لیپوکالین مرتبط با نوتروفیل ژلاتیناز بالا با شدت آسیب کلیه و پیش آگهی ضعیف بیماران مبتلا به کووید مرتبط است-19--بخش اول

تماس: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 ایمیل:audrey.hu@wecistanche.com

کاترین Xu1 و همکاران

مقدمه:از دست دادن عملکرد کلیه یک ویژگی مشترک استکووید-19عفونت، اما کراتینین سرم (SCr) یک نشانگر حساس یا اختصاصی نیستکلیهصدمه. ما آزمایش کردیم که آیا بیومارکرهای مولکولی آسیب لوله‌ای اندازه‌گیری شده در بستری در بیمارستان با حاد مرتبط هستند یا خیرکلیهصدمه(AKI) در کسانی که باکووید-19عفونت

مواد و روش ها:این یک مطالعه مشاهده‌ای کوهورت آینده‌نگر متشکل از 444 بیمار متوالی مبتلا به SARS-CoV-2 است که در بخش اورژانس دانشگاه کلمبیا (ED) در اوج همه‌گیری نیویورک (2 مارس02{{6) ثبت نام کردند. }}–آوریل 2020). ادرار و خون به طور همزمان در هنگام بستری در بیمارستان جمع آوری شد (زمان میانه: روز 0، محدوده بین چارکی: 0-2 روز)، و نشانگرهای زیستی ادرار با روش ایمونوسوربنت متصل به آنزیم (ELISA) و یک نشانگر جدید تجزیه و تحلیل شدند. بیوپسی کلیه برای نشانگرهای زیستی و نمرات آسیب لوله‌ای حاد هیستوپاتولوژیک (ATI) بررسی شد.

نتایج: Admission urinary neutrophil gelatinase-associated lipocalin (uNGAL) level was associated with AKI diagnosis (267 +- 301 vs. 96+-139 ng/ml, P < 0.0001) and staging; uNGAL levels >150 ng/ml دارای 80 درصد ویژگی و 75 درصد حساسیت برای تشخیص مراحل 2 تا 3 AKI بود. سطح پذیرش uNGAL از نظر کمی با طولانی‌مدت AKI، دیالیز، شوک، بستری طولانی‌مدت در بیمارستان، و مرگ در بیمارستان، حتی در زمان بستری شدن در سطح SCr مرتبط است. بالا نبود خطر دیالیز تقریباً 4- برابر در هر SD از unNGAL بدون SCr پایه، بیماری‌های همراه و پروتئینوری افزایش یافت (نسبت شانس [OR] [95 درصد فاصله اطمینان (CI): 3.59 [1.83-7.45]، P <0.001). در="" کلیه="" کسانی="" که="">کووید-19بیان mRNA NGAL به موازات آسیب هیستوپاتولوژیک شدید (ATI) گسترش می یابد. برعکس، سطوح پایین uNGAL در پذیرش، مراحل 2 تا 3 AKI (مقدار پیش‌بینی منفی: 0.95، 95 درصد CI: 0.92–0.97) و نیاز را رد کرد. برای دیالیز (ارزش اخباری منفی:0.98، ​​95 درصد فاصله اطمینان (CI): 0.96–0.99). اگرچه پروتئینوری و ادراری (u)KIM{16}} در آسیب لوله‌ای دخیل بودند، اما هیچ کدام تشخیصی برای مراحل AKI نبود.

نتیجه:در بیماران مبتلا بهکووید-19سطح uNGAL از نظر کمی با آسیب هیستوپاتولوژیک (ATI)، از دست دادن عملکرد کلیه (AKI) و شدت پیامدهای بیمار مرتبط بود.

CISTANCHE ANTI-COVID-19 و محافظت از عملکرد کلیه

مقدمه

از دست دادن حاد عملکرد کلیه، که با افزایش SCr اندازه گیری می شود، در شرایط عفونت حاد SARS CoV{0}} رایج است. سطح SCr بالا در یک سوم بیماران بستری در بیمارستان وجود دارد.کووید-19.5-11 با این حال، اندازه گیری SCr نمی تواند بار کامل را منعکس کندکووید-19 کلیهصدمه. به عنوان مثال، SCr تنها پس از گذشت زمان کافی برای تجمع SCr تا آستانه تشخیصی، می تواند اختلال عملکرد کلیه را در گذشته تشخیص دهد. علاوه بر این، تغییرات بالینی قابل توجهی در SCr ممکن است در آسیب کلیوی orfocal ساب کل در نتیجه تغییرات جبرانی در نفرون های آسیب ندیده رخ ندهد که می تواند افزایش سطح SCr را کاهش دهد. حتی زمانی که افزایش سطح SCr آشکار است، شواهدی از آسیب لوله ای ممکن است وجود نداشته باشد، به عنوان مثال در حضور کاهش حجم، 12،13 یک تظاهرات رایج در بیماران مبتلا بهکووید-19اسهال مرتبط. 10،14 افزایش سطح SCr ممکن است با بروز رابدومیولیز درکووید-19،که باعث افزایش تولید کراتینین می شود.15،16 بارکلیهصدمهدر طول موج‌های کووید-19 منابع بیمارستانی، از جمله پزشکی اورژانس، مراقبت‌های ویژه، و نفرولوژی را تحت فشار قرار داده است و نیاز فوری به محدود کردن تاخیر در شناسایی افراد در معرض خطر ایجاد کرده است.کلیهصدمهاز دست دادن عملکرد کلیه و درمان جایگزینی کلیه. در نتیجه، تصمیمات تریاژ برای بیماران و تخصیص منابع از استفاده از یک نشانگر غیرتهاجمی سریع، حساس و خاص سود می برد.کلیهصدمهو پیامدهای همراه آن رایج درکووید-19عفونت

تحقیقات قبلی در مدل‌های انسان و موش نشان داد که 2 نشانگر مولکولی آسیب لوله‌ای، uNGAL و uKIM{1}}، از بخش‌های مختلف به دست آمده‌اند.کلیهو امکان تشخیص حساس و تمایز بی‌درنگ بین اشکال ذاتی آسیب لوله‌ای حساس به حجم و غیرحساس به حجم را فراهم می‌کند. آیا ممکن است در بیمارانی که دارای ارزش هستندکووید-19. نیاز به آزمایشات تشخیصی جدید به ویژه مشهود است زیرا بسیاری از بیماران مبتلا بهکووید-19برای اولین بار به بیمارستان مراجعه می کنند و سوابق قبلی SCr را ندارند.

در اینجا، ما عملکرد uNGAL anduKIM{0}} را در گروه بزرگی از بیماران مبتلا به حاد مطالعه می‌کنیم.کووید-19ارائه به ED دانشگاه کلمبیا در اوج همه گیری در شهر نیویورک (مارس 2020 تا آوریل 2020). ما ارتباط uNGAL anduKIM-1 را با تشخیص بعدی، مدت و شدت AKI که توسط حاد تعریف شده است، آزمایش کردیم.کلیهجراحتمعیارهای شبکه (AKIN) و با مرگ در بیمارستان، دیالیز، شوک، نارسایی تنفسی، و طول مدت بستری در بیمارستان. ما از هر دو روش استاندارد ELISA و یک میله جدید استفاده کردیم که می تواند uNGAL را در کنار تخت اندازه گیری کند. در نهایت، ما بررسی کردیم که آیا NGAL و KIM{1}}RNA با معیارهای هیستوپاتولوژیک ATI در ارتباط هستند یا خیرکلیهیافته های بیوپسی از بیماران مبتلا بهکووید-19.

مواد و روش ها

سوژه های انسانی

کلمبیاکووید-19بیوبانک به صورت متوالی جذب شدکووید-19 موارد (نتیجه مثبت از آزمایش واکنش زنجیره ای پلیمراز SARS-CoV{1}} نازوفارنکس)، صرف نظر از سن، جنس، یا نژاد/قومیت که در مرکز پزشکی دانشگاه کلمبیا ایروینگ تحت مراقبت قرار گرفته‌اند. Biobank نمونه‌های خون و ادرار باقی‌مانده را پس از آزمایش بالینی از هر بیمار ذخیره می‌کندکووید-19شامل نمونه اولیه ادرار و سرم به دست آمده در بستری شدن در بیمارستان که برای اندازه گیری نشانگرهای زیستی استفاده شد. برای تجزیه و تحلیل خود، ما 444 بیمار متوالی را شناسایی کردیم که بین 24 مارس 2020 و 27 آوریل 2020 بستری شدند.کووید-19این شامل 371 بیمار بود که نه تنها یک نمونه ادرار از ارائه، بلکه اطلاعات مربوط به SCr پایه و اندازه گیری کامل SCr در بیمارستان مورد نیاز برای تعیین مرحله و مدت AKI را داشتند (شکل 1). علاوه بر این، 4 بیمار مبتلا به بیماری غدد استاگرنال از مطالعه خارج شدند.کلیهبیوپسی ها توسط آزمایشگاه آسیب شناسی کلیه مرکز پزشکی ایروینگ دانشگاه کلمبیا، شامل 13 نمونه برداری از کلیه از موارد کووید-19 و 4 مورد غیر-کووید به دست آمد.کووید-19نمونه‌ها با هیبریداسیون درجا برای NGAL و KIM{0}} RNA تجزیه و تحلیل شدند. گروه COVID ( پلاس ) با گروه COVID(-) که به روشی یکسان در مرکز پزشکی ایروینگ دانشگاه کلمبیا ED بین ژوئن 2017 و ژانویه 2019.20 انتخاب شده بود مقایسه شد. مشابه گروه کووید (بعلاوه)، 426 بیمار کووید (-) متوالی بدون در نظر گرفتن سن، جنس، یا نژاد/قومیت در ارائه ثبت نام شدند. این شامل 318 بیمار با اندازه گیری کامل SCr در بیمارستان مورد نیاز برای تعیین مرحله و مدت AKI بود. نمونه ادرار ظرف 24 ساعت پس از ورود به ED جمع آوری شد. بیماران مبتلا به بیماری کلیوی در مرحله نهایی از مطالعه خارج شدند.

شکل 1. جمع‌آوری نمونه ادرار: نمونه‌های ادرار باقی‌مانده از 444 بیمار متوالی مبتلا به کووید-19 توسط بیوبانک ادرار کووید{3}} دانشگاه کلمبیا بین 24 مارس 2020 تا 27 آوریل 2020 جمع‌آوری شد. در کل 4 بیمار با مرحله پایانیکلیهمرضبیماران تحت دیالیز از گروه نهایی حذف شدند (N ¼ 440). بیماران با سوابق کامل از اندازه گیری SCr با معیارهای AKIN (n ¼ 371) مرحله بندی شدند. در مجموع 69 بیمار کافی نبودندکلیهعملکردداده ها با برچسب "ناشناخته" بودند. AKIN، حادکلیهجراحتشبکه؛ SCr، کراتینین سرم.

تعریف پیامدهای اولیه پیامدهای اولیه شامل AKI مبتنی بر SCr، مرحله AKIN، و مدت زمان افزایش سطح SCr به طور مداوم در هر دو گروه کووید (+) و کووید (-) بود. در هر دو مورد، سطح پایه SCr با استفاده از یک الگوریتم استاندارد شده، همانطور که قبلا توسط استیونز و همکاران، 20 به ترتیب زیر شرح داده شد، تعریف شد:

میانه SCr از 365 تا 31 روز قبل از جمع آوری ادرار. اگر در دسترس نیست، پس:

حداقل SCr از 30 روز قبل از جمع آوری ادرار تا روز جمع آوری. اگر در دسترس نیست، پس:

حداقل SCr از جمع آوری ادرار تا 7 روز در بیمارستان

اگر هیچ یک از معیارهای ذکر شده در بالا رعایت نمی شد، بیماران به عنوان "ناشناخته" طبقه بندی شدند. مراحل AKIN23 به شرح زیر طبقه بندی شدند:

AKIN مرحله 1: $0.3 mg/dl افزایش SCr در عرض یک 48-ساعت پنجره یا 1.5- تا 2-برابر افزایش SCr در مقایسه با پایه.

AKIN stage 2: >2- تا 3-برابر افزایش SCr در مقایسه با خط پایه.

AKIN stage 3: $0.5 mg/dl increase in SCr within a 48- hour window when SCr $4.0 mg/dl OR >3-برابر افزایش SCr در مقایسه با پایه.

حداکثر سطح SCr اندازه گیری شده در 48 ساعت پس از جمع آوری ادرار برای تشخیص مرحله AKIN استفاده شد. موارد غیرمنتخب، روز 1 نمره AKIN نسبت داده شد که نمرات AKIN قبلی و بعدی یکسان بودند.

طبقه بندی بیشتر بر اساس مدت زمان ارتفاع SCr بالاتر از خط پایه بود:

بدون AKI (AKIN 0) - معیارهای AKIN را در عرض 2 روز پس از ارائه برآورده نمی کند (باید مقادیر SCr برای هر دو روز داشته باشد).

AKI گذرا—معیارهای AKIN را در روز 0 یا 1 ارائه برآورده کرد، اما در کمتر از آستانه تشخیص AKIN در عرض 2 روز پس از اولین تشخیص عادی شد (مدت کل AKI<72>

Sustained AKI (sAKI)—met AKIN criteria within 2 days of presentation but normalized below the AKIN detection thresholds only after 2 days from the first detection (total AKI duration >72 ساعت).

ناشناخته—فقدان SCr خط پایه، یا اندازه‌گیری‌های SCr ناکافی برای تعیین سینتیک SCr، یا اندازه‌گیری‌های ناپدید در روز 0 یا 1 که به دلیل نمرات AKIN متناقض نمی‌توان آنها را نسبت داد (شکل 1).

طبقه بندی بیشتر سطح SCr بالا بر اساس مدت زمان ارتفاع SCr بالاتر از خط پایه بود، از جمله AKI گذرا که به سرعت سطح SCr را عادی می کند.<72 hours)="" and="" sustained="" (saki)="" delayed="" normalization="" of="" scr="" level="" (="">72 ساعت).

برون ده ادرار به دلیل استفاده متغیر از کاتترهای فولی و ضبط کامل برون ده ادرار در ED برای تعریف AKI استفاده نشد.

تعریف پیامدهای ثانویه

پیامدهای ثانویه شامل دیالیز، شوک، نارسایی تنفسی، مدت بستری در بیمارستان و مرگ در بیمارستان بود. شوک با نیاز به وازوپرسورها و نارسایی تنفسی با نیاز به تهویه فشار مثبت تهاجمی یا غیرتهاجمی تعریف شد. مرحله بندی مزمنکلیه مرضبا استفاده از مزمن تعیین شدکلیه مرضهمکاری اپیدمیولوژی فرمول میزان فیلتراسیون گلومرولی و کراتینین پایه را همانطور که قبلا توضیح داده شد تخمین زد.

تجزیه و تحلیل آزمایشگاهی

تمام اندازه‌گیری‌های ادراری به داده‌های بالینی کور شد. NGAL و uKIM-1 با الایزا اندازه‌گیری شدند (KIM{1}}:Enzo، ADI-900-226-0001؛ NGAL: BioPorto، KIT036). پروتئینوری با Chemstrip شناسایی شد. 10 SG (RocheDiagnostics). ادرار (12،000 دور در دقیقه؛ 10 دقیقه) سانتریفیوژ شد و بر روی میله‌های NGAL gRAD (Bio Porto) اعمال شد، و توسعه رنگ با غلظت NGAL (ng/ml) با مقیاس رنگی توسط 2 خواننده مستقل مقایسه شد. گلوله های سلولی ادراری برای LRP2 و UMOD توسط ایمونوبلات با SDS-PAGE (Bio-Rad Laboratories)، خرگوش anti-LRP2 (1:1000)، Abcam، ab76969)، ضد UMOD گوسفند (1:2000، MeridianLife) آنالیز شدند. Science، K90071C)، و آنتی بادی های ثانویه پلی کلونال کونژوگه به ​​HRP (1:10000، JacksonImmunoResearch).

شناسایی بافت شناسی ATI

ویژگی‌های بافت‌شناسی ATI شامل از دست دادن برس‌بوردر، ساده‌سازی اپیتلیال، واکوئل‌سازی داخل سیتوپلاسمی، نکروز آشکار، آپوپتوز و ریزش سلولی بود. برای اندازه گیری میزان ATI از مقیاس نیمه کمی استفاده شد که به شرح زیر بود:<5% of="" tubules="" involved),="" mild=""><25%), moderate="" (25%–50%),="" and="" severe="" (="">50 درصد ).

تجزیه و تحلیل پاتولوژیک

هیبریداسیون درجا بر روی انسان تثبیت شده با فرمالین و پارافینکلیه هااز کیت معرف chromogenicRNAscope 2.5 HD Duplex Reagent Kit (Advanced CellDiagnostics, 322430) استفاده کرد. کاوشگرها شامل NGAL: Hs-LCN2(559441) و Hs-LCN2-C2 (559441-C2 در 1:600); KIM{13}}:Hs-HAVCR1-O1 (538081 و 538081-C2 در 1:100); andaquaporin 2: Hs-AQP2 (434861) و Hs-LRP2 (532391).

تجزیه و تحلیل ایسکمی-پرفیوژن مجدد کلیه تاییدی

موش‌های نر و ماده وحشی C57Bl/6 با سن 8 تا 10 هفته (آزمایشگاه‌های جکسون) با ایزوفلوران بیهوش شدند و روی میز گرم‌کننده (دمای مقعدی: 37 درجه) قرار گرفتند. گیره های میکروواسکولار (Fine Science Tools) به مدت 10، 20، 30 یا 40 دقیقه بر روی ساقه کلیه چپ اعمال شد. اینکلیه هادر 24 ساعت برداشت شدند. هیبریداسیون درجا روی فرمالین ثابت، پارافین جاسازی شدهکلیه هااز پروب NGAL استفاده کرد: Mm-Lcn2-C2(313971-C2) و پروب KIM-1: Mm-Havcr1(472551).

تحلیل آماری

نرمال بودن متغیرهای پیوسته با استفاده از آزمون Shapiro-Wilk مورد بررسی قرار گرفت. متغیرهای پیوسته توزیع شده نرمال با استفاده از آزمون t نمونه {{{0}} مقایسه شدند و به عنوان میانگین SD خلاصه شدند. متغیرهای پیوسته غیرعادی توزیع شده به عنوان میانه و دامنه خلاصه شده و با استفاده از آزمون ناپارامتری Mann-Whitney U مقایسه شدند. برای بهبود تفسیرپذیری تخمین‌های اثر از مدل‌های رگرسیون چند متغیره، همه پیش‌بینی‌کننده‌های غیرعادی توزیع شده (از جمله سطوح uNGAL anduKIM{4}}) به صورت لاگ تبدیل شدند و قبل از آزمایش آماری نرمال شدند. اندازه اثر برای نشانگرهای زیستی به ازای واحد SD پیش‌بینی‌کننده‌های عادی بیان شد. متغیرهای طبقه بندی با استفاده از آزمون دقیق c2 یا فیشر مقایسه شدند. برای آزمایش نتایج باینری، از رگرسیون لجستیک استفاده کردیم. نتایج ترتیبی، مانند مرحله AKIN، با استفاده از رگرسیون لجستیک ترتیبی آزمایش شدند. پیش‌بینی‌کننده‌های ترتیبی، مانند رده ادرار یا درجه پروتئینوری، با فرض اثرات خطی با استفاده از یک آزمایش شیب در چارچوب یک مدل خطی تعمیم‌یافته متناسب با نتیجه مورد نظر (به‌عنوان مثال، لجستیک یا لجستیک ترتیبی برای نتایج باینری یا ترتیبی، به ترتیب) آزمایش شدند. ما از مدل خطرات متناسب کاکس برای تحلیل‌های زمان تا رویداد برای پیامدهای مرگ استفاده کردیم. ما از مدل رگرسیون ریسک رقابتی برای تجزیه و تحلیل طول مدت اقامت در بیمارستان، با مرگ به عنوان یک ریسک رقیب استفاده کردیم. ارتباط بیومارکرهای ادراری با پیامدهای بالینی برای متغیرهای کمکی زیر تنظیم شد: سن، جنس، نژاد، قومیت (مدل با حداقل تنظیم)، SCr پایه، و چاقی از قبل موجود، دیابت، فشار خون بالا، پیوند (هر عضو)، سرطان، بیماری قلبی عروقی (بیماری عروق کرونر، نارسایی قلبی، انفارکتوس مغزی)، بیماری ریوی (آسم، بیماری انسدادی مزمن ریه، بیماری بینابینی ریوی، فشار خون ریوی اولیه، فیبروز ریوی ایدیوپاتیک) (مدل 1 کاملاً تنظیم شده)، و پروتئینوری (مدل 2 کاملاً تنظیم شده). در تجزیه و تحلیل پیامدهای اولیه، ما 2-P < 0.{38}}5="" را="" از="" نظر="" آماری="" معنادار="" در="" نظر="" گرفتیم.="" در="" تجزیه="" و="" تحلیل="" پیامدهای="" ثانویه،="" ما="" p=""><0.{53}}1 را="" از="" نظر="" آماری="" معنادار="" در="" نظر="" گرفتیم="" (بونفرونی="" برای="" 5="" پیامد="" مستقل="" آزمایش="" شده="" تصحیح="" شد).="" ما="" علاوه="" بر="" این="" بیماران="" را="" با="" ungal="" (150="" دلار="" در="" میلی="" لیتر)="" و="" aki="" مبتنی="" بر="" scr="" به="" 4="" گروه="" زیر="" تقسیم="" کردیم:="" ngal-ak-i،="" ngal="" به="" علاوه="" aki،="" ngal-aki="" پلاس،="" و="" ngal="" به="" علاوه="" akiþ.="" ما="" از="" آزمون="" c2="" برای="" مقایسه="" دوتایی="" نسبت‌ها="" با="" یک="" نتیجه="" بالینی="" بین="" گروه‌ها="" و="" آزمون="" کوکران="" آرمیتاژ="" برای="" روند="" نسبت‌های="" بین="" کم="" خطر="" (ngal-aki-)،="" خطر="" متوسط="" ​​(ngal="" به="" علاوه="" aki-="" یا="" ngal-aki="" پلاس)="" استفاده="" کردیم.="" ،="" و="" گروه="" های="" پرخطر="" (ngal="" به="" علاوه="" aki="" plus).="" علاوه="" بر="" این،="" هر="" گروه="" به‌عنوان="" پیش‌بینی‌کننده="" قطعی="" نتیجه="" با="" استفاده="" از="" رگرسیون="" لجستیک="" با="" گروه="" کم="" خطر="" (ngal-ak-)="" به="" عنوان="" مرجع="" مورد="" آزمایش="" قرار="" گرفت.="" همه="" تجزیه="" و="" تحلیل‌های="" آماری="" با="" استفاده="" از="" r="" (cranversion="" 4.0.4)،="" از="" جمله="" بسته‌های="" الحاقی="" r="" انجام="" شد.="" mass="" (نسخه="" 7.{42}}.1)،="" نسبت="" شانس="" (نسخه="" 2.0.1)،="" بقا="" (نسخه="" 3.2-7)،="" cmprsk="" (نسخه="" 2.2-10)،="" و="" proc(="" نسخه="" 1.17.="" 0.1).="" مطالعه="" ما="" بر="" اساس="" دستورالعمل‌های="" تقویت="" گزارش‌دهی="" مطالعات="" مشاهده‌ای="" در="" اپیدمیولوژی="" برای="" مطالعات="" کوهورت="" گزارش="">

نظارت بر مطالعات

بیوبانک دانشگاه کلمبیاکووید-19مطالعات توسط هیئت بررسی نهادی مرکز پزشکی دانشگاه کلمبیا (AAAS7370 andAAAS7948) تایید شد. زیرمجموعه‌ای از بیماران تحت معافیت هیئت بازبینی سازمانی بحران سلامت عمومی به‌طور خاص برای این افراد قرار گرفتندکووید-19مطالعات در صورتی که بیماران مرده بودند، قادر به رضایت نبودند، یا برای از دست دادن تماس بودند. موش ها طبق کمیته مراقبت و استفاده از حیوانات سازمانی (AC-AAAY7464) استفاده شدند و از راهنمای مؤسسه ملی بهداشت برای مراقبت و استفاده از حیوانات آزمایشگاهی تبعیت کردند.

برای دریافت قسمت دوم این مقاله اینجا را کلیک کنید.

از: 'افزایش لیپوکالین مرتبط با نوتروفیل ژلاتیناز با شدت آسیب کلیه و پیش آگهی ضعیف بیماران مبتلا به کووید مرتبط است-19'--توسطکاترین Xu1 و همکاران

---Kidney International Reports (2021) 6, 2979–2992 CLINICAL RESEARCH