قسمت 3: نقش های متمایز برای دامنه دی استیلاز HDAC3 در هیپوکامپ و قشر پیش پیشانی داخلی در شکل گیری و انقراض حافظه

برای اطلاعات بیشتر:ali.ma@wecistanche.com

لطفاً اینجا را کلیک کنید تا به قسمت 2 برگردید

کلیکسیستانچ و سیستانچ برای بهبود حافظه

قدردانی

با تشکر ویژه از دکتر نوربرت جی فورتین برای کمک او در تجزیه و تحلیل آماری.

منابع مالی: این کار توسط کمک های مالی موسسه ملی سوء مصرف مواد مخدر و موسسه ملی سلامت روان (DA025922, DA036984, MH101491) به کمک های مالی MAW و NIDA و موسسه ملی پیری (NIA) (F32 DA043998 and T32 AG{{{ 6}}) به YA.

منابع

Alenghat T، Meyers K، Mullican SE، Leitner K، Adeniji-Adele A، Avila J، Bucan M، Ahima RS، Kaestner KH، Lazar MA. کورپرسور گیرنده هسته ای و هیستون داستیلاز 3 بر فیزیولوژی متابولیک شبانه روزی حاکم هستند. طبیعت. 2008; 456:997-1000. [PubMed: 19037247]

بالدراس اول، رودریگز-اورتیز سی جی، سالگادو-توندا پی، چاوز-هورتادو جی، مک گاو جی ال، برمودز-راتونی اف. تلفیق شناخت شی و زمینهحافظهنواحی مختلف لوب تمپورال را درگیر می کند. یاد بگیرید Mem. 2008; 15:618-624. [PubMed: 18723431]

Baltan S، Bachleda A، Morrison RS، Murphy SP. بیان هیستون داستیلازها در بخش های سلولی مغز موش و اثرات ایسکمی Transl Stroke Res. 2011; 2:411-423. [PubMed: 21966324]

Barrett RM، Malvaez M، Kramar E، Matheos DP، Arrizon A، Cabrera SM، Lynch G، Greene RW، Wood MA. ناک اوت کانونی هیپوکامپ CBP بر تغییرات خاص هیستون، تقویت طولانی مدت و طولانی مدت تأثیر می گذارد.حافظه. نوروسیکوفارماکولوژی. 2011; 36:1545-1556. [PubMed: 21508930]

Bowers ME، Xia B، Carreiro S، Ressler KJ. مهارکننده HDAC کلاس I RGFP963 تجمیع انقراض ترس را افزایش می دهد. یاد بگیرید Mem. 2015; 22:225-231. [PubMed: 25776040]

Broide RS، Redwine JM، Aftahi N، Young W، Bloom FE، Winrow CJ. توزیع هیستون داستیلاز 1-11 در مغز موش. جی مول نوروسی. 2007; 31:47-58. [PubMed: 17416969]

Burger C، Gorbatyuk OS، Velardo MJ، Peden CS، Williams P، Zolotukhin S، Reier PJ، Mandel RJ، Muzyczka N. ناقل‌های ویروسی AAV نوترکیب شبه‌تایپ‌شده با کپسیدهای ویروسی از سروتیپ‌های 1، 2 و 5، کارایی دیفرانسیل را پس از سلول نشان می‌دهند. تحویل به مناطق مختلف سیستم عصبی مرکزی. Mol Ther. 2004; 10:302-317. [PubMed: 15294177]

Dere E، Huston JP، De Souza Silva MA. فارماکولوژی، نوروآناتومی و نوروژنتیک تشخیص شی یک بار آزمایشی در جوندگان Neurosci Biobehav Rev. 2007; 31:673-704. [PubMed: 17368764]

Ennaceur A. تشخیص شی یکباره در موش و موش: مسائل روش شناختی و نظری. Behav Brain Res. 2010; 215:244-254. [PubMed: 20060020]

Fanselow MS، Dong HW. آیا هیپوکامپ پشتی و شکمی از نظر عملکردی ساختارهای متفاوتی دارند؟ نورون. 2010; 65:7-19. [PubMed: 20152109]

Fischle W، Dequiedt F، Hendzel MJ، Guenther MG، Lazar MA، Voelter W، Verdin E. فعالیت آنزیمی مرتبط با HDAC های کلاس II وابسته به یک کمپلکس چند پروتئینی حاوی HDAC3 و SMRT/N-CoR است. سلول مول. 2002; 9:45-57. [PubMed: 11804585]

Fuchs RA، Evans KA، Ledford CC، Parker MP، Case JM، Mehta RH، رجوع کنید به RE. نقش قشر جلوی پیشانی پشتی، آمیگدال قاعده‌ای جانبی و هیپوکامپ پشتی در بازگرداندن محتوایی جستجوی کوکائین در موش‌ها. نوروسیکوفارماکولوژی. 2005; 30:296-309. [PubMed: 15483559]

Fuchs RA، Eaddy JL، Su ZI، Bell GH. فعل و انفعالات آمیگدال قاعده‌ای جانبی با هیپوکامپ پشتی و قشر جلوی پیشانی پشتی داخلی، بازگرداندن جوی کوکائین را در موش‌ها تنظیم می‌کند. Eur J Neurosci. 2007; 26:487-498. [PubMed: 17650119]

گراف جی، تسای ال اچ. استیلاسیون هیستون: حافظه مولکولی روی کروماتین. Nat Rev Neurosci. 2013; 14:97-111. [PubMed: 23324667]

Guenther MG، Barak O، Lazar MA. کورپرسورهای SMRT و N-CoR کوفاکتورهای فعال کننده هیستون داستیلاز 3 هستند. Mol Cell Biol. 2001; 21:6091-6101. [PubMed: 11509652]

Guenther MG، Yu J، Kao GD، Yen TJ، Lazar MA. مونتاژ کمپلکس سرکوب SMRT-histone deacetylase 3 به کمپلکس حلقه TCP-1 نیاز دارد. Genes Dev. 2002; 16:3130–3135. [PubMed: 12502735]

Haberland M، Montgomery RL، Olson EN. نقش های متعدد هیستون داستیلازها در توسعه و فیزیولوژی: پیامدهای بیماری و درمان Nat Rev Genet. 2009; 10:32-42. [PubMed: 19065135]

Hartig J، Stefanko DP، Multani ML، Figueroa DX، McQuown SC، Wood MA. مهار HDAC در طولانی مدت وابسته به هیپوکامپ را تعدیل می کندحافظهبرای مکان یابی شی به روشی وابسته به CBP. یاد بگیرید Mem. 2011; 18:71-79. [PubMed: 21224411]

Haettig J، Sun Y، Wood MA، Xu X. غیرفعال سازی خاص نوع سلولی CA1 هیپوکامپ، تشخیص شی وابسته به مکان را در موش مختل می کند. یاد بگیرید Mem. 2013; 20:139-146. [PubMed: 23418393]

ایزاک دبلیو.ال، ننمن ای جی، نیسواندر جی، لندر تی، باردو ام تی. ضایعات قشر جلوی مغز به طور متفاوت ترجیح مکان شرطی شده تقویت شده با کوکائین را مختل می کنند اما بیزاری از طعم مشروط را ندارند. رفتار عصبی. 1989; 103:345-355. [PubMed: 2706078]

Jenuwein T، Allis CD. ترجمه کد هیستون علوم پایه. 2001; 293:1074-1080. [PubMed: 11498575]

Kalivas PW، McFarland K. مدارهای مغزی و بازگرداندن رفتار جستجوی کوکائین. روان فارماکولوژی (برل). 2003; 168:44-56. [PubMed: 12652346]

کوجیما ان، وانگ جی، مانسوی آی‌ام، گرانت اس‌جی، میفورد ام، کندل ای‌آر. نجات اختلال در تقویت طولانی مدت در موش های فاقد fyn با معرفی تراریخته Fyn. Proc Natl Acad Sci US A. 1997; 94:4761-4765. [PubMed: 9114065]

Kouzarides T. تغییرات کروماتین و عملکرد آنها. سلول. 2007; 128:693-705. [PubMed: 17320507]

Krasnova IN، Li SM، Wood WH، McCoy MT، Prabhu VV، Becker KG، Katz JL، Cadet JL. پاسخ‌های رونویسی به اثرات تقویت‌کننده کوکائین در هیپوکامپ و قشر موش صحرایی ژن رفتار مغز. 2008; 7:193-202. [PubMed: 17640290]

Kwapis JL، Alaghband Y، López AJ، White AO، Campbell RR، Dang RT، Rhee D، Tran AV، Carl AE، Matheos DP، Wood MA. زمینه و ترس شنوایی به طور متفاوتی توسط فعالیت HDAC3 در زیر هسته های جانبی و پایه آمیگدال تنظیم می شوند. نوروسیکوفارماکولوژی. 2017; 42:1284-1294. [PubMed: 27924874]

Lahm A، Paolini C، Pallaoro M، Nardi MC، Jones P، Neddermann P، Sambucini S، Bottomley MJ، Lo Surdo P، Carfi A، Koch U، De Francesco R، Steinkuhler C، Gallinari P. کشف فعالیت کاتالیزوری پنهان مهره داران کلاس IIa هیستون داستیلازها. Proc Natl Acad Sci US A. 2007; 104:17335–17340. [PubMed: 17956988]

LaLumiere RT، Niehoff KE، Kalivas PW. قشر infralimbic تثبیت انقراض پس از خود تجویز کوکائین را تنظیم می کند. یاد بگیرید Mem. 2010; 17:168-175. [PubMed: 20332188]

Laurent V، Westbrook RF. غیرفعال شدن قشر infralimbic اما نه prelimbic، تثبیت و بازیابی انقراض ترس را مختل می کند. یاد بگیرید Mem. 2009; 16:520-529. [PubMed: 19706835]

Lebrón K، Milad MR، Quirk GJ. یادآوری تأخیر انقراض ترس در موش های صحرایی با ضایعات قشر جلوی مغزی داخلی شکمی. یاد بگیرید Mem. 2004; 11:544-548. [PubMed: 15466306]

Levenson JM، Sweatt JD. مکانیسم های اپی ژنتیک: موضوعی رایج در مهره داران و بی مهرگانحافظهتشکیل. Cell Mol Life Sci. 2006; 63:1009-1016. [PubMed: 16596331]

لوپز AJ، Kramar E، Matheos DP، White AO، Kwapis J، Vogel-Ciernia A، Sakata K، Espinoza M، Wood MA. اثرات مدولاسیون DREADD ویژه مروج بر انعطاف پذیری سیناپسی هیپوکامپ وتشکیل حافظه. J Neurosci. 2016; 36:3588-3599. [PubMed: 27013687]

Malvaez M، Sanchis-Segura C، Vo D، Lattal KM، Wood MA. تعدیل اصلاح کروماتین، انقراض ترجیح مکان شرطی شده ناشی از کوکائین را تسهیل می کند. روانپزشکی بیول. 2010; 67:36-43. [PubMed: 19765687]

Malvaez M، Mhillaj E، Matheos DP، Palmery M، Wood MA. CBP در هسته اکومبنس استیلاسیون هیستون ناشی از کوکائین را تنظیم می کند و برای رفتارهای مرتبط با کوکائین بسیار مهم است. J Neurosci. 2011; 31:16941-16948. [PubMed: 22114264]

Narvaez M، McQuown SC، Rogge GA، استرآبادی M، Jacques V، Carreiro S، Rusche JR، Wood MA. مهارکننده انتخابی HDAC{0}}نابودی رفتار جستجوی کوکائین را به روشی مداوم افزایش می‌دهد. Proc Natl Acad Sci US A. 2013; 110:2647-2652. [PubMed: 23297220]

مارن اس. نوروبیولوژی ترس پاولویی تا شرایط. Annu Rev Neurosci. 2001; 24:897-931. [PubMed: 11520922]

Marie-Claire C، Laurendeau I، Canestrelli C، Courtin C، Vidaud M، Roques B، Noble F. Fos اما نه Cart (رونوشت تنظیم شده با کوکائین و آمفتامین) توسط چندین داروی سوء مصرف بیش از حد بیان می شود: یک مطالعه مقایسه ای با استفاده از زمان واقعی واکنش زنجیره ای پلیمراز کمی در مغز موش نوروسی لت. 2003; 345:77-80. [PubMed: 12821175]

McQuown SC، Wood MA. HDAC3 و فرضیه لنت ترمز مولکولی Neurobiol Learn Mem. 2011; 96:27-34. [PubMed: 21521655]

McQuown SC، Barrett RM، Matheos DP، Post RJ، Rogge GA، Alenghat T، Mullican SE، Jones S، Rusche JR، Lazar MA، Wood MA. HDAC3 یک تنظیم کننده منفی مهم استتشکیل حافظه بلند مدت. J Neurosci. 2011; 31:764-774. [PubMed: 21228185]

Meyers RA، Zavala AR، Neisewander JL. ضایعات پشتی، اما نه شکمی، هیپوکامپ، تهویه محل کوکائین را مختل می کنند. گزارش عصبی 2003; 14:2127-2131. [PubMed: 14600510]

Mullican SE، Gaddis CA، Alenghat T، Nair MG، Giacomin PR، Everett LJ، Feng D، Steger DJ، Schug J، Artis D، Lazar MA. هیستون دی استیلاز 3 یک ترمز اپی ژنومیک در فعال سازی جایگزین ماکروفاژ است. Genes Dev. 2011; 25:2480-2488. [PubMed: 22156208]

Mumby DG. دیدگاه‌های مربوط به حافظه تشخیص شی به دنبال آسیب هیپوکامپ: درس‌هایی از مطالعات در موش‌ها Behav Brain Res. 2001; 127:159-181. [PubMed: 11718890]

Parkinson JA، Olmstead MC، Burns LH، Robbins TW، Everitt BJ. تفکیک در اثرات ضایعات هسته و پوسته هسته اکومبنس بر رفتار رویکرد پاولوی اشتها آور و تقویت تقویت شرطی و فعالیت حرکتی توسط D-آمفتامین. J Neurosci. 1999; 19:2401-2411. [PubMed: 10066290]

Peixoto L، Abel T. نقش استیلاسیون هیستون در شکل گیری حافظه و اختلالات شناختی. نوروسیکوفارماکولوژی. 2013; 38:62-76. [PubMed: 22669172]

پنی جی، تسای ال اچ. هیستون داستیلازها در حافظه و شناخت سیگنال علمی 2014; 7: re12. [PubMed: 25492968]

پیترز جی، لالومیر RT، کالیواس پی دبلیو. قشر جلوی پیشانی infralimbic مسئول مهار جستجوی کوکائین در موش های خاموش شده است. J Neurosci. 2008; 28:6046-6053. [PubMed: 18524910]

پیترز جی، کالیواس پی دبلیو، کویرک جی. مدارهای خاموشی برای ترس و اعتیاد در قشر جلوی مغز همپوشانی دارند. یاد بگیرید Mem. 2009; 16:279-288. [PubMed: 19380710]

Pfaffl MW. یک مدل ریاضی جدید برای کمی سازی نسبی در RT-PCR بلادرنگ Nucleic Acids Res. 2001; 29:e45. [PubMed: 11328886]

Pfaffl MW، Georgieva TM، Georgiev IP، Ontsouka E، Hageleit M، Blum JW. تعیین کمیت آنی RT-PCR فاکتور رشد شبه انسولین (IGF){3}}، گیرنده IGF-1، گیرنده IGF-2، گیرنده IGF-2، گیرنده انسولین، هورمون رشد گیرنده، پروتئین های متصل شونده به IGF 1، ​​2 و 3 در گونه گاو. Domest Anim Endocrinol. 2002; 22:91-102. [PubMed: 11900967]

Quirk GJ، Russo GK، Barron JL، Lebron K. نقش قشر پیش پیشانی شکمی در بازیابی ترس خاموش شده. J Neurosci. 2000; 20:6225-6231. [PubMed: 10934272]

Quirk GJ، Garcia R، Gonzalez-Lima F. مکانیسم‌های پیش پیشانی در انقراض ترس شرطی. روانپزشکی بیول. 2006; 60:337-343. [PubMed: 16712801]

Rescorla RA. مقایسه میزان تغییرات انجمنی در حین اکتساب و انقراض. J Exp Psychol Anim Behav Process. 2002; 28:406-415. [PubMed: 12395498]

Rogge GA، Singh H، Dang R، Wood MA. HDAC3 تنظیم کننده منفی تشکیل حافظه مرتبط با زمینه کوکائین است. J Neurosci. 2013; 33:6623-6632. [PubMed: 23575859]

Roozendaal B، Hernandez A، Cabrera SM، Hagewoud R، Malvaez M، Stefanko DP، Haettig J، Wood MA. فعالیت گلوکوکورتیکوئید مرتبط با غشاء برای تعدیل حافظه بلند مدت از طریق اصلاح کروماتین ضروری است. J Neurosci. 2010; 30:5037–5046. [PubMed: 20371824]

Rumbaugh G، Sillivan SE، Ozkan ED، Rojas CS، Hubbs CR، Aceti M، Kilgore M، Kudugunti S، Puthanveettil SV، Sweatt JD، Rusche J، Miller CA. گزینش دارویی در کلاس I هیستون دی استیلازها تأثیرات را بر عملکرد سیناپسی و نجات حافظه پیش بینی می کند. نوروسیکوفارماکولوژی. 2015; 40:2307-2316. [PubMed: 25837283]

Sando R 3rd, Gounko N, Pieraut S, Liao L, Yates J 3rd, Maximov A. HDAC4 یک برنامه رونویسی ضروری برای شکل پذیری سیناپسی و حافظه را کنترل می کند. سلول. 2012; 151:821-834. [PubMed: 23141539]

Sierra-Mercado D Jr، Corcoran KA، Lebron-Milad K، Quirk GJ. غیرفعال شدن قشر پیش پیشانی شکمی، بیان ترس شرطی را کاهش می دهد و یادآوری بعدی انقراض را مختل می کند. Eur J Neurosci. 2006; 24:1751-1758. [PubMed: 17004939]

Stafford JM، Raybuck JD، Ryabinin AE، Lattal KM. افزایش استیلاسیون هیستون در شبکه هیپوکامپ-اینفرالیمبیک انقراض ترس را افزایش می دهد. روانپزشکی بیول. 2012; 72:25-33. [PubMed: 22290116]

Stefanko DP، Barrett RM، Ly AR، Reolon GK، Wood MA. مدولاسیون حافظه بلند مدت برای تشخیص اشیا از طریق مهار HDAC. Proc Natl Acad Sci US A. 2009; 106:9447-9452. [PubMed: 19470462]

Sun Z، Feng D، Fang B، Mullican SE، You SH، Lim HW، Everett LJ، Nabel CS، Li Y، Selvakumaran V، Won KJ، Lazar MA. عملکرد HDAC3 مستقل از داستیلاز در رونویسی و متابولیسم به یک مهارکننده گیرنده هسته ای نیاز دارد. سلول مول. 2013; 52:769-782. [PubMed: 24268577]

Tzschentke TM، اشمیت WJ. ضایعات گسسته اسید کینولینیک در قشر پیش‌پیشانی میانی پیش‌لیمبیک موش بر روی کوکائین و MK{1}} تأثیر می‌گذارد، اما بر پاداش و فعال‌سازی روانی حرکتی ناشی از مورفین و آمفتامین که با الگوی شرطی‌سازی ترجیح مکان اندازه‌گیری می‌شود، تأثیر نمی‌گذارد. Behav Brain Res. 1998; 97:115-127. [PubMed: 9867237]

Tzschentke TM، اشمیت WJ. ناهمگنی عملکردی قشر پیش پیشانی داخلی موش: اثرات ضایعات اختصاصی زیر ناحیه ای مجزا بر ترجیح مکان شرطی شده و حساسیت رفتاری ناشی از دارو Eur J Neurosci. 1999; 11:4099–4109. [PubMed: 10583498]

Vogel-Ciernia A، Matheos DP، Barrett RM، Kramar EA، Azzawi S، Chen Y، Magnan CN، Zeller M، Sylvain A، Haettig J، Jia Y، Tran A، Dang R، Post RJ، Chabrier M، Babayan AH، Wu JI، Crabtree GR، Baldi P، Baram TZ، Lynch G، Wood MA. زیرواحد تنظیمی کروماتین BAF53b ویژه نورون برای انعطاف پذیری و حافظه سیناپسی ضروری است. Nat Neurosci. 2013; 16:552-561. [PubMed: 23525042]

Vogel-Ciernia A، Wood MA. بازسازی کروماتین خاص نورون: یک حلقه گمشده در مکانیسم های اپی ژنتیکی که زمینه ساز اختلالات انعطاف پذیری سیناپسی، حافظه و ناتوانی ذهنی است. نوروفارماکولوژی. 2014; 80:18-27. [PubMed: 24140580]

White AO، Kramar EA، López AJ، Kwapis JL، Doan J، Saldana D، Davatolhagh MF، Alaghband Y، Blurton-Jones M، Matheos DP، Wood MA. BDNF انعطاف پذیری سیناپسی وابسته به BAF53b و حافظه مرتبط با کوکائین را در هسته اکومبنس نجات می دهد. Nat Commun. 2016; 7:11725. [PubMed: 27226355]

Winters BD، Saksida LM، Bussey TJ. حافظه تشخیص شی: مکانیسم های عصبی زیستی رمزگذاری، تثبیت و بازیابی Neurosci Biobehav Rev. 2008; 32:1055-1070. [PubMed: 18499253]

Zhang J، Kalkum M، Chait BT، Roeder RG. مجموعه هسته‌پرسور گیرنده هسته‌ای N-CoR-HDAC3 مسیر JNK را از طریق زیرواحد انتگرال GPS2 مهار می‌کند. سلول مول. 2002; 9:611-623. [PubMed: 11931768]

نکات برجسته

◄ مسدود کردن فعالیت HDAC3 deacetylase در هیپوکامپ پشتی باعث افزایش حافظه بلندمدت مکان شیء می شود اما هیچ تأثیری بر شکل گیری حافظه مرتبط با کوکائین نداشت. ◄ اختلال در حوزه HDAC3 deacetylase در قشر prelimbic هیچ تاثیری بر تشکیل حافظه مرتبط با کوکائین نداشت. ◄ مسدود کردن فعالیت HDAC3 deacetylase در قشر infralimbic هیچ تأثیری بر انقراض نداشت. ◄ بر هم زدن فعالیت HDAC3 deacetylase در هیپوکامپ پشتی منجر به انقراض آسان شد.

شکل 1.

ویروس جهش یافته نقطه منفی غالب (HDAC3(Y298H)-v5 به طور موثر در هیپوکامپ پشتی بیان می شود. (A) اپی توپ V5 به ویروس جهش یافته نقطه ای اضافه شد. (B) تصویر ایمونوفلورسانس نماینده نشان دهنده بیان برچسب اپی توپ V5 (سبز) در هیپوکامپ پشتی (DH) پس از انفوزیون AAV-HDAC3(Y298H)-v5. رنگ‌آمیزی V5 با ویروس کنترل AAV-EV مشاهده نشد. سلول‌ها با DAPI (آبی) رنگ‌آمیزی شدند. (C) mRNA V5 به طور قابل‌توجهی در DH افزایش یافت. موش‌های تزریق شده با AAV- HDAC3(Y298H)-v5، AAV-EV n {{20}}، HDAC3(Y298H)-v5 n=4. (D) HDAC3 نیز به طور قابل‌توجهی در موش DH با AAV-HDAC(Y298H)-v5 در مقایسه با کنترل‌های AAV-EV، AV-EV n=6، ​​HDAC3(Y298H)-v5 n=6 تزریق شد. *p <0.05.

شکل 2.

مسدود کردن فعالیت HDAC3 در DH باعث افزایش حافظه برای مکان شی (OLM) شد، اما نه برای تشخیص شی (ORM). (الف) موش‌ها آموزش زیرآستانه (3 دقیقه) را در محیطی با دو جسم یکسان دریافت کردند و 24 ساعت بعد یک آزمایش حفظ را دریافت کردند که در آن یک شی به مکان جدید منتقل می‌شود. شماتیک روش‌هایی را برای B و C توصیف می‌کند. (B) موش‌هایی که به AAV-HDAC3(Y298H)-v5 داده شده‌اند، 24 ساعت پس از آموزش ترجیح قابل‌توجهی برای مکان شی جدید در مقایسه با کنترل‌های EV نشان دادند، AAV-EV n {{1{31}} }}، HDAC3(Y298H)-v5 n=6. (C) گروه ها در زمان اکتشاف کل دو شی تفاوتی نداشتند. (د) موش‌ها آموزش زیرآستانه (3 دقیقه) را در محیطی با دو شیء یکسان دریافت کردند و 24 ساعت بعد یک آزمایش حفظ را دریافت کردند که در آن یک شی با یک شی جدید (ORM)، AAV-EV n=9 جایگزین شد، HDAC3(Y298H)-v5 n=7. شماتیک روش‌هایی را برای E و F توصیف می‌کند. (E) موش‌های کنترل AAV-EV یا AAV-HDAC3 (Y298H) -v5 اولویت قابل‌توجهی برای شی جدید نشان ندادند. (F) گروه ها در کل زمان اکتشاف دو جسم تفاوتی نداشتند. *p <>

شکل 3.

مسدود کردن فعالیت HDAC3 در هیپوکامپ پشتی هیچ تاثیری بر تشکیل حافظه CPP ناشی از کوکائین ندارد. (الف) شماتیک رویه کوکائین-CPP. (B) بیان کوکائین- CPP با میانگین امتیاز CPP (زمان صرف شده در جفت کوکائین (CS به علاوه) منهای جفت با نمک (CS-) ± sem) نشان داده شده است. در دوز تهویه‌کننده کوکائین 5 میلی‌گرم/کیلوگرم، موش‌های AAV-HDAC3(Y298H)-v5 امتیاز CPP مشابهی با کنترل‌های EV در طول پس‌آزمون نشان دادند، AAV-EV n=15، HDAC3(Y298H)-v5 n {{{ 19}}.

شکل 4.

حذف ژن هموزیگوت کانونی Hdac3 در هیپوکامپ پشتی هیچ تاثیری بر تشکیل حافظه CPP ناشی از کوکائین ندارد. (الف) شماتیک رویه کوکائین-CPP. (B) بیان کوکائین-CPP با میانگین امتیاز CPP (زمان صرف شده در جفت کوکائین (CS به علاوه) منهای جفت با نمک (CS-) ± sem) نشان داده شده است. در دوز تهویه‌کننده کوکائین 5 میلی‌گرم/کیلوگرم، موش‌های Hdac3flox/flox امتیاز CPP مشابهی با کنترل‌های Hdac3 plus/pl در طول پس‌آزمون نشان دادند. (C) تصویر ایمونوفلورسانس نشان دهنده بیان HDAC3 (سبز) در هیپوکامپ پشتی پس از تزریق AAV2.1 Cre تزریق شده در موش های Hdac3 plus/plus و Hdac3flox/flox. سلول ها با DAPI (آبی) رنگ آمیزی شدند. (د) کمی رنگ‌آمیزی ایمنی تأیید کرد که HDAC3 در موش‌های Hdac3flox/flox در مقایسه با کنترل‌های Hdac3 plus/plus، Hdac3 plus / plus n=12، Hdac3flox/flox n=11 به طور قابل‌توجهی کاهش یافت. *p <>

شکل 5.

مسدود کردن فعالیت HDAC3 در قشر prelimbic (PrL) هیچ تاثیری بر تشکیل حافظه CPP ناشی از کوکائین ندارد. (الف) شماتیک رویه کوکائین-CPP. (B) بیان کوکائین- CPP با میانگین امتیاز CPP (زمان صرف شده در جفت کوکائین (CS به علاوه) منهای جفت با نمک (CS-) ± sem) نشان داده شده است. در دوز تهویه‌کننده کوکائین 5 میلی‌گرم/کیلوگرم، موش‌های AAV-HDAC3(Y298H)-v5 امتیاز CPP مشابهی با کنترل‌های EV در طول پس‌آزمون نشان دادند، AAV-EV n=12، HDAC3(Y298H)-v5 n {{{ 19}}. (C) تصویر ایمونوفلورسانس نماینده نشان دهنده بیان برچسب اپی توپ V5 (سبز) پس از تزریق AAV-HDAC3 (Y298H) -v5 که PrL را هدف قرار می دهد. هیچ رنگ آمیزی V5 با ویروس کنترل AAV-EV مشاهده نشد. سلول‌ها با DAPI (آبی) و نورون‌ها با NeuroTrace (قرمز) رنگ‌آمیزی شدند. بیان V5 تا حد زیادی محدود به ناحیه prelimbic قشر پیش پیشانی داخلی بود. (د) تزریق ویروسی هدفمند در PrL. مناطق سایه دار تصاویر اطلس موش نشان دهنده گسترش تزریق ویروسی است.

شکل 6.

مسدود کردن فعالیت HDAC3 در قشر infralimbic (IL) هیچ تاثیری بر انقراض حافظه CPP ناشی از کوکائین ندارد. (الف) شماتیک رویه کوکائین-CPP. (B) بیان کوکائین- CPP با میانگین امتیاز CPP (زمان صرف شده در جفت کوکائین (CS به علاوه) منهای جفت با نمک (CS-) ± sem) نشان داده شده است. حیوانات در ابتدا با 20 میلی گرم بر کیلوگرم کوکائین آموزش دیدند. متعاقباً، حیوانات تزریقات ویروسی intra-IL AAV-EV یا AAV-HDAC3 (Y298H) -v5 را دریافت کردند و حافظه انقراض مورد بررسی قرار گرفت. موش‌های AAV-HDAC3(Y298H)-v5 امتیاز CPP مشابهی را با کنترل‌های EV در طول پس‌آزمون 2-5، AAV-EV n=17، HDAC3(Y298H)- v5 n=16 نشان دادند. (C) تصویر ایمونوفلورسانس نماینده نشان دهنده بیان برچسب اپی توپ V5 (سبز) پس از تزریق AAV-HDAC3 (Y298H) -v5 که IL را هدف قرار می دهد. هیچ رنگ آمیزی V5 با ویروس کنترل AAV-EV مشاهده نشد. سلول‌ها با DAPI (آبی) و نورون‌ها با NeuroTrace (قرمز) رنگ‌آمیزی شدند. بیان V5 تا حد زیادی محدود به ناحیه infralimbic قشر پیش پیشانی داخلی بود. (د) تزریق ویروسی هدفمند در IL. مناطق سایه‌دار تصاویر اطلس موش، میزان تزریق ویروسی را نشان می‌دهد.