اگزوزوم های ادراری مسیرهای التهابی در آسیب حاد کلیه مرتبط با وانکومایسین را شناسایی می کنند

مخاطب:joanna.jia@wecistanche.com/ واتساپ: 008618081934791

لیندا آودیشو 1،*، امی لی 1، جردن آماتو 1، ویدیوت جانی 1، سوما بال 2، رابرت اچ میلز 1، مارویک کاریلو-ترازاس 1، دیوید جی. گونزالس 1، آشیتا تولوانی 3، آنجلی آچاریا 4، خورخه سردا 5، ملانی اس. جوی 6،7، پائولا نیکولتی 8، اتین ماسدو 2، سوچتا واینگانکار 2، راویندرا مهتا 2، ساتیش پی راماچاندرا رائو 9 و به نمایندگی از محققین مستقیم †

1 دانشکده داروسازی و علوم دارویی اسکاگز، دانشگاه کالیفرنیا، سن دیگو، CA 92093، USA;a6le@ucsd.edu (AL); jegilmor@ucsd.edu (JA); vgjani@ucsd.edu (VJ); rhmills@health.ucsd.edu (RHM);mac215@health.ucsd.edu (MC-T.); djgonzalez@ucsd.edu (DJG)

2 دانشکده پزشکی، دانشگاه کالیفرنیا، سن دیگو، CA 92093، ایالات متحده; sobal@ucsd.edu (SB);emacedo@ucsd.edu (EM); svaingankar@health.ucsd.edu (SV); rmehta@ucsd.edu (RM)

3 School of Medicine, University of Alabama, Birmingham, AL 35233, USA; atolwani@uab.edu

4 Albert Einstein College of Medicine, The Bronx, NY 10461, USA; anjali2526@gmail.com

5 کالج پزشکی آلبانی، آلبانی، نیویورک 12208، ایالات متحده آمریکا؛ jorge.cerda82@gmail.com

6 بخش بیماری های کلیوی و فشار خون، دانشکده داروسازی و داروسازی اسکاگز، آرورا، CO 80045، ایالات متحده آمریکا. MELANIE.JOY@cuanschutz.edu

7 دانشکده پزشکی، دانشگاه کلرادو، آرورا، CO 80045، ایالات متحده آمریکا

8 دانشکده پزشکی Mount Sinai، نیویورک، NY 10029، ایالات متحده; paola.nicoletti@mssm.edu

9 گروه پزشکی سلولی و مولکولی، سیستم پزشکی دانشگاه میشیگان، ان آربور، MI 48109، ایالات متحده; satishpr@med.umich.edu

* مکاتبات: lawdishu@ucsd.edu; تلفن: به علاوه 858-534-3919

† عضویت محققین مستقیم در قدردانی ها ارائه شده است.

خلاصه:

زمینه:وانکومایسین معمولا به عنوان درمان خط اول برای ارگانیسم های گرم مثبت مانند استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سیلین استفاده می شود. حاد ناشی از وانکومایسینکلیهصدمه(V-AKI) در 43 درصد از بیماران گزارش شده است، به ویژه در بیمارانی که غلظت های پایین هدفمند بالاتری دارند. مکانیسم دقیق آسیب در انسان، با شواهد اخیر که به سمت آپوپتوز سلول توبول پروگزیمال هدایت شده است، هنوز مبهم باقی مانده است. در این مطالعه، ما محتوای پروتئین اگزوزوم‌های ادراری را در بیماران مبتلا به V-AKI بررسی کردیم تا نشانگرهای زیستی مکانیسم‌های آسیب و پاسخ‌های بالقوه را روشن کنیم. روش‌ها: نمونه‌های ادرار از بیماران مبتلا به V-AKI که در مطالعه DIRECT ثبت‌نام شده بودند و با کنترل سالم از UAB-UCSD O'Brien CenterBiorepository در آنالیز قرار گرفتند. اگزوزوم ها با استفاده از اصل خروج حلال و رسوب ناشی از پلی اتیلن گلیکول استخراج شدند. هویت و کمیت پروتئین توسط کروماتوگرافی مایع طیف‌سنجی جرمی بدون برچسب (LC/MS) تعیین شد. میانگین پیک کراتینین سرم 4/1 ± 7/3 میلی‌گرم در دسی‌لیتر و زمان تاکلیهصدمه4.{1}} ± 3.0 روز بود. در هنگام ترخیص، 90 درصد بیماران بهبودی نسبی را نشان دادند. 33 درصد در روز 28 بهبودی کامل را تجربه کردند. آنالیزهای پروتئومی روی پنج نمونه V-AKI و 7 نمونه شاهد، 2009 پروتئین را در همه نمونه ها و 251 پروتئین را به طور قابل توجهی با V-AKI نشان داد (نمره Pi > 1). پروتئین‌های متمایز برتر عبارت بودند از کمپلمان C3، مکمل C4، پروتئین اتصال‌دهنده گالکتین، فیبرینوژن، آلفا{17}} ماکروگلوبولین، مو ثابت سنگین ایمونوگلوبولین، و سروترانسفرین.

نتیجه:اگزوزوم های ادراری افزایش تنظیم پروتئین های التهابی را پس از آسیب نفروتوکسیک در V-AKI نشان می دهد. مطالعات بیشتر برای یک نمونه بزرگ بیمار ضروری است تا این یافته ها را برای روشن شدن مکانیسم های پاتوفیزیولوژیک و اعتبار بیومارکرهای آسیب احتمالی تایید کند.

کلید واژه ها:وانکومایسین؛ AKI; سمیت کلیوی؛ اگزوزوم ها التهاب؛ متمم؛ مسیرهای ایمنی

گیاه سیستانچمی تواند آسیب کلیه را درمان کند

چنگدو Wecistanche داردسیستانچمحصولاتی برای درمان آسیب کلیه

1. مقدمه

وانکومایسین یک آنتی بیوتیک گلیکوپپتیدی است که برای درمان عفونت های استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سیلین در بیماران بدحال استفاده می شود. سمیت کلیوی یک عارضه جانبی جدی است که 10 تا 20 درصد از بیماران تحت درمان را تحت تأثیر قرار می دهد و با افزایش طول مدت بستری در بیمارستان، 30-نرخ بستری مجدد در بیمارستان یک روزه، و مرگ و میر همه علل 30-روزانه [1] همراه است. حاد مرتبط با وانکومایسینکلیهصدمه(V-AKI) وابسته به دوز و با شروع 4 تا 17 روز شروع درمان است. اگرچه V-AKI به مدت طولانی به عنوان یک عارضه جانبی اصلی وانکومایسین شناخته شده است، مکانیسم های سمیت کلیوی هنوز به خوبی شناخته نشده است. درک پاسخ‌های سلولی و مولکولی ایجاد شده توسط وانکومایسین برای درک مکانیسم‌ها و توسعه استراتژی‌هایی برای به حداقل رساندن خطر V AKI و هزینه‌های مرتبط و در عین حال به حداکثر رساندن اثربخشی آن در درمان عفونت‌ها از اهمیت کلیدی برخوردار است. به نظر می رسد که پاسخ سمی کلیوی ناشی از اثر مستقیم وانکومایسین بر روی اپیتلیوم لوله های پروگزیمال باشد [2]. تا به امروز، رویکردهای توکسیکوژنومیک استاندارد برای مطالعه V-AKI در مدل‌های موش استفاده شده است، اما مطالعات انسانی وجود ندارد [3-5]. مدل‌های حیوانی نشان می‌دهند که تجویز وانکومایسین باعث ایجاد استرس اکسیداتیو می‌شود که ممکن است به آسیب کلیه کمک کند [6،7]. یکی از مکانیسم‌های احتمالی آسیب، به دام افتادن دارو در سلول‌های لوله‌ای پروگزیمال است، زیرا توسط ناقل‌های کاتیون آلی (OCTs) از غشای قاعده‌ای جانبی و به داخل سلول توبول پروگزیمال منتقل می‌شود، اما هیچ مکانیسم انتقال جریان فعال شناسایی نشده است [6]. -8].

اگزوزوم ها وزیکول های میکروسیتی مشتق از غشاء هستند که نقش کلیدی در ارتباطات بین سلولی و تحویل پروتئین/نوکلئیک اسید دارند و پتانسیل کشف بیومارکرهای جدید را برای کمک به تشخیص بالینی فراهم می کنند.کلیهصدمه[9]. پیشنهاد شده است که اگزوزوم ها دارای ویژگی و حساسیت بیشتری برای کشف نشانگرهای زیستی هستند که به پایداری نمونه ها نسبت به روش های ترانس کریپتومی و پروتئومی با استفاده از نمونه های سرم و ادرار معمولی نسبت داده می شود [9]. در این مطالعه، ما این فرضیه را آزمایش کردیم که تغییر در پروتئین‌های اگزوزوم ادرار در پاسخ به V-AKI به روشن شدن مکانیسم‌های آسیب و شناسایی بیومارکرهای جدید در بین بیماران مبتلا به آسیب کلیوی ناشی از دارو کمک می‌کند. برای این کار، ما از افراد از مطالعه کنسرسیوم آسیب کلیوی ناشی از دارو (DIRECT) استفاده کردیم، که یک گروه بین‌المللی و چند مرکزی از موارد بالینی قضاوت شده حاد ناشی از دارو است.کلیهصدمهو کنترل‌های مبتنی بر جمعیت برای بررسی پیش‌بینی‌کننده‌های فارماکوژنومیک با استفاده از یک ارتباط گسترده ژنومی. جزئیات مطالعه DIRECT در بخش روش ها و انتشار اخیر آزمایشگاه ما توضیح داده شده است [10].

2. نتایج

نمونه ادرار از 22 نفر، 10 مورد V-AKI، و 12 کنترل، در آنالیز قرار گرفتند. مشخصات دموگرافیک بیمار بین موارد V-AKI و شاهد مشابه بود و در جدول 1 خلاصه شده است. همانطور که انتظار می رفت، شیوع فشار خون بالا، دیابت و نارسایی قلبی در موارد V-AKI در مقایسه با گروه شاهد بیشتر بود (جدول 1).

همه موارد V-AKI مرحله 2 یا بالاتر AKI را ایجاد کردند که توسط معیارهای بهبود بیماری کلیوی (KDIGO) تعریف شده است (شکل 1) [11]. شروع V-AKI 4.{6}} ± 3.0 روز پس از شروع وانکومایسین رخ داد. دوره زمانی تغییرات در کراتینین سرم (Scr) پس از بستری شدن در بیمارستان تا ترخیص از بیمارستان و پس از آن، در شکل 1 نشان داده شده است.

شکل 1. تغییرات در کراتینین سرم نسبت به دوره V-AKI. این شکل تغییرات کراتینین سرم را در 10 مورد در طول دوره حاد مرتبط با وانکومایسین نشان می دهد.کلیهصدمهاز بستری شدن در بیمارستان تا روز 90 پس از آسیب. نقاط زمانی مربوط به زمان مطالعه کنسرسیوم آسیب کلیوی ناشی از دارو (DIRECT) است. اختصارات: SCr=کراتینین سرم، بستری در بیمارستان =، Predrug=قبل از قرار گرفتن در معرض دارو، DIRI=تعریف آسیب کلیوی ناشی از دارو، DrugDC {{8} } قطع دارو یا کاهش دوز، Nadir Scr=کمترین سرم بعد از V-AKI، ترخیص از بیمارستان Disch=

عوامل خطر اولیه در موارد V-AKI شامل سپسیس (30 درصد)، بیماری قلبی (30 درصد)، دیابت شیرین (30 درصد)، کم خونی (20 درصد)، قرار گرفتن در معرض رادیو کنتراست (10 درصد)، بیماری کبد (10 درصد)، و هیپوآلبومینمی (10 درصد) (شکل 2).

حداکثر، موارد V-AKI دوره های دوز سه داروی ونکومایسین را دریافت کرده بودند. دوزهای روزانه وانکومایسین از 00 تا 4000 میلی‌گرم متغیر بود. میانگین (محدوده بین چارکی (IQR)) تعداد روزهای صرف شده در هر قسمت از دوز در شکل 3 نشان داده شده است. میانگین (انحراف استاندارد (SD)) غلظت پایین پلاسمایی وانکومایسین مرتبط با قسمت های دوز 1-3 در 8.1 ± 20.6 افزایش یافت. به ترتیب 16.3 ± 29.6، 13 ± 38.0 میلی گرم در لیتر. با این حال، تفاوت در غلظت بین هر یک از قسمت‌ها از نظر آماری معنی‌دار نبود (قسمت 1 در مقابل 2 p=0.5، قسمت 2 در مقابل 3 p=0}.41)

سایر داده های پیامدها در جدول 2 خلاصه شده است. با توجه به شدت آسیب، 20 درصد از بیماران نیاز به درمان جایگزین کلیه داشتند. مرگ و میر داخل بیمارستانی 10 درصد بود. پس از ترخیص از بیمارستان، 90 درصد بیماران از V-AKI بهبود نیافتند. شش بیمار در روز 28 پس از آسیب و چهار بیمار در روز 90 اندازه‌گیری شدند. در روز 28، دو نفر از شش بیمار (33 درصد) AKD داشتند اما هیچ‌کدام از چهار بیمار باقی‌مانده تا روز 90 AKD نداشتند.کلیهبیوپسی در 20 درصد موارد V-AKI انجام شد (جدول 2).

12 نمونه ای که پس از اعمال فیلتر برای تطبیق پپتیدها با طیف های همبستگی آنها برای آنالیز واجد شرایط بودند، در مجموع حاوی 2009 پروتئین بودند. این پروتئین ها بیشتر مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. ابتدا، یک تجزیه و تحلیل مختصات اصلی (PCoA) برای مقایسه پروتئوم کلی هر نمونه انجام شد. این تجزیه و تحلیل یک جدایی معنی‌دار (P-value PERMANOVA=0.037) بین AKI و نمونه‌های شاهد (شکل 4) را نشان داد، که فنوتیپ سطح سیستمیک را در سطح پروتئین اگزوزوم نیز خلاصه می‌کند، بنابراین اطمینان ما را در این مجموعه داده‌ها افزایش می‌دهد. . قدرت ارتباط بین هر پروتئین و وضعیت V-AKI با استفاده از متریک pi-value رتبه‌بندی شد که اهمیت p-value را با تغییر برابری ترکیب می‌کند [12].

شکل 4. ترکیب پروتئوم اگزوزوم های ادراری بیماران و گروه کنترل V-AKI را متمایز می کند. (الف) تجزیه و تحلیل مختصات اصلی پروتئوم های نمونه. متریک فاصله Bray-Curtis برای محاسبه تفاوت بین پروتئوم نمونه استفاده شد و نمودار مختصات اصلی نشان داده شده است. جداسازی در امتداد محورهای 1 و 3 بین نمونه‌های AKI (قرمز) و نمونه‌های شاهد (آبی) مشاهده شد. (ب) باکس پلات که فاصله Bray-Curtis بین نمونه های کنترل و AKI را خلاصه می کند. جداسازی آماری بین نمونه های AKI و شاهد نشان داده شده در (A) با استفاده از آزمون آنالیز واریانس جایگشتی (PERMANOVA) مورد آزمایش قرار گرفت. نمودارهای جعبه ای نشان داده می شوند که نتایج را در هنگام مقایسه فواصل شاهد یا نمونه های AKI با نمونه های کنترل خلاصه می کنند.

در مرحله بعد، مقایسه دوتایی بین V-AKI و نمونه‌های شاهد، 42 پروتئین را به دست آورد که به طور معنی‌داری با فنوتیپ AKI و 26 پروتئین مرتبط با فنوتیپ کنترل (نمره پی > 1) مرتبط بودند (جدول تکمیلی S1). نمودار آتشفشانی که اهمیت و تغییر چین مرتبط با هر پروتئین را نشان می دهد در شکل 5A نشان داده شده است. برترین پروتئین‌های متمایزکننده برای موارد V-AKI فیبرینوژن، مکمل C3، مکمل C4، پروتئین اتصال‌دهنده گالکتین، ماکروگلوبولین آلفا{11}}، مو ثابت سنگین ایمونوگلوبولین، و سروترانسفرین بودند (شکل 5B). تجزیه و تحلیل غنی‌سازی مجموعه ژن در میان پروتئین‌های مهم برای شناسایی دسته‌های پروتئین‌های تغییر یافته در بیماران V-AKI انجام شد و نتایج در جدول تکمیلی S1 خلاصه شده‌اند. چندین پروتئین که با فنوتیپ AKI مرتبط بودند نشان داده شد که عملکردهای مرتبط با التهاب و/یا واسطه فنوتیپ التهابی دارند. برای آزمایش اینکه آیا این تغییرات پروتئینی ممکن است با تغییرات در سیگنال دهی سیتوکین زمینه ای مرتبط باشد، یک استنباط سیتوکین انجام شد که نشان دهنده رابطه قوی بین پروتئین های مرتبط با AKI و سیتوکین های IL10، IL6 و TNF بود. این سیتوکین ها به ترتیب دارای 2.8، 2.3 و 2 بودند.{24}}برابر اتصالات بیشتر به پروتئین های مرتبط با AKI نسبت به پروتئین های مرتبط با کنترل، همانطور که در شکل 5C خلاصه شده است. شبکه‌های برهمکنش پروتئین-پروتئین پروتئین‌های مرتبط با AKI و سیتوکین‌های استنباط‌شده، ارتباطات عمدتاً پیش‌التهابی را در بین پروتئین‌های مرتبط با AKI نشان دادند که در شکل 5D خلاصه شده است.

شکل 5. ارتباط سطح پروتئین با V-AKI. (الف) نمودار آتشفشان نشان دهنده اهمیت تغییر برابر و آزمون t هر پروتئین به وضعیت V-AKI. 10 پروتئین برتر مرتبط با وضعیت AKI و کنترل به ترتیب با رنگ های آبی و قرمز نشان داده شده اند. سایر پروتئین های مرتبط بر اساس امتیاز Pi > 1 با رنگ زرد نشان داده شده اند. (B) نمره Pi، که هم برای تغییر برابری و هم اهمیت آزمون t برای هر پروتئین محاسبه شد و پروتئین‌هایی با قوی‌ترین انجمن‌ها ترسیم شدند. (C) تاپ سیتوکین های مرتبط با AKI یا پروتئین های کنترل. یک رویکرد استنتاج سیتوکین مبتنی بر شبکه اتخاذ شد و سیتوکین‌هایی که قوی‌ترین نمرات غنی‌سازی را نسبت به AKI یا پروتئین‌های مرتبط با کنترل نشان می‌دهند نشان داده شده‌اند. نوارهای قرمز نشان دهنده سیتوکین های مربوط به پروتئین های مرتبط با AKI، نوارهای آبی نشان دهنده سیتوکین های مربوط به پروتئین های مرتبط با کنترل است. (د) شبکه برهمکنش پروتئین-پروتئین پروتئین های مرتبط با AKI و سیتوکین های استنباط شده غنی شده با AKI. لبه بیرونی گره های پروتئینی وابسته به ارتباط با سیتوکین های طرفدار یا ضد التهابی رنگی است. اندازه هر گره نشان دهنده قدرت ارتباط آماری هر پروتئین با وضعیت AKI است.

Cistanche tubulosaمی تواند آسیب کلیه را درمان کند

3. بحث

ما یک رویکرد جدید برای استفاده از اگزوزوم های ادراری برای اطلاع رسانی مکانیسم های پاتوفیزیولوژیک درگیر در ناشی از دارو گزارش می کنیم.کلیهصدمهاستفاده از وانکومایسین به عنوان سم اولیه کلیوی. یکی از نقاط قوت این مطالعه، ادغام داده‌های مشخص شده در سطح بیمار از مطالعه DIRECT [10] است که برای روشن کردن مکانیسم‌هایی از جمله ژنومیک ناشی از دارو ایجاد شده است.کلیهصدمه. افراد با AKI مرحله 2 یا بالاتر در ابتدا در معرض عوامل خطر متعارف قرار گرفتند. تمام افراد مورد مطالعه علیرغم دریافت دوزهای روزانه کمتر از آستانه سمیت کلیوی پذیرفته شده 4 گرم در روز، به طور قابل توجهی غلظت پایین وانکومایسین پلاسما را افزایش دادند [13]. بسیاری از افراد پس از ترخیص از بیمارستان به طور کامل از V-AKI بهبود نیافتند و در ماه بعد از آسیب دچار بیماری حاد کلیوی بودند. همانطور که انتظار می رفت، تعداد کمی از بیماران بیوپسی کلیه دریافت کردند.

پروتئومیکس ادراری اگزوزوم/وزیکول خارج سلولی (EV) نشان داد که پروتئین‌های تمایز هدفمند برای موارد V-AKI شامل مکمل C3، مکمل C4، پروتئین اتصال‌دهنده گالکتین، فیبرینوژن، آلفا{4} ماکروگلوبولین، موی ثابت سنگین ایمونوگلوبولین است. و سروترانسفرین این یافته‌های اگزوزوم مکانیسم‌های آسیب را در سطح درون سلولی/فوق مولکولی برای V-AKI نشان می‌دهد و به طور بالقوه به عنوان نشانگرهای زیستی در امتداد روند بیماری ناشی از دارو عمل می‌کند.

اگزوزوم ها، موجود در خون و ادرار، نقش مهمی در ارتباطات بین سلولی، انعقاد و مدیریت مواد زائد دارند [14]. پس از حاد مرتبط با سمکلیهصدمهاگزوزوم‌های آزاد شده از سلول‌های اپیتلیال لوله‌ای ممکن است سیگنال‌های آسیب را برای جذب نفوذ ماکروفاژها و ترویج التهاب لوله‌های بینابینی ارسال کنند [15]. ما استدلال کردیم که محتوای پروتئین اگزوزوم ها بین موارد V-AKI و افراد سالم متفاوت است. دویست و پنجاه و یک پروتئین در V-AKI تنظیم نشدند، و به نظر می‌رسد که این پروتئین‌ها عمدتاً در مسیرهای التهابی و انعقادی نقش دارند. در بین این 251 پروتئین، تجزیه و تحلیل ما نشان داد که مکمل C3، مکمل C4، پروتئین اتصال‌دهنده گالکتین، فیبرینوژن، آلفا{8} ماکروگلوبولین، مو ثابت سنگین ایمونوگلوبولین و سروترانسفرین به طور معنی‌داری با موارد V-AKI مرتبط هستند.

بر اساس نتایج ما که C3 و C4 جزو برترین پروتئین‌های اگزوزوم V-AKI بودند، پیشنهاد می‌کنیم که فعال‌سازی یک سیستم مکمل در آسیب لوله‌ای کلیوی ناشی از وانکومایسین دخیل است. این همچنین با ادبیات منتشر شده مطابقت دارد که فعال شدن سیستم مکمل در گلومرولونفریت کمپلکس ایمنی و مجموعه متنوعی از بیماری های کلیوی نقش دارد [16]. آسیب کلیه ناشی از فعال سازی مکمل در AKI به دلیل ایسکمی یا قرار گرفتن در معرض نفروتوکسین با رویدادهای التهابی سیستمیک که باعث آسیب ارگان از راه دور و مرگ و میر بیماران می شود مرتبط است [17]. در مدل‌های آسیب ایسکمی-پرفیوژن مجدد (IR)، هیپوکسی، کاهش ATP و آسیب میتوکندریایی منجر به تولید رادیکال‌های اکسیژن آزاد در جریان خونرسانی مجدد می‌شود [18]. سیتوکین‌ها، کموکاین‌ها و فعال‌سازی مکمل، التهاب را تقویت می‌کنند و منجر به آسیب حاد لوله‌ای می‌شوند. علاوه بر این، موش‌های دارای کمبود گیرنده C3a و C5a از آسیب IR محافظت می‌شوند [19،20]. نشان داده شده است که آسیب IR تولید محلی اجزای مکمل را تنظیم می کندکلیهسلول های اندوتلیال و لوله ای [16،21]. چندین مطالعه بر روی مدل‌های حیوانی و افراد انسانی، افزایش رسوب محصولات پروتئینی مکمل مانند C3 و C4 را در امتداد غشای پایه لوله‌ای پس از ضربه یا آسیب در بدن شناسایی کرده‌اند.کلیه. این افزایش سطح رسوبات به طور قابل توجهی در ناحیه اطراف لوله یا گلومرول وجود ندارد، اما به شدت در غشای لوله‌ای متمرکز است، همانطور که در نمونه‌برداری از کلیه‌های انسان و مدل حیوانی دیده می‌شود [17]. اگزوزوم ها و EV ها می توانند اجزای کمپلمان گردش خون را هنگامی که فعال سازی کمپلمان بی نظم باشد منتقل کنند [22،23]. چندین آزمایش سلولی و مشاهدات بالینی تأیید کرده اند که EV های آزاد شده، پروتئین های مکمل را حمل و تعدیل می کنند و به طور همزمان، تولید آنها در شرایط التهابی نیز می تواند بر تعداد وزیکول های گردش خون تأثیر بگذارد [23]. این وابستگی متقابل دو فرآیند منجر به این نتیجه می‌شود که EVها پتانسیل بودن منابع نشانگر زیستی، اهداف و عوامل تحویل درمانی را نسبت به مکمل‌ها و ترکیبات تعدیل‌کننده ایمنی نشان می‌دهند که در حوزه مکانیسم‌های التهابی AKI بسیار مرتبط هستند. یافته‌های ما که نمونه‌های V-AKI در مقایسه با افراد سالم، نقش پاسخ‌های ایمنی به سمیت مستقیم وانکومایسین در سلول‌های لوله‌ای کلیه را نشان می‌دهد. علاوه بر تمام محتوای پروتئین فوق، اگزوزوم ها/EV های مشتق شده از ادرار همچنین نشانگرهای زیستی غیرتهاجمی بالقوه را به عنوان جایگزینی برای بیوپسی کلیه برای شناسایی و اطلاع رسانی در مورد نقش سیستم مکمل در القای دارو نشان می دهند.کلیهصدمه.

اگرچه بسیاری از مطالعات قبلی (برای منابع خاص به چند جمله بعدی مراجعه کنید) بر نقش گالکتین-3 (Gal-3) درکلیهصدمه، اطلاعات کمی در مورد پروتئین اتصال دهنده گالکتین-3 (Gal-3-bp) وجود دارد. Gal{2}} در لوله‌های جمع‌آوری کلیه بیان می‌شود و برای ترویج نفروژنز، تعدیل برهمکنش‌های سلول-سلول و ماتریس سلول، و تنظیم التهاب عمل می‌کند [24-26]. هندرسون و همکاران نقش Gal{7}} را در التهاب بررسی کرد و دریافت که Gal-3 یک جزء کلیدی در التهاب مزمن و در صورت عود آسیب بافتی است. این "دیواره کردن" آسیب بافتی را تسهیل می کند و گسترش آسیب را به تاخیر می اندازد [27]. علاوه بر این، نیشیاما و همکاران. در موش‌های مبتلا به AKI ایسکمیک نشان داد که mRNA Gal{10}} تنظیم مثبت شده است، و خونرسانی مجدد زیر، ایمونوهیستوشیمی افزایش Gal{11}} را در بخش‌های نفرون نشان داد [25]. تسوچیاما و همکاران دریافتند که تجویز Gal{13}} در موش‌های مبتلا به نفریت سرم نفروتوکسیک منجر به کاهش دفع پروتئین ادرار، تشکیل هلال و کاهش نفوذ ماکروفاژها به گلومرول‌ها شد [28]. این نشان می‌دهد که پس از آسیب ایسکمیک یا آسیب ناشی از سیستم ایمنی، Gal{16}} در بازسازی نقش دارد. به‌عنوان شریک همزاد Gal{17}}، نقش اساسی Gal-3-bp، و دلیل بالارفتن آن در آسیب‌های نفروتوکسیک ناشی از وانکومایسین و سایر عوامل، تمرکز ضروری در تحقیقات آینده خواهد بود.

مطالعه ما همچنین نشان داد که هر سه زیرواحد فیبرینوژن در تطابق خوبی با داده‌های منتشر شده قبلی، بی‌نظم هستند. فیبرینوژن یک مولکول پلاسما دایمر محلول است و هر دایمر از سه پلی پپتید آلفا، بتا و گاما تشکیل شده است [29]. نقش کلیدی در هموستاز و انعقاد دارد، اما نشان داده شده است که در تنظیم شرایط ناشی از التهاب نیز مهم است [30-32]. آجی و همکاران نشان داد که در دسترس بودن فیبرینوژن برای عملکرد کلیه، التهاب و بقا مهم است [33]. علاوه بر این، فیبرینوژن ممکن است اثر ضد چسبندگی روی سلول های اپیتلیال کلیه داشته باشد که ممکن است با کمک به جلوگیری از انسداد لوله مفید باشد [34]. فیبرینوژن به طور قابل توجهی در AKI افزایش یافته و تنظیم می شود و قبلاً به عنوان یک نشانگر زیستی بالقوه برای تشخیص زودهنگام AKI ارزیابی شده است [29]. هافمن و همکاران، تغییر فیبرینوژن را پس از ایسکمی/پرفیوژن مجدد و تجویز سیس‌پلاتین در موش‌ها مطالعه کردند و mRNA 30 دقیقه پس از آسیب IR دوطرفه تنظیم شد و در 48 تا 72 ساعت به اوج رسید، در حالی که در تجویز سیس پلاتین، بیان mRNA فیبرینوژن کاهش یافت. در ساعت 24 شناسایی شد [29]. فیبرینوژن ادراری در اوایل 3 ساعت پس از آسیب ایسکمیک خونرسانی مجدد و 24 ساعت پس از تجویز سیس پلاتین شناسایی شد که با افزایش زیادی درکلیهصدمهمولکول 1 (KIM{1}}) [29].

مزایای سیستانچ: می تواند درمان کندآسیب کلیه

از نظر تاریخی، دو مکانیسم پاتوفیزیولوژیکی مختلف برای V-AKI به طور کلی پذیرفته شده است، نکروز حاد توبولار ناشی از اثرات سمی مستقیم و نفریت بینابینی حاد. اپیتلیوم لوله پروگزیمال کلیه در نکروز حاد توبولار دچار از دست دادن یکپارچگی اسکلت سلولی، نکروز و آپوپتوز می شود [35]. سلول‌های نکروز مولکول‌هایی را آزاد می‌کنند که سیستم ایمنی ذاتی را تنظیم می‌کنند و باعث التهاب و تسریع آسیب لوله‌ها می‌شوند [35]. در مطالعه حاضر، ما نشانگرهای التهابی را در EVs ادراری بیماران مبتلا به V-AKI نشان دادیم. علاوه بر این، ما یک رابطه پیش‌التهابی بین سیتوکین‌های IL10، IL6 و TNF و پروتئین‌های متمایز کننده برتر AKI خود پیدا کردیم. در مجموع، این داده‌ها نشان می‌دهند که پاتوفیزیولوژی V-AKI یکی از سمیت‌های لوله‌ای با تنظیم مثبت التهاب در طول دوره 24 تا 72 ساعت پس از آسیب است.

چندین محدودیت برای مطالعه ما وجود دارد. حجم نمونه کوچک 22 بیمار که مرد و عمدتاً قفقازی بودند، تعمیم یافته های ما را به سایر جنسیت ها، نژادها و قومیت ها محدود می کند. محدودیت دوم برای مطالعه ما این بود که نمونه اگزوزوم ادرار هر بیمار دارای مقادیر متفاوتی از پروتئین کل بود، بنابراین اندازه‌گیری پروتئین‌های خاص، به‌ویژه برای آنهایی که مقادیر مطلق کمتری دارند، دشوار می‌کرد. در حالی که این لزوماً محدودیت این مطالعه به خودی خود نیست، زیرا توانایی هر فرد برای بسته بندی پروتئین ها در اگزوزوم ادرار خود به طور طبیعی متغیر است، مقادیر کمتر پروتئین در برخی افراد توانایی ما را برای تجزیه و تحلیل بیشتر و نتیجه گیری معنادار که قابل تعمیم به جمعیت های بزرگتر محدودیت سوم، نمونه نقطه زمانی منفرد است که درک ما را از تغییرات سلولی که در مراحل مختلف پیوستار AKI رخ می‌دهند، محدود می‌کند، به عنوان مثال، مرحله آسیب فوری، مرحله تعمیر، و غیره. نمونه‌برداری متوالی درک ما را از دوره زمانی محتوای اگزوزوم بیشتر می‌کند. تغییرات، استرس اکسیداتیو ناشی از تجمع دارو، و تنظیم مثبت مسیرهای ایمنی در ترمیم. مطالعه حاضر شامل بیمارانی بود که با آستانه های Scr تعریف شده بودند. کراتینین سرم یک نشانگر زیستی عملکرد ناقص کلیه است زیرا افزایش Scr اغلب از آسیب عقب می ماند [36]. این حساسیت و ویژگی Scr را برای تشخیص زودهنگام محدود می کندکلیهصدمه[36]، و مطالعات شناسایی شده اندکلیهصدمهنشانگرهای زیستی مانندکلیه صدمهمولکول 1 (KIM1) و لیپوکالین مرتبط با ژلاتیناز نوتروفیل (NGAL) برای تشخیص زودهنگام سمیت کلیوی [37،38]. همانطور که قبلا گزارش شد، نشانگرهای زیستی پتانسیل تشخیص سطوح آشکار و تحت بالینی ناشی از دارو را دارند.کلیهصدمه[39,40].

4. مواد و روش ها

4.1. انتخاب بیمار

نمونه ادرار از 10 بیمار مبتلا به V-AKI، که در مطالعه DIRECT [10] وارد شدند و 12 نمونه ادرار کنترل سالم از مخزن زیستی مرکز UAB-UCSD O'Brien در آنالیز گنجانده شد. افراد کنترل از نظر جنسیت، نژاد و دهه سن با افراد مورد مطالعه مطابقت داشتند و هیچ مواجهه با وانکومایسین یا شناخته شده ای نداشتند.کلیهصدمه. مطالعه DIRECT یک مطالعه بین المللی است که پیش بینی های فارماکوژنتیک ناشی از دارو را بررسی می کند.کلیهصدمهبا استفاده از یک مطالعه ارتباط ژنومی در مورد موارد و کنترل های مبتنی بر جمعیت [10]. مطالعه مستقیم توسط هیئت تحقیقاتی سازمانی (IRB #121651) تایید شد و رضایت کتبی آگاهانه از همه شرکت‌کنندگان قبل از ثبت‌نام اخذ شد که شامل ارائه استفاده از نمونه‌های ذخیره‌شده برای تجزیه و تحلیل‌های آتی بود. AKI در DIRECT به عنوان کاهش ناگهانی در عملکرد کلیه که با هر یک از معیارهای زیر نشان داده می شود تعریف شد: (1) افزایش مطلق کراتینین سرم (Scr) (بیشتر یا مساوی 0.3 میلی گرم در دسی لیتر یا بیشتر یا مساوی 26.4 میکرومول در/ L) (در عرض 48-ساعت پنجره زمانی) از مقدار Scr مرجع، (2) درصد افزایش Scr بزرگتر یا مساوی 50 درصد (1.5 برابر از مرجع) در عرض هفت روز، (3) کاهش در ادرار خروجی (الیگوری مستند از<0.5 ml/kg/h="" for="">6 ساعت) علیرغم احیای مایع کافی در صورت امکان، (4) کاهش مطلق Scr بیشتر از یا مساوی 0.3 mg/dL یا بیشتر یا مساوی 26.4 میکرومول در لیتر (در عرض 48-). پنجره زمانی h) از Scr مرجع، و (5) کاهش نسبی Scr بزرگتر یا مساوی 50 درصد (1.5 برابر از مرجع) در عرض هفت روز. بیماران مبتلا به مرحله 2 AKI یا بالاتر به دنبال مواجهه با وانکومایسین در مطالعه وارد شدند. داده‌های بالینی شامل اطلاعات دموگرافیک، سابقه پزشکی، یافته‌های معاینه فیزیکی، علائم حیاتی، خون و ادرار، نتایج بیوپسی و داده‌های دوز دارو در مقاطع زمانی زیر جمع‌آوری شد: (1) بستری در بیمارستان، (2) شروع وانکومایسین، 3) اوج آسیب، (4) قطع دارو یا کاهش دوز، (5) رفع آسیب، (6) ترخیص از بیمارستان، (7) 28 روز و (8) 90 روز پس از آسیب. یک دوره دوز وانکومایسین به عنوان تغییر در دوز یا فرکانس تعریف شد. بیماری حاد کلیه (AKD) به عنوان تداوم مرحله 1 AKI یا بیشتر از یا مساوی 7 روز پس از مواجهه تعریف می شود [41]. اگر AKI مرحله 1 یا بالاتر ادامه داشت و زمان از قرار گرفتن در معرض تا ترخیص از بیمارستان بیشتر از هفت روز بود، بیماران با AKD در هنگام ترخیص از بیمارستان طبقه‌بندی شدند. نمونه ادرار و خون کامل از همه شرکت کنندگان گرفته شد. تمام موارد V-AKI توسط دو نفرولوژیست مستقل (EM، JC، RL) برای تعیین علیت مورد قضاوت قرار گرفتند. شرح کامل روشها قبلاً منتشر شده است [10].

4.2. آماده سازی اگزوزوم و جمع آوری داده های پروتئومی

نمونه‌های ادرار و خون از شرکت‌کنندگان در مطالعه مستقیم جمع‌آوری شد و نمونه‌ها قبل از آماده‌سازی اگزوزوم در دمای -80 درجه سانتی‌گراد منجمد شدند. نمونه های ادرار مورد استفاده در این تجزیه و تحلیل از نزدیک ترین دوره زمانی به توهین کلیه انتخاب شدند که از 24 تا 72 ساعت پس از آن شروع می شود.کلیهصدمه. اگزوزوم ها از نمونه های ادرار منجمد AKI با استفاده از یک پروتکل داخلی که بر اساس اصل حذف حلال با استفاده از رسوب ناشی از پلی اتیلن گلیکول (PEG) توسعه یافته است، استخراج شد، همانطور که در Rao و همکارانش توضیح داده شد. صفحه انتشار اخیر [42] از پروتئین های اگزوزومی قبل از تریپسینیزاسیون ژل با استفاده از ژل های NuPAGE bisTris10 درصد آکریل آمید 12 چاهی برای جداسازی 40 میکرولیتر پروتئین از اگزوزوم های نمونه ادرار کنترل و-AKI انجام شد.

عصاره های ژل با یک بافر برای جلوگیری از پروتئولیز ترکیب شدند که حاوی 75 میلی مولار NaCl (سیگما، سنت لوئیس، MO، ایالات متحده آمریکا)، 3 درصد سدیم دودسیل سولفات (SDS، فیشر، آرنولد AFB، Tullahoma، TN، ایالات متحده)، 1 میلی مولار NaF است. (سیگما، سنت لوئیس، MO، ایالات متحده آمریکا)، 1 میلی مولار بتا گلیسروفسفات (سیگما، سنت لوئیس، MO، ایالات متحده آمریکا)، 1 میلی مولار بتا گلیسروفسفات (سیگما، سیگما، سنت لوئیس، MO، ایالات متحده)، 1 میلی مولار سدیم ارتووانادات (سیگما، سنت لوئیس، MO، ایالات متحده)، 1{33}} میلی مولار پیروفسفات سدیم (سیگما، سنت لوئیس، MO، ایالات متحده)، 1 میلی مولار فنیل متیل سولفونیل فلوراید (PMSF، سیگما)، و 1× مینی EDTA کامل قرص بازدارنده پروتئاز رایگان همه در 50 میلی مولار HEPES (سیگما، سنت لوئیس، MO، ایالات متحده آمریکا)، pH 8.5. برای دناتوره کردن پروتئین ها، حجم مساوی 8 مولار اوره در 50 میلی مولار HEPES، pH 8.5 اضافه شد و سونیکاسیون پروب با استفاده از دو بازه {17}} ثانیه در دامنه 25 درصد انجام شد. همانطور که قبلاً توضیح داده شد، پروتئین ها با استفاده از دی تیوتریتول و یدوااستامید کاهش، آلکیله و خاموش شدند [43]. پروتئین ها با افزودن تری کلرواستیک اسید (سیگما، سنت لوئیس، MO، ایالات متحده آمریکا) به نمونه های روی یخ و پلت کردن پروتئین ها از طریق سانتریفیوژ در دمای 4 درجه سانتیگراد رسوب داده شدند. گلوله های پروتئینی دو بار با استون سرد شسته شدند. گلوله های پروتئینی در دمای 56 درجه سانتیگراد به مدت 30 دقیقه خشک شدند، سپس مجدداً در 1 مولار اوره در 50 میلی مولار HEPES معلق شدند سپس یک شبه در دمای اتاق با 6 میکروگرم LysC (واکو، ریچموند، مشترک المنافع ویرجینیا، ایالات متحده آمریکا) هضم شدند و سپس {27} }h هضم با درجه توالی تریپسین (Promega، Fitchburg، WI، USA) در 37 ◦C. نمونه ها از طریق C18 Sep-Paks نمک زدایی شدند و پروتئین ها کمی سازی شدند [44]. در مجموع 1.0 میکروگرم پروتئین در هر نمونه با استفاده از کروماتوگرافی مایع-طیف‌سنجی جرمی پشت سر هم (LC-MS [2]) با استفاده از گرادیان کروماتوگرافی مایع 85 دقیقه روی Easy-nLC 1000 (Thermo Fischer Scientific, Waltham, MA, USA) آنالیز شد. در خط به طیف سنج جرمی Orbitrap Fusion (Thermo Fischer Scientific) متصل شده است.

کروماتوگرافی بر روی یک ستون 30 سانتی‌متری خانه‌کشی و بسته‌بندی شده انجام شد و با بسته‌بندی سه‌گانه با 0.5 سانتی‌متر، 0.5 سانتی‌متر و 30 سانتی‌متر از 5 میکرومتر C4، 3. میکرومتر C18، و 1.8 میکرومتر C18، به ترتیب، و تا دمای 60 درجه سانتیگراد حرارت داده شد. پپتیدها ابتدا در 500 بار بارگذاری شدند و سپس یک گرادیان کروماتوگرافی از 6 تا 25 درصد استونیتریل در طول 70 دقیقه و سپس یک گرادیان 5- دقیقه تا 100 درصد استونیتریل، که به مدت 10 دقیقه نگه داشت شد. یونیزاسیون الکترواسپری با اعمال ولتاژ 2000 ولت از طریق یک اتصال T از جنس استنلس استیل که ستون تحلیلی و سیستم Easy-nLC را به هم متصل می کند، انجام شد. هر نمونه با دو شستشو با گرادیان 3 تا 100 درصد استونیتریل در مدت 15 دقیقه با 10 دقیقه اضافی در 100 درصد استونیتریل دنبال شد. محدوده جرم به بار (m/z) 375-1500 برای پپتیدهایی با حالت بار بین 2-6 اسکن شد. از داده های متمرکز برای کمی سازی پیک ها استفاده شد. اکتساب در حالت یون مثبت وابسته به داده اجرا شد. طیف‌های خام در Proteome Discoverer نسخه 2.1 در مقابل پایگاه‌داده مرجع UniProt (www.uniprot.org (دسترسی در 5 نوامبر 2017)) برای انسان خردمند با استفاده از الگوریتم Sequest [18] در کنار رویکرد پایگاه داده معکوس مورد استفاده برای کنترل پپتید و کشف نادرست جستجو شدند. نرخ (FDR) تا 1 درصد [17]. در هضم تریپسین سیلیکو همانطور که در پارامترهای جستجو مشخص شده است در کنار حداقل طول پپتید شش اسید آمینه. تنظیمات جستجو همچنین شامل اصلاح دینامیکی برای اکسیداسیون متیونین ها و اصلاح ایستا کاربامیدومتیلاسیون سیستئین ها بود. تحمل جرم پیش ساز روی 50 ppm و تحمل جرم قطعه 0.6 Da تنظیم شد.

علاوه بر مسابقات طیفی و پروتئین ها محدود به<1% fdr,="" peptide="" matches="" were="" further="" screened="" to="" only="" include="" peptide="" spectral="" matches="" (psms)="" identified="" with="" high="" confidence.="" the="" summed="" abundance="" of="" the="" area="" under="" the="" curve="" of="" ms1="" peaks="" associated="" with="" psms="" was="" used="" to="" represent="" protein="" abundances.="" to="" help="" account="" for="" run-to-run="" variation="" in="" lc-ms2="" experiments,="" the="" raw="" protein="" abundances="" were="" next="" normalized="" by="" a="" two-step="" process.="" in="" the="" first="" step,="" protein="" abundances="" were="" divided="" by="" the="" average="" abundance="" of="" a="" given="" protein="" throughout="" the="" experiment="" divided="" by="" the="" median="" of="" the="" protein="" averages="" observed="" throughout="" the="" experiment.="" in="" the="" second="" step,="" the="" adjusted="" protein="" abundances="" were="" divided="" by="" the="" median="" protein="" abundances="" observed="" within="" their="" respective="" samples="" divided="" by="" the="" median="" protein="" abundance="" observed="" in="" the="" entire="" experiment.="" records="" of="" the="" normalization="" and="" analysis="" of="" proteomics="" data="" are="" available="" in="" a="" jupyter="" notebook="" form="" at="">

4.3. تجزیه و تحلیل داده های پروتئومیکس

سوابق تجزیه و تحلیل داده های پروتئومیکس در قالب نوت بوک jupyter در یک مخزن Github بارگذاری شد (در 3 مارس 2021 در دسترس قرار گرفت). تجزیه و تحلیل مختصات اصلی (PCoA) با استفاده از Qiime2 (نسخه 2019-7) [45] انجام شد. دستور معیارهای هسته تنوع زمانی برای محاسبه فواصل بین نمونه با استفاده از متریک Bray-Curtis و تجسم با استفاده از PCoA استفاده شد. تجزیه و تحلیل آماری فواصل بین نمونه‌های شاهد و V-AKI با استفاده از آزمون PERMANOVA جفتی از طریق دستور "اهمیت گروه بتا تنوع qiime" انجام شد. یک تصویر باکس پلات از این نتایج از طریق بسته seaborn ایجاد شد (در 3 مارس 2021 در دسترس قرار گرفت)). مقایسه دودویی موارد V-AKI و افراد کنترل با استفاده از بسته scipy ((دسترسی در 3 مارس 2021)) با استفاده از آزمون t مستقل با واریانس نابرابر انجام شد. قدرت ارتباط بین هر پروتئین و وضعیت V-AKI با استفاده از متریک pi-value که اهمیت p-value را با تغییر برابری ترکیب می کند، رتبه بندی شد [12]. همانطور که قبلاً توضیح داده شد [46] در رتبه های برتر، ارتباط های قابل توجهی به عنوان داشتن مقدار pi > |1| تعریف شد. هر ارتباط پروتئینی با وضعیت V-AKI در یک نمودار آتشفشانی ترسیم شد تا مکان پروتئین‌های رتبه‌بندی شده{27} را بیشتر نمایان کند. تجزیه و تحلیل غنی‌سازی مجموعه ژن با استفاده از سرور DAVID [47] انجام شد و پروتئین‌های قابل‌توجه (pi-value > |1|) را با پس‌زمینه همه پروتئین‌های شناسایی‌شده در مجموعه داده مقایسه کرد. خوشه های غنی سازی عملکردی مرتبط در جدول تکمیلی S1 گزارش شده است.

To test for a relationship between V-AKI-associated proteins and inflflammatory cytokines, a recently developed network-based cytokine inference approach was utilized [48]. Briefly, a list of cytokines (TGFb, TNF, IFN, IL1-40, CXCL1-16, CCL1-27) was submitted alongside signifificantly altered proteins (pi-value > |1|) to the STRING-db tool [49]. Connections between proteins were determined using all interaction sources and a minimum interaction score >0.4. سیتوکین ها ابتدا فیلتر شدند تا حداقل پنج اتصال به پروتئین های تغییر یافته قابل توجهی داشته باشند. سپس، نسبت اتصالات بین هر سیتوکین و پروتئین های مرتبط با V-AKI یا مرتبط با کنترل با تعداد کل اتصالات بین V-AKI یا پروتئین های مرتبط با کنترل مقایسه شد. برای در نظر گرفتن تفاوت در تعداد اتصالات هر سیتوکین به پروتئین های دیگر، این مقدار در مقایسه با تعداد اتصالات هر سیتوکین به تمام پروتئین های تغییر یافته قابل توجهی قرار گرفت. نمرات غنی‌سازی برای سیتوکین‌های انتخاب شده برای ارتباط آن‌ها با پروتئین‌های مرتبط با V-AKI یا کنترل ترسیم شد. در نهایت، یک جستجوی تصفیه‌شده از پروتئین‌های مرتبط با V-AKI و سیتوکین‌های با اتصالات غنی‌شده با پروتئین‌های مرتبط با V-AKI برای تعاملات آنها با استفاده از Cytoscape نسخه 3.5.1 [50] مشاهده شد. شبکه‌های برهمکنش پروتئین-پروتئین با اندازه‌گیری هر پروتئین مرتبط با V-AKI با توجه به ارتباط آن‌ها با نمره پی با وضعیت V-AKI تزئین شده و با داشتن ارتباط استنباط‌شده با سیتوکین‌های غنی‌شده با اثرات جانبی یا ضد التهابی رنگ‌آمیزی شدند.

گیاه اژدها سیستانچمی تواند درمان کندآسیب کلیه

5. نتیجه گیری ها

ما به دنبال درک بهتر مکانیسم آسیب برای V-AKI از موارد قضاوت بالینی بودیم و جالب اینکه، دریافتیم مکمل، پروتئین اتصال‌دهنده گالکتین{1}} و فیبرینوژن به طور قابل‌توجهی با V-AKI مرتبط هستند. نتایج مطالعات قبلی و ما نشان دهنده نقش سیستم کمپلمان و مسیرهای التهابی در V-AKI است. در حالی که برای تأیید فرآیندهای مولکولی در آسیب های ناشی از وانکومایسین و مسیرهای ترمیم متعاقب آن به مطالعات بیشتری نیاز است، نتایج نشان می دهد که اگزوزوم های ادراری ممکن است اطلاعات مهمی در مورد مکانیسم های پاتوفیزیولوژیک داشته باشند و ممکن است به عنوان نشانگرهای زیستی برای القای دارو عمل کنند.کلیهصدمه.

مشارکت نویسنده:

مفهوم سازی، LA و SPR، روش، SV، SPR، DJG، RM. نرم افزار، DJG، RHM، آنالیز رسمی، LA، AL، RHM. تحقیق، AL، JA، VJ، SB، MC-T.، PN; نوشتن - آماده سازی پیش نویس اصلی، AL، JA، VJ، LA. نوشتن - بررسی و ویرایش، RHM، DJG، MC-T.، AT، AA، JC، MSJ، EM، RM، PN. نظارت، SV، SPR; مدیریت پروژه، لس آنجلس; اکتساب بودجه، لس آنجلس همه نویسندگان نسخه منتشر شده نسخه خطی را خوانده و با آن موافقت کرده اند.

منابع مالی:

این تحقیق توسط کنسرسیوم بین المللی حوادث ناگوار جدی تامین مالی شده است. MCT توسط T32 Training Grant DK007202 پشتیبانی شد.

بیانیه هیئت بررسی نهادی: این مطالعه بر اساس دستورالعمل‌های اعلامیه هلسینکی انجام شد و توسط هیئت بازبینی نهادی (یا کمیته اخلاق) دانشگاه کالیفرنیا، برنامه حفاظت از افراد انسانی سن دیگو (IRB#121651) تأیید شد.

بیانیه رضایت آگاهانه: رضایت آگاهانه از همه افراد درگیر در مطالعه اخذ شد

قدردانی ها:

مایلیم از مشارکت محققین مستقیم قدردانی کنیم: دینا کروز، استوارت گلدشتاین، پاتریک موری، اندرو داونپورت، اندرو لوینگتون، دیوید سلفسکی، مایکل زاپیتلی، مارلیس اوسترمن، لی یانگ، بهاونا پاندیا، پاتریک بروفی، دانیلا پونسه، جو، دانیلا پونسه، جو. بوچارد، کارلوس ایرارازابال، دیوید آسکنازی، نیتین کوله، رولاندوکلور-دل گرانادو، نادین بنادور، کلر کاسلدین، جاناتان بارت، سونیل بانداری، آلیسا رایلی، آیسه آککان-آریکان، تی کی دیویس، کریستوفر فارمر، مارک هوماس، فرد ننگ، کار. ، هانسجورگ روته.

تضاد علاقه:

نویسندگان هیچ تضاد منافع را اعلام نمی کنند.

از: "اگزوزوم های ادراری مسیرهای التهابی را در آسیب حاد کلیه مرتبط با وانکومایسین شناسایی می کنند" نوشته لیندا آودیشو

---بین جی. مول. علمی 2021، 22، 2784