مطالعه اثرات ضد پیری کلسیتریول بر سلول های کشنده طبیعی انسان در شرایط آزمایشگاهی Ⅱ

3. نتایج

این مطالعه بر روی اثرات ضد پیری کلسیتریول بر سلول‌های NK متمرکز بود. نتایج نشان داد که کلسیتریولبیان نشانگرهای زیستی مرتبط با پیری از جمله CD16 را کاهش داد، TIM3، PD-1، KIR، وبیان NKG2A سلول های NK را افزایش داد. آن را نیزمهار تکثیر سلول های NKوآنها را در مرحله G1 دستگیر کنید. کلسیتریولکاهش انتشار عوامل التهابیمانند IL-5، IL-13، IFN- و TNF- واثرات آنتی اکسیدانی، که می تواند به آن کمک کنداثرات ضد پیری.

برای اطلاع از اثرات آنتی اکسیدانی سیستانچ و دریافت نمونه اینجا را کلیک کنید

3.1 کلسیتریول بیان نشانگرهای پیری سطح را معکوس کرد، تکثیر سلول های NK را کند کرد و سلول های NK را در فاز G1 حفظ کرد.

سلول‌های پیر NK بیان بالایی از نشانگرهای زیستی مرتبط با پیری، مانند CD16، PD{2}}، TIM3 و KIR و بیان کم NKG2A را نشان دادند. ما دریافتیم که سطح بیان نشانگرهای زیستی مرتبط با پیری NKG2A (شکل 1a) (*P < 0.{17}}5) افزایش یافته است، در حالی که بیان CD16 (شکل 1b)، TIM3 (شکل 1c) PD{14}} (شکل 1d) و KIR (شکل 1e) (*P <0.05) پس از درمان با کلسیتریول به مدت 72 ساعت کاهش یافت. اثرات معکوس با غلظت کلسیتریول همبستگی مثبت داشت (شکل تکمیلی 1).

ما سلول‌های نمونه‌های خون محیطی انسان را در شرایط آزمایشگاهی گسترش دادیم. سپس سلول های NK (CD{{0}}CD56 plus ) را با مرتب سازی مهره های مغناطیسی جدا کردیم (شکل 1f). سپس سلول های NK مرتب شده با غلظت های مختلف کلسیتریول یا راپامایسین به مدت 72 ساعت کشت داده شدند. نتایج رنگ‌آمیزی CCK8 نشان داد که سرعت رشد سلول‌های NK تیمار شده با کلسیتریول با غلظت بالا (1{14}}- [7] M) کندتر از گروه کنترل منفی (NC) بود (*P <{17). }}.05) (شکل 1g). علاوه بر این، کلسیتریول چرخه سلولی NK را تنظیم کرد. پس از درمان با کلسیتریول به مدت 48 ساعت، سلول‌های NK تغییر وابسته به غلظت کلسیتریول بالا را به سمت فاز G1 نشان دادند (05/0 P <)، در حالی که نسبت سلول‌ها در فاز G2 (05/0 > P) کاهش یافت. نسبت سلول های NK تیمار شده با کلسیتریول در فاز S بدون توجه به غلظت کلسیتریول هیچ تغییری نشان نداد (شکل 1h، شکل تکمیلی 2). سپس ما آزمایش کردیم که آیا این توقف فاز G1 مشتق از کلسیتریول باعث القای آپوپتوز سلول NK می شود یا خیر و دریافتیم که بیومارکر آپوپتوز سلول NK، ایمونوگلوبولین سلول T و دامنه موتیف مهاری مبتنی بر گیرنده تیروزین (ITIM) (TIGIT) هیچ تغییر قابل توجهی را نشان نداد (P> 0.05). ، NS) (شکل 1i). این نتایج حاکی از آن است که افزودن کلسیتریول باعث کاهش سرعت رشد سلول‌های NK، کاهش تکثیر آن‌ها و توقف فاز G1 سلول‌های NK به جای ایجاد آپوپتوز می‌شود.

3.2 کلسیتریول آزادسازی سیتوکین های التهابی در سلول های NK را کاهش داد و سمیت سلولی سلول های NK را مهار کرد.

التهاب یک التهاب مزمن با درجه پایین است. پیری سلول های NK را تسریع می کند، زیرا سلول های NK در این التهاب مزمن شرکت می کنند. شکل 2a نشان می دهد که سطوح IL-5، IL{3}}، IFN- و TNF- به طور قابل توجهی در همه گروه ها نسبت به گروه کنترل منفی کاهش یافته است (*P < 0.05). IFN- و TNF- سیتوکین های پیش التهابی شناخته شده ای هستند، اما برخی از مطالعات خواص پیش التهابی IL را نیز نشان داده اند. گزارش شده است که IL{14}} در انواع مختلف التهاب مخاطی، مانند آسم آلرژیک، کولیت اولسراتیو، ازوفاژیت ائوزینوفیلیک و چندین بیماری مرتبط با فیبروز نقش دارد.

با این حال، سمیت سلولی سلول‌های NK عمدتاً شامل آزادسازی سیتوکین‌های التهابی و دگرانولاسیون سلول‌ها می‌شود. ما سلول های K562 را با DIO برچسب گذاری کردیم و سلول های DIO-K562 را با سلول های NK تیمار شده با کلسیتریول به مدت 4 ساعت کشت دادیم. درصد سلول‌های DIO به علاوه PI پلاس در همه گروه‌های نسبت اثرگذار (E)/هدف (T) نسبت به گروه کنترل منفی کمتر بود (*P <0).{11}}5) (شکل 2b، ج). بیان استنباط شده از خوشه تمایز 107 (CD107) نشان دهنده ریزش دانه بندی کمتر (*P <0.05) است (شکل 2d). این نتایج مهار عملکرد NK-کشنده توسط کلسیتریول را نشان می دهد.

3.3 کلسیتریول بیان SIRT{2}} ∆Exon8 و مسیر SIRT1/pERK مربوط به ضد پیری را فعال کرد.

برای بررسی اثرات ضد پیری کلسیتریول بر سلول‌های NK، ما مسیرهای سیگنال دهی مرتبط با پیری را با بلات ایمنی شناسایی کردیم. تجزیه و تحلیل وسترن بلات برای ارزیابی سطح بیان VDR، SIRT{2}∆Exon8، SIRT1، و PERK در سلول‌های NK تیمار شده با کلسیتریول انجام شد. تجزیه و تحلیل آماری نشان داد که کلسی تریول محور VDR/SIRT1/pERK را در غلظت های بالا فعال می کند. در همین حال، کلسیتریول بیان SIRT1-∆Exon8 را فعال کرد (*P < 0.05). (شکل 3 الف).

شکل 1. فنوتیپ مربوط به پیری، گسترش سلولی و تجزیه و تحلیل چرخه سلولی سلول های NK. (ae) سلول های NK انسانی تیمار شده با کلسیتریول یا راپامایسین به مدت 72 ساعت بیومارکرهای سلولی زیر را نشان دادند: گروه کشنده طبیعی 2 عضو A (NKG2A)، خوشه تمایز 16 (CD16)، ایمونوگلوبولین سلول T و پروتئین حاوی دامنه موسین 3. TIM3) مرگ سلولی برنامه ریزی شده{11}} (PD{12}})، و گیرنده شبه ایمونوگلوبولین قاتل (KIR)، که با پیری مرتبط بودند. 5{16}} نانومولار راپامایسین (RAPA) به عنوان کنترل مثبت استفاده شد. n=3 برای هر گروه. *P < 0.05 و **P < 0.{25}}1 با گروه کنترل منفی (NC) مقایسه شد. (f) سلول‌های NK (راست) جدا شده از سلول‌های تک هسته‌ای خون محیطی انسان (PBMCs، سمت چپ) با مرتب‌سازی مهره‌های مغناطیسی. (ز) تجزیه و تحلیل تکثیر سلولی با کیت شمارش سلولی 8 (CCK8) اندازه گیری شد. (h) اثر کلسیتریول یا راپامایسین بر روی سلول های سلولی در سلول های nk مرتب شده پس از درمان به مدت 72 ساعت، wp 0.0، 0.05، و fp <0.05 نشان دهنده معنی دار بودن تفاوت در فازهای G1، S و G2 به ترتیب. همه گروه ها به ترتیب با NC مقایسه شدند. n=3. درصد سلول‌های NK مثبت گلوبولین سلولی T و گیرنده ایمنی مبتنی بر موتیف (M) مهاری تیروزین (TGI) پس از درمان با کلسیتریول یا راپامایسین به مدت 72 ساعت.*p <0.05 و **p <0.01 با NC مقایسه شد. n=3.

3.4 کلسیتریول در برابر پیری سلول های NK ناشی از استرس اکسیداتیو در شرایط آزمایشگاهی مقاومت می کند.

به طور گسترده پذیرفته شده است که پیری ناشی از تجمع آسیب اکسیداتیو به دلیل شواهد زیادی است که در طول سال ها یافت شده است [31]. ما سلول‌های NK را با غلظت‌های مختلف H2O2 به مدت 24 ساعت کشت دادیم و دریافتیم که 0 میکرومولار 1{{{{20}}} نزدیک‌ترین غلظت به میانگین دوز کشنده (LD50) بود (شکل 3b) . بیان TIM3 در جمعیت سلولی NK با افزودن H2O2 افزایش یافت، در حالی که بیان پس از درمان با کلسیتریول کاهش یافت (05/0 P <) (شکل 3c). علاوه بر این، سلول های پیر NK در حضور گالاکتوزیداز آبی رنگ آمیزی شدند. این رنگ آبی سلول ها مشخصه مشخص سلول های پیر است. تجزیه و تحلیل آماری نشان داد که سلول‌های NK تیمار نشده دارای فعالیت سلولی -گالاکتوزیداز کمتری هستند، در حالی که سلول‌های NK در معرض H2O2 فعالیت گالاکتوزیداز بالا را نشان می‌دهند. کلسیتریول جمعیت مثبت گالاکتوزیداز را کاهش داد که نشان دهنده وجود سلول های پیر کمتر است (*P <0.05) (شکل 3d). کاهش پتانسیل غشای میتوکندری نیز در انواع سلول های پیر از گونه های مختلف پستانداران مشاهده شده است. ما پتانسیل غشای میتوکندری سلول‌های NK را در این مطالعه ارزیابی کردیم. نتایج آماری نشان داد که H2 O2 به طور قابل توجهی فعالیت سلولی سلول های NK را در مقایسه با سلول های تیمار نشده کاهش داد، در حالی که کلسیتریول آسیب ناشی از H2 O2 را افزایش داد (*P <0.05) (شکل 3e).

شکل 2. اثرات کلسیتریول بر عملکرد سلول های NK. (الف) تجزیه و تحلیل سیتوکین آزاد شده توسط سلولهای NK تیمار شده با کلسیتریول در 48 ساعت. ب) نتایج مرتب‌سازی سلول‌های فعال شده با فلورسانس (FACS) سلول‌های مرده K562 نشان‌دار شده با 3، 3 -octadecyl-oxacarbocyanineDlO) و پروپیدیوم یدید (P) را نشان داد. سلول‌های K562 با نسبت‌های مختلف سلول‌های Nk تیمار شده با کلسیتریول همزمان کشت شدند. به مدت 4 ساعت (C) تجزیه و تحلیل FACS سلول‌های K562 مرده در سنجش‌های کشتار. (د) اثرات دگرانولاسیون سلول‌های Nk تیمار شده در سنجش‌های کشتن. n=3 برای eaciyroup. *p < 0.05 و **p <0.01 با NC مقایسه شد

3.5 کلسیتریول در برابر آپوپتوز سلول های NK ناشی از استرس اکسیداتیو در شرایط آزمایشگاهی مقاومت می کند.

در مرحله بعد، تعداد سلول های آپوپتوز را اندازه گیری کردیم. نتایج فلوسایتومتری نشان داد که تیمار با 1{4}}0 میکرومولار H2O2 به مدت 24 ساعت منجر به آپوپتوز قابل توجه سلول‌های NK شد. با این حال، تیمار با کلسیتریول نسبت آپوپتوز را کاهش داد (*P <0.05) (شکل 4a). تمام نتایج فوق مقاومت کلسیتریول را در برابر استرس اکسیداتیو ناشی از H2O2 نشان دادند. با این حال، ما پروتئین‌های آپوپتوز را در سلول‌های NK تحت استرس اکسیداتیو شناسایی کردیم. قبل از درمان با H2O2، 10- [7] M کلسیتریول به مدت 24 ساعت به سلول های NK اضافه شد. سطح پروتئین های مرتبط با آپوپتوز، کاسپاز{15}} p17 و کاسپاز-3 p20، پس از درمان با H2O2 به طور قابل توجهی افزایش یافت. کلسیتریول آپوپتوز ناشی از H2O{22}}را کاهش داد و بیان کاسپاز{23}}، p17 و کاسپاز{25}} p20 را کاهش داد (*P <0.05) (شکل 4b). این نتایج نشان داد که کلسیتریول در برابر آپوپتوز ناشی از H2O2 مقاومت می کند.

شکل 3اثرات ضد پیریکلسیتریول روی سلول های NK (الف) بیان گیرنده ویتامین D (VDR)، sirtuin 1 (SIRT1)، SIRT{2}} ∆Exon8، و پروتئین کیناز R مانند شبکه آندوپلاسمی کیناز (pERK) در سلول‌های NK با آنالیز وسترن بلات شناسایی شد. پس از درمان با کلسیتریول به مدت 48 ساعت. گلیسرآلدئید{6}فسفات دهیدروژناز (GAPDH) به عنوان کنترل بارگیری استفاده شد. نمودار میله ای نتایج وسترن بلات را نشان می دهد (n=3). *P < 0.{{10}}5 و **P < 0.01 با NC (n=3) مقایسه شد. (ب) منحنی مرگ و میر سلولهای NK پس از درمان با پراکسید هیدروژن (H2O2) به مدت 24 ساعت. (ج) درصد سلول‌های TIM3 که پس از درمان با 100 میکرومولار H2O2 به مدت 24 ساعت بیان بالایی از خود نشان می‌دهند. (د) نتایج آنالیز و رنگ آمیزی گالاکتوزیداز مرتبط با پیری. سلول های پیر به رنگ آبی رنگ آمیزی شدند و با فلش های قرمز نشان داده شدند. نوار مقیاس، 50 میکرومتر. (ه) سلول‌های NK با هوخست و کلرومتیل-X-رزامین (CMXRos) رنگ‌آمیزی شدند تا مکان سلول و پتانسیل غشای میتوکندری مشخص شود. سلول های پیر و آپوپتوز Hoechst به علاوه CMXRos- بودند و با فلش های سفید نشان داده شدند. نوار مقیاس، 50 میکرومتر. تجزیه و تحلیل آماری شدت فلورسانس نسبی را نشان داد. *P <0.05 و **P <0.01 با گروه H2O2 در شکل های C، D و E (n=3) مقایسه شد.

شکل 4. اثرات ضد آپوپتوتیک کلسیتریول بر سلول های NK. (الف) اثرات ضد آپوپتوتیک کلسیتریول در آسیب ناشی از H2O{4}. تجزیه و تحلیل FACS درصد سلول‌های NK آپوپتوز را پس از درمان با 1{18}} 0 میکرومولار H2O2 به مدت 24 ساعت نشان داد. (ب) سطح بیان کاسپاز{9}} p20 و کاسپاز-3 p17 در سلول‌های NK پس از تیمار با 100 میکرومولار H2O2 به مدت 24 ساعت، با تجزیه و تحلیل وسترن بلات شناسایی شد. GAPDH به عنوان کنترل بارگذاری استفاده شد. نمودار میله ای نتایج وسترن بلات را نشان می دهد (n=3). * P <0.05 با گروه H2O2 مقایسه شد.

4. بحث

تعامل طولانی مدت بین التهاب و استرس اکسیداتیو یک عامل مهم در پیری است. علاوه بر این، التهاب و استرس اکسیداتیو هم افزایی دارند [32]. ROS اضافی تولید شده توسط استرس اکسیداتیو به سلول های بدن حمله می کند. در طی این فرآیند، فاکتورهای التهابی توسط سیستم ایمنی فعال شده برای کشتن سلول‌های غیرطبیعی آزاد می‌شوند که منجر به تولید بیشتر ROS می‌شود. کمبود کلسیتریول می تواند باعث بیماری های خود ایمنی، بیماری های متابولیک مزمن و تومورها شود. با این حال، اطلاعات کمی در مورد اثرات ضد پیری کلسیتریول بر روی سیستم ایمنی، به ویژه بر روی سلول های NK وجود دارد.

در این مطالعه، اثرات ضد پیری کلسیتریول بر سلول‌های NK را بررسی کردیم. ما دریافتیم که کلسیتریول بیان NKG2A را افزایش داد، در حالی که بیان KIR را در شرایط آزمایشگاهی کاهش داد. زیرجمعیت CD56- CD16 به علاوه سلول‌های NK که به التهاب مزمن مرتبط است، در افراد مسن به طور قابل‌توجهی افزایش می‌یابد [33]. بنابراین، کاهش بیان CD16 ناشی از کلسیتریول ممکن است به اثر ضد التهابی آن نسبت داده شود. TIM{7}} و PD-1 به عنوان گیرنده های بازدارنده و تخلیه سلول های NK گزارش شده اند. مطالعه ما نشان داد که کل سیتریول سطوح بیان TIM-3 و PD{10}} را کاهش داد و از آپوپتوز سلول‌های NK جلوگیری کرد.

علاوه بر این، کلسیتریول از گسترش سلول های NK جلوگیری کرد و جمعیت سلول های NK را در فاز G1 در شرایط آزمایشگاهی حفظ کرد. با این حال، سلول های فاز S تحت تاثیر قرار نگرفتند. TIGIT که به عنوان فاکتور ایست بازرسی سلول های NK شناخته می شود، بدون تغییر باقی ماند. این نتایج نشان داد که شکل 4. اثرات ضد آپوپتوتیک کلسیتریول بر سلول های NK. (الف) اثرات ضد آپوپتوتیک کلسیتریول در آسیب ناشی از H2O2-. تجزیه و تحلیل FACS درصد سلول‌های NK آپوپتوتیک را پس از تیمار با 1{20}}0 میکرومولار H2O2 به مدت 24 ساعت نشان داد. (ب) سطح بیان کاسپاز{11}} p20 و کاسپاز-3 p17 در سلول‌های NK پس از تیمار با 100 میکرومولار H2O2 به مدت 24 ساعت توسط آنالیز وسترن بلات شناسایی شد. GAPDH به عنوان کنترل بارگذاری استفاده شد. نمودار میله ای نتایج وسترن بلات را نشان می دهد (n=3). * P <0.05 با گروه H2O2 مقایسه شد. 6851 کلسیتریول مهندسی شده زیستی منجر به مرگ سلول های NK نشد، اما فقط سرعت گسترش سلول های NK را کاهش داد.

به خوبی شناخته شده است که التهاب منجر به ایمن سازی می شود [34،35]. علاوه بر این، ما دریافتیم که کلسیتریول سطوح IL-5، IL-13، IFN- و TNF- را در سلول‌های NK کاهش می‌دهد. سمیت سلولی سلول های NK تا حدی با انتشار عوامل التهابی انجام می شود [36]. علاوه بر این، کاهش مرگ و میر سلول های تومور K562 و دگرانولاسیون سلول های NK وجود داشت. این نتایج مطابق با انتظارات ما بود. راپامایسین یک داروی شناخته شده است که سرعت متابولیسم را برای جلوگیری از پیری کاهش می دهد[37] که به عنوان کنترل مثبت در این مطالعه استفاده می شود. این منجر به سرکوب سیستم ایمنی می شود و خطر بالقوه تومور و بار تومور را افزایش می دهد. این بار در مدل های موش سرطان سینه تایید شده است [38]. اینکه آیا کلسیتریول اثرات مشابه راپامایسین را نشان می دهد ناشناخته باقی مانده است. مطالعات حیوانی و بالینی بیشتری باید انجام شود تا اثرات آنها در بدن انسان بررسی شود.

در نهایت، ما اثرات کلسیتریول را بر پیری آنتی اکسیدانی بررسی کردیم. رسوراترول، یک داروی معروف ضد پیری، می تواند مسیر NF-kB را با فعال کردن محور SIRT1/PERK کاهش دهد. همچنین نشان داده شده است که این کاهش در اختلالات عصبی و بیماری های قلبی عروقی مفید است [39]. استیلاسیون SIRT1 با کنترل متابولیک و بیوژنز میتوکندری همراه است. در این نوع تنظیم، افزایش سطح SIRT1 می‌تواند باعث تجمع گیرنده فعال‌شده با تکثیرکننده پراکسی زوم فعال‌کننده گاما آلفا (PGC{9}}) در هسته شود که منجر به رونویسی ژن‌هایی می‌شود که برای عملکرد میتوکندری [40]. علاوه بر این، SIRT1 هدف پستانداران مسیر سیگنالینگ راپامایسین (mTOR) را سرکوب می کند، که می تواند از اعصاب محافظت کند و در برابر پیری مغز در موش مقاومت کند [41]. در این مطالعه، ما یک مسیر تنظیمی مشابه برای کلسیتریول شناسایی کردیم. کلسیتریول SIRT1 را از طریق VDR فعال کرد و محور SIRT1/pERK را افزایش داد.

علاوه بر این، ما دریافتیم که کلسیتریول بیان SIRT1-∆Exon8 را افزایش داد. تنش ها به عنوان یک عامل تنظیم کننده بالا SIRT1-∆Exon8 شناخته می شوند. اگرچه SIRT{5}∆Exon8 خود فعالیت استیل‌زدایی p53 کاهش یافته را نشان می‌دهد، هنگامی که همراه با SIRT1 تمام طول بیان می‌شود، یک اثر استیل‌زدایی افزایشی روی p53 اعمال می‌کند [42]. این اثر نشان دهنده عملکرد ضد آپوپتوتیک کلسیتریول بر روی سلول های NK بود. با این حال، نقش SIRT1-∆Exon8 در مسیرهای مرتبط با سن هنوز باید بهتر درک شود. از آنجایی که کاهش SIRT1 ممکن است به دلیل آسیب اکسیداتیو باشد [43]، ما یک مدل سلول NK پیری حاد را در شرایط آزمایشگاهی با استفاده از H2O2 ایجاد کردیم. پیری اکسیداتیو ناشی از H2O2 بیان TIM3 و همچنین فعالیت -گالاکتوزیداز را در سلول‌های NK افزایش داد. ما دریافتیم که کلسیتریول در برابر آسیب اکسیداتیو مقاومت می کند و فعالیت میتوکندری و زنده ماندن سلولی سلول های NK را حفظ می کند و در عین حال از آپوپتوز سلولی جلوگیری می کند. با این حال، کلسیتریول هنوز به عنوان یک داروی ضد پیری در پزشکی بالینی شناسایی نشده است زیرا شواهد بیشتری در مورد اثرات ضد پیری این دارو در داخل بدن مورد نیاز است. به طور خلاصه، ما شواهد اولیه ای را برای دخیل کردن اثرات ضد پیری کلسیتریول بر سلول های NK در شرایط آزمایشگاهی ارائه کردیم. ما معتقدیم که اثرات این دارو باید در مطالعات حیوانی و بالینی آینده بیشتر مورد بررسی قرار گیرد.

5. نتیجه گیری

در این مطالعه، ما نشان دادیماثرات ضد پیریکلسیتریول روی سلول های NK کلسیتریول بیان را معکوس کردنشانگرهای زیستی پیریروی سلول های NK باعث کاهش سرعت تقویت NK شد و آنها را در فاز G1 نگه داشت. علاوه بر این، کلسیتریول از آزادسازی سیتوکین های التهابی و کاهش گرانولاسیون سلول های NK جلوگیری کرد. فعال سازی محور SIRT1-∆Exon8 و VDR/SIRT1/pERK توسط کلسیتریول ممکن است مکانیسم اصلی اثر ضد پیری کلسیتریول بر اساس همه موارد فوق باشد. در نهایت، کلسیتریول در برابر پیری اکسیداتیو سلول‌های NK در شرایط آزمایشگاهی مقاومت کرد. مطالعات بیشتر باید بر روی حیوانات و تحقیقات بالینی متمرکز شود.

نکات برجسته

(1) کلسیتریول بیان نشانگرهای زیستی مرتبط با سن شامل CD16، TIM3، PD{4}}، KIR را کاهش داد و بیان NKG2A سلول‌های NK را افزایش داد. (2) کلسیتریول قادر به مهار تکثیر سلول های NK و توقف آنها در فاز G1 بود. (3) کلسیتریول آزادسازی عوامل التهابی اصلی مانند IL{9}}، IL{10}}، IFN- و TNF- سلول های NK را کاهش داد. (4) اثر ضد پیری کلسیتریول بر سلول های NK می تواند از طریق مسیر سیگنال Sirt{15}} pERK حاصل شود.

تشکر و قدردانی ما می خواهیم از همه کارکنان گروه خود برای حمایت آنها و کمیته نوآوری علم و فناوری شنژن برای حمایت مالی آنها از این مطالعه تشکر کنیم.

تامین مالی این کار توسط کمیته نوآوری علم و فناوری شنژن (JCYJ20170412155231633)، صندوق ساخت و ساز رشته پزشکی کلیدی شنژن (شماره SZXK062)، Chengdu Wecistanche Biotech، و پروژه پزشکی Sanming در شنژن (شماره SM120Z10) حمایت مالی شد. کمیته نوآوری علم و فناوری شنژن [JCYJ20170412155231633]؛ صندوق ساختمانی رشته پزشکی کلیدی شنژن [شماره. SZXK062]; پروژه پزشکی Sanming در شنژن [شماره. SZSM202011010].

تأیید اخلاقی همه رویه‌ها توسط کمیته اخلاق بیمارستان مردمی شنژن لوهو (ZLNK 12/2019، شنژن، چین) تأیید شد. رضایت آگاهانه برای آزمایش با نمونه های انسانی به دست آمد.

بیانیه افشا همه نویسندگان ارسال این نسخه را تایید کردند. نویسندگان اعلام می کنند که هیچ منافع مالی رقیب یا روابط شخصی شناخته شده ای ندارند که بتواند بر کار گزارش شده در این مقاله تأثیر بگذارد.

منابع

[1] Ovadya Y، Landsberger T، Leins H، و همکاران. اختلال در نظارت ایمنی باعث تسریع تجمع سلول های پیر و پیری می شود. Nat Commun. 2018؛ 9 (1): 5435.

[2] López-Otín C، Blasco MA، Partridge L، و همکاران. نشانه های پیری سلول. 2013؛ 153: 1194-1217.

[3] Hodgins JJ، Khan ST، Park MM، و همکاران. Killers 2.0: درمان با سلول NK در خط مقدم کنترل سرطان قرار دارد. جی کلین سرمایه گذاری. 2019؛ 129 (9): 3499-3510.

[4] Zhu H، Blum RH، Bjordahl R، و همکاران. سلول‌های NK مشتق از سلول‌های بنیادی پرتوان با CD16a غیرقابل شکافتن با میل ترکیبی بالا باعث بهبود فعالیت ضد توموری می‌شوند. خون 2020؛ 135 (6): 399-410.

[5] ماندال A، ویسواناتان سی. سلول های کشنده طبیعی: در سلامت و بیماری. سلول های بنیادی هماتول Oncol Ther. 2015؛ 8 (2): 47-55.

[6] Le Garff-Tavernier M، و همکاران. سلول های NK انسانی تغییرات فنوتیپی و عملکردی عمده ای را در طول عمر نشان می دهند. سلول پیری 2010؛ 9 (4): 527-535.

[7] Le Garff-Tavernier M, Béziat V, Decocq J, et al. الگوهای بیان NKG2A، KIR، و CD57 فرآیندی از تمایز سلول های NK CD56dim جدا از آموزش سلول های NK را تعریف می کنند. خون 2010؛ 116 (19): 3853-3864.

[8] Manser AR، Uhrberg M. تغییرات مرتبط با سن در مجموعه سلول‌های کشنده طبیعی: تأثیر بر عملکرد سلول‌های NK و نظارت ایمنی. سرطان ایمونول ایمونوتر. 2016؛ 65 (4): 417-426. [9] بی جی، تیان زی. فرسودگی سلولی NK. جلو ایمونول. 2017؛ 8:760.

[10] Furman D، Campisi J، Verdin E، و همکاران. التهاب مزمن در علت بیماری در طول عمر نات مد. 2019؛ 25 (12): 1822-1832.

[11] لیو وای و همکاران. یک آنتی بادی مخصوص پپتید سیتومگالوویروس، هموستاز سلول های کشنده طبیعی را تغییر می دهد و در چندین بیماری خودایمنی مشترک است. میکروب میزبان سلولی 2016؛ 19 (3): 400-408.

[12] پردیس X، Pera A، Solana R، و همکاران. سلول های NK در پیری سالم و بیماری های مرتبط با سن جی بیومد بیوتکنول. 2012؛ 2012: 195956.

[13] لیو یو، مو آر، گائو وای پی، و همکاران. تأثیر پیری بر جمعیت سلولی nk و تکثیر آنها در شرایط کشت خارج از بدن. پاتول سلولی مقعد (Amst). 2018؛ 2018: 7871814.

[14] Sintov AC، Yarmolinsky L، Dahan A، و همکاران. اثرات فارماکولوژیک ویتامین D و آنالوگ های آن: پیشرفت های اخیر Drug Discov امروز. 2014؛ 19 (11): 1769-1774. [15] Halicka HD، Zhao H، Li J، و همکاران. تضعیف سیگنال‌دهی آسیب DNA سازنده توسط

بیشتر بخواهید:

ایمیل:wallence.suen@wecistanche.com whatsapp: plus 86 15292862950