کنجاله سویا برای باس دهان بزرگ (Micropterus salmoides): اثرات بر عملکرد تولید، ترکیب و حفظ مواد مغذی کل بدن، و هیستوپاتولوژی روده. Aquaculture 2021, 532, 736031. [CrossRef]

10. حسینی، س.م. مقدم، ع.ا. قلیچ پور، م. پاگه، ا. حق پناه، ع. غروی، ب. مکمل‌های گلیسین در رژیم غذایی، پاسخ‌های آنتی‌اکسیدانی و ایمنی را تعدیل می‌کنند. آکواک. Rep. 2022, 23, 101026. [CrossRef]

11. حسینی، س.م. پائولوچی، ام. ارغیده، م. حسین پور دلاور، ف. زووار، ف. حسینی فر، SH اثرات تجویز گلیسین جیره بر پاسخ های بیوشیمیایی به سمیت آمونیاک در ماهی کپور معمولی Cyprinus carpio. آکواک. Res. 2022، 53، 2185-2194. [CrossRef]

12. حسینی، س.م. مجیدیان، ن. میرقائد، ع. حسینی فر، ش. Van Doan، H. مکمل‌های گلیسین در رژیم غذایی استرس ناشی از حمل و نقل را در ماهی کپور معمولی، Cyprinus carpio کاهش می‌دهد. آبزی پروری. 2022, 551, 737959. [CrossRef]

13. لی، پی. یین، ی.-ل. لی، دی. وو کیم، اس. وو، جی. اسیدهای آمینه و عملکرد سیستم ایمنی. برادر جی. نوتر. 2007، 98، 237-252. [CrossRef]

14. جی، ی. فن، X. ژانگ، ی. لی، جی. دای، ز. Wu, Z. Glycine ایمنی مخاطی و ترکیب میکروبی روده را در خوک‌های از شیر گرفته تنظیم می‌کند. آمینو اسید. 2021، 54، 385-398. [CrossRef] [PubMed]

15. Angermeier, SM; شپرد، MD; Tunnicliff، G. Glycine انتقال توسط سلول های قرمز گربه ماهی کانال. می توان. جی. زول. 1996، 74، 688-692. [CrossRef]

16. کیم، KM; کینگزمور، اس.اف. هان، اچ. یانگ فنگ، TL; گودینو، ن. سلدین، MF شبیه سازی ناقل گلیسین انسانی نوع 1: خصوصیات مولکولی و فارماکولوژیکی انواع ایزوفرم جدید و محلی سازی کروموزومی ژن در ژنوم انسان و موش. مول. فارماکول. 1994، 45، 608.

17. زمستان، م. فانک، جی. کورنر، آ. آلبراتی، دی. کریستن، اف. اشمیت، جی. اثرات مهار GlyT1 بر اریتروپوئزیس و هموستاز آهن در موش صحرایی. انقضا هماتول. 2016، 44، 964-974.e4. [CrossRef]

18. دیسی، ج. لوئیس، اس. هماتولوژی عملی. چرچیل و لیوینگستون: لندن، بریتانیا، 1996.

19. الیس، AE سنجش لیزوزیم. در تکنیک های ایمونولوژی ماهی؛ Stolen, JS, Ed. انتشار SOS: Fair Haven، NJ، USA، 1990; صص 101-103.

20. Yano, T. سنجش فعالیت مکمل همولیتیک. در تکنیک های ایمونولوژی ماهی؛ Stolen, JS, Ed. انتشار SOS: Fair Haven, NJ, USA, 1992; صص 131-141.

21. Siwicki، A. اندرسون، دی. سنجش مکانیسم های دفاعی غیر اختصاصی در ماهی: II. فعالیت کشنده بالقوه نوتروفیل ها و ماکروفاژها، فعالیت لیزوزیم در سرم و اندام ها و سطح ایمونوگلوبولین تام در سرم. در روش های تشخیص و پیشگیری از بیماری ماهی؛ Siwicki, A., Anderson, D., Waluga, J., Eds. Wydawnictwo Instytutu Rybactwa Srodladowego: Olsztyn، لهستان، 1993; صص 105-112.

22. یوسفی، م. حسینی، س.م. واتنیکوف، YA; نیکیشوف، AA; Kulikov, EV Thymol به عنوان یک بی حس کننده جدید در ماهی کپور معمولی (Cyprinus carpio): اثربخشی و اثرات فیزیولوژیکی در مقایسه با اوژنول. آبزی پروری 2018، 495، 376-383. [CrossRef]

23. گائو، ی.-ج. لیو، ی.-جی. چن، X.-Q. یانگ، اچ.-جی. لی، X.-F. تیان، L.-X. اثرات سطوح درجه بندی شده هیستیدین بر عملکرد رشد، فعالیت آنزیم های هضم شده، شکنندگی اسمزی گلبول های قرمز و تحمل هیپوکسی ماهی کپور جوان Ctenopharyngodon idella. آبزی پروری 2016، 452، 388-394. [CrossRef]

24. برادفورد، MM روشی سریع و حساس برای اندازه گیری مقادیر میکروگرم پروتئین با استفاده از اصل اتصال پروتئین به رنگ. بیوشیمی مقعدی 1976، 72، 248-254. [CrossRef]

25. Quade، MJ; Roth, JA یک روش سریع و مستقیم برای اندازه گیری گرانول زدایی گرانول های اولیه نوتروفیل گاوی. ایمونول دامپزشکی ایمونوپاتول. 1997، 58، 239-248. [CrossRef]

26. ژانگ، دبلیو. هو، Y.-H. وانگ، اچ.-ال. Sun، L. شناسایی و شناسایی یک پروتئاز مرتبط با حدت از یک سویه بیماریزای سودوموناس فلورسنس. میکروبیول دامپزشکی 2009، 139، 183-188. [CrossRef]

27. حسینی فر، ش. روستا، ز. حاجی مرادلو، ع. وکیلی، ف. تأثیر لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس به عنوان مکمل خوراکی بر پارامترهای ایمنی مخاطی پوست، میکروبیوتای روده، مقاومت به استرس و عملکرد رشد دم شمشیری سیاه (Xiphophorus helleri). ایمونول صدف ماهی. 2015، 42، 533-538. [CrossRef] [PubMed]

28. فو، سی. کوی، ی. آویزان، SSO; Zhu, Z. الگوی اسید آمینه کل بدن ژن هورمون رشد انسانی F4-کپور معمولی قرمز تراریخته (Cyprinus carpio) که با جیره‌های غذایی با سطوح مختلف پروتئین تغذیه می‌شود. آبزی پروری 2000، 189، 287-292. [CrossRef]

29. گان، ال. لیو، YJ; تیان، LX; یو، YR; یانگ، اچ. لیو، FJ اثرات اکسیژن محلول و سطوح لیزین جیره بر عملکرد رشد، ضریب تبدیل خوراک و ترکیب بدن ماهی کپور علف، Ctenopharyngodon idella. آبزی پروری Nutr. 2013، 19، 860–869. [CrossRef]

30. یون، ی. آهنگ، دی. او، ز. می، جی. وانگ، ال. Nie, G. اثرات مکمل متیونین در رژیم غذایی مبتنی بر پروتئین گیاهی بر عملکرد رشد و کیفیت فیله بچه ماهی کپور زرد رودخانه (Cyprinus carpio haematopterus). Aquaculture 2022, 549, 737810. [CrossRef]

31. Fazio، F. تجزیه و تحلیل خون شناسی ماهی به عنوان ابزار مهم آبزی پروری: مروری. آبزی پروری 2019، 500، 237–242. [CrossRef]

32. محسنی، م. حمیدقلی، ع. Bai، SC روی رژیم غذایی ارگانیک و معدنی در ماهیان خاویاری بلوگا (Huso huso): اثرات بر رشد، هماتولوژی، غلظت بافت و ظرفیت اکسیداتیو. Aquaculture 2021, 539, 736672. [CrossRef]

33. محسنی، م. Saltanat، NL; راستروان، من; گلعلی‌پور، ی. تأثیر مکمل‌سازی بتائین در جیره‌های مبتنی بر پروتئین گیاهی بر عملکرد رشد، پارامترهای هماتو-ایمونولوژیک، وضعیت آنتی‌اکسیدانی و فعالیت آنزیم‌های گوارشی بچه ماهی قزل‌آلای خزری (Salmo trutta, Kessler, 1877). آبزی پروری Nutr. 2021، 27، 2132-2141. [CrossRef]

34. آفتابگرد، م. سالارزاده، ع. محسنی، م. بحری شعبانی پور، ق. زوریه زهرا، MEJ کارایی ترکیبی ایزومالتوالیگوساکاریدهای جیره و باسیلوس گونه. بر روی رشد، هماتو-سرولوژیک و شاخص های میکروبیوتای روده ای قزل آلای قهوه ای خزری (Salmo trutta caspius Kessler، 1877). آنتی میکروب پروبیوتیک پروتئین ها 2019، 11، 198-206. [CrossRef]

35. میکلاتو، م. زمیننهان، م. بوسکولو، WR؛ نوگاروتو، وی. ویکاری، م. آرتونی، RF نیاز هیستیدین رژیم غذایی نوجوانان تیلاپیا نیل بر اساس عملکرد رشد، بیان ژن‌های مرتبط با رشد عضلانی و پاسخ‌های خونی. آبزی پروری 2017، 467، 63-70. [CrossRef]

36. ماچادو، م. آزردو، ر. فونتینها، اف. فرناندز بو، اس. Conceição، LEC; Dias, J. متیونین رژیم غذایی وضعیت ایمنی، پاسخ التهابی و مقاومت در برابر بیماری باس دریایی اروپایی (Dicentrarchus labrax) را بهبود می بخشد. جلو. ایمونول. 2018, 9, 2672. [CrossRef]

37. شرف، ی. Khan، MA نیاز Channa punctatus (Bloch) انگشتی برای لیزین رژیم غذایی بر اساس رشد، تبدیل خوراک و کارایی حفظ لیزین، نسبت RNA/DNA، پارامترهای خونی و فعالیت آنتی اکسیدانی سرم. آبزی پروری Nutr. 2021، 27، 140-150. [CrossRef]

38. لی، H.-T. فنگ، ال. جیانگ، دبلیو. لیو، ی. جیانگ، جی. لی، اس.-اچ. پارامترهای استرس اکسیداتیو و پاسخ ضد آپوپتوز به رادیکال های هیدروکسیل در گلبول های قرمز ماهی: اثرات محافظتی گلوتامین، آلانین، سیترولین و پرولین آکوات. سموم 2013، 126، 169-179. [CrossRef] [PubMed]

39. گووزدزی اسکی، ک. روشه، اچ. Pérès, G. مقایسه اثرات یون های فلزات سنگین بر فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدانی در گلبول های قرمز Dicentrarchus labrax انسان و ماهی. Comp. بیوشیمی. فیزیول. قسمت C Comp. فارماکول. 1992، 102، 57-60. [CrossRef] [PubMed]

40. Janssens، BJ; لو گال، آر. ریس، همولیز اریتروسیت‌های تحریک‌شده با JF Peroxide به عنوان مدلی برای مطالعه آسیب اکسیداتیو در ماهی‌های دریایی. J. Fish Biol. 2002، 61، 71-84. [CrossRef]

41. Maisey، K. Imarai، M. تنوع مولکول‌های لکوسیت استخوانی: نقش پیوند جایگزین. ایمونول صدف ماهی. 2011، 31، 663-672. [CrossRef] [PubMed]

42. کخ، JFA; د اولیویرا، CAF; Zanuzzo، FS Dietary -glucan (MacroGard®) پاسخ های ایمنی ذاتی و مقاومت در برابر بیماری را در ماهی تیلاپیا نیل بدون توجه به دوره مصرف بهبود می بخشد. ایمونول صدف ماهی. 2021، 112، 56-63. [CrossRef]

For more information:1950477648nn@gmail.com