آیا می توان از گلیکوزیدهای سیستانچ برای درمان سمیت قلبی استفاده کرد؟

اثر محافظتی گلیکوزیدهای سیستانچ در برابر سمیت قلبی ناشی از دوکسوروبیسین در موش

مخاطب:joanna.jia@wecistanche.com/ واتساپ: 008618081934791

وو لیا، وانگ شیائوون، وانگ ژئوفی، و همکاران

(گروه فارماکولوژی، دانشگاه پزشکی X سین کیانگ، X سین کیانگ 830054)

چکیده: هدف: بررسی اثر حفاظتیگلیکوزیدهای سیستانچ(GCs) در برابر دوکسوروبیسین ناشی ازسمیت قلبیدر موش ها و مکانیسم آن

روش‌ها: موش‌های NI H به صورت داخل صفاقی با دوکسوروبیسین (Dox) با دوز 17.5 میلی‌گرم بر کیلوگرم{2}} برای ایجاد مدل آسیب حاد میوکارد تحت درمان قرار گرفتند. فعالیت SOD، GS H-Px، محتوای M DA، و فعالیت کراتین فسفوکیناز (CPK) اندازه‌گیری شد. تغییرات فراساختاری قلب با میکروسکوپ الکترونی روبشی مورد بررسی قرار گرفت.

نتایج: در 48 ساعت پس از تجویز، Dox باعث آسیب شدید میوکارد با کاهش فعالیت SOD و GS H-Px شعاعی من، افزایش محتوای M DA میوکارد و فعالیت CPK سرم در موش‌ها شد. همچنین باعث آسیب شدید سلول های میوکارد در سطح فراساختار شد. تجویز خوراکی GCs (62.5، 125، 250 میلی گرم بر کیلوگرم- 1) با افزایش SOD میوکارد، فعالیت GS H-Px، کاهش محتوای M DA میوکارد و فعالیت CPK سرم در برابر این تغییرات ناشی از Dox محافظت می کند. ، و کاهش می دهدسمیت قلبیo Dox در سطح فراساختاری.

نتیجه گیری:گلیکوزیدهای سیستانچدارای اثر محافظتی برسمیت قلبیالقا شده توسط داکس. مکانیسم کاهش سمیت قلبی ناشی از Dox ممکن است به اثر GCها بر از بین بردن رادیکال‌های آزاد ox yg در قلب موش، محافظت از فعالیت SOD و GSH-Px و مهار پراکسیداسیون لیپیدی بستگی داشته باشد.

کلیدواژه: دوکسوروبیسینگلیکوزیدهای سیستانچ; پراکسیداسیون لیپیدی؛سمیت قلبی; کراتین فسفوکیناز؛ فراساختار

دوکسوروبیسین (داکس) یک آنتی بیوتیک آنتراکینون است و تأثیر خوبی بر انواع تومورهای بدخیم دارد. با این حال، به دلیل سمیت حاد و مزمن میوکارد، کاربرد وسیع Dox را در عمل بالینی محدود می کند. مشخص شده است که اثر ضد توموری Dox روی تکثیر DN A و سنتز RN A تأثیر می گذارد و آنسمیت قلبیمربوط به آسیب پراکسیداسیون لیپیدی ناشی از سمیکینون آدریامایسین است [1، 2]. بنابراین، یافتن جاذب‌کننده‌های رادیکال‌های آزاد و آنتی‌اکسیدان‌ها برای مقابله با رادیکال‌های آزاد مهم استسمیت قلبیDox در حالی که فعالیت ضد توموری خود را حفظ می کند.سیستانچگلیکوزیدهای کل سیستانش (GCs) مواد فعالی هستند که از آن استخراج می شوندسیستانچ. مطالعات مربوطه نشان داده اند که GCها دارای اثرات آنتی اکسیدانی بر روی بافت موش هستند، می توانند به طور قابل توجهی محتوای لیپوفوسسین را کاهش دهند [3]، اثرات محافظتی بر ایسکمی میوکارد موش [4] دارند و دارای اثرات ضد پراکسیداسیون لیپیدی و ضد تشعشع هستند. [5]. هدف این مطالعه بررسی اثر محافظتی و مکانیسم GCها بر آسیب میوکارد در موش‌های ناشی از Dox است.

1 مواد و روش ها

1. 1 دارو و معرف

GC ها از نمک تولید کننده استخراج می شوندسیستانچدر شمال سین ​​کیانگ ترکیبات اصلی گلیکوزیدهای فنتیل الکل مانند گلیکوزیدهای اکیناکوزید و ارگوت هستند (ارائه شده توسط گروه شیمی طب طبیعی، دانشکده داروسازی، دانشگاه پزشکی سین کیانگ). تترا متوکسی پروپان (TM P Sigma Company) )؛ دوکسوروبیسین (Do x, Zhejiang Hisun Pharmaceutical Co., Ltd.)؛ ویتامین E (ویتامین E، کارخانه داروسازی شانگهای Yan'an)؛ سایر معرف ها در داخل کشور تولید می شوند.

اثر گلیکوزیدهای سیستانچ بر سمیت قلبی

1. 2 تجهیزات آزمایشی

اسپکتروفتومتر نوع 721 (کارخانه ابزار تحلیلی سوم شانگهای)؛ میکروسکوپ O LYM PU S (ساخت ژاپن)؛ میکروسکوپ الکترونی عبوری JEM-100CXII (ساخت ژاپن)؛ اسیدیته سنج نوع PHS-250 (کارخانه ابزار مغناطیسی شانگهای لی).

1. 3 گروه بندی و اداره حیوانات

موش‌های N IH توسط مرکز آزمایش حیوانات موسسه بیماری‌های اندمیک سین‌کیانگ و شماره گواهی حیوان آزمایشگاهی پزشکی: شماره {{0}} ارائه شد. 138 موش N IH با وزن (2±24) گرم، نیمی نر و ماده انتخاب شدند. به طور تصادفی به 6 گروه (23 در هر گروه) تقسیم شدند: (1) گروه کنترل: نرمال سالین (NS) 20 ml/kg. (2) گروه آسیب داکس: NS 20 میلی لیتر / کیلوگرم. (3) گروه ویتامین E: ویتو 100 میلی گرم بر کیلوگرم؛ (4) گروه GCsⅠ: GCs 62.5 mg/kg. (5) گروه GCsⅡ: GCs 125.0 mg/kg. (6) گروه GCsⅢ: GCs 25.0 میلی گرم بر کیلوگرم، همه گروه های فوق با تجویز معده، یک بار در روز آبیاری شدند. گروه آسیب Dox، گروه ویتامین E، گروه GCsⅠ، گروه GCsⅡ، گروه GCsⅢ با Dox 17.5 mg/kg در روز چهارم پس از تجویز NS و GCs به صورت داخل صفاقی تزریق شد. پس از 48 ساعت، کره چشم برای جمع آوری خون برداشته شد، سرم تهیه شد و حیوانات بلافاصله برای بیرون آوردن قلب قربانی شدند، با NS شستشو داده شدند، با کاغذ صافی خشک شدند و وزن شدند. پس از 30 دقیقه، مایع رویی را برای اندازه گیری شاخص های بیوشیمیایی بگیرید. در هر گروه 3 موش وجود داشت و قلب ها برای ساختن نمونه های میکروسکوپ الکترونی گرفته شد.

1.4 تعیین شاخص های بیوشیمیایی

روش اتواکسیداسیون پیروگالول [6] برای تعیین فعالیت سوپراکسید دیسموتاز میوکارد (SOD) استفاده شد. روش DTNB [7] برای تعیین فعالیت سلنیوم گلوتاتیون پراکسیداز میوکارد (Se-GS H-Px) استفاده شد. استفاده از روش TBA [8] برای تعیین محتوای محصول پراکسیداسیون لیپیدی میوکارد مالون دی آلدئید (M DA). تعیین کمیت پروتئین با استفاده از روش CBB-SDS [9]؛ با استفاده از روش CPK [10] برای تعیین فعالیت کراتین فسفوکیناز سرم (CPK).

1.5 میکروسکوپ الکترونی بافت میوکارد

راس قلب با گلوتارآلدئید 4 درصد و اسید اسمیم 1 درصد تثبیت شد، با استون آبگیری شد، در Epon 812 جاسازی شد، با الکترون های سرب-اورانیوم رنگ آمیزی شد و زیر میکروسکوپ الکترونی عبوری JEM-100CXII مشاهده شد. 1.6 پردازش آماری همه داده ها به صورت x-± s بیان می شوند. پس از اینکه داده های تجربی برای همگنی واریانس مورد آزمایش قرار گرفتند، از آزمون F و آزمون q برای پردازش آماری استفاده می شود. سطح بازرسی=0.05.

2 نتیجه

2.1 تأثیر GCها بر شاخص های بیوشیمیایی میوکارد آسیب دیده توسط Dox در جدول 1 نشان داده شده است.

2. 1.1 اثر GCs بر فعالیت SOD میوکارد آسیب دیده Dox

در مقایسه با گروه کنترل، گروه آسیب داکس فعالیت SOD میوکارد را 41.1 درصد کاهش داد (P<0.01). the="" gcsⅰ,="" gcsⅱ,="" gcsⅲ,="" and="" vit="" e="" groups="" increased="" the="" myocardial="" sod="" activity="" by="" 30.9%="" and="" 33.2="" compared="" with="" the="" dox="" injury="" group,="" respectively.="" %,="" 36.5%,="" and="" 34.9%="" (all=""><0.01), the="" gcsⅲ="" group="" was="" close="" to="" the="" control="" group="" (p="">0.05)، و بقیه گروه ها پایین تر از گروه کنترل بودند.

2.1.2 اثر GCs بر فعالیت Se-GSH-Px در میوکارد آسیب دیده توسط Dox

در مقایسه با گروه کنترل، گروه آسیب Dox فعالیت Se-GSH-Px میوکارد را 26.2 درصد کاهش داد (P<0.01), and="" the="" gcsⅰ,="" gcsⅱ,="" gcsⅲ,="" and="" vit="" e="" groups="" increased="" by="" 19.="" 2%="" and="" 21="" respectively="" compared="" with="" the="" dox="" injury="" group.="" .1%,="" 25.0%="" and="" 26.1%="" (all=""><0.01), which="" are="" all="" close="" to="" the="" control="" group="" (p="">0.05).

2.1.3 تأثیر GCها بر محتوای M DA در میوکارد آسیب دیده Dox

در مقایسه با گروه کنترل، محتوای MDA در گروه آسیب داکس 25.8 درصد افزایش یافت (P<0.01), and="" the="" gcsⅰ,="" gcsⅱ,="" gcsⅲ,="" and="" vit="" e="" groups="" decreased="" by="" 16.7%,="" 17.3%,="" and="" 18.="" 6%="" and="" 17.3%="" (both=""><0.01), both="" were="" close="" to="" the="" control="" group="" (p="">0.05).

گلیکوزیدهایسیستانچ

2.1.4 اثر GCs بر فعالیت C PK سرم در موش های آسیب دیده Dox

فعالیت CPK سرم در گروه آسیب داکس 87.3 درصد نسبت به گروه نرمال افزایش یافت (P<0.01), and="" the="" gcsⅰ,="" gcsⅱ,="" gcsⅲ,="" and="" vit="" e="" groups="" were="" reduced="" by="" 26.6%,="" 33.1%,="" and="" 37="" respectively="" compared="" with="" the="" dox="" injury="" group.="" .="" 4%="" and="" 36.="" 7%="" (both=""><0.01), both="" higher="" than="" the="" control="">

جدول 1 اثر GCs بر شاخص های بیوشیمیایی میوکارد آسیب دیده Dox

توجه: در مقایسه با گروه کنترل، * * P<0.01; compared="" with="" the="" dox="" injury="" group,="" #="" #="" p=""><>

2.2 میکروسکوپ الکترونی میوکارد موش

2. 2. 1 گروه کنترل

غشای فیبر میوکارد دست نخورده است، میوفیبریل ها به طور منظم چیده شده اند، باندهای سارکومر ساختار یافته اند، میتوکندری ها به طور مرتب چیده شده اند، ساختار طبیعی است و ساختار هسته ای طبیعی است.

2. 2. 2 گروه آسیب داکس

مشاهده می شود که تغییرات آشکاری در فراساختار فیبرهای میوکارد وجود دارد، سلول های میوکارد متورم می شوند، سارکومر داخل سیتوپلاسمی رشد می کند، نوار روشن پهن می شود، نوارهای انقباض غیرطبیعی در برخی نواحی ظاهر می شوند و ماده Z-line افزایش می یابد. میتوکندری‌ها به‌طور پراکنده متورم و هیپرپلاستیک، با چینش کریستاهای پراکنده، شکستگی‌ها و دژنراسیون واکوئلی بودند. شبکه سارکوپلاسمی منبسط می شود، لیزوزوم های ثانویه افزایش می یابد و دژنراسیون کانونی دیده می شود. حجم هسته افزایش می یابد و فضای دور هسته ای گسترده می شود.

2. 2. 3 GCsⅠ گروه

تورم فیبر میوکارد کاهش یافته است. ساختار سارکومر نرمال بود، اما سارکومر همچنان گسترده تر از گروه کنترل بود. تورم میتوکندری کاهش یافت، تراکم ماتریکس افزایش یافت، تراکم کریستا افزایش یافت، و کریستای میتوکندری فردی همچنان تغییر کرد. افزایش لیزوزوم های ثانویه در سیتوپلاسم.

2. 2. 4 GCs Ⅱ و Ⅲ گروه

ساختار فیبر میوکارد به حالت عادی بازگشت. میوفیبریل ها به طور مرتب چیده شده اند، ساختار سارکومر طبیعی است و ساختار میتوکندری به حالت عادی باز می گردد.

3 بحث

داکس یک آنتی بیوتیک آنتراکینون است که دارای ویژگی های طیف گسترده ضد تومور و اثرات قوی است. با این حال، Dox می تواند باعث مسمومیت جدی میوکارد شود، مانند آریتمی های مختلف در مراحل اولیه دارو، وابسته به دوز، و نارسایی احتقانی قلب در مرحله آخر، که کاربرد بالینی آن را محدود می کند. مکانیسم داکس که باعث مسمومیت میوکارد می شود، عمدتاً تولید رادیکال های آزاد اکسیژن فعال بیش از حد است که باعث آسیب میوکارد می شود. میل ترکیبی داکس با بافت میوکارد به طور قابل توجهی بیشتر از سایر بافت ها است. پس از ورود به سلول‌های میوکارد، به Semiquinone Dox تبدیل می‌شود که با اثر روی مولکول‌های اکسیژن، آن را به رادیکال‌های آزاد آنیون سوپراکسید (O-2) تبدیل می‌کند و همراه با پراکسید هیدروژن (H2 O2) تولید می‌شود. O-2· و H2O2 رادیکال های هیدروکسیل (OH·) را از طریق واکنش هابر ویس یا واکنش فنتو n تولید می کنند. O{9}}· و OH· در مقادیر زیادی تجمع می یابند که می تواند باعث پراکسیداسیون لیپیدی در بافت ها و غشای سلولی شود و باعث آسیب به ماکرومولکول های بیولوژیکی شود [11].

در این آزمایش مشاهده شد که پس از 48 ساعت تزریق داخل صفاقی Dox (17.5 میلی گرم بر کیلوگرم) به موش، فعالیت آنزیم مهار کننده رادیکال های آزاد میوکارد SO D و Se-GSH-Px به طور قابل توجهی کاهش یافت و محصولات پراکسیداسیون لیپیدی محتوای MDA به طور قابل توجهی افزایش یافت و فعالیت CPK سرم افزایش یافت. در زیر میکروسکوپ الکترونی، فراساختار عضله قلب آسیب دیده بود که به صورت تورم آشکار میتوکندری، کریستای شکسته، دژنراسیون واکوئلی، کاهش تراکم ماتریکس و گسترش شبکه سارکوپلاسمی آشکار شد.

همه گروه‌های دوز GCs می‌توانند به طور قابل‌توجهی فعالیت آنزیم‌های مهارکننده رادیکال‌های آزاد SOD و Se-GS H-Px را در عضله قلب موش‌های آسیب‌دیده Dox افزایش دهند، محتوای MDA را کاهش دهند و آزادسازی CPK را کاهش دهند. پیشنهاد می‌شود که GCها می‌توانند آسیب پراکسیداسیون لیپیدی ناشی از Dox را با افزایش فعالیت آنزیم‌های مهارکننده رادیکال‌های آزاد در بدن کاهش دهند. گروه های GCsⅡ و GCsⅢ به طور قابل توجهی از فراساختار فیبرهای میوکارد از آسیب Dox محافظت کردند. تشخیص در شرایط آزمایشگاهی با استفاده از فن‌آوری مدرن آنالیز لومینسانس شیمیایی، مشخص شده است که GCها می‌توانند به طور موثر رادیکال‌های آزاد اکسیژن فعال مانند O·2، OH·، H2O2 را حذف کنند و اثر مهار بر O·2 به ویژه قابل توجه است [12]. پیشنهاد می‌شود که GCها می‌توانند O-2· القا شده توسط Semiquinone Dox در میوکارد را از بین ببرند، در نتیجه واکنش زنجیره‌ای رادیکال‌های آزاد را قطع کرده و به عنوان مسدودکننده زنجیره پراکسیداسیون لیپیدی عمل می‌کنند.

در این آزمایش از ویتامین E به عنوان کنترل مثبت استفاده شد. نتایج نشان داد که ویتامین E اثر محافظتی خاصی بر آسیب حاد میوکارد ناشی از Dox در موش دارد. این می تواند محتوای M DA میوکارد را کاهش دهد و فعالیت SOD و Se-GSH-Px را افزایش دهد. 13] گزارش ها سازگار هستند.

جزء اصلی GCها گلیکوزیدهای فنوکسی اتانول است و ساختار آن شبیه به ویتامین E است، یعنی دارای یک گروه هیدروکسیل فنولیک و یک گروه هیدروکسیل است. بنابراین، حدس زده می‌شود که GCها می‌توانند اتم‌های هیدروژن روی گروه هیدروکسیل فنلی ساختار مولکولی آن را در اختیار رادیکال لیپیدی (LOO·) قرار دهند و آن را به لیپو هیدروپراکسید (LOOH) تبدیل کنند، که سپس توسط GSH- به هیدروکسیل غیر سمی تجزیه می‌شود. Px از پراکسیداسیون اسیدهای چرب غیر اشباع در بیوفیلم توسط رادیکال های آزاد جلوگیری می کند و در نتیجه آسیب داکس به کاردیومیوسیت ها را کاهش می دهد. مکانیسم باید به طور عمیق مورد مطالعه قرار گیرد.

گلیکوزیدهای سیستانچ می توانند سمیت قلبی را درمان کنند

منابع

[1] Baser RL، Green M D. عوارض درمان: استراتژی‌هایی برای پیشگیری از بازیافتسمیت قلبی[ج]. Cancer Tread Rer، 1993، 19: 57.

[2] Doroshow JH. اثر آنتی بیوتیک های آنتراسایکلین بر تشکیل رادیکال ox yg در موش صحرایی شنیده شده [J]. Cancer Res, 1983, 43: 460.

[3] وانگ شیاوون، لی لینلین، موهو یاتی، و همکاران. اثر آنتی اکسیدانی کلگلیکوزیدهای سیستانچروی بافت های موش [J]. مجله چینی چینی ماتریا مدیکا، 1998، 23(9): 554-556.

[4] مائو شینمینگ، وانگ شیاوون، لی لینلین، و همکاران. اثر محافظتی گلیکوزیدهای کل گیاه سیستانچ بر ایسکمی میوکارد در موش صحرایی [J]. طب گیاهی چینی، 1999، 30(2): 118-120.

[5] لی لینلین، وانگ شیاوون، وانگ ژئوفی، و همکاران. اثرات ضد پراکسیداسیون چربی و ضد تشعشع کلگلیکوزیدهای سیستانچ[ج]. مجله چینی چینی ماتریا مدیکا، 1997، 22(6): 364-367.

[6] Zou Guolin، Gui Xingfen، Zhong Xiaoling، و همکاران. یک روش تعیین SOD - بهبود روش اتوکسیداسیون پیروگالول [J]. پیشرفت در بیوشیمی و بیوفیزیک، 1986، 4: 17.

[7] شیا ییمین، ژو لیانژن. تعیین فعالیت گلوتاتیون پراکسیداز در خون و بافت - روش مستقیم DTNB [J]. تحقیقات بهداشتی، 1987، 16(4): 29-32.

[8] چن شونژی، جین یویو. مقایسه سه روش توسعه رنگ پراکسید لیپید TB A [J]. مجله علوم آزمایشگاهی بالینی، 1984، 2(4): 8-10.

[9] Macart M, Gerbaut L. بهبود روش اتصال رنگ آبی کوماسی به دلیل حساسیت خوب به پروتئین‌های واراس: کاربرد در مایع نخاعی Crerebros [J]. Clin Chem Act a, 1982, 112: 93.

[10] خو شویون، بیان رولیان، چن شیو. روش شناسی آزمایش فارماکولوژیکی [M]. چاپ دوم، پکن: انتشارات پزشکی مردم، 1991. 922.

[11] Halliw ell B، Gu tt ridge JMC. رادیکال های آزاد در زیست شناسی و پزشکی [M]. ویرایش دوم نیویورک: انتشارات دانشگاه آکسفورد، 1989. 543-550.

[12] وانگ شیاوون، جیانگ ژیائویان، وو لیا ییمین، و همکاران. اثر مهاری کلگلیکوزیدهای سیستانچدر مورد رادیکال های آزاد و محافظت از آسیب DNA ناشی از OH [J]. مجله دارویی چینی، 2001، 36 (1): 29-31.

[13] وو یولینگ، خو گوانگیوان. مطالعه تجربی حاد ناشی از دوکسوروبیسینسمیت قلبیدر موش و اثر محافظتی ویتامین E [J]. مجله دانشگاه پزشکی دالیان، 1991، 13(1): 22-27.

از: کتابخانه چینی شماره طبقه بندی: Q949. 752. 7; R978. 1 R-332 کد شناسایی سند: شماره مقاله: 1009-5551 (2003) 01-0028-03

پروژه صندوق: بنیاد علوم طبیعی کمیسیون علم و فناوری منطقه خودمختار سین کیانگ اویغور (96814)

درباره نویسنده: Wu Liya Yiming (1964-)، زن (ایغور)، استاد، مدرس، جهت تحقیق: فارماکولوژی قلب و عروق.