RNA M6 A Reader YTHDF2 ضد تومور سلول NK و ایمنی ضد ویروسی را کنترل می کند قسمت 6

مدل ملانوم متاستاتیک و چالش MCMV

سلول های B16F1{12}} (105) به صورت داخل وریدی به موش تزریق شد. 14 روز پس از تزریق، موش ها برای تجزیه و تحلیل پس از مرگ کشته شدند. ندول های متاستاتیک در ریه به صورت ماکروسکوپی آنالیز و شمارش شدند. رده سلولی B16F10 توسط Hua Yu (شهر امید، لس آنجلس، کالیفرنیا) ارائه شد. موش‌های Ythdf2ΔNK و Ythdf2WT با تزریق IP سویه اسمیت MCMV (2.5 × 104 PFU)، که از مجموعه فرهنگ نوع آمریکایی (VR{11}}) خریداری شده بود، آلوده شدند. نمونه خون محیطی از طریق سوراخ زیر فکی در روزهای 0، 4 و 7 پس از عفونت گرفته شد.

ندول‌های متاستاز ریوی به گره‌هایی گفته می‌شود که توسط سلول‌های تومور بدخیم از مکان‌های دیگر ایجاد می‌شوند که از طریق خون یا سیستم لنفاوی به ریه‌ها مهاجرت می‌کنند. برای بسیاری از بیماران، این یک تظاهرات رایج سرطان ریه است.

با این حال، اگرچه گره های متاستاز ریه تهدیدی برای سلامت جسمی بیماران هستند، اما هیچ رابطه مستقیمی بین آن و حافظه وجود ندارد. بنابراین، باید فعالانه با چالش‌های سرطان ریه و ندول‌های متاستاز ریه روبرو شویم و اجازه ندهیم احساسات منفی و اضطراب بر سلامت جسمی و روانی ما تأثیر بگذارد.

در عین حال می‌توانیم حافظه را با روش‌های مثبت حفظ و بهبود دهیم. به عنوان مثال برخی از تمرینات حافظه مانند محاسبات ریاضی، خواندن، گوش دادن به موسیقی، بازی کردن و غیره را انجام دهید. علاوه بر این، رعایت عادات خوب زندگی مانند ورزش منظم، خواب کافی، تغذیه سالم و غیره نیز می تواند حافظه ما را بهبود بخشد

مهمترین چیز حفظ نگرش مثبت است. مهم نیست که با چه مشکلاتی روبرو هستید، باید به قدرت و انعطاف پذیری سیستم عصبی خود ایمان داشته باشید و با تعدیل ها و پاسخ های مثبت، در نهایت با موفقیت بر مشکلات غلبه کنید.

به طور خلاصه، اگرچه گره های متاستاتیک در ریه ها تهدیدی برای سلامت جسمی هستند، اما ارتباط مستقیمی با حافظه ندارند. ما باید با آن برخورد مثبت داشته باشیم و با تنظیم سبک زندگی و حفظ یک نگرش خوب، حافظه خود را حفظ و تقویت کنیم. مشاهده می شود که ما نیاز به بهبود حافظه داریم و سیستانش دسرتیکولا می تواند حافظه را به میزان قابل توجهی بهبود بخشد، زیرا سیستانش دسرتیکولا می تواند تعادل انتقال دهنده های عصبی مانند افزایش سطح استیل کولین و فاکتورهای رشد را نیز تنظیم کند. این مواد برای حافظه و یادگیری بسیار مهم هستند. علاوه بر این، Cistanche deserticola همچنین می تواند جریان خون را بهبود بخشد و اکسیژن رسانی را تقویت کند، که می تواند اطمینان حاصل کند که مغز مواد مغذی و انرژی کافی را دریافت می کند، در نتیجه نشاط و استقامت مغز را بهبود می بخشد. مشاهده می شود که ما نیاز به بهبود حافظه داریم و سیستانش دسرتیکولا می تواند حافظه را به میزان قابل توجهی بهبود بخشد، زیرا سیستانش دسرتیکولا می تواند تعادل انتقال دهنده های عصبی مانند افزایش سطح استیل کولین و فاکتورهای رشد را نیز تنظیم کند. این مواد برای حافظه و یادگیری بسیار مهم هستند. علاوه بر این، Cistanche deserticola همچنین می تواند جریان خون را بهبود بخشد و اکسیژن رسانی را تقویت کند، که می تواند اطمینان حاصل کند که مغز مواد مغذی و انرژی کافی را دریافت می کند، در نتیجه نشاط و استقامت مغز را بهبود می بخشد.

برای تقویت حافظه روی مکمل‌های شناختی کلیک کنید

برای اندازه گیری بارهای ویروسی در خون محیطی، طحال و کبد، DNA با استفاده از کیت خون و بافت QIAGEN DNeasy برای تجزیه و تحلیل qPCR جدا شد. آغازگرهای زیر استفاده شد: MCMV-IE1،59-AGCCACCAACATTGACCACGCAC-39 (به جلو) و MCMVIE1، 59-GCCCCAACCAGGACACACAACTC-39 (معکوس).

درمان in vivo موش با IL-15

برای درمان in vivo موش با IL-15، Ythdf2ΔNK و Ythdf2WTmice با 2 میکروگرم IL نوترکیب انسانی IL{4}} (شماره گربه 745101؛ موسسه ملی سرطان) به مدت 5 روز تزریق شد. سپس موش‌های تحت درمان و کنترل برای آنالیز فلوسایتومتری معدوم شدند.

فلوسیتومتری

سوسپانسیون‌های تک سلولی از BM، خون، طحال، کبد و ریه موش‌های Ythdf2ΔNK و Ythdf2WT همانطور که قبلاً توضیح داده شد تهیه شد (Wang et al., 2018b). آنالیز فلوسیتومتری و مرتب سازی سلولی به ترتیب بر روی LSRFortessa X{4}} و FACSAriaFusion Flow Cytometer (BD Biosciences) انجام شد.

داده ها با استفاده از نرم افزار NovoExpress (Agilent Technologies) مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت.

آنتی‌بادی‌های برچسب‌دار با رنگ فلورسانس زیر از BD Biosciences، BioLegend، Invitrogen، یا فناوری سیگنال‌دهی سلولی مورد استفاده قرار گرفتند: CD3ε (145-2C11)، CD19 (1D3)، Gr-1 (RB6-8C5) TER-119 (TER-119)، CD11c (N418)، CD4 (GK1.5)، CD8 (53-6.7)، CD122 (5H4)، CD132 (TUGm2)، NK1.1 (PK136), CD11b (M1/70), CD27 (LG.3A10), CD117 (2B8), CD127 (SB/199), CD135 (A2F10.1),KLRG1 (2F1), CD45 ({{46) }}F11)، CD45.1 (A20)، CD45.2 (104)، IFN- (XMG1.2)، 2B4 (m2B4)، گرانزیم B (QA16A02)، پرفورین (S16009A)، Ly49H (3D10)، Ly49D ( 4e5), CD69 (H1.2F3), CD226 (TX42.1), NKG2D (CX5), NKG2A (16A11), NKp46 (29A1.4), TIGIT(1G9), PD{88}} (J43), annexin V، Ki67 (b56)، Tbet (4b10)، و Eomes (WD1928)، phospho-p44/42 Erk1/2 (Thr202/Tyr204، #9101)، فسفو-Akt (Ser473، #5315)، پروتئین ریبوزومی فسفو-S6 ,phospho-Stat3 (Tyr705, #9145) و phospho-Stat5 (Tyr694,#9539).

برای ارزیابی تکثیر سلول‌های NK، سلول‌ها با 5 میکرومولار CTV (Invitrogen) طبق پروتکل سازنده، قبل از انتقال به موش گیرنده برچسب‌گذاری شدند. رنگ‌آمیزی داخل سلولی Ki67، Tbet و Eomes با تثبیت و نفوذپذیری با کیت رنگ‌آمیزی فاکس‌پی3/فاکتور رونویسی (eBioscience) انجام شد.

برای تشخیص پروتئین‌های فسفریله شده، سلول‌های NK طحال خالص شده با IL نوترکیب انسانی (50 نانوگرم در میلی‌لیتر) به مدت 1 ساعت پیش تیمار شدند و سپس با بافر ثابت فسفلو فیکس I و سپس نفوذپذیری با بافر فسفلو پرم III (BD Biosciences) و رنگ‌آمیزی تثبیت شدند. آنتی بادی ها

انتقال سلول پذیرفته شده

برای ارزیابی اثر کمبود Ythdf2 بر بلوغ سلول NK، مخلوطی از 5 × 106 سلول BM با نسبت 1: 1 از موش CD45.1 orYthdf2ΔNK CD45.2 به موش Rag2 - / - Il2rg - / - منتقل شد. بازسازي گيرندگان با فلوسيتومتري 8 هفته پس از پيوند ارزيابي شد.

برای آزمایش‌های تکثیر هموستاتیک ناشی از لنفوپنی، تعداد مساوی از سلول‌های NK خالص طحال از موش‌های CD45.1 یا Ythdf2ΔNK CD45.2 به موش‌های Rag2-/-Il2rg-/- منتقل شدند و پس از ارزیابی درصد نسبی سلول‌های WT و Ythdf2ΔNK انتقال داده شدند. دریافت کنندگان Rag2-/-Il2rg-/- توسط فلوسیتومتری در نقاط زمانی مشخص شده.

برای مدل ملانوم متاستاتیک، 106 سلول NK منبسط شده IL-2 از Ythdf2ΔNK یا Ythdf2WTmice به صورت داخل وریدی به موش Rag2-/-Il2rg-/- تزریق شد. 1 روز بعد، سلول های B16F10 (105) به صورت داخل وریدی به موش ها تزریق شد. 14 روز پس از تزریق، موش ها برای تجزیه و تحلیل پس از مرگ کشته شدند. در برخی آزمایش‌ها، سلول‌ها با CTV (5 میکرومولار، Invitrogen) برای ردیابی تکثیر سلولی قبل از انتقال برچسب‌گذاری شدند.

سنجش قاچاق در داخل بدن

برای تشخیص قاچاق سلول های NK از BM به خون محیطی، 1 میکروگرم آنتی بادی ضد CD45 با برچسب APC به موش های C57BL/6 تزریق شد. دو دقیقه پس از تزریق آنتی‌بادی، پوسته‌ها بلافاصله معدوم شدند و پس از رنگ‌آمیزی سلول‌ها با آنتی‌بادی‌های CD3 و NK1.1، سلول‌های BM برای فلوسیتومتری جمع‌آوری شدند. سلول‌های NK پارانشیمی با عدم رنگ‌آمیزی CD45 شناسایی شدند، در حالی که سلول‌های NK سینوسی با حضور برچسب‌گذاری CD45 شناسایی شدند. بنابراین، نسبت سلول‌های NK در سینوسی‌ها (CD{11}}) به مناطق پارانشیم (CD45-) نشان‌دهنده قاچاق سلول‌های NK از خون سطحی BM در حالت ثابت است.

RT-qPCR بلادرنگ و ایمونوبلات

RNA با استفاده از یک کیت کوچک RNeasy (QIAGEN) جدا شد و سپس طبق دستورالعمل سازنده با PrimeScript RT Reagent Kitwith gDNA Eraser (Takara Bio) به cDNA رونویسی معکوس شد. سطوح بیان mRNA با استفاده از SYBRGreen PCR Master Mix و یک سیستم QuantStudio 12K Flex Real-TimePCR (هر دو از Thermo Fisher Scientific) آنالیز شد. توالی پرایمر در جدول S1 فهرست شده است.

ایمونوبلات بر اساس روش‌های استاندارد، همانطور که قبلاً توضیح داده شد، انجام شد (Denget al., 2015; Yu et al., 2006). آنتی بادی های زیر استفاده شد: METTL3 (گربه شماره 15073-1-AP; Proteintech)، METTL14 (cat. no.26158-1-AP; Proteintech)، YTHDF1 (cat. no. 17479-1-AP ؛ Proteintech)، YTHDF2 (شماره گربه. RN123PW؛ MBL)، YTHDF3 (شماره گربه.25537-1-AP؛ Proteintech)، ALKBH5 (شماره گربه. ab195377؛ Abcam)،FTO (شماره گربه. ab124892; Abcam)، MDM2 (cat. no. 33-7100; Invitrogen)، TDP{17}} (cat. no. PA{18}}; Invitrogen) and -actin(cat. no. {{20 }}Ig؛ Proteintech).

سنجش شکست siRNA

IL-2–expanded NK cells were transfected with Accell mouse Tardbp siRNA (cat. no. E-040078-00-0005; Dharmacon) or Mdm2 siRNA (cat. no. E-041098-00-0005; Dharmacon) using Accell delivery media (Dharmacon) according to the manufacturer's instructions in the presence of IL-15 (50 ng/ml). The Accell eGFP control pool was used as siRNA control. The transfection efficiency was >90% که توسط فلوسیتومتری اندازه گیری می شود. کارایی Geneknockdown با qPCR و ایمونوبلات تعیین شد. 3 روز پس از ترانسفکشن، آپوپتوز سلولی و تکثیر با فلوسیتومتری همانطور که در بالا توضیح داده شد آنالیز شد.

سنجش گزارشگر لوسیفراز

ناحیه پروموتر Ythdf2 از -2،{2}} bp تا +100 bpof TSS از سلول‌های NK موش تقویت شد و در apGL{4}}Basic Luciferase Reporter Vector (Promega) برای تولید apGL{4} کلون شد. {5}}پلاسمید گزارشگر Ythdf2. سلول های HEK293T خریداری شده از ATCC با پلاسمیدهای گزارشگر pGL{8}}Ythdf2 و همچنین پلاسمیدهای بیان بیش از حد STAT5a یا STAT5b یا وکتور anempty همراه با پلاسمید گزارشگر pRL-TK Renilla (Promega) برای عادی سازی کارایی ترانسفکشن هم ترانسفکت شدند. سلول ها برای لیز 24 ساعت پس از ترانسفکشن برداشت شدند و فعالیت لوسیفراز به صورت فلورمتری با سیستم Dual-Luciferase (Promega) تعیین شد. توالی های پرایمر برای شبیه سازی پروموتر Ythdf2 و پلاسمیدهای بیان بیش از حد STAT5a و STAT5b در جدول S1 فهرست شده اند.

سنجش تراشه

سنجش تراشه با استفاده از کیت چیپ مغناطیسی پیرس (گروه شماره 26157؛ Thermo Fisher Scientific) طبق دستورالعمل سازنده انجام شد. به طور خلاصه، مقدار مساوی ananti-anti-phospho-Stat5 (Tyr694, Cat. No. 9351; Cell Signaling Technologies) یا IgG خرگوش معمولی کنترل متناظر به طور جداگانه برای رسوب کمپلکس های DNA-پروتئین متقابل مشتق شده از 5×5 استفاده شد. 106 سلول NK اولیه موش خالص شده که با IL{10}} (50 نانوگرم در میلی لیتر) به مدت 1 ساعت از قبل تیمار شده بودند. پس از معکوس شدن اتصال عرضی، DNA ایمونو رسوب شده توسط آنتی بادی مشخص شده توسط qPCR مورد آزمایش قرار گرفت. توالی آل پرایمرها در جدول S1 آمده است.

سنجش سمیت سلولی خارج از بدن

سمیت سلولی خارج از بدن سلول‌های NK با روش‌های استاندارد 51Crrelease ارزیابی شد. رده‌های سلولی لنفوم موش RMA-S (کلاس MHC ناکافی) و RMA (MHC کلاس I کافی) که هدیه‌ای از Andre'Veillette (دانشگاه مک گیل، مونترال، کانادا) بود، از سلول‌های ستاره استفاده شد. موش ها با تزریق داخل صفاقی پلی اینوزینیک: اسید پلی سیتیدیلیک [پلی (I: C) تحت درمان قرار گرفتند. 200 میکروگرم بر موش] به مدت 18 ساعت. سلول های NK فعال شده با پلی (I: C) از طحال با استفاده از کیت جداسازی سلولی EasySepMouse NK (STEMCELL Technologies) جدا شدند. سلول‌های PurifiedNK با سلول‌های هدف به نسبت 5:1، 2.5:1 و 1.25:1 در حضور IL{13}} (50 U/ml) کشت شدند.

دانلود: m6A-seq

سلول های NK طحال خالص شده توسط IL{0}} (1،000 U/ml، شماره گربه. Bulk Ro 23-6019؛ موسسه ملی سرطان) در شرایط آزمایشگاهی به مدت 7 روز گسترش یافتند. RNA کل توسط معرف TRIZol (Thermo FisherScientific) از 50 میلیون سلول NK منبسط شده IL-2 جدا شد. RNA پلی ادنیله شده با استفاده از کیت خالص سازی mRNA Dynabeads (Invitrogen) از RNA کل بیشتر غنی شد. نمونه‌های mRNA با معرف‌های تکه‌تکه‌کننده RNA (Invitrogen) به قطعات طول 100-nt تقسیم شدند.

mRNA قطعه قطعه شده (5 μgmRNA) برای رسوب ایمنی m6A با استفاده از آنتی بادی m6A (202003؛ سیناپتیک) به دنبال پروتکل استاندارد کیت Magna MeRIP m6A (Merck Millipore) استفاده شد. RNA از طریق RNA Clean & Concentrator{5}} (Zymo Research) برای تولید کتابخانه با کیت HyperPrep KAPA RNA (روش) غنی شد. توالی یابی در مرکز ژنومیک شهر امید بر روی دستگاه Illumina HiSeq 2500 با حالت تک خواندن 50-bp انجام شد. توالی‌خوانی‌ها با استفاده از نرم‌افزار HISAT2 v101 به ژنوم موش نگاشت شدند (Kim et al., 2015).

نقشه‌برداری‌های immunoprecipitation و کتابخانه‌های ورودی با استفاده از بسته R exomePeak ارائه شد (Meng et al., 2014). m6Apeaks با استفاده از نرم افزار Integrative Genomics Viewer (http://www.igv.org) تجسم شدند. موتیف اتصال m6A توسط MEME (https://meme-suite.org) و HOMER (http://homer.ucsd.edu/homer/motif) تجزیه و تحلیل شد. پیک های نامیده شده توسط تقاطع با معماری ژن با استفاده از Rpackage ChiPseeker (یو و همکاران، 2015) حاشیه نویسی شدند.

StringTie was used to assess expression levels for mRNAs from input libraries by calculating the total exon fragments/mapped reads in millions × exon length in kb (Pertea et al., 2015). The differentially expressed mRNAs were selected with log2(fold change) >1 orlog2 (تغییر برابر)<−1 and P < 0.05 using the R package edgeR (Robinson et al., 2010).

YTHDF2 RIP-seq

50 میلیون IL-2-سلول NK منبسط شده جمع آوری و دو بار با PBS سرد شسته شد، و گلوله سلولی با 2 حجم بافر لیز (10 میلی مولار هپس، pH 7.6، 150) لیز شد. mM KCl، 2 میلی‌مولار EDTA، 0.5% NP{10}}، 0.5 میلی‌مولار دی تیوتریتول، کوکتل مهارکننده پروتئاز 1:100 [Thermo Fisher Scientific] و 400 U/ml SUPERase-In RNase Inhibitor [Thermo Fisher Scientific].

لیز به مدت 5 دقیقه روی یخ انکوبه شد و به مدت 15 دقیقه سانتریفیوژ شد تا لیز پاک شود. یک دهم حجم لیزات سلولی به عنوان ورودی ذخیره شد. مابقی لیزات سلولی با 5 میکروگرم anti-YTHDF2 (شماره گربه RN123PW؛ MBL) که با دانه‌های مغناطیسی پروتئین A (گروه شماره 1{17}}{20}}01D؛ Invitrogen) همراه شده بود انکوبه شد. در 4 درجه به مدت 2 ساعت با چرخش ملایم. سپس، دانه‌ها پنج بار با 1 میلی‌لیتر بافر شستشوی سرد یخی (50 میلی‌مولار HEPES، pH 7.6200 میلی‌مولار NaCl، 2 میلی‌مولار EDTA، 0.05% NP{19}}، 0.5 میلی‌مولار دی تیوتریتول، و 200 U/ml RNase شسته شدند. بازدارنده).

نمونه‌های رسوب‌شده ایمنی تحت هضم پروتئیناز K در بافر شستشو با 1% SDS و 2 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر پروتئیناز K (ThermoFisher Scientific) که با تکان دادن در 1200 دور در دقیقه در دمای 55 درجه به مدت 1 ساعت انکوبه شد، قرار گرفتند. RNA کل از هر دو RNA ورودی و ایمونوفیل شده با افزودن معرف TRIZol 5 vol و سپس Direct-zol RNA Miniprep (Zymo Research) استخراج شد.

کتابخانه cDNA با کیت HyperPrep KAPA RNA (روش) تولید شد و بر روی پلت فرم Illumina HiSeq 2500 توالی یابی شد. حداکثر نتایج تماس با رسوب ایمنی و کتابخانه های ورودی توسط بسته RRIPSeeker ایجاد شد (لی و همکاران، 2013). HOMER برای یافتن موتیف های توزیع داده ها در مناطق اوج استفاده شد. پیک های نامیده شده با تقاطع با معماری ژن و رونوشت با استفاده از ChIPpeakAnno (Zhu و همکاران، 2010) حاشیه نویسی شدند.

سنجش پایداری mRNA

سلول‌های NK طحال خالص‌شده از موش‌های Ythdf2ΔNK و Ythdf2WT با IL{2}} (5{7}} نانوگرم در میلی‌لیتر) کشت شدند. 3 روز پس از کشت، سلول ها با اکتینومایسین D (5 میکروگرم در میلی لیتر، شماره گربه A9415؛ سیگما) در زمان مشخص شده تیمار شدند. سلول‌های بدون تیمار در 0 ساعت استفاده شدند. سلول‌ها در زمان مشخص شده جمع‌آوری شدند و RNA کل از سلول‌ها برای qPCR استخراج شد. نیمه عمر mRNA با استفاده از روشی که قبلا توسط Weng و همکاران (2018) توضیح داده شده بود محاسبه شد. توالی پرایمر در جدول S1 فهرست شده است.

تجزیه و تحلیل پایگاه داده آنلاین

ما از منبع آنلاین BioGPS (http://biogps.org) برای تجزیه و تحلیل بیان بافت خاص Ythdf2 استفاده کردیم. مجموعه‌های RNA-seqdata از GEO تحت شماره‌های الحاقی بودند. GSE106138، GSE113214، و GSE25672. داده های نرمال شده از آنالیزهای RNA-seq صادر شد و بیان ژن z-score با تابع Heatmap.2 در gplots Rlibrary مشاهده شد.

آمار

آزمون های t-test بدون جفت دانشجو (دو دنباله) با استفاده از نرم افزار GraphPad Prism انجام شد. آنالیز واریانس یک طرفه یا دو طرفه زمانی انجام شد که سه یا چند گروه مستقل با هم مقایسه شدند. مقادیر P برای مقایسه چندگانه با استفاده از روش Holm-Sˇ´ıdak تنظیم شد. P < 0.05 قابل توجه در نظر گرفته شد. *، P < {{10}}.05; **، P <0.01; و ***، P <0.001.

مطالب تکمیلی آنلاین

شکل S1 سطوح پروتئین YTHDF2 را در سلول های ایمنی، از جمله سلول های NK در پاسخ به تحریک IL-15، عفونت MCMV و پیشرفت تومور نشان می دهد. نسل موش با حذف خاص NKcell Ythdf2. شکل S2 تیترهای ویروسی در طحال و کبد موش‌های آلوده به MCMV و درصد و تعداد مطلق سلول‌های Ly49H+ و/یا Ly49D+ NK را در موش‌های آلوده به MCMV نشان می‌دهد. شکل S3 تکثیر، بقا، بلوغ و بیان گیرنده‌های فعال و مهارکننده سلول‌های NK را از موش‌های Ythdf2WT و Ythdf2ΔNK نشان می‌دهد. شکل S4 تنظیم بیان YTHDF2 توسط سیگنال دهی IL-15-STAT5 و بیان اجزای گیرنده های IL{16}}، مسیر PI3K-AKT، و مسیر MEK-ERK در سلول های NK از Ythdf2WT و Ythdf2ΔNK را نشان می دهد. موش. شکل S5 سنجش‌های RNA-seq، m6A-seq و RIP-seq را در سلول‌های NK نشان می‌دهد. جدول S1 آغازگرهای مورد استفاده در مطالعه را فهرست می کند.

در دسترس بودن داده ها

داده‌های RNA-seq، m6A-seq، و RIP-seq در مرکز ملی اطلاعات بیوتکنولوژی GEO تحت شماره ثبت قرار گرفتند. GSE174027. داده‌های باقی‌مانده که از یافته‌های این مطالعه پشتیبانی می‌کنند، در صورت درخواست از نویسندگان مربوطه در دسترس هستند.

قدردانی

این کار توسط مؤسسه‌های ملی بهداشت (NS106170, AI129582, CA247550, CA163205, CA223400, CA068458, and CA210087) و انجمن سرطان خون و لنفوم ({{7}DIGEN) کالیفرنیا ({{7}REGENERGEN) Medco({{7}DIGEN}}) حمایت شده است. 9}})، و جایزه پروژه استثنایی اتحاد سرطان سینه 2021. این کار همچنین تا حدی توسط یک جایزه USDA (USDA/NIFA 2020-67017-30843) پشتیبانی شد.

مشارکت نویسندگان: S. Ma، J. Yu، و MA Caligiuri این پروژه را طراحی و طراحی کردند. S. Ma، J. Yan، J. Zhang، andJ. یو آزمایش ها و/یا تجزیه و تحلیل داده ها را انجام داد. Z. Chen، L.-S.Wang، JC Sun، و J. Chen معرف‌ها و پشتیبانی مواد را ارائه کردند. S. Ma، J. Yu، J. Chen و MA Caligiuri مقاله را نوشتند، بررسی کردند و/یا تجدید نظر کردند. همه نویسندگان نتایج را مورد بحث و بررسی قرار دادند و در مورد مقاله نظر دادند.

افشاگری ها: جی. چن "دیگر" را از Genovel BiotechCorp گزارش کرد. خارج از کار ارائه شده و یک بنیانگذار علمی شرکت Genovel Biotech و یک مشاور علمی سرطان شناسی نژادی است. هیچ افشای دیگری گزارش نشده است.

منابع

1. Arase، H.، ES Mocarski، AE Campbell، AB Hill، و LL Lanier. 2002. شناسایی مستقیم سیتومگالوویروس با فعال سازی و مهار گیرنده های NKcell. علوم پایه. 296:1323-1326.

2. Ayala، YM، T. Misteli، و FE Baralle. 2008. TDP{2}} فسفوریلاسیون پروتئین رتینوبلاستوما را از طریق سرکوب بیان کیناز 6 وابسته به سیکلین تنظیم می کند. Proc. Natl. آکادمی علمی ایالات متحده آمریکا. 105:3785-3789.

3. Barbieri، I.، K. Tzelepis، L. Pandolfini، J. Shi، G. Millan-Zambrano، SC Robson، 'D. Aspris، V. Migliori، AJ Bannister، N. Han، و همکاران. 2017. METTL3 با پروموتر بوند، لوسمی میلوئیدی را با کنترل ترجمه وابسته به m6A حفظ می کند. طبیعت. 552:126-131.

4. Becknell، B.، و MA Caligiuri. 2005. اینترلوکین-2، اینترلوکین-15، و نقش آنها در سلولهای کشنده طبیعی انسان. Adv. ایمونول. 86:209-239.

5. Bertoli، C.، JM Skotheim، و RA de Bruin. 2013. کنترل رونویسی چرخه سلولی در مراحل G1 و S. نات. کشیش مول. سلول بیول. 14:518-528.

6. بزمن، NA، سی سی کیم، جی سی سان، جی. مین-او، دی دبلیو هندریکس، ی. کامیمورا، جی بست، آ.و گلدراث و ال ال لنیر. کنسرسیوم پروژه ژنوم ایمونولوژیک. 1391. تعریف مولکولی هویت و فعال سازی سلول های کشنده طبیعی. نات. ایمونول. 13:1000–1009.

7. Carson، WE، JG Giri، MJ Lindemann، ML Linett، M. Ahdieh، R. Paxton، D.Anderson، J. Eisenmann، K. Grabstein، و MA Caligiuri. 1994. اینترلوکین (IL) 15 یک سیتوکین جدید است که سلول های کشنده طبیعی انسان را از طریق اجزای گیرنده IL{3}} فعال می کند. J. Exp. پزشکی 180:1395–1403.

8. Carson، WE، TA Fehniger، S. Haldar، K. Eckhert، MJ Lindemann، CF Lai، CM Croce، H. Baumann، و MA Caligiuri. 1997. نقش بالقوه اینترلوکین{2}} در تنظیم بقای سلول های کشنده طبیعی انسان. J. کلین سرمایه گذاری. 99:937-943.

9. چان، سی جی، ام جی اسمیت و ال. مارتینت. 2014. مکانیسم های مولکولی فعال سازی سلول های کشنده طبیعی در پاسخ به استرس سلولی. سلول DeathDiffer. 21:5-14.

10.Chen، X.، J. Han، J. Chu، L. Zhang، J. Zhang، C. Chen، L. Chen، Y. Wang، H.Wang، L. Yi، و همکاران. 2016. درمان ترکیبی سلولهای EGFR-CAR NK و ویروس هرپس سیمپلکس انکولیتیک 1 برای متاستازهای مغزی سرطان پستان. Oncotarget. 7:27764–27777.

For more information:1950477648nn@gmail.com