پیشرفت های اخیر در کشف آنتی ژن کنه و توسعه واکسن ضد کنه قسمت 2

2.4. کاندیداهای آنتی ژن مرتبط با Malpighian

در موجودات زنده، 50 -نوکلئوتیدازها یک گروه گسترده از آنزیم‌ها در گونه‌های مختلف کنه هستند. شباهت‌های قابل‌توجهی بین 50 -نوکلئوتیداز کنه‌ها و آنزیم‌های موجود در مهره‌داران وجود دارد، و طیف وسیعی از عملکردهای احتمالی توسط این آنزیم‌ها انجام می‌شود، از جمله دخالت در مسیرهای نجات پورین [108]. در میان کنه ها، این گروه از آنزیم ها در بسیاری از بافت های مختلف مانند روده، غدد بزاقی و تخمدان ها یافت می شوند.

با این حال، آنها در لوله های Malpighian، به ویژه در سطح لوله های Malpighian و سلول های تخمدان فراوان هستند. ویژگی های 50 -نوکلئوتیدازها نشان می دهد که آنها یک هدف بالقوه برای آنتی بادی ها هستند [109]. هوپ و همکاران نوکلئوتیدازها را برای مشارکت احتمالی آنها در ایمن سازی میزبان بررسی کردند و دریافتند که تزریق نوکلئوتیداز نوترکیب به تنهایی در گوسفند باعث افزایش قابل توجهی در آنتی بادی های ضد نوکلئوزیداز می شود که نشان می دهد آنها ممکن است آنتی ژن خوبی برای توسعه یک واکسن [104].

با این حال، هنگامی که همان گروه از محققان عملکرد خود را به عنوان آنتی ژن در گاو تجزیه و تحلیل کردند، هیچ افزایشی در سطح آنتی بادی مشاهده نشد. بنابراین، 50 -نوکلئوتیدازها بیشتر به عنوان آنتی ژن برای توسعه واکسن مورد بررسی قرار نگرفتند. با این حال، مطالعه اخیر انجام شده توسط گروه دیگری از محققان نشان داده است که سطح تولید 50 -نوکلئوتیداز/آپیرازی در O. erraticus پس از تغذیه افزایش می‌یابد [110]. علاوه بر این، آنها پیشنهاد کردند که مسدود کردن عملکرد آپیراز توسط ایمن سازی میزبان با پروتئین آپیراز نوترکیب می تواند تغذیه کنه های O. moubata را به شدت کاهش دهد، و نشان می دهد که 50 -نوکلئوتیدازها/آپیرازها به طور بالقوه آنتی ژن های کاندید امیدوار کننده ای برای ایجاد یک ضد کنه هستند. واکسن [110،111].

نوکلئوتیداز آنزیمی است که می تواند واکنش هیدرولیز نوکلئوتیدها را کاتالیز کند و نوکلئوتیدها را به نوکلئوزیدها و فسفات های معدنی تجزیه کند. نوکلئوتیدها عملکردهای بیولوژیکی مهمی در موجودات دارند، از جمله ساخت، ذخیره و انتقال DNA و RNA، انتقال انرژی و انتقال سیگنال سلولی. بنابراین نوکلئوتیدازها نقش مهمی در موجودات زنده دارند. ایمنی توانایی بدن برای مقاومت در برابر عوامل بیماری زا در محیط خارجی است که شامل انواع فرآیندهای بیولوژیکی از جمله گسترش، تمایز و تنظیم سلول های ایمنی است. چندین مطالعه نشان داده اند که نوکلئوتیدازها می توانند بر عملکرد سیستم ایمنی و در نتیجه ایمنی تأثیر بگذارند.

به عنوان مثال، برخی از انواع نوکلئوتیدازها با ایجاد بیماری های خودایمنی مرتبط هستند. علاوه بر این، نوکلئوتیداز همچنین می تواند بر تکثیر و فعال شدن سلول های ایمنی تأثیر بگذارد و عملکرد سلول های ایمنی را ارتقا دهد. بنابراین رابطه خاصی بین نوکلئوتیداز و ایمنی وجود دارد. از این نظر باید به بهبود ایمنی توجه زیادی داشته باشیم. سیستانچ تاثیر بسزایی در بهبود ایمنی دارد. خاکستر گوشت حاوی انواع مواد فعال بیولوژیکی مانند پلی ساکاریدها، دو قارچ، هوانگ لی و غیره است که این مواد می توانند سیستم ایمنی بدن را تحریک کنند. انواع مختلف سلول ها در سیستم، فعالیت ایمنی خود را افزایش می دهند.

روی مزایای cistanche tubulosa کلیک کنید

2.5. کاندیداهای آنتی ژن مرتبط با سیمان

سیمان کنه مخلوطی از گلیکول و لیپوپروتئین است که مدت کوتاهی پس از اتصال به میزبان از طریق بزاق کنه به میزبان ترشح می شود و منبع ارزشمندی از آنتی ژن های مشتق شده از کنه برای توسعه واکسن است [112]. علاوه بر چسباندن قطعات دهان کنه به پوست میزبان [113]، سیمان کنه به عنوان یک انبار برای B. burgdorferi sensu lato (sl) و ویروس آنسفالیت منتقله از کنه عمل می کند [114,115]. تاکنون آنتی ژن های مختلفی از سیمان کنه شناسایی و مشخص شده است که در کنترل آلودگی کنه و بیماری های منتقله از کنه نیز موثر بوده است.

ساختارهای کوتاه شده 64P (64TRPs)، یک پروتئین سیمانی 15 کیلو دالتون که توسط غدد بزاقی Rhipicephalus آپاندیکولاتوس ترشح می‌شود، با هدف قرار دادن آنتی‌ژن‌ها در روده میانی و غدد بزاقی در غدد بزاقی در بزرگسالان، محافظت متقاطع در برابر Rhipicephalus sanguineus و Ixodes ricinus نشان داد. واکسیناسیون میزبانهای تازه کنه با 64P نوترکیب به طور قابل توجهی تعداد هجوم پوره و کنه بالغ را کاهش داد، که منجر به 48 درصد پوره و تا 70 درصد مرگ و میر بالغین شد، با برخی اثرات بر وزن ریزش و توده تخم نیز [116].

از این نتایج به نظر می رسد که این پروتئین یک آنتی ژن واکسن با طیف وسیع است و در برابر مراحل بالغ و نابالغ گونه های مختلف کنه از جمله I. ricinus موثر است [100]. این آنتی ژن سیمانی یک عملکرد دوگانه (i) به عنوان یک واکسن در مدل های همستر، خوکچه هندی و خرگوش با اختلال در اتصال و تغذیه و (ii) با واکنش متقابل با آنتی ژن های "مخفی" روده میانی انجام می دهد که در نهایت باعث مرگ کنه های جوشیده می شود. [100,117]. این آنتی ژن نه تنها تیتر آنتی بادی را در پاسخ به آلودگی کنه افزایش می دهد، بلکه با بافت های مختلف کنه نیز واکنش متقاطع دارد. بنابراین، مزایای هر دو آنتی ژن "پنهان" و "در معرض" را ترکیب می کند [118].

3. انواع واکسن های ضد کنه

کنه ها شایع ترین انگل های بندپایانی هستند که از انسان و دام تغذیه می کنند و بیماری ها را انتقال می دهند [19]. بیماری های زئونوز بیش از 60 درصد از کل بیماری های عفونی را تشکیل می دهند که انسان را تحت تاثیر قرار می دهد و تخمین زده می شود که 22.8 درصد از این عفونت ها توسط ناقلان کنه منتقل می شود [131]. همچنین خسارات اقتصادی هنگفتی برای دامداران در سرتاسر جهان به دلیل بیماری‌های ناقل کنه‌ها که دام‌های آن‌ها را تحت تأثیر قرار می‌دهند، وجود دارد [132,133].

بنابراین، کنترل کنه ها برای کاهش بار اجتماعی و اقتصادی مهم است. کنترل کنه ها چالش برانگیز شده است، زیرا کنه ها می توانند در برابر کنه کش های تجاری موجود مقاومت ایجاد کنند [134-136]. به دلیل نگرانی‌ها در مورد ایمنی کنه‌کش‌ها برای کارگران، غذا و محیط‌زیست و افزایش هزینه‌های مرتبط با کشف، توسعه و بازاریابی کنه‌کش‌ها، فناوری‌های نوآورانه کنترل محیط‌زیست مورد نیاز است. واکسن‌ها نسبت به کنه‌کش‌ها مزایای زیادی دارند زیرا عموماً غیرسمی، غیرآلاینده و ارزان‌تر در مقایسه با مواد شیمیایی هستند.

با این حال، آنها تمایل زیادی به گونه های خاص دارند. صنعت داروسازی می‌تواند نقش مهمی در حمایت از تحقیقات برای ایجاد واکسنی داشته باشد که بتواند حداکثر محافظت را برای میزبان فراهم کند و در برابر گونه‌های مختلف کنه مؤثر باشد [133,137]. برنامه های تحقیقاتی واکسن در کشورهای مختلف در حال انجام است و بقیه این مقاله بر پیشرفت فناوری های جدید واکسن و آنهایی که در حال حاضر در دسترس هستند تمرکز خواهد کرد (شکل 2).

مانند کاربردهای شیمیایی، مقاومت واکسن را نمی توان نادیده گرفت و واکسن های موجود را می توان با استفاده از روش های توالی یابی و شبیه سازی برای جداسازی آنتی ژن های جدید یا تغییر آنتی ژن های موجود برای بازیابی اثربخشی آنها اصلاح کرد. همچنین می‌توان دو یا چند آنتی‌ژن نامرتبط را در یک محصول واکسن گنجاند تا خطر ایجاد مقاومت به هر آنتی ژن یا عامل تعیین‌کننده آنتی‌ژنی کاهش یابد.

3.1. واکسن های ضد کنه مبتنی بر DNA

اختراع واکسن DNA و استفاده از آن نگرانی های ایمنی را ایجاد کرده است. به ویژه امکان انتقال پایدار ماده ژنتیکی (DNA) به سلول های سوماتیک یا حتی ژرم که ممکن است منجر به تغییر بیان ژن و جهش شود. یک وکتور لوسیفراز کدکننده پلاسمید خارج کروموزومی به مدت بیش از 19 ماه پس از درمان عضلانی در عضله اسکلتی قابل تشخیص بود (138). علاوه بر این، تزریق عضلانی پس از الکتروپوریشن تا حد زیادی میزان انتقال کلی را افزایش داد. ادغام کروموزومی DNA ناقل در مکان‌های تصادفی با افزایش نرخ انتقال مرتبط است (139). بر اساس این مطالعات، فرکانس ادغام بسیار کمتر از تعداد جهش‌های ژنی خود به خودی بود.

با این حال، منام و همکاران. دریافتند که اکثر DNA پلاسمید تزریق شده به ماهیچه های اسکلتی جوندگان مختلف در محل تزریق باقی مانده است. بخش‌های جزئی نیز در غدد جنسی شناسایی شدند، اما در ژنوم ادغام نشدند (140). استفاده مکرر عضلانی یک وکتور گزارشگر کدکننده لوسیفراز در پستانداران منجر به بیان گزارشگر طولانی مدت شد اما هیچ آنتی بادی ضد DNA را القا نکرد (141,142). با وجود این، باید توجه داشت که نگرانی‌های ایمنی فوق‌الذکر و اضافی مربوط به واکسن‌های DNA باید در مورد ترجمه آنها به عمل بالینی در نظر گرفته شود (143).

در طول دو دهه گذشته، گروه‌های مختلفی از محققان بر روی ساخت واکسن DNA برای کنترل آلودگی کنه‌ها تمرکز کرده‌اند و تاکنون، چندین واکسن DNA برای ایمن‌سازی میزبان معرفی شده‌اند (130،144،145). واکسن‌های DNA، که با واکسن‌های سنتی مبتنی بر پروتئین متفاوت هستند، زیرا بر پایه پلاسمیدهای باکتریایی هستند که پروتئین‌های آنتی ژنی را کد می‌کنند و رونویسی توسط پروموترهای یوکاریوتی کارآمد کنترل می‌شود، دارای مزایای طراحی ساده، پایداری بالا و تجویز ایمن هستند (143). تصور می شود که در واکسیناسیون DNA، مولکول های DNA پلاسمید تزریق شده به طور فعال وارد هسته می شوند و مادام العمر به عنوان DNA اپیزومی در آنجا باقی می مانند و تا زمانی که سلول زنده است، آنتی ژن های محافظ را به طور مداوم تولید می کنند (146). مشکل تقویت مکرر برای حفظ آن یک تیتر آنتی‌بادی بالا را می‌توان با سنتز، پردازش و ارائه آنتی‌ژن‌ها به سلول‌های T در داخل بدن در حیوانات واکسینه‌شده با DNA حل کرد.

علاوه بر این، از آنجایی که یک واکسن DNA فقط حاوی DNA پلاسمید است و هیچ پروتئین آلوده کننده ای ندارد، به نظر می رسد که دریافت واکسیناسیون های متعدد یا مکرر منجر به واکنش ایمنی به DNA ناقل نشود (147). آنتی ژن بیان شده می تواند توسط MHC کلاس I و کمپلکس هایی ارائه شود که می توانند سلول های CD4 پلاس و CD8 پلاس T را القا کنند و به ترتیب پاسخ های ایمنی سلولی و هومورال را تحریک کنند (148).

شواهد از مطالعه De Rose و همکاران بدست آمد. [144]، که در آن گوسفندان آمیخته مرینو با استفاده از واکسن DNA در برابر B. micro plus ایمن شدند. هنگامی که یک پلاسمید حاوی یک توالی ژنی با طول کامل Bm86 به تنهایی یا با پلاسمید حامل ژن‌های گوسفند برای سیتوکین‌ها، فاکتور محرک کلنی گرانولوسیت-ماکروفاژ (GM-CSF) یا اینترلوکین (IL) تجویز شد. -1بتا سطح نسبتاً پایینی از محافظت را در برابر آلودگی بعدی کنه ایجاد کرد. علاوه بر این، واکسیناسیون همزمان با پلاسمیدهای Bm86 و GM-CSF منجر به کاهش معنی‌دار آماری در باروری کنه‌ها شد. در همه گروه‌هایی که واکسن Bm{10}} DNA تزریق می‌شد، تیتر آنتی‌بادی علیه Bm{11}} پایین بود. علاوه بر این، سطح پایین تحریک آنتی ژن اختصاصی لنفوسیت های خون محیطی در این گروه ها رخ داد. با این حال، واکسیناسیون DNA منجر به یک پاسخ آنتی بادی قوی متعاقب به دنبال یک تزریق پروتئین نوترکیب Bm86 در ادجوانت شد. با این حال، به نظر می رسد تولید آنتی بادی ها نسبت به دو واکسیناسیون با پروتئین های نوترکیب کمی کمتر موثر باشد.

علاوه بر این، بسیاری از محققان دیگر کارآیی آنتی ژن های مبتنی بر DNA را برای ایمن سازی میزبان در برابر هجوم کنه ها بررسی کردند. به عنوان مثال، سید و همکاران. [149] DNA را از تخم‌های Argas persicus استخراج کرد و از آن برای ایمن‌سازی جوجه‌ها با دوزهای 200-800 میکروگرم DNA بر کیلوگرم وزن جوجه استفاده کرد. نتیجه حمایتی بود، زیرا زمانی که کنه ها در معرض جوجه ایمن شده با DNA قرار گرفتند، موفقیت تغذیه کنه ها 74.64 درصد (50 میکروگرم DNA/کیلوگرم وزن جوجه) و 89.39 درصد (100 میکروگرم DNA/کیلوگرم وزن جوجه) کاهش یافت. علاوه بر این، نویسندگان گزارش کردند که سرم جوجه های ایمن شده با DNA دارای فعالیت علیه پروتئین های روده A. precious است. با این حال، تجزیه و تحلیل بیشتر با استفاده از سایر گونه‌های کنه نشان داد که فعالیت سرمی به گونه خاص است. الگوی الکتروفورتیک سرم مرغ واکسینه شده سه باند پروتئینی جدید را نشان داد که فرض بر این بود که در توسعه دفاع ایمنی مرغ در برابر کنه ها نقش دارند [149]. پس از آن، بسیاری از مطالعات بر روی واکسیناسیون DNA آنتی ژن خاص متمرکز شدند. با این حال، سطح حفاظت خود را با انواع مختلف آنتی ژن متفاوت است. نشان داده شده است که موش‌های BALB/c با تزریق پلاسمید pBMC{14}}آنتی‌ژن کدکننده Bm86 در برابر Boophilus microplus مقاومت نشان دادند.

دوز بالاتری از تولید آنتی‌بادی Anti-Bm{2}} ناشی از واکسیناسیون و سطوح بالاتر اینترلوکین (IL) (IL-4، IL-5 و IL-12 (p40)) و سطح اینترفرون گاما (IFN-) در سرم موش های ایمن شده با pBMC2. موش‌هایی که با pBMC2 ایمن‌سازی شده‌اند، تحریک خاص آنتی‌ژنی سلول‌های طحال را با توجه به ادغام برمودئوکسی‌اوریدین و ترشح IFN g نشان دادند. استفاده از این واکسن در دام باعث تولید آنتی بادی شد، که نشان می‌دهد واکسیناسیون Bm{12}} DNA یک پاسخ ایمنی قوی در برابر B. micro plus [150] ایجاد می‌کند. مطالعه دیگری حفاظت ایمنی ناشی از پلاسمیدهای نوترکیب کد کننده پارامیوزین (Pmy) H. longicornis (pcDNA3.1(+)-Pmy) در خرگوش را ارزیابی کرد. خرگوش ها سطح بالایی از IgG را ایجاد کردند که نشان می دهد یک پاسخ ایمنی هومورال با واکسیناسیون القا می شود. برخی از کنه‌ها (31/27 درصد) که از خرگوش‌های واکسینه‌شده تغذیه می‌کردند مردند، در حالی که میانگین وزن چروکیدگی کنه‌های باقی‌مانده و تخم‌گذاری حشرات بالغ ماده به ترتیب 36 و 39 درصد کاهش یافت.

بنابراین، به نظر می‌رسد که واکسن Pmy DNA می‌تواند پاسخ ایمنی هومورال مؤثری را القا کند، اما تا حدی از خرگوش‌ها در برابر عفونت H. longicornis محافظت می‌کند [151]. جالب توجه است که یک واکسن DNA چند اپی توپی که هر دو اپی توپ CD4 پلاس و CD8 به علاوه لنفوسیت T سیتوتوکسیک را در خود جای داده بود، 100 درصد از گوسفندان را تحت شرایط آزمایشگاهی در برابر Ehrlichia ruminantium محافظت می کرد. با این حال، نتایج در شرایط مزرعه تکرار نشد. در این مطالعه، تجویز همزمان pLamp با MPL از طریق مسیر عضلانی، علاوه بر کاربرد موضعی، گوسفند را تا 60 درصد در برابر کنه ها با تحریک پاسخ سلول های T حافظه محافظت کرد [152].

چندین آنتی ژن دیگر، مانند Salp14 و لیپوکالین ها، به تنهایی یا در ترکیب با آنتی ژن های دیگر اخیراً به عنوان واکسن های DNA ارزیابی شده اند که بیشتر امید به ساخت واکسن DNA علیه کنه ها را فراهم می کند [130,153]. نشان داده شده است که واکسن salp14 DNA باعث ایجاد اریتم در محل نیش کنه پس از چالش کنه می شود [153]. به طور مشابه، یک واکسن لیپوکالین (LIP) شامل پلاسمید نوترکیب pcDNA3.{7}}HlLIP همولوگ LIP از H. longicornis (HlLIP) برای ایمن سازی یک میزبان خرگوش استفاده شد. اگرچه این کاربرد باعث ایجاد ایمنی هومورال میزبان و همچنین بر وزن انباشته شدن، تخمگذاری و جوجه کشی H. longicornis تأثیر می گذارد، کارایی بسیار پایین بود، که نشان می دهد این آنتی ژن برای واکسن ها مناسب نیست زیرا محافظت نسبی از میزبان را فراهم می کند [130]. ].

در نهایت، هدف اصلی از تولید واکسن DNA باید طراحی واکسن به گونه ای باشد که پاسخ ایمنی میزبان را نسبت به پاسخ Th2 قطبی کند، زیرا پاسخ ایمنی هومورال نقش عمده ای در ایمنی کنه ایفا می کند. در گاوهایی که با آنتی ژن های B. micro به علاوه روده میانی واکسینه شده بودند، سطوح IgG1 خاص، که توسط سلول های Th2 تعدیل می شوند، با محافظت در ارتباط بودند. این احتمال وجود دارد که اگر توالی سیگنال ترشحی به طور مناسب در پایین دست ژن هدف قرار گیرد، آنتی ژن هدف می تواند به قسمت خارج سلولی ترشح شود و پاسخ ایمنی هومورال بیشتری را القا کند. همچنین این احتمال وجود دارد که انتخاب سلول‌های Th2 در صورتی که همزمان با سایر ژن‌های تعدیل‌کننده ایمنی مانند IL4 و IL10 آلوده شوند، مطلوب باشد.

3.2. واکسن mRNA

در سال‌های اخیر، تلاش‌های زیادی برای کشف آنتی‌ژن‌های محافظ جدید صورت گرفته است که می‌تواند در ساخت واکسن ضد کنه، با پیشرفت‌های متعدد، استفاده شود. برای آزمایش اثربخشی واکسن کاندید، پروتئین‌های نوترکیب، صرف نظر از اینکه با سایر پروتئین‌ها یا ادجوانت‌ها مرتبط هستند یا نه، پلت فرم انتخابی برای آزمایش اثربخشی آنها از طریق استفاده از ارگانیسم‌های مدل بوده‌اند.

با توجه به سهولت تولید پلت فرم های واکسن DNA و mRNA، پیشرفت های قابل توجهی در استفاده از پلت فرم های واکسن ژنتیکی (DNA و mRNA) در سال های اخیر صورت گرفته است [130,145]. یک واکسن mRNA که کوکتلی از پروتئین‌های بزاق کنه را کد می‌کند، "ایمنی کنه" را در خوکچه هندی القا کرد، در نتیجه انتقال بورلیا بورگدورفری منتقله از کنه، عامل بیماری لایم (بورلیوز) را به‌طور چشمگیری کاهش داد. حتی اگر بسیاری از کاندیدهای آنتی ژن کنه نشان داده شده است که پاسخ های ایمنی را در میزبان ایجاد می کنند، هنوز امکان تکثیر ایمنی قوی کنه با استفاده از واکسیناسیون وجود ندارد. این احتمال وجود دارد که این ممکن است به این دلیل باشد که در مراحل مختلف تغذیه، ترکیب پروتئین های بزاقی در کنه ها ممکن است به صورت پویا تغییر کند، احتمالاً برای مدیریت تغییرات داخلی میزبان. این اطلاعات در یک مطالعه اخیر ارائه شده است که در آن گروهی از محققان ۱۹ پروتئین بزاقی کنه پا سیاه I. scapularis را شناسایی و به طور منطقی انتخاب کردند که ناقل رایج بیماری لایم در انسان است. آنها mRNA های اصلاح شده با نوکلئوزید را مهندسی کردند که این پروتئین ها را کد می کند.

برای تولید واکسن mRNA-LNP 19ISP (19 پروتئین بزاقی Ixodes)، این واکسن ها به مقدار مساوی در نانوذرات لیپیدی (LNPs) کپسوله شدند. برای ارزیابی تأثیر واکسن بر رفتار تغذیه I. scapularis، خوکچه‌های هندی سه بار در فواصل هفته‌ای سه بار واکسینه شدند که منجر به پاسخ‌های آنتی‌بادی قوی به حداقل ده آنتی ژن کدگذاری شده شد. در مرحله بعدی آزمایش، حیوانات با پوره های I. scapularis غیر عفونی به چالش کشیده شدند. حیواناتی که واکسینه شده بودند در عرض 24 ساعت دچار اریتم قابل توجهی شدند.

علاوه بر این، کنه‌ها روی حیواناتی که واکسینه شده بودند، تغذیه ضعیفی داشتند و تا 48 ساعت شروع به جدا شدن کردند، به طوری که 80 درصد کنه‌ها بعد از 96 ساعت از حیوانات واکسینه شده جدا شدند، در حالی که این رقم در حیواناتی که واکسینه نشده بودند، 20 درصد بود. برای بررسی بیشتر اینکه آیا تغییر رفتار تغذیه بر انتقال پاتوژن ها تأثیر می گذارد، پوره های I. scapularis آلوده به B. burgdorferi بر روی خوکچه های هندی که با 19ISP یا با واکسن mRNA کد کننده لوسیفراز کرم شب تاب واکسینه شده بودند قرار گرفتند. هر یک از این حیوانات سه کنه آلوده دریافت کردند. با توجه به اینکه انسان احتمالاً کنه‌ای را که باعث خارش ناشی از اریتم می‌شود را از بین می‌برد، کنه‌ها به محض ظاهر شدن قرمزی به روشی دوسوکور جدا شدند.

در مجموع 46 درصد از حیوانات شاهد سه هفته پس از چالش با B. burgdorferi آلوده شدند، در حالی که هیچ یک از حیوانات واکسینه شده با این پاتوژن آلوده نشدند. تجزیه و تحلیل بیان ژن نشان داده است که واکسن چندین مسیر ایمنی را فعال می کند، از جمله گیرنده های سلول های T و B، کموکاین، FcεRI، و سیگنال دهی IL{1}}، و همچنین سمیت با واسطه سلول های کشنده طبیعی. علاوه بر این، تجزیه و تحلیل محل گزش همچنین نشان داد که واکسن پاسخ سلول های T را القا کرده است [154].

به طور همزمان، همان گروه از محققان از Salp14 به عنوان یک آنتی ژن مدل برای بررسی ایمنی کنه با استفاده از نانوذرات لیپیدی mRNA (LNPs)، DNA پلاسمید، یا پلت فرم های پروتئین نوترکیب استفاده کردند [153]. در این مطالعه، واکسیناسیون شامل نانوذرات لیپیدی mRNA اصلاح‌شده با نوکلئوزید کدکننده (mRNA-LNPs) Salp14 به صورت داخل پوستی با دو بار افزایش هر 4 هفته انجام شد. توسعه آنتی‌بادی‌های اختصاصی سالپ{6}}در بین استراتژی‌های مختلف ایمن‌سازی مقایسه شد. ایمن‌سازی mRNA Salp14 بستری بود که قوی‌ترین پاسخ هومورال را در مقایسه با واکسیناسیون DNA و پروتئین ایجاد کرد. خوکچه های هندی واکسینه شده با mRNA ژن salp14 قوی ترین و شدیدترین اریتم مشاهده شده در محل گزش را در تمام گروه های ایمن سازی ایجاد کردند. با این حال، بر میزان جدا شدن کنه تأثیری نداشت و وزن انباشتگی را تغییر نداد [153]. واکسن کنه باید اریتم را القا کند تا موثر باشد، و یک رویکرد برای تغییر جنبه های بعدی تغذیه کنه، از جمله چسبندگی و گرفتگی، استفاده از واکسنی است که حاوی چندین آنتی ژن کنه بزاقی است [154].

بنابراین، به نظر می رسد که ایمن سازی با mRNALNP salp14 اصلاح شده با نوکلئوزید، که می تواند به عنوان یک واکسن بالقوه مورد استفاده قرار گیرد، می تواند منجر به تیتر آنتی بادی بالاتر و درجه قرمزی زودتر و بالاتر نسبت به ایمن سازی با DNA یا پروتئین شود، که نشان می دهد Salp14 می تواند کاندید خوبی برای یک واکسن باشد، چه به تنهایی با بهینه سازی ها و چه در ترکیب با سایر آنتی ژن های کاندید [154].

به طور کلی، به نظر می رسد که واکسن mRNA چند ظرفیتی ممکن است توانایی ایجاد مقاومت کنه در حیوانات آزمایشگاهی مانند خوکچه هندی و جلوگیری از آلودگی کنه و عفونت منتقله از کنه را داشته باشد، احتمالاً با محدود کردن مدت زمان تغذیه کنه از میزبان خود. همچنین پیشنهاد شده است که فرمول mRNA-LNP که تحویل آهسته و مداوم آنتی ژن را امکان پذیر می کند، ممکن است گزش کنه طبیعی را تقلید کند. اگر بتوان این استراتژی را به انسان ترجمه کرد، این اولین واکسنی خواهد بود که مستقیماً یک پاتوژن یا هدف میکروبی را هدف قرار نمی دهد، بلکه ناقل آن را هدف قرار می دهد. علاوه بر این، از آنجایی که واکسن‌های ضد کنه هنوز برای کمک به انسان در پیشگیری از انتقال بیماری‌های منتقله از کنه ساخته می‌شوند، استراتژی ایمن‌سازی و انتخاب آنتی‌ژن‌ها برای ایمن‌سازی باید در نظر گرفته شود.

3.3. واکسن های مبتنی بر پروتئین

برخی از واکسن های مبتنی بر پروتئین به صورت تجاری در دسترس و موثر هستند. یک برنامه واکسن برای اولین بار در دهه 1970 آغاز شد، زمانی که محققان شروع به آزمایش با دو نوع مختلف فرمولاسیون واکسن برای ایمن سازی میزبان در برابر کنه (D. Anderson) در آن زمان کردند. اولی شامل آنتی‌ژن‌های به‌دست‌آمده از روده و تخمدان بود، در حالی که دومی شامل تمام اندام‌های داخلی استخراج‌شده از زنان D. Anderson نیمه‌جوش‌خورده بود.

این مطالعه نشان داد که پاسخ‌های ایمنی با واسطه آنتی‌بادی علیه بافت روده کنه‌ها زمانی که میزبان گاو با عصاره‌های به‌دست‌آمده از ماده‌های بالغ R. microplus تلقیح می‌شود، فعال می‌شود. این مطالعه اولیه برای ارزیابی اثربخشی فرمول واکسن، محققان را در سراسر جهان تشویق کرد تا بر توسعه واکسنی برای کنترل کنه‌ها و بیماری‌های منتقله از کنه تمرکز کنند. بنابراین، در دهه 1980، دو گروه جداگانه از محققان اولین تحقیقات علمی را با استفاده از فرمولاسیون واکسن برای تجزیه و تحلیل پاسخ ایمنی گاوها در برابر R. microplus انجام دادند [156].

به دنبال مطالعات فوق، مشخص شد که یک گلیکوپروتئین مرتبط با روده کنه می‌تواند باعث ایجاد محافظت ایمنی در میزبان شود [157]. در مطالعه بعدی، همان گروه تحقیقاتی گلیکوپروتئینی با وزن مولکولی 89 کیلو دالتون را جدا کردند که Bm{3}} نامگذاری شد و گزارش شد که با سلولهای روده R. ​​microplus مرتبط است [158,159]. پروتئین نوترکیب Bm{6}} در مقیاس بزرگ با استفاده از سیستم بیان مخمر تولید شد.

تاکنون، فقط واکسن مبتنی بر Bm{0}}با نام‌های تجاری مختلف تجاری شده است، به عنوان مثال، در استرالیا با نام تجاری TickGARD® و در کوبا تحت عنوان Gavac® [160,161] فروخته می‌شود. این واکسن ها تا حد زیادی در کشورهای مختلف برای کاهش فشار کنه روی گاو استفاده می شود. نشان داده شده است که استفاده از این واکسن ها می تواند جمعیت کنه ها را تا 74 درصد کاهش دهد و اثربخشی کلی آنها از 51 درصد تا 91 درصد متغیر است که با جمعیت کنه و وضعیت تغذیه گاو متفاوت است [160-163]. شواهدی وجود دارد که نشان می‌دهد برخی از سویه‌های کلمبیایی، مکزیکی و برزیلی R. میکرو پلاس در مقایسه با سویه‌های کنه‌های میکرو پلاس کوبایی و استرالیایی R. میکرو پلاس کارایی کلی کمتری از خود نشان می‌دهند، و حتی به نظر می‌رسد سویه A آرژانتینی R. micro plus نسبت به واکسیناسیون مقاوم است. Bm{8}} [34,164]. تجزیه و تحلیل بیشتر در مورد تغییر در اثربخشی واکسن Bm{11}} روی جمعیت‌های یک گونه کنه در نقاط مختلف جهان انجام شد و به این نتیجه رسیدیم که جمعیت‌های مختلف کنه‌ها به احتمال زیاد دارای چندشکلی در Bm{11} هستند. {12}} ژن های آنتی ژن از نظر توالی اسید آمینه ژن، و این دلیل اصلی این است که واکسن های موجود بر پایه Bm{13}} چندان کارآمد نیستند.

به عنوان مثال، یک پلی مورفیسم در ژن همولوگ Bm86 (تعیین شده به عنوان Bm95) در جمعیت کنه‌ها در آرژانتین وجود داشت که منجر به تفاوت در توالی Bm86 بین جمعیت‌های کنه مانند آن‌ها شد. یافت شده در کوبا و استرالیا، که ممکن است توضیح دهد که چرا واکسن Bm{3}} در برابر کنه آرژانتینی موثر نبود [34]. با توجه به مشکلات مقاومتی واکسن Bm86، محققان واکسن نوترکیب Bm95 را تولید کردند که بسیار مؤثر است، با اثربخشی کلی 89 درصد در کوبا و آرژانتین و 81 درصد در هند از نظر کاهش آلودگی کنه‌ها. [34,102,120,165].

علاوه بر واکسن تجاری فوق الذکر و کارآزمایی کارآیی آن، بسیاری از مطالعات دیگر بر بهبود بیشتر کارایی واکسن مبتنی بر Bm86- متمرکز شده‌اند. برخی از مطالعات اخیر پپتیدهایی از جمله SBm4912، SBm7462®، و SBm19733 را که از Bm86 به‌دست آمده‌اند، سنتز کرده‌اند، و همچنین یک پپتید نوترکیب rSBm7462 را تولید کرده و کارایی آنها را تجزیه و تحلیل کرده‌اند. درصد اثربخشی این پپتیدها از 35.87 درصد تا 81.05 درصد متغیر بود، که نشان می دهد این پپتیدها، به ویژه SBm7462® و rSBm7462®، نقش مهمی در القای ایمنی میزبان دارند و می توانند تجاری شوند زیرا از نظر کاهش کنه بسیار مؤثر هستند. آلودگی [121,122]. علاوه بر این، برای بهبود اثربخشی واکسن پروتئین نوترکیب Bm{15}}، اخیراً، Lapisa SA یک واکسن مبتنی بر Bm{16}} Bovimune Ixovac® در مکزیک معرفی کرده است. با این حال، این واکسن از نظر اثربخشی در برابر کنه مورد مطالعه قرار نگرفته است. بنابراین، مطالعاتی برای تعیین اثرات آن بر روی جمعیت های مختلف کنه برای تعیین اثربخشی آن مورد نیاز است.

به نظر می‌رسد واکسن مبتنی بر همولوگ Bm86 (TickGard) مناسب است، زیرا این واکسن کاربرد وسیعی دارد و می‌تواند آنتی‌بادی‌های واکنش متقاطع را در گونه‌های مختلف کنه، مانند Rhipicephalus sanguineus، Hyalomma anatolicum anatolicum، Rhipicephalus (Boophilus) ایجاد کند. ) decoloratus، Rhipicephalus (Boophilus) annulatus، و Hyalomma dromedary [166-168]. با این حال، این واکسن قادر به ایجاد حفاظت متقاطع در برخی از گونه‌های کنه دیگر (مانند Rhipicephalus appendiculatus، Amblyomma variegatum و Amblyomma cajennense) نیست [169,170]. جالب است بدانید که واکسن Bm86 کارایی 100 درصدی در برابر R. annulatus دارد که در نتیجه اثربخشی بیشتری نسبت به کارآیی گزارش شده واکسن همولوگ با R. microplus دارد. دلیل این امر ممکن است به دلیل عوامل فیزیولوژیکی (به عنوان مثال، احتقان خون کمتر و سطوح پایین تر فعالیت پروتئاز در بدن) یا عوامل ژنتیکی کنه باشد. این عوامل ممکن است سطوح پروتئین BM{10}} یا فرآیندهای فیزیولوژیکی مانند تغذیه و تخریب پروتئین را تحت تأثیر قرار دهند که منجر به تعاملات آنتی‌بادی-آنتی ژن کارآمدتر می‌شود [171]. واکسیناسیون Bm{12}} محافظت عالی در برابر کنه های R. microplus ارائه می دهد، اما تعمیم این تجربیات به واکسن کنه Ixodes چالش برانگیز است.

برخلاف I. ricinus و I. scapularis، R. microplus یک کنه میزبان منفرد است که منحصراً از گاو تغذیه می کند [168]. همچنین چرخه زندگی کوتاهی دارد، پوست انداز نمی شود و پس از پایان غذای خون میزبان جدیدی پیدا می کند. اثربخشی واکسن Bm86 در گاوهایی که در معرض لارو کنه R. microplus قرار گرفته بودند مورد بررسی قرار گرفت و اندازه‌گیری پارامترهای مربوط به ایمنی کنه در ماده‌های بالغ پر شده که پس از واکسیناسیون رها شدند، انجام شد. بنابراین، حفاظت اندازه گیری شده مجموع تأثیر بر دو دوره پوست اندازی و سه مرحله کنه است. برای R. microplus نشان داده شده است که واکسیناسیون Bm86 باعث آسیب می‌شود و متعاقباً باعث کاهش وزن گرفتگی در کنه‌های ماده بالغ می‌شود [172]. با این وجود، تأثیر نسبی واکسیناسیون Bm{4}} بر مراحل زندگی نابالغ R. microplus دقیقاً مشخص نیست. همولوگ های Bm86 نیز از کنه های Ixodes جدا و شناسایی شده اند. I. ricinus شامل دو همولوگ Bm{86، Ir86-1 و Ir-86-2 است و I. scapularis نیز دو همولوگ Is86-1 و Is{10} دارد. } [173]. مطالعه بعدی نشان داد که واکسیناسیون پروتئین‌های Ir{12}} نوترکیب، تیتر IgG سرم را در برابر پروتئین‌های Ir{13}} نوترکیب افزایش می‌دهد. با این حال، آنتی بادی ها قادر به محافظت از خرگوش در برابر چالش I. ricinus نبودند. نه تعداد کنه های متصل و نه وزن کنه ها کاهش یافت [174].

بنابراین، واکسیناسیون علیه همولوگ‌های Bm86 در Ixodes رویکرد مؤثری برای کنترل جمعیت‌های Ixodes ricinus در نظر گرفته نمی‌شود، حتی اگر واکسیناسیون Bm86 تأثیر واضحی بر R. microplus دارد. حتی اگر واکسن Bm86 موفقیت قابل توجهی از خود نشان داده است، درک این نکته ضروری است که واکسن بعید است که جایگزین کنه کش ها شود، زیرا فاقد "اثر حذف" مرتبط با کنه کش ها است. با وجود این، تجربه میدانی نشان داده است که استفاده از Bm86 به طور قابل توجهی نیاز به استفاده از تیمارهای کنه کش را در مزرعه کاهش می دهد. به عنوان مثال، مقررات سخت کوبا در مورد برنامه کنترل کنه خود منجر به کاهش 87 درصدی میزان کنه کش مورد استفاده در این کشور شد که با نتایج مطالعه اخیر انجام شده در ونزوئلا قابل مقایسه است [161,175,176].

علاوه بر این، استفاده از واکسن Bm{0}} همچنین بیماری‌های منتقله از کنه، از جمله آناپلاسموز گاوی و بابزیوز گاوی را کاهش داده است. استفاده از این واکسن همچنین باعث افزایش بهره وری دام از جمله گاو و در نتیجه کاهش خسارات اقتصادی کشاورزان شده است [160]. جنبه های فوق واکسیناسیون Bm86 نشان می دهد که روشی بسیار مقرون به صرفه در مقایسه با کاربردهای شیمیایی در مقابله با آلودگی کنه است. به این ترتیب، این واکسن ممکن است در کاهش بیماری های منتقله از کنه و همچنین در بهبود مدیریت شیوع کنه در مزارع دام برای کاهش بیماری های منتقله از کنه بسیار مفید باشد.

4. نکات پایانی

کنه ها برای نمو، رشد و تولید مثل از خون تغذیه می کنند و مسئول انتقال بیماری های مختلف منتقله از طریق کنه هستند. به عنوان مثال، کنه های Ixodes تعداد زیادی پاتوژن از جمله باکتری ها، تک یاخته ها و ویروس ها را منتقل می کنند. توجه به این نکته ضروری است که واکسن های ضد کنه آلودگی به کنه را کاهش داده و از انتقال پاتوژن جلوگیری می کند و علاوه بر آن نسبت به کنترل شیمیایی ایمن تر است که ممکن است عوارض جانبی منفی داشته باشد. چندین آنتی ژن جدید از انواع بافت ها / اندام ها شناسایی شده است و کارایی آنها در حیوانات آزمایشگاهی مورد بررسی قرار گرفته است که منجر به پیشرفت های مهمی در جهت ایجاد واکسنی علیه کنه ها بدون عوارض جانبی گزارش شده شده است. واکسن‌های مبتنی بر پروتئین Bm86 در کشورهای مختلف تجاری شده‌اند و استفاده از آن‌ها در برابر R. microplus نشان داده است که واکسیناسیون علیه کنه‌ها می‌تواند به طور موثر مورد استفاده قرار گیرد. با این حال، واکسن‌های مبتنی بر Bm{3}}در برابر سایر گونه‌های کنه مانند کنه‌های Ixodes به یک اندازه مؤثر نیستند. نشان داده شده است که واکسیناسیون با همولوگ Bm86 I. ricinus هیچ تأثیری بر تغذیه کنه ندارد [174].

علاوه بر این، از آنجایی که R. micro plus فقط از یک میزبان تغذیه می کند، از لاروها برای به چالش کشیدن گاوها استفاده شد که منجر به پر شدن کنه های ماده بالغ شد که نه تنها تعداد کنه ها را کاهش داد، بلکه تأثیر قابل توجهی بر هر سه مرحله زندگی گاو داشت. تیک بزنید. برخلاف R. microplus، کنه‌های Ixodes میزبان‌ها را در طول چرخه زندگی خود تغییر می‌دهند و بنابراین واکسیناسیون کنه Ixodes نیاز به پیشگیری مؤثر از چسبیدن و/یا تغذیه کنه‌ها در طول یک وعده خونی روی یک میزبان دارد. با این وجود، واکسیناسیون علیه کنه های Ixodes ممکن و واقع بینانه به نظر می رسد. بنابراین توجه به این نکته مهم است که محافظت متقابل میزبان می تواند یک کار چالش برانگیز با این نوع واکسن باشد. علاوه بر Bm{1}} برخی پروتئین‌های دیگر نیز وجود دارند که ممکن است پتانسیل درمانی به عنوان سرکوبگر سیستم ایمنی یا ضد انعقاد داشته باشند [39،61].

پیشرفت‌های اخیر در ژنومیکس و پروتئومیکس ما را قادر به کشف آنتی‌ژن‌های جدید و استفاده از تکنیک‌های مولکولی برای دستکاری پروتئین‌های شناسایی‌شده و آزمایش واکسن‌های جدید به‌طور قابل توجهی سریع‌تر و مقرون‌به‌صرفه‌تر از گذشته کرده است. واکسیناسیون DNA نیز یک گزینه عالی است. با این حال، به طور کلی، این نوع واکسیناسیون تنها می تواند منجر به سطوح پایین بیان آنتی ژن شود و سلول های غیرحرفه ای ارائه دهنده آنتی ژن فعال CD4 به علاوه سلول های کمکی T را از طریق مسیر MHC کلاس II محدود می کند [177]. با این حال، واکسیناسیون DNA نه تنها محافظت قابل توجهی را برای میزبان فراهم می کند، بلکه اگر با واکسن کایمریک یا واکسیناسیون پروتئین نوترکیب دنبال شود، محافظت متقاطع در برابر کنه ها نیز در نظر گرفته می شود [178].

علاوه بر این، mRNA-LNPs ممکن است در برانگیختن اریتم در محل نیش کنه، که یکی از مهم ترین شاخص های اولیه مقاومت اکتسابی کنه است، کمک کند. mRNA-LNP های حاوی ژن کنه ها یک پلت فرم مفید برای توسعه واکسن هایی هستند که به طور بالقوه می توانند از بیماری های منتخب منتقله از کنه جلوگیری کنند [153,154]. هر دو واکسیناسیون DNA و mRNA نیز استراتژی‌های مؤثری به نظر می‌رسند و امید در آینده وجود دارد که واکسیناسیون mRNA یا DNA برای کنترل آلودگی کنه‌ها و بیماری‌های منتقله از کنه ایجاد شود و همچنین محافظت متقاطع را فراهم کند. با این حال، تا کنون هیچ واکسنی تجاری نشده است، که نشان می دهد مطالعات بیشتری برای تعیین اثربخشی آنتی ژن های بیشتر برای استفاده از آنها برای تولید واکسن DNA یا mRNA مورد نیاز است. شناسایی و شناسایی نامزدهای جدید واکسن کنه می تواند از تغذیه کنه و انتقال پاتوژن جلوگیری کند. استفاده از این آنتی ژن ها در واکسن های حیوانات اهلی و حیات وحش، چه رسد به انسان، همچنان یک چالش است.

مشارکت نویسنده:

MNA، MAJ و MK ساختار مقاله را طراحی کردند. همه نویسندگان جستجوی ادبیات را انجام دادند و بخش هایی از نسخه خطی را نوشتند / داده ها را جمع آوری کردند. MNA و IM شکل ها را ایجاد و ویرایش کردند. ID و MK بازنگری های انتقادی انجام دادند و نسخه خطی را تصحیح کردند. همه نویسندگان نسخه منتشر شده نسخه خطی را خوانده و با آن موافقت کرده اند.

منابع مالی:

MK از آژانس گرانت جمهوری چک (Grant {{0}}}S) و ERD Funds، پروژه CePaVip OPVVV (شماره 384 CZ.02.1.01) بودجه دریافت کرد. /0.0/0.0/16_019/0000759). سرمایه‌گذاران هیچ نقشی در طراحی مطالعه، جمع‌آوری و تجزیه و تحلیل داده‌ها، تصمیم‌گیری برای انتشار، یا تهیه نسخه خطی نداشتند.

بیانیه هیئت بررسی نهادی: قابل اجرا نیست.

بیانیه رضایت آگاهانه: قابل اجرا نیست.

بیانیه در دسترس بودن داده ها: قابل اجرا نیست

تضاد منافع: نویسندگان اعلام می کنند که این تحقیق در غیاب هرگونه روابط تجاری یا مالی که می تواند به عنوان تضاد منافع بالقوه تعبیر شود، انجام شده است.

منابع

1. د لا فوئنته، ج. Kocan، KM پیشرفت در شناسایی و شناسایی آنتی ژن های محافظ برای واکسن های نوترکیب در برابر آلودگی کنه ها. Expert Rev. Vaccines 2003, 2, 583-593. [CrossRef]

2. بافنده، GV; اندرسون، ن. گرت، ک. تامپسون، AT; یابسلی، کنه های MJ و پاتوژن های منتقله از کنه در حیوانات اهلی، خوک های وحشی، و نمونه برداری محیطی خارج از میزبان در گوام، ایالات متحده. جلو. دامپزشک علمی 2022, 8, 803424. [CrossRef] [PubMed]

3. جونز، KE; پاتل، NG; لوی، MA; استوریگارد، ا. بالک، دی. گیتلمن، جی ال. Daszak, P. روندهای جهانی در بیماری های عفونی در حال ظهور. طبیعت 2008، 451، 990-993. [CrossRef]

4. بیگنت، اف. ماری، J.-L. بیماری های نوظهور حیوانات همراه در اروپا منتقل شده از طریق بندپایان دامپزشک پارازیتول 2009، 163، 298-305. [CrossRef] [PubMed]

5. پیتر، اس جی; کاریوکی، HW; آبوگه، برو؛ Gakuya، DW; ماینگی، ن. Mulei، CM شیوع کنه‌های آلوده به گاوهای شیری و پاتوژن‌هایی که آنها در مزارع کوچک در مناطق اطراف شهری نایروبی، کنیا پناه می‌دهند. دامپزشک پزشکی بین المللی 2021، 2021، 9501648. [CrossRef]

6. گراف، J.-F. گوگولوفسکی، آر. لیچ-بینگ، ن. ساباتینی، GA; مولنتو، مگابایت؛ Bordin، EL; Arantes، GJ کنترل تیک: یک دیدگاه صنعتی. Parasitology 2004، 129، S427-S442. [CrossRef] [PubMed]

7. de la Fuente، J. واکسن‌ها برای کنترل ناقل: احتمالات هیجان‌انگیز برای آینده. دامپزشک J. 2012, 194, 139-140. [CrossRef] [PubMed]

8. اسپارگانو، او. فولدواری، جی. درداکوا، م. Kazimírová، M. چالش های جدید ناشی از کنه ها و بیماری های منتقله از طریق کنه. Biologia 2022، 77، 1497-1501. [CrossRef]

9. Doolan، DL; Apte، SH; Proietti، C. طراحی واکسن مبتنی بر ژنوم: وعده مالاریا و سایر بیماری های عفونی. بین المللی J. Parasitol. 2014، 44، 901-913. [CrossRef]

10. Bragazzi، NL; جیانفردی، وی. ویلرینی، م. روسلی، آر. نصر، ع. حسین، ع. مارتینی، م. بهزادی‌فر، ام. واکسن‌ها با داده‌های بزرگ ملاقات می‌کنند: آخرین‌ها و چشم‌اندازهای آینده. از واکسن شناسی کلاسیک 3Is ("Isolate-Inactivate-Inject") 1.{10}} تا Vaccinology 3.0, Vaccinomics, and Beyond A Historical Overview. جلو. بهداشت عمومی 2018، 6، 62. [CrossRef]

11. زپ، اف. اصول طراحی واکسن-درس هایی از طبیعت. واکسن 2010، 28 (ضمیمه 3)، C14-C24. [CrossRef]

12. بوآزاوی، ا. عبداللطیف، ع. العلاف، ف. بوگری، ن. الدهلوی، س. قاری، س. راهبردهای واکسیناسیون: رویکردهای واکسن مرسوم در مقابل راهبردهای نسل جدید در ترکیب با ادجوانت ها. Pharmaceutics 2021, 13, 140. [CrossRef] [PubMed]

13. D'Argenio، DA; ویلسون، CB یک دهه واکسن: ادغام ایمونولوژی و واکسینولوژی برای طراحی منطقی واکسن. مصونیت 2010، 33، 437-440. [CrossRef]

14. مرینو، او. آنتونس، اس. مسجدی، ج. Moreno-Cid، JA; de la Lastra، JMP; روزاریو-کروز، آر. رودریگز، اس. دومینگوس، آ. de la Fuente, J. واکسیناسیون با پروتئین‌های دخیل در برهمکنش‌های کنه و پاتوژن باعث کاهش آلودگی ناقل و عفونت پاتوژن می‌شود. واکسن 2013، 31، 5889-5896. [CrossRef] [PubMed]

15. White, AL; Gaff, H. Review: Application of Tick Control Technologies for Blacklegged, Lone Star, and American Dog Ticks. جی. اینتگر. آفت مناگ. 2018، 9، 12. [CrossRef]

16. Willadsen, P. واکسن های ضد کنه. Parasitology 2004، 129، S367-S387. [CrossRef]

17. د لا فوئنته، ج. مرینو، O. واکسینومیکس، راه جدید واکسن‌های کنه. واکسن 2013، 31، 5923-5929. [CrossRef] 18. هیل، کالیفرنیا; Wikel، SK پروژه ژنوم Ixodes scapularis: فرصتی برای پیشرفت تحقیقات کنه. روند پارازیتول. 2005، 21، 151-153. [CrossRef]

19. مدینه، ج.م. عباس، م.ن. بنساود، سی. هاکنبرگ، ام. Kotsyfakis، M. تجزیه و تحلیل بیوانفورماتیک Ixodes ricinus Long NonCoding RNAs توانایی اتصال آنها به miRNA های میزبان را پیش بینی می کند. بین المللی جی. مول. علمی 2022, 23, 9761. [CrossRef]

20. Valle, MR; واکسن‌های Guerrero، FD ضد کنه در عصر omics. جلو. Biosci. (Elite Ed.) 2018, 10, 122-136. [CrossRef]

21. لوگولو، سی. واز، IDS; سورگین، MHF; Paiva-Silva، GO; Faria، FS; زینگلی، آر.ب. DE Lima، MFR; آبرو، ال. اولیویرا، EF; Alves، EW; و همکاران جداسازی یک پیش ساز پروتئیناز آسپارتیک از تخم یک کنه سخت، Boophilus microplus. انگل شناسی 1998، 116، 525-532. [CrossRef]

22. کورلوفس، ق. لی، جی. چنگ، دی. کنه‌های ژونگ، جی. PLoS ONE 2014, 9, e104815. [CrossRef] [PubMed]

23. Sappington، TW; هیز، آر. Raikhel، گیرنده ویتلوژنین پشه AS: خالص سازی، خصوصیات تکاملی و بیوشیمیایی. حشرات بیوشیمی. مول. Biol. 1995، 25، 807-817. [CrossRef] [PubMed]

24. واز، IDS; لوگولود، سی. سورگین، م. Velloso، FF; دی لیما، MFR؛ گونزالس، جی سی. ماسودا، ح. اولیویرا، PL; Masudaa، A. ایمن سازی گاوها با یک پیش ساز پروتئیناز آسپارتیک جدا شده از تخم های Boophilus microplus. دامپزشک ایمونول. ایمونوپاتول. 1998، 66، 331-341. [CrossRef]

25. Leal, AT; سیکساس، ا. Pohl، PC; فریرا، کالیفرنیا؛ لوگولو، سی. اولیویرا، PL; فاریاس، SE; ترمینیونی، سی. واز، IDS; Masuda, A. واکسیناسیون گاوها با Boophilus Yolk pro-Cathepsin نوترکیب. دامپزشک ایمونول. ایمونوپاتول. 2006، 114، 341-345. [CrossRef]

26. Leal, AT; Pohl، PC; فریرا، کالیفرنیا؛ ناسیمنتو-سیلوا، ام سی; سورگین، MH; لوگولو، سی. اولیویرا، PL; فاریاس، SE; واز، IDS; ماسودا، الف. خالص سازی و آنتی ژنی دو شکل نوترکیب بووفیلوس میکروپلوس زرده پرو-کاتپسین بیان شده در اجسام اینکلوژن. پروتئین Expr. Purif. 2006، 45، 107-114. [CrossRef] [PubMed]

27. یاماشیتا، او. Indrasith، LS سرنوشت متابولیک پروتئین زرده در طول جنین زایی در بندپایان. (بندپایان / جنین زایی / پروتئین های زرده / پروتئولیز محدود / پروتئاز). توسعه دهنده رشد متفاوت است. 1988، 30، 337-346. [CrossRef]

28. تللام، ر. کمپ، دی. سواری، جی. بریسکو، اس. اسمیت، دی. شارپ، پ. ایروینگ، دی. Willadsen, P. تخمگذاری کاهش یافته Boophilus microplus که بر روی گوسفندان واکسینه شده با ویتلین تغذیه می کند. دامپزشک پارازیتول 2002، 103، 141-156. [CrossRef]

29. Boldbaatar، D. Umemiya-Shirafuji, R.; لیائو، م. تاناکا، تی. ژوان، ایکس. فوجیزاکی، ک. چندین ویتلوژنین از کنه Haemaphysalis longicornis برای رشد تخمدان بسیار مهم هستند. J. حشره Physiol. 2010، 56، 1587-1598. [CrossRef]

30. سیکساس، ا. دوس سانتوس، رایانه شخصی؛ Velloso، FF; واز، IDS; ماسودا، ع. هورن، اف. Termignoni، C. A Boophilus microplus ویتلین تجزیه کننده سیستئین اندوپپتیداز. انگل شناسی 2003، 126، 155-163. [CrossRef]

31. سیکساس، ا. Leal, AT; Nascimento-Silva، MCL; ماسودا، ع. ترمینیونی، سی. Vaz، IDS پتانسیل واکسن یک آنزیم تجزیه کننده ویتلین کنه (VTDCE). دامپزشک ایمونول. ایمونوپاتول. 2008، 124، 332-340. [CrossRef] [PubMed]

32. جارمی، ج. سواری، جی. پیرسون، آر. مک کنا، آر. Willadsen، P. Carboxydipeptidase از Boophilus microplus: یک آنتی ژن "پنهان" با شباهت به آنزیم تبدیل کننده آنژیوتانسین. حشرات بیوشیمی. مول. Biol. 1995، 25، 969-974. [CrossRef] [PubMed]

33. ویلادسن، پ. اسمیت، دی. کوبون، جی. McKenna، RV واکسیناسیون مقایسه ای گاو در برابر بووفیلوس میکروپلاس با آنتی ژن نوترکیب Bm86 به تنهایی یا در ترکیب با نوترکیب Bm91. انگل ایمونول. 1996، 18، 241-246. [CrossRef]

34. García-García, JC; مونترو، سی. ردوندو، م. وارگاس، ام. کانالز، ام. بوئه، او. رودریگز، م. جوگلار، م. ماچادو، اچ. گونزالس، IL; و همکاران کنترل کنه های مقاوم به ایمن سازی با Bm86 در گاوهای واکسینه شده با آنتی ژن نوترکیب Bm95 جدا شده از کنه گاو Boophilus microplus. واکسن 2000، 18، 2275-2287. [CrossRef]

35. لامبرتز، سی. چونگکاسیکیت، ن. جیتاپالاپونگ، اس. Ganguly، M. پاسخ ایمنی گاو Bos indicus در برابر آنتی ژن ضد کنه Bm91 مشتق شده از کنه های میکروپلوس محلی رایپیسفالوس (Boophilus) و تأثیر آن بر تولید مثل کنه تحت آلودگی طبیعی. J. Parasitol. Res. 2012، 2012، 907607. [CrossRef]

For more information:1950477648nn@gmail.com