پاسخ‌دهی عملکردی سلول‌های T حافظه از بیماران کووید-19

برای اطلاعات بیشتر:ali.ma@wecistanche.com

Ece Tavukcuoglua,, Utku Horzum1 a,, Ahmet Cagkan Inkaya1, Serhat Unal, bb Gunes Esendaglia, *

یک گروه انکولوژی پایه، موسسه سرطان دانشگاه Hacettepe، آنکارا، ترکیه

b گروه بیماری های عفونی، دانشکده پزشکی، دانشگاه Hacettepe، آنکارا، ترکیه

کلید واژه ها: SARS-CoV-2 مرکزیحافظهسلول های T، افکتورحافظهسلول های T، گلیکوپروتئین Spike S1 سلول های دندریتیک کمک کننده سلول های T لنفوسیت های T سیتوتوکسیک

چکیده: حضورحافظهسلول‌های T در بیماران COVID{0}} تایید شده است، با این حال قدرت عملکردیحافظهپاسخ ها برای حفاظت حیاتی است. در این مطالعه ساده، اثرگذار، حافظه موثر و مرکزیحافظهسلول‌های CD4 پلاس و CD8 پلاس T به‌دست‌آمده از بازماندگان کووید{2}} مجدداً در معرض DCهای مشتق از مونوسیت اتولوگ قرار گرفتند که با گلیکوپروتئین S1 سنبله SARS-CoV{6} بارگذاری شده بودند. ظرفیت تکثیر، CD25، 4-1BB، و PD{10}}

بیان و ترشح IFN-، IL-6، گرانزیم، گرانولیزین و FasL در CD4 پلاس و CD8 پلاس افزایش یافت.حافظهو مرکزیحافظهسلول های T. اگرچه در سطوح ناهمگن قرار دارند، اماحافظهسلول های T از افراد دارای سابقه COVID{0}} دارای ظرفیت های عملکردی برای تقویت ایمنی ضد ویروسی در برابر SARS-CoV-2 هستند.

کلیک کنید تاCistanche deserticola ma برای بهبود حافظه

1. مقدمه

علی‌رغم داده‌های در حال ظهور در مورد بیماری کروناویروس 2019 (COVID-19)، پاسخ ایمنی به سندرم حاد تنفسی ویروس کرونا 2 (SARS-CoV-2) هنوز بهتر تعریف شده است. قدرت و طول مدت پاسخ های هومورال و سلولی در برابر SARS-CoV{6}} با آنتی بادی های خنثی کننده وحافظهسلول های T [1،2]. به خصوص، گلیکوپروتئین-S1 سنبله دارای تسلط ایمنی قابل توجهی است زیرا آنتی بادی های خنثی کننده اتصال آن به آنزیم مبدل آنژیوتانسین 2 (ACE2) را مسدود می کنند و مانع ورود ویروس می شوند [3]. علاوه بر این، تقریباً 50 درصد از بیماران پاسخ‌های S{9} اختصاصی سلول T را نشان دادند [4،5].

با این وجود، ناهمگونی مشاهده شده در بین موارد کووید-19 یک اثر مخدوش کننده دارد. در حالی که اکثر بیماران ایمنی ضد ویروسی ایجاد می کنند، حتی افراد در حال نقاهت ممکن است از عفونت مجدد محافظت نشوند که به طور بالقوه به دلیل اندازه و/یا پایداری ناکافی سلول T و تولید آنتی بادی است [6-8]. جالب اینجاست که در عفونت‌های شدید SARS-CoV{6}، تعامل بین سلول‌های CD4 به علاوه سلول‌های کمکی T (Th) و سلول‌های B در مرکز ژرمینال ضعیف می‌شود، که به طور بالقوه باعث کاهش طول عمر پاسخ‌های آنتی‌بادی می‌شود [9]. همراه با فعالیت‌های Th، استحکام سلول‌های T سیتوتوکسیک CD8 به‌علاوه برای یک ایمنی موفق ضد ویروسی بسیار مهم است [10]. پیش از این، وجود CD4 پلاس یا CD8 پلاسحافظهسلول‌های T در COVID{0}} گزارش شده‌اند، با این وجود، ظرفیت‌های عملکردی این سلول‌ها باید به‌طور کامل بررسی شود [11-13]. در این مطالعه پاسخ‌گویی عملکردی ساده‌لوح، مؤثر، مرکزیحافظهو سلول‌های CD4 پلاس یا CD8 پلاس T که از بیماران دارای سابقه COVID، در برابر سلول‌های دندریتیک مشتق از مونوسیت (DCs) حاوی آنتی‌ژن SARS-CoV{5}} S1 به‌دست آمده بودند، تأیید شد.

2. مواد و روش ها

2.1. بیماران و جمع آوری نمونه

در دو نقطه زمانی مختلف، نمونه‌های خون محیطی تازه از بیماران بهبود یافته از کووید-19 جمع‌آوری شد (جدول 1) و سلول‌های تک هسته‌ای خون محیطی با گرادیان دانسیته فیکول 1.077 گرم در میلی‌لیتر (سیگما آلدریچ) جدا شدند. تمامی پروتکل ها توسط کمیته های اخلاقی محلی و وزارت بهداشت جمهوری ترکیه تایید شد. رضایت آگاهانه از بیماران اخذ شد. بیماران با تست RT-PCR مثبت و/یا مثبت بودن سرمی در مطالعه وارد شدند. علائم بالینی به عنوان خفیف (بیماران غیر بستری)، متوسط ​​(بیمارانی که ذات الریه متوسط ​​داشتند) و شدید (بیمارانی که پنومونی شدید داشتند و بیش از 5 روز در بیمارستان بستری بودند) طبقه بندی شدند. نمونه خون از اهداکنندگان سالم [n=10 (6 زن، 4 مرد)، میانه سن 33 سال (حداقل 28 تا حداکثر 55)] بدون سابقه SARS-CoV-2 و مثبت بودن سرمی به عنوان شاهد استفاده شد.

2.2. ایجاد هم‌کشت سلول‌های DC و T مشتق از مونوسیت

DCها از مونوسیت ها (CD14 MACS، Miltenyi) طبق یک پروتکل منتشر شده قبلی [14] تولید شدند. بارگیری آنتی ژن با پروتئین نوترکیب S1 (S1؛ 10 میکروگرم در میلی لیتر، Abcam) یا آنتی ژن HIV Gag (10 میکروگرم در میلی لیتر، مرکز تحقیقات مرمره TUBITAK) [15] یا سم کزاز (TT؛ 10 میکروگرم در میلی لیتر، ترک ایلاک) ) همزمان با بلوغ DCهای مشتق از مونوسیت با LPS (1 میکروگرم در میلی لیتر، سیگما آلدریچ) آغاز شد. DCهای مشتق از مونوسیت بالغ تولید شده در غیاب a

آنتی ژن اختصاصی به عنوان شاهد استفاده شد. در پایان انکوباسیون یک روزه 7-، DCهای مشتق از مونوسیت به عنوان یک جمعیت CD11bhiCD14loCD1a به علاوه CD83 پلاس مشخص شدند.

از همان بیمار کووید-19، T اتولوگ ساده (TN)، افکتور T پایانی تمایز یافته (TEMRA)، مرکزیحافظهT (TCM) و افکتورحافظهسلول های T (TEM) (بیشتر یا مساوی 96 درصد) توسط FACS (FACSria II؛ Becton Dickinson) به عنوان لنفوسیت های CD3-دست نخورده، CD19- و CD56- بر اساس لنفوسیت های منفی خالص شدند. به بیان افتراقی نشانگرهای CD45RA، CD45RO و CCR7 (شکل 1A).

DCهای مشتق شده از مونوسیت (5x104) با زیرگروه های خالص شده سلول های T (10)5 به مدت 96 ساعت در یک چاه ته گرد حاوی 200 میکرولیتر RPMI 1640 محیط تکمیل شده با 10 درصد FBS کشت شدند. 1 درصد پنی سیلین/استرپتومایسین (صنایع بیولوژیکی)، 5 نانوگرم در میلی لیتر IL{14}} (زیست

افسانه). قبل از کشت همزمان، زیرگروه های سلول T با 5 میکرومولار CFSE (BioLegend) نشاندار شدند. به عنوان یک کنترل مثبت، یک آنتی بادی ضد CD3 (HIT3a، 25 نانوگرم در میلی لیتر؛ BioLegend) به کشت های مشترک اضافه شد. تنظیمات آزمایشی در شکل 1A خلاصه شده است.

2.3. ایمونوفنوتایپ و سنجش های مربوط به عملکرد توسط فلوسایتومتری

ایمونوفنوتایپینگ با آنتی بادی های مونوکلونال anti-human-CD4 (OKT4)، -CD8 (RPA-T8)، -CD56 (MEM{10}})، -CD19 (SJ25C1)، -CD45RA (HI100)، -CD45RO (UCHL1) انجام شد. )، -CCR7 (G043H7)، -CD25 (M-A251)، -CD38 (HIT2)، -4-1BB (4B4-1)، -PD-1 (NAT105)، -CD14 (M5E2)، -CD11b (ICRF44) (BioLegend); -CD1a (REA736)، -CD83 (REA714) (Miltenyi). مقادیر شدت فلورسانس متوسط ​​(MFI) روی سلول‌های CD4 پلاس و CD8 پلاس T و با توجه به رقت CFSE تعیین شد.

تغییر در MFI با مقایسه داده‌های حاصل از کشت مشترک با DCهای بارگذاری شده با آنتی ژن و DCهای کنترل محاسبه شد.

درصد سلول های T با رقت CFSE برای تکثیر ارزیابی شد. ظرفیت تکثیر اختصاصی آنتی ژن سلول‌های T به‌عنوان تغییر در تکثیر محاسبه شد که در آن داده‌های حاصل از کشت‌های مشترک با DCهای مشتق از مونوسیت کنترل به عنوان نرمال‌کننده‌ها استفاده شد. مایع رویی جمع آوری شده در یک ELISA مالتی پلکس (LEGEND-plex، BioLegend) استفاده شد. تمام آنالیزهای فلوسایتومتری بر روی یک جورتر FACSAria II انجام شد.

2.4. تحلیل آماری

نتایج به صورت میانه ± SEM ارائه شده است. برای تجزیه و تحلیل آماری از آزمون کروسکال والیس و تصحیح بونفرونی استفاده شد. مقدار AP<0.05 was="" considered="" statistically="">

3. نتایج

پس از انکوباسیون با S{0}}DC، درصد کمی از سلول های T در حال تکثیر شناسایی شد (محدوده درصد، CD4 پلاس، TN {{{0}}.49–6.8، TEMRA 3.29–7.7، TCM 0.38–20.2، TEM 0.2– 16.7؛ محدوده درصد، CD8 پلاس، TN 0.64–5.6، TEMRA 2.16–10.3، TCM0.8–15، TEM 1.6-19.4). هر دو سلول CD4 پلاس و CD8 به علاوه TCM و TEM فرکانس افزایش قابل توجهی از تکثیر را نسبت به جمعیت سلول های T ساده یا موثر نشان دادند (شکل 1B). سلول‌های CD4 به علاوه TCM و سلول‌های CD8 پلاس TEM بیشترین فعالیت تکثیری را نشان دادند. CD4 پلاسحافظهتکثیر سلول های T می تواند در 90 درصد از بیماران کووید{1}} القا شود، اما CD8 پلاسحافظهتکثیر سلول های T تنها در 60 درصد از بیماران مشاهده شد (شکل 1B). DCهای مشتق از مونوسیت نیز با یک آنتی ژن ویروسی نامربوط، HIV Gag بارگذاری شدند. انتظار می رود، هیچ پاسخ قابل توجهی در سلول های T از بازماندگان COVID-19 بدست نیامد (شکل 1C). به طور مشابه، سلول‌های T افراد سالم به S{5}}DC پاسخ ندادند. از سوی دیگر، DC مشتق شده از مونوسیت که آنتی ژن TT را ارائه می کند به عنوان یک کنترل مثبت برای سلول T عمل می کند.حافظهپاسخ ها (شکل 1C). علاوه بر این، بیان سطحی برخی از نشانگرهای مرتبط با فعال سازی، به ویژه CD25، PD{3}}، و 4-1BB، به طور قابل توجهی در سلول های T پاسخگو S1- تنظیم مثبت شد (شکل 1D). سلول‌های TEM تحریک‌شده با DC بالاترین سطوح IFN- و IL{10}} را ترشح می‌کنند که عمدتاً توسط سلول‌های CD4 به‌علاوه T نوع 1 و سلول‌های T سیتوتوکسیک CD8 تولید می‌شود. نشانگرهای پاسخ سیتوتوکسیک، گرانزیم A، گرانولیزین، لیگاند Fas (FasL)، و به ویژه گرانزیم B نیز در کشت‌های مشترک حاوی سلول‌های TEM از بیماران COVID{15}} افزایش یافت (شکل 1E). سوپرناتانت های کشت همزمان که فاکتورهای محلول از آن اندازه گیری شدند، حاوی واسطه های ترشح شده توسط سلول های T و DCs بودند. بنابراین، همانطور که در ادبیات گفته شد، مقادیر متوسطی از سایتوکین‌ها مانند TNF-، IL{19}}، IL{20}}، و IFN- نیز ممکن است توسط DC تولید شوند [16،17]. در برخی موارد، سلول‌های T غیرحافظه‌ای به S1-DC پاسخ دادند، بیان CD38 و 4-1BB و ترشح IL-4 و TNF- را افزایش دادند (شکل 1) . همچنین ناهمگونی بین پارامترهای سلول T مورد مطالعه و زمان نمونه‌گیری خون پس از بهبودی، شدت علائم بالینی یا سطح آنتی‌بادی‌های ضد S1 مشاهده شد (داده‌ها نشان داده نشده است).

4. بحث

در بازماندگان کووید-19، سلول‌های TEM و TCM خاص S1-در گردش، پاسخ‌دهی عملکردی خود را حفظ کردند و ظرفیت‌های تأثیرگذار تقویت‌شده‌ای مانند فعال‌سازی، تکثیر و ترشح واسطه‌های ایمنی را نشان دادند. حتی اگر پاسخ تکثیر درحافظهسلول های CD8 پلاس T به اندازه CD4 پلاس قوی نبودندحافظهسلول‌های T، داده‌های ما نشان می‌دهد که این سلول‌ها می‌توانند به سرعت در معرض آنتی‌ژن S1 SARS-CoV-2 به حالت اثرگذار برسند. سلول‌های TEM دروازه‌بان‌های مهمی هستند زیرا تمایل دارند در بافت‌های مستعد تهاجم میکروارگانیسم‌های بیماری‌زا قرار بگیرند، در حالی که سلول‌های TCM برای تسریع واکنش‌های ایمنی ایجاد شده توسط DC‌های ارائه‌دهنده آنتی‌ژن در اندام‌های لنفاوی ثانویه استخدام می‌شوند [18]. اگرچه تعداد محدودی از موارد کووید{5}} را پوشش می‌دهد، در مطالعه ما، اکثر بیماران سلول‌های TEM و TCM را در خود جای داده‌اند که از نظر عملکرد حداقل یک پارامتر آزمایش‌شده به پروتئین S1 پاسخ می‌دهند. این یافته‌های اولیه ممکن است نشان دهنده اختلاف احتمالی بین صلاحیت عملکردی سلول‌های T و شدت کووید{7}} باشد. مطالعه قبلی فراوانی سلول‌های T اختصاصی S{8} را بیشتر از سلول‌های T اختصاصی برای پروتئین‌های N و M گزارش کرده است [8]. به همین ترتیب، پاسخ‌دهی عملکردی سلول‌های T به سایر آنتی‌ژن‌های SARS-CoV{11}} همچنان باید بهتر مشخص شود. کار اصلی اخیراً منتشر شده حضور طولانی مدت را نشان می دهدحافظهدر سلول های T از بیماران COVID{0}} [19،20]. با استفاده از یک رویکرد تجربی متمایز که در آن DCهای مشتق از مونوسیت اتولوگ به عنوان یک عنصر امکان‌پذیر برای آزمایش پاسخ سلول T استفاده می‌شد، مطالعه ما عملکرد و ویژگی سلول‌های T را که قبلاً در افراد دارای سابقه COVID{4}} ذکر شده بود تأیید کرد. جمع آوری شواهد در مورد ایمنی ایجاد شده در بازماندگان کووید-19 درک بهتری از پاتوژنز بیماری، رویکردهای درمانی و توسعه واکسن ارائه می‌کند.

شکل 1. ارزیابی پاسخ‌های عملکردی در سلول‌های T از بازماندگان کووید-19. الف) طرح کلی گرافیکی تنظیمات آزمایشی نشان داده شده است. سلول‌های دندریتیک مشتق از مونوسیت از افراد دارای سابقه COVID{3}} تولید و با SARS-CoV-2 Spike Glycoprotein-S1 (S{8}}DC) بارگذاری شدند. سپس، اتولوگ ساده T (TN)، افکتور پایانی تمایز یافته T (TEMRA)، مرکزیحافظهT (TCM) و افکتورحافظهسلول های T (TEM) خالص شده و با این DCها کشت شدند. تکثیر سلول های T، بیان نشانگرهای فعال سازی و ترشح سیتوکین پس از 96 ساعت انکوباسیون اندازه گیری شد. ب) تغییر در تکثیر سلول های CD4 پلاس و CD8 پلاس T برای هر بیمار در مقایسه با تغییرات حاصل از کشت های مشترک کنترل با DCهای مشتق از مونوسیت بدون بارگذاری آنتی ژن خاص ترسیم شد. هیستوگرام فلوسیتومتری نماینده در سمت راست داده شده است. کشت های مشترک تحریک شده با آنتی بادی مونوکلونال ضد CD3 به عنوان یک کنترل فنی مثبت برای تکثیر سلول های T عمل کرد. ج) پاسخ تکثیر سلولهای TCM و TEM مشتق از بیمار در برابر S{{{{2{22}}}}}}DC با آنهایی که با HIV Gag یا با آنتی ژن سم کزاز (TT) به دست آمدند مقایسه شد. دی سی های بارگذاری شده سلول های T و S{12}}DCهای به دست آمده از افراد سالم (S1(hd)) نیز به عنوان شاهد استفاده شدند. د) تغییرات در سطوح نشانگر فعال‌سازی سلول‌های CD4 پلاس و CD8 پلاس در مقایسه با آنهایی که با کشت‌های مشترک شاهد با DCهای مشتق از مونوسیت بدون بارگذاری آنتی‌ژن خاص به‌دست آمدند، نشان داده شد. E) مقدار سیتوکین های مرتبط با سلول T ترشح شده به رویی کشت همزمان ارزیابی شد. (*p <0.05، **p=""><>

بیانیه مشارکت نویسنده CRediT

Ece Tavukcuoglu: تحقیق، تجسم، تحلیل رسمی، نوشتن - بررسی و ویرایش. Utku Horzum: تحقیق، تجسم، تحلیل رسمی، نوشتن - بررسی و ویرایش. احمد چاگکان اینکایا: مفهوم سازی، منابع. سرهات اونال: مفهوم سازی، منابع. Gunes Esendagli: مفهوم سازی، نوشتن - بررسی و ویرایش، نظارت.

اعلامیه منافع رقابتی

نویسندگان اعلام می کنند که هیچ منافع مالی رقیب یا روابط شخصی شناخته شده ای ندارند که به نظر می رسد بر کار گزارش شده در این مقاله تأثیر بگذارد.

منابع

[1] A. Mazzoni، L. Maggi، M. Capone، M. Spinicci، L. Salvati، MG Colao، A. Vanni، ST Kiros، J. Mencarini، L. Zammarchi، E. Mantengoli، L. Menicacci، E. Caldini، S. Romagnani، F. Liotta، A. Morettini، GM Rossolini، A. Bartoloni، L. Cosmi، F. Annunziato، پاسخ های ایمنی انطباقی با واسطه سلولی و هومورال به SARS-CoV-2 کمتر در بدون علامت نسبت به بیماران کووید{4} علامتدار، یورو. J. Immunol. 50 (2020) 2013–2024.

[2] Y. Tan، F. Liu، X. Xu، Y. Ling، W. Huang، Z. Zhu، M. Guo، Y. Lin، Z. Fu، D. Liang، T. Zhang، J. Fan، M. Xu، H. Lu، S. Chen، دوام آنتی بادی های خنثی کننده و پاسخ سلول های T پس از عفونت SARS-CoV{4}}، جلو. پزشکی 14 (2020) 746–751.

[3] C. Conte، F. Sogni، P. Affanni، L. Veronesi، A. Argentiero، S. Esposito، واکسن‌ها علیه کروناویروس‌ها: وضعیت هنر، واکسن‌ها (بازل) 8 (2020).

[4] CK Li، H. Wu، H. Yan، S. Ma، L. Wang، M. Zhang، X. Tang، NJ Temperton، RA Weiss، JM Brenchley، DC Douek، J. Mongkolsapaya، BH Tran، CL Lin، GR Screaton، JL Hou، AJ McMichael، XN Xu، پاسخ‌های سلول T به کل کرونا ویروس SARS در انسان، J. Immunol. 181 (2008) 5490-5500.

[5] M. Koblischke، MT Traugott، I. Medits، FS Spitzer، A. Zoufaly، L. Weseslindtner، C. Simonitsch، T. Seitz، W. Hoepler، E. Puchhammer-Stockl، SW Aberle، M. Fodinger، A. Bergthaler، M. Kundi، FX Heinz، K. Stiasny، JH Aberle، دینامیک سلول های CD4 T و پاسخ های آنتی بادی در بیماران COVID{3}} با شدت بیماری متفاوت، جلو. پزشکی (لوزان) 7 (2020)، 592629.

[6] GA Poland، IG Ovsyannikova، RB Kennedy، SARS-CoV{2}} مصونیت: بررسی و برنامه‌های کاربردی برای کاندیدهای واکسن فاز 3، Lancet 396 (2020) 1595-1606.

[7] R. Zhou، KK To، YC Wong، L. Liu، B. Zhou، X. Li، H. Huang، Y. Mo، TY Luk، TT Lau، P. Yeung، WM Chan، AK Wu، KC ریه، OT Tsang، WS Leung، IF Hung، KY Yuen، Z. Chen، عفونت حاد SARS-CoV-2 پاسخ‌های سلول‌های دندریتیک و سلول‌های T را مختل می‌کند، ایمنی 53 (2020) 864–877 e{ {7}}.

[8] A. Grifoni، D. Weiskopf، SI Ramirez، J. Mateus، JM Dan، CR Moderbacher، SARawlings، A. Sutherland، L. Premkumar، RS Jadi، D. Marrama، AM de Silva، A. Frazier، AF Carlin، JA Greenbaum، B. Peters، F. Krammer، DM Smith، S. Crotty، A. Sette، Targets of T Cell Responses to SARS-CoV-2 Coronavirus in Humans with COVID{3}} Disease and افراد در معرض قرار نگرفته، سلول، 181 (2020) 1489-1501 e1415.

[9] PF Canete، CG Vinuesa، COVID-19 باعث می‌شود سلول‌های B فراموش شوند، اما سلول‌های T به یاد می‌آورند، Cell 183 (2020) 13-15.

[10] I. Schulien، J. Kemming، V. Oberhardt، K. Wild، LM Seidel، S. Killmer، F. Sagar، MS Daul، A. Lago، H. Decker، B. Luxenburger، D. Binder، O Bettinger، S. Sogukpinar، M. Rieg، D. Panning، M. Huzly، G. Schwemmle، CF Kochs، A. Waller، D. Nieters، F. Duerschmied، HE Emmerich، AR Mei، S. Schulz، DA Llewellyn -لیسی، تی. پرایس، بی. بوتلر، آر. بنگش، ام. تیم، سی.-اچ. هافمن، مشخص کردن سلول‌های T از قبل موجود و القا شده توسط SARS-CoV{5}}خاص CD8(+)، Nat. پزشکی 27 (2021) 78-85.

[11] آی. اوداک، جی. باروس-مارتینز، بی. بوسنیاک، کی. استال، اس. دیوید، او. ویزنر، ام. بوش، م.

M. Hoeper، I. Pink، T. Welte، M. Cornberg، M. Stoll، L. Goudeva، R. Blasczyk، A. Ganser، I. Prinz، R. Forster، C. Koenecke، CR شولتز-فلوری، ظهور مجدد سلول های T موثر با بهبودی از COVID-19، EBioMedicine 57 (2020)، 102885 مرتبط است.

[12] AE Oja، A. Saris، CA Ghandour، NAM Kragten، BM Hogema، EJ Nossent، LMA Heunks، S. Cuvalay، E. Slot، F. Linty، FH Swaneveld، H. Vrielink، G. Vidarsson، T. Rispens، E. van der Schoot، RAW van Lier، A. Ten Brinke، P. Hombrink، Divergent SARS-CoV-2-واکنش‌های اختصاصی T- و B-cell در بیماران شدید اما نه خفیف COVID-19 ، یورو J. Immunol. 50 (2020) 1998–2012.

[13] B. Kratzer، D. Trapin، P. Ettel، U. Kormoczi، A. Rottal، F. Tuppy، M. Feichter، P. گاتینگر، K. Borochova، Y. Dorofeeva، I. Tulaeva، M. Weber، K. Grabmeier- Pfistershammer، PA Tauber، M. Gerdov، B. Muhl، T. Perkmann، I. Fae، S. Wenda، H. Fuhrer , R. Henning, R. Valenta, WF Pickl, Immunological imprint of COVID-19 بر روی جمعیت لکوسیت خون محیطی انسان، آلرژی (2020).

[14] AM Bruger، C. Vanhaver، K. Bruderek، G. Amodio، E. Tavukcuoglu، G. Esendagli، S. گرگوری، S. Brandau، P. van der Bruggen، پروتکل برای ارزیابی سرکوب تکثیر سلول T توسط MDSC انسان، روش آنزیم. 632 (2020) 155-192.

[15] SA Younes، B. Yassine-Diab، AR Dumont، MR Boulassel، Z. Grossman، JP Routy، RP Sekaly، HIV{2}} ویرمی مانع از ایجاد اینترلوکین 2- تولید کننده HIV خاص می شود.حافظهسلول های CD4 به علاوه T دارای ظرفیت تکثیر، J. Exp. پزشکی 198 (2003) 1909-1922.

[16] DM Frucht، T. Fukao، C. Bogdan، H. Schindler، JJ O'Shea، S. Koyasu، تولید IFN-گاما توسط سلول های ارائه دهنده آنتی ژن: ظهور مکانیسم ها، Trends Immunol. 22 (2001) 556-560.

[17] EO Gubernatorova، EA Gorshkova، OA Namakanova، RV Zvartsev، J. Hidalgo، MS Drutskaya، AV Tumanov، SA Nedospasov، عملکردهای غیر زائد IL-6 تولید شده توسط ماکروفاژها و سلول های دندریتیک در التهاب آلرژیک راه هوایی، جلو. ایمونول. 9 (2018) 2718.

[18] YD Mahnke، TM Brodie، F. Sallusto، M. Roederer، E. Lugli، The who's who از تمایز سلول T: انسانحافظهزیر مجموعه های سلول T، Eur. J. Immunol. 43 (2013) 2797-2809.

[19] JM Dan، J. Mateus، Y. Kato، KM Hastie، ED Yu، CE Faliti، A. Grifoni، SI Ramirez، S. Haupt، A. Frazier، C. Nakao، V. Rayaprolu، SA Rawlings، B پیترز، اف. کرامر، وی. سیمون، ای او سافایر، دی.ام اسمیت، دی. ویسکوف، ای. ست، اس. کروتی، ایمونولوژیکحافظهبه SARS-CoV-2 تا 8 ماه پس از آلودگی ارزیابی شد، Science 371 (2021).

[20] LB Rodda، J. Netland، L. Shehata، KB Pruner، PA Morawski، CD Thouvenel، KK Takehara، J. Eggenberger، EA Hemann، HR Waterman، ML Fahning، Y. Chen، M. هیل، جی. راث، سی. استوکس، اس. رن، بی. فیالا، ال. کارتر، جی هامرمن، ان پی کینگ، ام. گیل، جونیور، دی جی کمپبل، دی جی راولینگ، ام. پپر، فانکشنال SARS-CoV{ {2}}ایمنی خاصحافظهپس از خفیف کووید-19، Cell، 184 (2021) 169-183 e117 ادامه دارد.