شناسایی نقش عصاره های شراب قرمز و سفید در مقابله با پیری پوست: اثرات آنتی اکسیدان ها بر رفتار فیبروبلاست

لطفا تماس بگیریدoscar.xiao@wecistanche.comبرای اطلاعات بیشتر

خلاصه:فیبروبلاست های پوستی عامل اصلی ترشح بسیاری از پروتئین ها از جمله کلاژن هستند و عملکرد پوست را حفظ می کنند. رادیکال های آزاد در پیری پوست و آسیب های مربوط به اجزای مختلف سلولی نقش دارند. عدم تعادل بین مقدار گونه‌های فعال اکسیژن (ROS) و آنزیم‌های آنتی اکسیدانی طبیعی بر هموستاز پوست تأثیر منفی می‌گذارد. ترکیبات طبیعی اخیراً به عنوان یک ابزار بالقوه ضد پیری در بازسازی بافت ظاهر شده اند. در مقاله حاضر، فعالیت آنتی اکسیدانی شراب های سفید و قرمز را با توجه به استفاده احتمالی آنها به عنوان مواد اولیه برای فرمولاسیون محصولات آرایشی و بهداشتی با خواص ضد پیری ارزیابی کردیم. ما روشی را مطالعه کردیم که امکان حذف بخش الکلی شراب ها را فراهم می کرد و ترکیب آنها را با تجزیه و تحلیل LC-MS تعیین کردیم. سپس اثرات سیتوتوکسیک احتمالی شراب‌های قرمز و سفید را روی فیبروبلاست‌ها توسط 3-(4,{5}}دی‌متیل تیازول-2-ایل)-2،5-دی‌فنیل تترازولیوم (MTT) آزمایش کردیم. ) سنجش، و فعالیت آنتی اکسیدانی آنها توسط تست فعالیت کاتالاز در شرایط استرس. در نهایت، پتانسیل ضد پیری آنها را از طریق روش رنگ سنجی -گالاکتوزیداز ارزیابی کردیم. نتایج ما نشان داد که عصاره‌های شراب فعالیت آنتی‌اکسیدانی و ضد پیری قابل‌توجهی را نشان می‌دهند، به ویژه در سلول‌هایی که در معرض رویدادهای استرس‌زا هستند. این ویژگی‌ها می‌تواند نشان‌دهنده کاربرد احتمالی آنها به عنوان محصولات آرایشی برای بازسازی پوست باشد.

کلید واژه ها:تکثیر سلولی؛ آنتی اکسیدان ها؛ پیری سلولی؛ مولکول های فعال زیستی؛ پیری پوست؛ استرس اکسیداتیو

لطفا برای دانستن بیشتر اینجا را کلیک کنید

1. مقدمه

پوست گسترده ترین اندام بدن است و دارای عملکردهای متعددی است که از بافت های زیرین در برابر آسیب های شیمیایی و مکانیکی، اشعه ماوراء بنفش، رادیکال های آزاد و عفونت ها محافظت می کند. در تنظیم حرارت نقش دارد، عملکردهای غدد درون ریز و بیوشیمیایی دارد و ارگان کاربرد و/یا جذب بیگانه‌بیوتیک‌ها (داروها، سموم، لوازم آرایشی) است[1-3]. در درم، فیبرهای الاستین و فیبرهای کلاژن خاصیت ارتجاعی مناسب پوست را تضمین می کنند. سن، هورمون‌ها و اثرات مخرب اشعه ماوراء بنفش می‌تواند ضخامت و خاصیت ارتجاعی درم را کاهش دهد و در نتیجه چین و چروک و از بین رفتن رنگ پوست را به همراه داشته باشد[4،5]. قبلاً مشخص شده است که پیری پوست عملکرد مانع پوست را به خطر می اندازد و در نتیجه ظاهری خشک و مستعد ابتلا به متجاوزان محیطی می شود [6]. گونه‌های فعال اکسیژن (ROS)، که در نتیجه از دست دادن الکترون‌ها در طول متابولیسم هوازی یا پس از قرار گرفتن در معرض عوامل محیطی ایجاد می‌شوند، گونه‌های ناپایداری هستند که می‌توانند به بیومولکول‌های مختلف آسیب بزنند [7،8]. برای مقابله با اثر آنها، دفاع آنتی اکسیدانی طبیعی در بدن قادر است ROS را در سطوح قابل قبول فیزیولوژیکی نگه دارد. در واقع، به نظر می رسد که ROS، اگر در مقادیر کنترل شده وجود داشته باشد، یک عمل فیزیولوژیکی نیز دارد و به عنوان مولکول سیگنال بین سلول ها عمل می کند [9،10].سیستانچ چنگیز خاناین عدم تعادل بین ROS و آنزیم های آنتی اکسیدانی، مانند کاتالاز، گلوتاتیون ردوکتاز، و سوپراکسید دیسموتاز، باعث آسیب به پروتئین ها، لیپیدها و DNA می شود [11]، بنابراین به طور منفی با مسیرهای سیگنال دهی درون سلولی کراتینوسیت ها و فیبروبلاست ها تداخل می کند و بیان MMP را تغییر می دهد. (متالوپروتئینازهای ماتریکس)، پروکلاژن، و سیتوکین های پیش التهابی [12،13]. ترکیبات فنلی مانند رسوراترول، هیدروکسی تیروزول و اپی گالوکاتچین{4}}گالات موجود در سبزیجات، میوه ها و مشتقات، مولکول های اصلی دفاعی در برابر قارچ ها، باکتری ها و ویروس ها هستند [14]. اثرات مفید پلی فنل ها - که به طور گسترده در شراب وجود دارد - در سال های اخیر توجه قابل توجهی را در صنعت داروسازی و آرایشی به خود جلب کرده است [15،16]. مصرف پلی فنل ممکن است اثرات محافظتی در بیماری های حاد و مزمن و در تنظیم متابولیسم و ​​تکثیر سلولی داشته باشد [17]. توسعه یک روش کارآمد واحد برای استخراج و تعیین خصوصیات ترکیبات فنلی دارای محدودیت‌های زیادی است که عمدتاً به دلیل تنوع ساختاری ترکیبات فنلی و تعامل آنها با سایر اجزای سلولی است. تکنیک‌های مدرن استخراج سبز و طیف‌سنجی جرمی با وضوح بالا (LC-ESI-LTQ-Orbitrap-MS) رویکردهای امیدوارکننده‌ای را برای مدیریت این مولکول‌های فعال زیستی نشان می‌دهند [20]. بنابراین، ما یک روش ارزان، انعطاف‌پذیر، قوی و کارآمد را مطالعه کردیم که به حذف بخش الکلی شراب‌ها، قابل استفاده به عنوان محصولات آرایشی، اجازه می‌دهد. اثرات متعدد سلامتی مرتبط با مصرف شراب برای مدت طولانی شناخته شده است، و به ویژه، محتوای بالای ترکیبات پلی فنولی آنتی اکسیدانی آن را در درمان بیماری های دارای استرس اکسیداتیو بالا مفید می کند.[21،22] کاربرد موضعی آنتی اکسیدان ها می تواند از سیستم آنتی اکسیدانی پوست در برابر استرس اکسیداتیو حمایت کند و از آن در برابر پیری طولانی مدت محافظت کند [23،24]. در این زمینه، در مقاله حاضر، ما با هدف ارزیابی اثرات آنتی اکسیدانی عصاره شراب قرمز و سفید در سلول های در معرض یک رویداد استرس زا قوی، به منظور مقابله با پیری سلولی، پیشنهاد گنجاندن احتمالی آنها در فرمولاسیون های موضعی مختلف با ضد پیری را بررسی کردیم. خواص، برای درمان پوست بالغ و آسیب دیده.

سیستانچ می تواند ضد پیری باشد

2. مواد و روشها

شراب های قرمز و سفید مورد استفاده در این مطالعه، Buio، با نام منشا کنترل شده، به دست آمده از انگور Carignano del Sulcis، تولید شده توسط Cantina Mesa، Sardegna، و Giunco، تولید شده توسط همان Cantina Mesa، به دست آمده از انگور Vermentino بودند.

برای آزمایش‌های آزمایشگاهی، فیبروبلاست‌های پوست انسان (HFF1) (ATCC، Manassas، VA، USA) در پاساژ 5 استفاده شد. سلول ها در حضور یک محیط رشد پایه، متشکل از محیط Eagle اصلاح شده Dulbecco (DMEM) (Life Technologies Grand Island، NY، ایالات متحده) همراه با 10 درصد سرم جنین گاو (FBS) (Life Technologies) رشد کردند. گراند آیلند، نیویورک، ایالات متحده آمریکا)، 200 میلی‌مولار ال-گلوتامین (یوروکلون، میلان، ایتالیا)، و 200 واحد بر میلی‌لیتر پنی سیلین - 0.1 میلی‌گرم در میلی‌لیتر استرپتومایسین (یوروکلون، میلان، ایتالیا). سلول ها در انکوباتورهای ترموستاتیک در دمای 37 درجه و 5 درصد (v/v)CO2 رشد کردند. 2.1. تهیه عصاره شراب: اسپری خشک کن

در طی مراحل اولیه تحقیق، ما روشی را برای حذف بخش الکلی شراب ها که برای سلول ها سمی است، مطالعه کردیم. یک خشک کن اسپری کوچک B{{0}} (BUCHIItalia srl، Cornaredo، ایتالیا) برای روش خشک کردن استفاده شد. در ابتدا مقدار 100 میلی لیتر شراب با دمای ورودی و خروجی (نیتروژن) به ترتیب 25 و 70 درجه خشک شد. نرخ جریان 15 درصد تعیین شد. پس از آن، یک بخش 100 میلی لیتری از شراب با 0.2 گرم صمغ زانتان و حداقل حجم آب لازم برای حل شدن صمغ اضافه شد. دمای ورودی و خروجی (نیتروژن) به ترتیب 135 و 70 درجه بود. نرخ جریان خوراک روی 12 درصد تنظیم شد.

2.2. تهیه عصاره شراب: روتاواپور

ما 500 گرم را دقیقاً تبخیر کردیم و شراب‌های قرمز و سفید را بوسیله Buchi Rotavapor卵R-10 (BUCHI Italia srl، Cornaredo، ایتالیا) در فلاسک‌های 500 میلی‌لیتری، با دمای 55 درجه، سرعت چرخش فلاسک برابر با 5 و شرایط خلاء وزن کردیم. برابر با 60 میلی متر جیوه در ابتدا، 2 نمونه شراب کاملا خشک آورده شد. سپس، ما آنها را تحت تبخیر کنترل شده، با زمان تعریف شده 20 دقیقه، برای حذف کسر الکلی قرار دادیم.

2.3. تجزیه و تحلیل HPLC

آنالیز کروماتوگرافی مایع-طیف‌سنجی جرمی (LC-MS) بر اساس D'Urso و همکاران انجام شد. （2020） 【25】 با تغییرات جزئی. به طور خلاصه، 5 میکرولیتر شراب قرمز و سفید قبل و بعد از تبخیر روتاپور با غلظت نهایی 1 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر (در هو) در یک سیستم کروماتوگرافی مایع تشکیل شده از Accela 6 چهارتایی تزریق شد{16}}{32} پمپ و نمونه‌بردار خودکار Accela، متصل به طیف‌سنج جرمی هیبریدی Trap-Orbitrap (LTQ-Orbitrap XL، Thermo Fisher Scientific، برمن، آلمان) با یونیزاسیون الکترواسپری (ESI). جداسازی کروماتوگرافی بر روی یک ستون C18 Moon (100×2.0 میلی متر، اندازه ذرات 5um؛ Phenomenex)، با استفاده از 0.1 درصد اسید فرمیک (حلال A) و 0.1 درصد اسید فرمیک (حلال B) H2O و CHSCN به عنوان فازهای شوینده انجام شد. گرادیان باینری زیر در 200 میکرولیتر در دقیقه∶ 0-35 دقیقه، 5 تا 95 درصد (B) و 35-40 دقیقه، ایزوکراتیک 95 درصد (B ESI پارامترهای منبع ESI به شرح زیر اعمال شد: ولتاژ مویرگی {{ 25}} V; ولتاژ عدسی لوله-176.47; دمای مویرگی 280 درجه؛ غلاف و جریان گاز کمکی (N2)، 15 و 5. گاز جارو 0; ولتاژ پاشش 5. طیف MS با اکتساب دامنه کامل پوشش دهنده m/z{34}} بدست آمد. برای مطالعات تکه تکه شدن، یک آزمایش اسکن وابسته به داده انجام شد و یون‌های پیش‌ساز مربوط به شدیدترین پیک‌ها در آنالیز LC-MS را انتخاب کرد. نرم افزار Xcalibur نسخه 2.1 برای کنترل ابزار، اکتساب داده ها و تجزیه و تحلیل داده ها استفاده شد.

2.4.MTT سنجش زنده ماندن

برای ارزیابی اثر سیتوتوکسیک احتمالی آنها، عصاره شراب قرمز و سفید بر روی HFFl در غلظت های مختلف (1{20}}0,200,300,400 و 500mg/mL) از 24 تا 72 ساعت در مجموع با استفاده از آزمون رنگ سنجی 3- آزمایش شدند. (4،5-دی متیل تیازول-2-یل)-2.5-دی فنیل تترازولیوم (MTT) (سیگما-آلدریچ، سنت لوئیس، MO، ایالات متحده). سلول های حیاتی توانستند این ترکیب را کاهش دهند و فورمازان تولید کردند که می توان آن را با اسپکتروفتومتر در طول موج 570 نانومتر تعیین کرد. HFF1 در غلظت 5000 سلول در چاهک در صفحات {18} چاه کاشته شد. سلول های مورد استفاده به عنوان شاهد تیمار نشده در تنها محیط رشد پایه رشد کردند. در پایان دوره جوجه کشی، محیط حاوی عصاره ها برداشته شد و 10 میکرولیتر MTTT با غلظت نهایی 0.65 میلی گرم در میلی لیتر به هر چاهک اضافه شد و به مدت 2 ساعت انکوبه شد.افزایش عمر cistancheپس از انکوباسیون، فورمازان در DMSO حل شد و جذب با قرائت اسپکتروفتومتری در 570 نانومتر (Akribis Scientific، Common Farm، Frog Ln، Knutsford WA16 OJG، بریتانیای کبیر) شناسایی شد. زنده ماندن سلول های کشت شده در حضور عصاره های مختلف به عنوان درصد زنده ماندن سلولی در مقایسه با کنترل تیمار نشده محاسبه شد: (سلول های تیمار شده با OD570) × 100 / (کنترل OD570).

(1)

2.5. فعالیت آنتی اکسیدانی

فعالیت آنتی اکسیدانی عصاره شراب با آزمایش فعالیت کاتالاز، آنزیمی که قادر به تجزیه پراکسید هیدروژن در آب و اکسیژن است، ارزیابی شد. سنجش رنگ سنجی مورد استفاده (کیت سنجش کاتالاز) (سیگما آلدریچ، سنت لوئیس، MO، ایالات متحده آمریکا) امکان ارزیابی فعالیت این آنزیم در سلول های تیمار شده با قرائت اسپکتروفتومتری را فراهم می کند. سلول ها با تیمار 1 ساعته با 100 میکرومولار پراکسید هیدروژن (H2O2) به پیری القا شدند و متعاقباً در حضور عصاره ها در غلظت های مختلف (10،{6}}،400 و 500 میلی گرم در میلی لیتر) به مدت 24،48 کشت داده شدند. ، و 72 ساعت سلول‌های مورد استفاده به‌عنوان کنترل مثبت استرس اکسیداتیو پس از قرار گرفتن در معرض H2 در محیط رشد پایه رشد کردند. سلول‌های مورد استفاده به‌عنوان شاهد در محیط رشد پایه به تنهایی، بدون مواجهه قبلی با H2O2 رشد کردند. در پایان زمان انکوباسیون، نمونه‌ها، چه تیمار شده و چه شاهد، با معرف‌های موجود در کیت در دمای اتاق به مدت 15 دقیقه انکوبه شدند تا رشد رنگ ارزیابی شود و جذب هر یک با قرائت اسپکتروفتومتری در 520 اندازه‌گیری شد. nm (Akribis Scientific، Common Farm، Frog Ln، Knutsford WA16 OJG، بریتانیای کبیر). فعالیت کاتالاز بر روی تعداد میکرومول های موجود در هر نمونه محاسبه شد و با فعالیت شاهد تیمار نشده مقایسه شد.

2.6. - سنجش پیری گالاکتوزیداز

از روش رنگ سنجی -گالاکتوزیداز (Cell Signaling، MA، USA) برای شناسایی سلول های پیر در فرهنگ استفاده شد. HFF1 در 24-صفحات چاهی، در حضور عصاره شراب سفید و قرمز، با غلظت 500 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر، در مجموع 72 ساعت رشد داده شد. سلول‌ها قبلاً با تیمار 1 ساعته با 100 میکرومولار پراکسید هیدروژن (H-O2) به پیری القا شدند. در پایان زمان انکوباسیون، محیط حاوی پراکسیدها حذف شد و محیط تازه حاوی کنسانتره‌های مطبوع به سلول‌ها اضافه شد. سلول های مورد استفاده به عنوان شاهد تیمار نشده در حضور محیط رشد به تنهایی، بدون مواجهه قبلی با H2O2 کشت داده شدند. در عوض، سلول‌هایی که از قبل با پراکسیدها تیمار شده بودند، به عنوان کنترل مثبت پیری، در محیط رشد طبیعی کشت داده شدند. پس از 72 ساعت درمان با عصاره ها، تمام سلول ها تثبیت شدند و با رنگ برای مشاهده در زیر میکروسکوپ نوری انکوبه شدند. 2.7.تحلیل آماری

تجزیه و تحلیل آماری با استفاده از بسته آماری برای نرم افزار علوم اجتماعی نسخه 13 (SPSInc، شیکاگو، IL، ایالات متحده آمریکا) انجام شد.cistanche nzآزمایش ها 2 بار با 3 تکرار فنی برای هر تیمار انجام شد. توزیع واریانس هر گروه با مجموع رتبه‌ای Kruskal-Wallis و آزمون رتبه‌بندی علامت‌دار Wilcoxon با فرض یک مقدار p ارزیابی شد.<0.05 as="" statistically="">

3. نتایج

3.1. استخراج شراب توسط روتاواپور کیفیت استخراج را بهبود می بخشد و پروفایل های فنلی شراب ها را حفظ می کند.

اولین تلاش برای به دست آوردن عصاره شراب توسط یک خشک کن اسپری انجام شد که یک تکنیک سریع و ساده مناسب برای حذف کسر الکلی از شراب ها بود. به هر حال عصاره به‌دست‌آمده برای محدوده ما مناسب نبود، بنابراین تبخیر ساده و ارزان‌تر در خلاء برای به دست آوردن نمونه برای آنالیز بیولوژیکی و شیمیایی در نظر گرفته شد. شروع از 500 گرم شراب و کار در دمای 55 درجه، پس از 20 دقیقه، 262 گرم عصاره بازیابی شد.

به منظور تشخیص هر گونه خرابی پلی فنل های موجود در شراب در طول مرحله تبخیر، نمونه ها قبل و بعد از تیمار تحت آنالیز کروماتوگرافی مایع قرار گرفتند. شکل 1 و 2 نمایه های LC-ESI-LTQ-Orbitrap MS شراب های قرمز و سفید را قبل و بعد از تبخیر نشان می دهد. اکتساب داده ها در حالت یونیزاسیون منفی انجام شد. مشخص شد که حالت یونیزاسیون منفی انتخابی تر است و اجازه می دهد تا حساسیت بیشتری برای ترکیبات فنلی بدست آوریم. 33 ترکیب فنلی در نمونه های شراب قرمز و 26 ترکیب در نمونه های شراب سفید شناسایی شده است (جدول 1 و 2). اثر انگشت وجود اسیدهای فنولیک، کاتچین ها و پروآنتوسیانیدین های مرتبط، استیلبن ها و گلیکوزیدهای فلاونوئید را در نمونه ها نشان داد. پروفیل های شراب قرمز قبل و بعد از تبخیر تفاوت های کمی را نشان داد (شکل 1). همانطور که انتظار می رفت، کروماتوگرام های شراب قرمز در مقایسه با شراب سفید شلوغ تر بودند، به این معنی که شراب قرمز حاوی ترکیبات پلی فنول بیشتری نسبت به شراب سفید بود. (شکل 2). از نظر کیفی، نمونه‌های خام و عصاره شراب متناظر معادل بودند.

3.2. عصاره شراب باعث بهبود زنده ماندن سلول ها و پاسخ آنتی اکسیدانی می شود

سنجش MIT غیر سمی بودن عصاره های شراب را برای تمام غلظت های آزمایش شده (شکل 3) و زمان قرار گرفتن در معرض، حفظ زنده ماندن سلول در مقایسه با سلول های تیمار نشده کنترل نشان داد. تنها برای غلظت‌های بالاتر (400 و 500 میلی‌گرم در میلی‌لیتر عصاره‌های شراب سفید و 500 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر عصاره شراب قرمز)، سلول‌ها پس از 24 ساعت (پانل A) و 48 ساعت (پانل B) به طور قابل‌توجهی کاهش زنده‌مانی سلولی را نشان دادند. کنترل سلول های درمان نشده سلول‌های تیمار شده با عصاره‌های مختلف نیز فعالیت آنتی‌اکسیدانی بهتری نشان دادند، فعالیت کاتالاز را در تجزیه H-O2 در اکسیژن و آب تحریک می‌کردند و سلول‌ها را از آسیب‌های ناشی از استرس اکسیداتیو محافظت می‌کردند (شکل 4). بهبود فعالیت آنتی اکسیدانی در سلول های تیمار شده، در مقایسه با گروه شاهد، پس از 24 ساعت درمان، به ویژه برای غلظت های بالاتر (500 میلی گرم در میلی لیتر) (شکل 4A) قابل مشاهده بود، که در 48 ساعت به اوج خود رسید، که از نظر آماری برای غلظت های بالاتر معنی دار بود. شکل 4B) و سپس پس از 72 ساعت تثبیت شد (شکل 4C).

3.3. عصاره شراب با وجود قرار گرفتن در معرض یک رویداد شدید استرس زا با پیری سلولی مقابله می کند.

شکل 5 فعالیت گالاکتوزیداز را در شرایط مختلف رشد نشان می دهد. سلول‌های کشت‌شده در حضور دو عصاره (سفید و قرمز با غلظت 500 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر) کاهش واضحی را در تعداد سلول‌های آبی مثبت نشان دادند، و بنابراین، در مقایسه با سلول‌های شاهد تیمار نشده کشت‌شده در حضور تنها سلول‌های آبی، پیر شدند. محیط رشد (Ctrl) و سلول های در معرض H2O2 بدون عصاره (Ctrl H2O2).

4. بحث

پلی فنول ها فراوان ترین مولکول های فعال زیستی در شراب هستند که اخیراً در زمینه کاربردهای آرایشی مورد توجه قرار گرفته اند [26]. پلی فنول ها گروهی از ترکیبات هستند که به طور گسترده در گیاهان یافت می شوند که از نظر ساختاری بسیار متفاوت هستند اما مسئول خواص ارگانولپتیکی و تغذیه ای غذاها و گیاهان هستند [14]. آنها همچنین تأثیر مثبتی دارند و از سرطان، بیماری های قلبی عروقی، دیابت، پوکی استخوان و بیماری های عصبی محافظت می کنند [27-29]. سایر نویسندگان قبلاً خواص آنها را برای مقابله با استرس اکسیداتیو و التهاب توصیف کردند [30]. به طور خاص، اثر پیشگیرانه شناخته شده آترواسکلروز به فعالیت آنتی اکسیدانی کلسترول LDL بستگی دارد، که اکسیداسیون آن منجر به جذب گلبول های سفید خون و به دنبال آن تشکیل پلاک آتروماتوز می شود [31،32]. در این زمینه، شراب اخیراً به عنوان یکی از بهترین راه‌ها برای جلوگیری از عفونت روده ظاهر شده است که فعالیت ضد ویروسی و ضد باکتریایی را در برابر میکروارگانیسم‌های گرم مثبت و گرم منفی مانند سالمونلوز، شیگلوز، کولی‌باسیلوز، استافیلوکوک و استرپتوکوک نشان می‌دهد [334] .

رسوراترول به عنوان یکی از موثرترین آنتی اکسیدان های موجود در شراب در نظر گرفته می شود که با مهار فعال شدن تیروزیناز از پوست در برابر رادیکال های آزاد محافظت می کند و روند پیری را به تاخیر می اندازد [35]. علاوه بر این، بر تولید گلیکوزامینوگلیکان‌ها تأثیر می‌گذارد که توزیع مجدد آب در درم را تسهیل و تنظیم می‌کند، تعادل آن را بازیابی می‌کند و منجر به هیدراتاسیون پایدار می‌شود [36]. علاوه بر این، رسوراترول چرخه های سلولی، آپوپتوز و پیری را تعدیل می کند و اثرات محافظتی در برابر آسیب اکسیداتیو DNA نشان می دهد[37]. اسید گالیک و تمام مشتقات آن به عنوان مهمترین اسیدهای فنولیک در نظر گرفته می شوند، با فعالیت مهار رادیکال آزاد بالا، قادر به تداخل با مسیرهای سیگنال دهی سلولی و آپوپتوز سلول های سرطانی هستند [38]. فلاونوئیدها و آنتوسیانین ها فعالیت آنتی اکسیدانی قابل توجهی دارند.اندازه آلت تناسلی سیستانچبه دلیل توانایی بارز خود در کاهش تکثیر سلول های سرطانی و محافظت از بیماری های قلبی عروقی، چاقی و دیابت به خوبی شناخته شده است [39،40]. علاوه بر این، آنها همچنین در تعدیل عملکردهای عصبی و پیشگیری از بیماری های مرتبط با افزایش سن نقش دارند [41]. یک روش استخراج کارآمد به منظور حفظ پایداری ترکیبات فنلی از اهمیت حیاتی برخوردار است [42]. در این زمینه، در مقاله حاضر، ما اجزای دو نوع عصاره شراب به دست آمده تحت تبخیر خلاء را برای تولید کنسانتره بدون الکل ارزیابی کردیم. برای اطمینان از اینکه فرآیند تبخیر بر کیفیت و کمیت شراب تأثیر نمی‌گذارد، پروفایل‌های شیمیایی نمونه‌های شراب قرمز و سفید آنالیز و با نمونه‌های بعد از تبخیر مقایسه شدند. تجزیه و تحلیل اثر انگشت نمونه‌ها وجود مقادیر زیادی از اسیدهای فنولیک، کاتچین‌ها و پروآنتوسیانیدین‌های مرتبط، استیل‌بن‌ها و گلیکوزیدهای فلاونوئیدی را نشان داد (شکل‌های 1 و 2)، که به‌عنوان ماده خام برای آماده‌سازی موضعی آرایشی مفید هستند [43]. اثر درمانی بالقوه آنها در بسیاری از اختلالات پوستی، از جمله زخم های عفونی و تابش اشعه ماوراء بنفش، احتمالاً به عملکرد هم افزایی این مولکول های زیست فعال مربوط می شود [4]. این ترکیبات می توانند آنزیم های مولد ROS مانند گزانتین اکسیداز و نیکوتین آمید آدنین دی نوکلئوتید فسفات (NADPH) اکسیداز را مهار کنند [45،46].

استرس اکسیداتیو توسط بیش از حد گونه‌های فعال اکسیژن ایجاد می‌شود. ROS که از از دست دادن الکترون‌ها در طول متابولیسم هوازی یا پس از قرار گرفتن در معرض عوامل محیطی به دست می‌آید، گونه‌های ناپایداری هستند که می‌توانند تغییراتی در ساختار و عملکرد بیومولکول‌ها ایجاد کنند [47،48] دفاع آنتی‌اکسیدانی طبیعی. در حفظ ROS در سطوح مناسب فیزیولوژیکی نقش دارند [49،50]. هر گونه تغییر در این فرآیند می تواند بر پیری پوست تأثیر منفی بگذارد [51،52]. در این زمینه، بسیاری از عصاره های طبیعی به دلیل اثرات مفیدشان در تحریک التیام زخم و پاسخ های آنتی اکسیدانی در پوست آسیب دیده پس از قرار گرفتن در معرض استرس محیطی به خوبی شناخته شده اند [53-56]. اکنون مشخص شده است که پیری پوست منجر به اختلال در عملکرد سد می شود و در نتیجه ظاهری خشک و مستعد ابتلا به متجاوزان محیطی می شود، بنابراین، نشان دهنده خطر بالاتری برای اختلالات پوستی است [57،58]. علاوه بر این، بهبود زخم یک فرآیند پیچیده و پویا برای ترمیم، بازیابی یکپارچگی پوست و هموستاز بافتی است [59]. استفاده موضعی از مولکول های آنتی اکسیدان فعال می تواند از سیستم آنتی اکسیدانی پوست در برابر استرس اکسیداتیو حمایت کند، بنابراین از آن در برابر پیری طولانی مدت محافظت می کند [24،60]. به خوبی شناخته شده است که مولکول های فعال زیستی، که به عنوان آنتی اکسیدان عمل می کنند، می توانند با فرآیندهای پیری و پیری سلول مقابله کنند. پیری سلولی مرحله پایدار توقف رشد سلولی است که با ترشح عوامل ترشحی مرتبط با فنوتیپ‌های پیری (SASP) مشخص می‌شود[61]. SASP می تواند سلول های مجاور را تعدیل کند و منجر به فعال شدن آبشارهای سیگنال دهی درگیر در فرآیندهای پاتولوژیک مختلف شود [62]. سلول های پیر با کوتاه شدن تلومرها و یک محیط ثابت پیش التهابی مرتبط هستند که باعث تمایز سلولی می شود [63]. در این زمینه، اخیراً نشان داده‌ایم که Myrtus Communis L. با تعدیل پرتوانی سلول‌های بنیادی و پاسخ التهابی، خواص آنتی‌اکسیدانی و بازسازی‌کننده مهمی از خود نشان می‌دهد[64]. عصاره های این گیاه، غنی از پلی فنول ها، قادر به محافظت از سلول ها در برابر استرس اکسیداتیو، القای بیان ترانس کریپتاز معکوس تلومراز (TERT) و مقابله با پیری زودرس است [65].

نویسندگان دیگر قبلاً نشان داده بودند که مداخلات درمانی به سمت سلول‌های پیر می‌تواند با مقابله با التهاب مزمن و القای ترمیم زخم، سلامتی را بازیابی کند[66]. با این وجود، سایر نویسندگان همچنین نشان دادند که کورستین، فلاونوئیدها و اسید گالیک می‌توانند از آسیب‌های ناشی از فعالیت مهار مستقیم رادیکال‌های آزاد جلوگیری کنند و از سیستم‌های سم‌زدایی سلولی مانند سوپراکسید دیسموتاز، کاتالاز و گلوتاتیون پراکسیداز حمایت کنند [67]. کاتالاز یکی از مهم ترین آنزیم های دخیل در سم زدایی ROS است که اختلال در تنظیم آن منجر به بسیاری از بیماری های دژنراتیو مرتبط با سن می شود[68،69].پودر سیستانچبه خوبی شناخته شده است که کمبود کاتالاز با آسیب کلیوی دیابتی تسریع شده از طریق اختلال عملکرد پراکسیزومال [70] مرتبط است، بنابراین فرآیندهای بیولوژیکی از جمله تکثیر سلولی، تمایز، مهاجرت و آپوپتوز را تحت تأثیر قرار می دهد [71]. در مقاله حاضر، ما نشان می‌دهیم که عصاره‌های شراب قرمز و سفید، در غلظت‌های مختلف، قادر به مقابله با پیری سلولی ناشی از استرس اکسیداتیو، تعدیل فعالیت کاتالاز، آنزیم اصلی دخیل در تنظیم استرس اکسیداتیو هستند (شکل 4) و -گالاکتوزیداز (شکل 5). نتایج ما نشان می‌دهد که عصاره‌های شراب قادر به مقابله با تجمع ROS هستند، فعالیت کاتالاز را پس از درمان H-O2 افزایش می‌دهند، بنابراین از بیماری‌های مزمن پوستی جلوگیری می‌کنند و تعداد سلول‌های پیر را کاهش می‌دهند. در مجموع، یافته‌های ما نشان می‌دهد که این عصاره‌های شراب که تحت تبخیر خلاء به‌دست می‌آیند، ممکن است ماده خام جالبی برای فرمولاسیون محصولات آرایشی جدید برای مقابله با پیری پوست باشد. مطالعات بیشتر در شرایط in vitro و in vivo نیز روی ترکیبات منفرد ممکن است برای ترجمه این نتایج در کاربردهای آینده برای بازسازی بافت مفید باشد.

5. نتیجه گیری ها

پیری پوست یک فرآیند پویا و چند عاملی است که در اثر قرار گرفتن در معرض اشعه ماوراء بنفش و تشکیل گونه‌های اکسیژن فعال مرتبط ایجاد می‌شود. تنها دفاع شناخته شده در برابر پیری عکس، فیلترهای ضد آفتاب و آنتی اکسیدان ها هستند، به ویژه در ترکیب، برای کاهش و خنثی کردن تولید رادیکال های آزاد. در مقاله حاضر، ما توجه را بر پتانسیل آنتی اکسیدانی عصاره های شراب متمرکز کردیم، که فلاونوئیدهای آن قادر به مقابله با پیری هستند، به ویژه هنگامی که روی سلول هایی که در معرض یک رویداد استرس زا مشخصی قرار دارند، اعمال می شود. به لطف یک روش استخراج جدید، ما بخش الکلی را بدون تغییر کیفی اجزای آنتی اکسیدانی فلاونوئید حذف کردیم. از نقطه نظر اقتصادی، واضح است که شراب از چندین محصول جانبی گرانتر است. به خوبی شناخته شده است که در صنعت آرایشی و بهداشتی نیز از چندین ماده خام گرانتر از شراب استفاده می شود. بنابراین عصاره شراب قرمز و سفید ممکن است یک ماده خام جالب برای فرمولاسیون محصولات آرایشی جدید برای مقابله با پیری پوست و بهبود بازسازی بافت باشد.

این مقاله از Antioxidants 2021, 10, 227 استخراج شده است. https://doi.org/10.3390/antiox10020227 https://www.mdpi.com/journal/antioxidants