بررسی پروفایل های شیمیایی و متابولیت بیابان سیستانش خام و فرآوری شده در موش ها توسط UPLC-Q-TOF-MSE

تماس با ایمیلtina.xiang@wecistanche.comبرای اطلاعات بیشتر

خلاصه

زمینه: فرآوری مواد دارویی چینی یک تکنیک دارویی متمایز و منحصر به فرد در طب سنتی چینی (TCM) است که برای کاهش عوارض جانبی و افزایش یا حتی تغییر اثربخشی درمانی گیاهان خام مورد استفاده قرار می گیرد. تغییرات در اجزای ضروری ناشی از یک روش پردازش بهینه، در درجه اول مسئول افزایش کارایی گیاهان دارویی است. اثر تقویت کننده کلیه یانگ برنج بخارپز شده شرابCistanche deserticola(C.deserticola) قویتر از C.deserticola خام (CD) بود.

مواد و روش هاتجزیه و تحلیل مقایسه ای با استفاده از UPLC-Q-TOF-MS با پلت فرم انفورماتیک UNIFl برای تعیین تأثیر پردازش انجام شد. مطالعات آزمایشگاهی برای تعیین خصوصیات ترکیبات و همچنین انجام شدمتابولیت هاin vivo اجزای شیمیایی در CD و محصولات فرآوری شده آن تعیین شد. تجزیه و تحلیل های آماری چند متغیره برای ارزیابی تغییرات بین آنها انجام شد در حالی که OPLS-DA برای مقایسه زوجی استفاده شد.

نتایجنتایج این مطالعه تغییرات قابل توجهی را در گلیکوزیدهای فنیل اتانوئیدی (PhGs) نشان داد.ایریدوئیدهاپس از پردازش در مجموع 97 ترکیب در عصاره CD و محصول فرآوری شده آن شناسایی شد. PhGهایی که دارای گروه 4-O-caffeoyl در قسمت 8-O- -D-glucopyranosyl هستند، مانند اکتئوزید، سیستانوزید C، campneoside Il، osmanthuside پس از پردازش کاهش یافت، در حالی که PhG ها با 6' گروه O-caffeoyl در قسمت 8-O- -D-glucopyranosyl، مانند ایزواستوزید، ایزوسیستانوزید C، ایزوکامپنئوزید l، ایزومارتینوزید به ویژه در گروه CD-NP افزایش یافت. شدت اکیناکوزید و سیستانوزید B که ساختار آنها دارای نصف 6'-O{15}}D-گلوکوپیرانوزیل است نیز افزایش یافت. در مطالعه in vivo، 10 جزء اولیه و 44 متابولیت در پلاسما، مدفوع و ادرار موش صحرایی شناسایی شد. نتایج به‌دست‌آمده نشان داد که پردازش منجر به تنوع قابل‌توجهی در ترکیبات شیمیایی CD می‌شود و بر وضعیت ترکیبات در داخل بدن تأثیر می‌گذارد، و فرآیندهای متابولیکی فاز Ⅱ آبشارهای کلیدی هر ترکیب هستند و بیشتر متابولیت‌ها با اکیناکوزید یا اکیناکوزید مرتبط هستند. اکتئوزید

نتیجه گیری: این اولین تحقیق مقایسه جهانی سی دی خام و فرآوری شده است. این یافته‌ها به درک ما از تأثیر پردازش CD می‌افزاید و داده‌های مهمی را برای بررسی‌های اثربخشی آینده به دست می‌دهد.

کلید واژه ها: Cistanche deserticola، پردازش، UPLC-Q-TOF-MS5، پروفایل های شیمیایی، متابولیت ها در داخل بدن

مقدمه

پردازش مواد دارویی چینی (CMM) کاربرد قابل توجهی در عمل بالینی طب سنتی چینی (TCM) نشان داده است و برای چندین قرن به عنوان یک درمان قابل دوام در نظر گرفته شده است. این یک فناوری دارویی منحصر به فرد است که از تئوری TCM مشتق شده است. پس از پردازش، تفاوت‌های قابل‌توجهی در ظاهر، ترکیبات شیمیایی، ویژگی‌ها، و اهمیت دارویی همه انواع TCM شناسایی شده است که منجر به این فرض می‌شود که پردازش می‌تواند کارایی را بهبود بخشد یا اثرات سمی TCM را کاهش دهد.

برای صدها سال،Cistanche deserticola(Rou Cong Rong به زبان چینی، CD) معمولاً در عمل بالینی TCM برای تکمیل عملکرد کلیه استفاده می شود. همچنین به مرطوب شدن روده کمک می کند که منجر به آرامش روده می شود [1].سیستانچاولین بار در ShenNongBencaoJing ثبت شد. معمولاً در زیستگاه های خشک و نیمه خشک در سراسر اوراسیا و شمال آفریقا از جمله ایران، چین، هند و مغولستان یافت می شود [2]. پردازش CD با بخارپز کردن با شراب برنج تحت فشار معمولی انجام شده است، که یک روش آماده سازی مستند شده در داروسازی چینی (به چینی Jiucongrong، از این پس "CD-NP" نامیده می شود). و بخار پز کردن سی دی با شراب برنج تحت فشار بالا روش آماده سازی مؤثرتری است (از این پس "CD-HP" نامیده می شود) [3، 4]. مطالعات متعددی نشان داده است که اثرات دارویی CD با محصولات فرآوری شده آن متفاوت است [5]. سی دی ممکن است کلیه یانگ را تقویت کند و روده را شل کند، در حالی که پس از بخارپز شدن توسط شراب برنج، اثر پر کردن کلیه یانگ تقویت می شود. در مطالعه قبلی ما، مشخص شد که CD-NP می‌تواند تونفیکاسیون کلیه را تقویت کند و یانگ را پشتیبانی کند و اثر مرطوب کردن روده‌ها و دفع مدفوع را کاهش دهد [6-8]. در عمل بالینی، محصولات فرآوری شده رایج ترین شکل مورد استفاده هستند.

تا به امروز، مطالعات متعددی اجزای شیمیایی CD را مورد تجزیه و تحلیل قرار داده اند و به دنبال آن بیش از 100 ترکیب [9-11] مانند فنیل اتانول گلیکوزیدها (PhGs) را جداسازی و شناسایی کرده اند.ایریدوئیدها، لیگنان ها و الیگوساکاریدها به عنوان ترکیبات شیمیایی اصلی آن. همچنین گزارش شده است که بسیاری از فعالیت های دارویی PhG ها از جمله تعدیل کننده ایمنی، محافظت عصبی، محافظت از کبد، ضد التهاب، ضد اکسیداتیو و غیره وجود دارد.[12-14]. ایریدوئیدها دارای فعالیت های ضد التهابی هستند [15، 16]. همچنین توسط مطالعات قبلی نشان داده شده است که برخی از اجزای شیمیایی در طول پردازش تغییراتی را نشان دادند [17-20]. بر اساس این گزارش ها، می توان فرض کرد که پس از پردازش، تغییرات در ترکیب شیمیایی منجر به اثرات دارویی مختلفی می شود که نیاز به بررسی بیشتر دارد.

در مطالعه حاضر، یک روش حساس و موثر یعنی کروماتوگرافی مایع با عملکرد فوق العاده بالا همراه با TOF-MSE (UPLC-Q-TOF-MSE) برای تجزیه و تحلیل مقایسه ای انجام شد و مطالعات in vitro برای تجزیه و تحلیل کیفی عصاره ها انجام شد. CD، CD-NP، و CD-HP برای روشن کردن پروفایل های شیمیایی آنها. به طور کلی، مواد شیمیایی برون زا با قرار گرفتن در معرض بالا در اندام های هدف به عنوان اجزای موثر در نظر گرفته شد. بنابراین، در موش‌ها، CD و فرآورده‌های فرآوری‌شده آن به ترتیب به صورت خوراکی و به دنبال آن مشخص‌سازی آنها تجویز شد. مطالعه موجود یک مطالعه مقایسه ای (هم در شرایط آزمایشگاهی و هم درون تن) سی دی خام و فرآوری شده را برای اولین بار نشان می دهد. نتایج به‌دست‌آمده درک ما را در مورد تأثیر پردازش CD گسترش می‌دهد، که ممکن است برای مطالعات بیشتر مفید باشد.

مواد و روش ها

مواد

ترکیبات استاندارد ajugol (180120) و 2'-acetyl-acetoside (M0601AS) توسط Chendu Pure Chem-Standard Co., Ltd (چنگدو، چین) ارائه شد. Cistanoside F (MUST{6}})، echinacoside (D1105AS)، cistano-side A (M0906AS) و isoacteoside (M0106AS) توسط شرکت Must (Sichuan China) ارائه شدند؛ اکتئوساید (O0618AS)، سالیدروسید (J0526AS)، catalpol (S0728AS)، جنیپوزید (A0407AS) و اسید جنیپوزیدیک (MB6001-S) از شرکت Dalian Meilun Bio.Co.,Ltd (Dalian، چین) خریداری شد.{16}}اپید اکسیلوگانیک اسید (B31123) بود. به دست آمده از شانگهای Yuanye Biological Technology Co., Ltd، چین. متانول و استونیتریل از درجه MS بودند و از Merck KGaA، دارمشتات، آلمان به دست آمدند. اسید متانوئیک (CH، O،) درجه HPLC توسط Merck KGaA (دارمشتات، آلمان) ارائه شد. آب مورد استفاده در مطالعه موجود از طریق سیستم Milli-Q (18.2 MQ، میلیپور، ما، ایالات متحده آمریکا) پردازش شد. شراب برنج توسط شرکت شراب برج برند شائوکسینگ، آموزشی ویبولیتین (ژجیانگ، چین) ارائه شد.

Cistanch deserticola از Neimenggu wangyedi cistanche Co.Ltd جمع آوری شد. نمونه ها توسط پروفسور Yanjun Zhai (مدرسه داروسازی، دانشگاه لیائونینگ TCM) شناسایی شدند. نمونه ها به دانشگاه طب سنتی چینی لیائونینگ ارسال شدند.

حیوانات

موش‌های نر Sprague–Dawley (درجه SPF) با 180 تا 220 گرم وزن کل بدن توسط Liaoning Changsheng Biotechnology Co. Ltd. (مرکز منابع حیوانی آزمایشگاهی استان لیائونینگ، شماره مجوز: SCXK{2}}–0001) ارائه شد. این موش‌ها به مدت یک هفته در اتاق پرورش با درجه حرارت و رطوبت مناسب یعنی 20 تا 26 درجه، 50 تا 70 درصد نگهداری شدند. موش‌ها قبل از آزمایش با آب و غذای معمول آزمایشگاه تغذیه شدند. حیوانات یک شبه روزه گرفتند، با این حال، آب به طور آزاد قبل از آزمایش فراهم شد. موش‌ها با بی‌حس کننده 10 درصد کلرال هیدرات اعدام شدند. کمیته سازمانی اخلاق حیوانات بیمارستان استانی لیائونینگ طب چینی همه پروتکل‌های آزمایشی را تأیید کرد (2019.3.25، 2019015).

تهیه عصاره CD، CD-NP و CD-HP

CD-NP، CD-HP از همان دسته Cistanch deserticola پردازش شدند. برای تهیه CD-NP، قطعات CD خشک (ضخامت 5 میلی‌متر، 100 گرم) با شراب برنج (30 میلی‌لیتر) مرطوب شده و در دمای 100 درجه به مدت 16 ساعت بخار داده شدند و سپس در دمای 55 درجه از طریق آون خشک‌کن خشک شدند. در حالی که CD-HP از طریق نفوذ قطعات CD خشک (ضخامت 5 میلی‌متر، 100 گرم) با شراب برنج (30 میلی‌لیتر) و سپس بخارپز در فشار اتمسفر 1.25 به مدت 4 ساعت تهیه شد. سپس در فر با دمای 55 درجه خشک کنید.

در یک فلاسک 100 میلی لیتری، یک گرم از پودر را از طریق الک شماره 4 الک کرده و سپس 50 درصد متانول (50 میلی لیتر) اضافه کرده و سپس کاملاً پوشانده و مخلوط می کنیم. این مخلوط به مدت نیم ساعت وزن شد. خیساندن پس از خیساندن، مخلوط به مدت 40 دقیقه اولتراسونیک شد (قدرت 250 وات، فرکانس 35 کیلوهرتز) و سپس سرد شد و دوباره وزن شد. کاهش وزن با متانول 50 درصد دوباره پر شد، به درستی مخلوط شد و اجازه داده شد تا بماند، سپس مایع رویی صاف شد و سپس از فیلتر به‌دست‌آمده به عنوان محلول آزمایش استفاده شد.

تجزیه و تحلیل MSE اجزای فعال

تهیه مواد استاندارد: توبولوزید-A (3.02 میلی‌گرم)، اکیناکوزید (3.00 میلی‌گرم)، 2'-استیلاکتئوزید (2.34 میلی‌گرم)، آکتئوزید (2.45 میلی‌گرم)، ایزواکتئوزید (0.61) میلی گرم)، سیستانوزید-F (2.14 میلی گرم)، سالیدروسید (3.39 میلی گرم)، جنی پوساید (2.84 میلی گرم)، آجوگل (1.58 میلی گرم)، کاتالپول (2.39 میلی گرم)، ژنیپوزیدیک اسید (2.56 میلی گرم)، و 8-اپیداکسی لوگانیک اسید (2.34 میلی گرم) به یک فاسک حجمی 10 میلی لیتری اضافه شد، حجم ثابت متانول به مقیاس اضافه شد و در محلول مرجع غلظت مربوطه پیکربندی شد. هر یک از 100 میکرولیتر در یک محلول مرجع مخلوط پیکربندی شد.

شرایط آنالیز MS: مقدار جرم قبل از آزمایش تصحیح شد و از حالت یون منفی استفاده شد. محدوده جرم 50-1200 Da بود و نمونه از طریق پمپ تزریق جریان تزریق شد. سرعت مخروط 100 لیتر در ساعت بود، سرعت جریان حلال 800 لیتر در ساعت تنظیم شد. ولتاژهای مویرگی و مخروطی بر این اساس در 2500 و 40 ولت ثابت شدند. دمای منبع یونی و گاز محلول به ترتیب 100 درجه و 400 درجه و فرکانس اکتساب سیگنال 0.5 S-1 بود.

تجزیه و تحلیل UPLC-Q-TOF-MS عصاره CD (15-16 دقیقه)، 65 درصد تا 55 درصد A (16-18 دقیقه). سرعت جریان 0.3 میلی‌لیتر در دقیقه-1 بود، در حالی که دمای اتاق و ستون خودکار نمونه‌بردار 30 درجه و 8 درجه بود. حجم تزریق 1.0 میکرولیتر بود.

ارزیابی طیف‌سنجی جرمی از طریق Waters XEVO G{{{0}}}XS QTOF MS (شرکت آب، میلفورد، MA، ایالات متحده آمریکا) انجام شد که شامل یک منبع ESI است. سرعت جریان گاز نیتروژن در 800 L·hrs-1 با دمای 400 درجه، دمای منبع در 100 درجه ثابت شد، و گاز مخروطی در 50 Lh-1 تنظیم شد. ولتاژ مخروط و مویرگی بر این اساس در 40 و 2000 ولت تنظیم شد. انرژی برخورد سطح شیب دار در محدوده 20 تا 30 ولت استفاده شد. داده های متمرکز از تمام نمونه ها از 50 تا 1200 دا با زمان اسکن 0.5 ثانیه در مدت زمان تجزیه و تحلیل 10 دقیقه به دست آمد. . LockSpray TM برای اعتبارسنجی دقت جرم استفاده شد. یون [M-H] - انکفالین لوسین (200 pg · μL-1 نرخ جریان تزریق 10 میکرولیتر در دقیقه) در m / z 554.2615 به عنوان جرم قفل استفاده شد. نرم افزار Te MassLynx V4.1 (Waters Co., Milford, USA) برای جرم دقیق، ترکیب یون های پیش ساز و محاسبه یون های قطعه مورد استفاده قرار گرفت.

تجزیه و تحلیل داده ها در پلت فرم Masslynx

علاوه بر این، یک کتابخانه داخلی شامل نام ترکیب، ساختار آن، و فرمول مولکولی (در مول.) بر اساس ادبیات راه‌اندازی شد. تمام ترکیبات در یک الگوی خاص، ساخته شده در اکسل ذکر شده است. علاوه بر این، فایل‌های mol (Chemdraw Ultra 8.0، Cam-bridge soft، ایالات متحده آمریکا) و فایل‌های اکسل تمام ساختارهای ترکیبی منفرد نیز در رایانه محلی ذخیره شدند. برگه اکسل ایجاد شده دارای داده های مهم مستقیماً به کتابخانه علمی در UNIFI وارد شد

UNIFI 1.8.2، واترز، منچستر، انگلستان برای ارزیابی ویژگی های ساختاری، به ویژه برای قطعات مشخصه و تکه تکه شدن MS استفاده شد. حداقل مساحت پیک 500 برای تشخیص اوج دوبعدی تنظیم شده است. در حین آشکار کردن پیک‌های سه بعدی، شدت اوج انرژی کم با بیش از 300 شمارش و شدت پیک انرژی بالا بیش از 80 شمارش انتخاب شد. خطای جرم تا 10 ± ppm برای ترکیبات شناخته شده یافت شد و تحمل زمان ماند در محدوده ± 0.1 دقیقه تنظیم شد. ما ترکیب های افزایشی منفی حاوی -H، به علاوه HCOOH را انتخاب کردیم. پردازش داده‌های خام به‌دست‌آمده از MS از طریق نرم‌افزار ساده‌شده UNIFI انجام شد تا به‌سرعت اجزای شیمیایی که استانداردها را با پایگاه داده‌های خود ساخته و کتابخانه طب سنتی داخلی مطابقت داشتند، مشخص کند.

در مرحله بعد، برای تأیید ساختار شیمیایی هر ترکیب هدف، ایزومرها با الگوهای تکه تکه شدن MS مشخصه‌شان که در مطالعات گزارش‌شده نشان داده شد، و با مقایسه زمان‌های نگهداری استانداردهای مرجع، متمایز شدند.

تجزیه و تحلیل متابولومیک بر اساس تجزیه و تحلیل آماری چند متغیره

قبل از پردازش داده های خام، پارامترهایی مانند جرم از 150 تا 1200 دا، محدوده زمان نگهداری (0 تا 20 دقیقه)، شدت آستانه ( 2000 شمارش)، تحمل جرم یعنی 5 MDA، در حالی که جرم و پنجره زمان ماند به ترتیب 0.20 دقیقه و 0.05 Da بود. در فهرست بعدی پایگاه داده، شناسه یون‌ها جفت‌های RT-m/ با توجه به زمان شستشوی آنها بود. مقادیر یکسان برای RT و m/z در دسته‌های مختلف نمونه‌ها به عنوان یک ترکیب در نظر گرفته شد.

تجزیه و تحلیل آماری چند متغیره برای ارزیابی بیومارکرهای موثر که به طور قابل‌توجهی به تغییرات در بین گروه‌های مختلف کمک می‌کنند، انجام شد. در طول تجزیه و تحلیل، تجزیه و تحلیل مؤلفه اصلی (PCA) برای نشان دادن حداکثر تفاوت ها و تشخیص الگو برای به دست آوردن یک نمای کلی و طبقه بندی استفاده شد. OPLS-DA یک ابزار مدل‌سازی است که بارگذاری مؤلفه پیش‌بینی‌کننده OPLS-DA را برای کمک به ارزیابی مدل ارائه می‌کند. اهمیت متغیر برای طرح ریزی (VIP) برای ارزیابی ارزیابی مولفه های مختلف استفاده شدمتابولیت هاwith VIP values>1.0 و P-value<0.05 were="" regarded="" as="" effective="" markers.="" furthermore,="" a="" permutation="" test="" was="" conducted="" for="" providing="" reference="" distributions="" for="" the="" r²/o²values="" that="" could="" show="" the="" statistical="">

آزمایش‌های حیوانی، موش‌ها به‌طور تصادفی به چهار گروه (n{0}} برای هر گروه) تقسیم شدند و سپس عصاره‌های مختلف به صورت خوراکی تجویز شدند: (1) گروه شاهد خالی: به موش‌ها نرمال سالین (2 میلی‌لیتر در 100 گرم) داده شد. ; (2) گروه CD: به موش ها عصاره CD (2 میلی لیتر / 100 گرم) داده شد. (3) گروه CD-NP: به موش ها عصاره CD-NP (2 میلی لیتر / 100 گرم) داده شد. (4) گروه CD-HP: به موش ها عصاره CD-HP (2 میلی لیتر در 100 گرم) داده شد. بر این اساس، همه گروه‌ها به سه زیر گروه برای پلاسما، ادرار و مدفوع طبقه‌بندی شدند. دو ساعت بعد، هر موش با مقدار یکسان و مساوی عصاره خوراکی داده شد.

پس از تجویز، جمع آوری نمونه خون در 1.{1}} ساعت، 2.{3}} ساعت و 4.{5}} ساعت در لوله های پلی اتیلن 1.5 میلی لیتری هپارینه شده (از وریدهای مداری) انجام شد. و سپس سانتریفیوژ (در 4500 دور در دقیقه) تمام نمونه ها به مدت 15 دقیقه انجام می شود.

برای نمونه‌های ادرار و مدفوع، موش‌ها در قفس‌های متابولیسم نگهداری شدند و نمونه‌های ادرار و مدفوع به مدت 24 ساعت پس از تجویز جمع‌آوری شد. سانتریفیوژ نمونه‌های ادرار با سرعت 45 دور در دقیقه به مدت 15 دقیقه انجام شد، در حالی که نمونه‌های مدفوع در سایه خشک، پودر شدند، سپس 0.2 گرم گرفته شد و به 0.5 میلی لیتر نمک اضافه شد. محلول، اولتراسوند به مدت 5 دقیقه، و سانتریفیوژ در 12، {9}} دور در دقیقه به مدت 15 دقیقه. تمام نمونه های زیستی تا زمان تجزیه و تحلیل در دمای 80- درجه نگهداری شدند.

تهیه نمونه های بیولوژیکی افزودن نمونه‌های پلاسما، ادرار و مدفوع با 3 حجم متانول و پس از آن به مدت 3 دقیقه گردابی انجام شد. سپس، سانتریفیوژ (در 12،{3}} دور در دقیقه) مخلوط ها به مدت 10 دقیقه انجام شد، سپس مایع رویی به لوله EP منتقل شد و سپس با نیتروژن در دمای 37 درجه خشک شد. علاوه بر این، افزودن 200 میکرولیتر محلول HCN-H2O (50 درصد) انجام شد. ده، از گرداب برای اختلاط (1 دقیقه)، و سپس سانتریفیوژ (در 12،{11}} دور در دقیقه) به مدت 5 دقیقه استفاده شد. مایع رویی (5 میکرولیتر) نمونه های تیمار شده به سیستم UPLC-Q-TOF-MSE تزریق شد.

کروماتوگرافی مایع و شرایط طیف سنجی جرمی تجزیه و تحلیل برایمتابولیت هاهمچنین توسط ابزار Waters UPLC از طریق رابط ESI انجام شد. جداسازی ها با استفاده از ستون Acquity UPLC HSS T3 (100 mm×2.1، 1.8 میکرومتر) انجام شد، فاز متحرک 0.1 درصد اسید فرمیک (A) بود: استونیتریل (B)، شرایط شستشوی گرادیان 0-3 دقیقه (99.8 درصد → 98 درصد A) بود. {18}} دقیقه (90 درصد → 85 درصد A)،12-17 دقیقه (85 درصد → 70 درصد A)، 17-22 دقیقه (70 درصد → 60 درصد A)، 22-23 دقیقه (60 درصد → 58 درصد A)، 23-25 دقیقه (58 درصد A)،25-32 دقیقه (58 درصد → 45 درصد A) و 32-37 دقیقه (45 درصد →35 درصد A) ) 0.4 میلی لیتر در دقیقه{40}} سرعت جریان بود. دمای ستون و اتاق نمونه به ترتیب 40 درجه و 8 درجه تنظیم شد. شرایط طیف سنجی جرمی ذکر شده در بالا مورد استفاده قرار گرفت.

استراتژی برای تجزیه و تحلیل سیستماتیک متابولیت ها در نمونه های زیستی، نرم افزارUNIFI (1.8.2) برای پردازش داده ها استفاده شد. تابع مقایسه دودویی برای شناسایی متابولیت های موثر استفاده شد. متابولیت های ارزیابی شده در نمونه کنترل معادل وجود نداشت یا در شدت یون پایین وجود داشت. آستانه شدت نسبی روی 3 یا 5 تنظیم شد و متابولیت هایی که معیارهای زیر خط کشی شده را برآورده می کردند، قابل ارزیابی بودند. متابولیت های رایج و قابل پیش بینی سپس توسط EIC تعیین شدند. برای جستجوی متابولیت های دو فازی از تابع NLF استفاده شد. به عنوان مثال، در نرم افزار UNIFI، پارامترها را می توان برای جستجوی ترکیبات احتمالی اسید گلوکورونیک در 176.0321 تنظیم کرد. پس از پردازش، یک ضرر خنثی را می توان در روش تنظیم یا شناسایی کرد. MassFragment برای تعیین یا توصیف ساختار متابولیت های شناسایی شده استفاده شد، تابع تفسیر طیفی UNIFI تابع اصلی مورد استفاده برای تجزیه و تحلیل قطعه قطعه شدن ثانویه اجزای اصلی است. این تابع می تواند برای تأیید سریع مسیر تکه تکه شدن معقول استفاده شود.

نتایج

قانون تکه تکه شدن انبوه گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید و ایریدوئیدها

گلیکوزیدهای فنیل اتانوئیدی ترکیبات شیمیایی اصلی CD هستند. محلول های استاندارد ایزواکتئوزید،

سیستانوزید F، توبولوزید A، اکیناکوزید، آکتئوزید، و 2'-استیل-اکتئوزید گرفته شد، به دنبال آن سطح متفاوتی از انرژی های برخورد ارائه شد (جدول 1)، و سپس نقشه های MS2 مربوطه به دست آمد (شکل 1).

تجزیه و تحلیل طیف سنجی جرمی نشان داد که گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید دارای الگوهای تکه تکه شدن طیف جرمی مشابهی هستند، مسیرهای برش در حالت یون منفی عمدتاً شامل (1) برش پیوند استری: از دست دادن گروه کافئویل خنثی (C، H، O162.03) و استیل خنثی است. گروه (C، H، O، 42.00)؛ (2) برش گلیکوزیدی: از دست دادن باقیمانده های رامنوز خنثی (C.HIO، 146.05) و باقی مانده گلوکز خنثی (CgHO، 162.05). از طیف سنجی جرمی با وضوح بالا، کافئویل (162.03) و باقیمانده گلوکز (162.05) را می توان متمایز کرد.

محلول های استاندارد ایریدوئیدهای آجوگل، کاتالپول، جنیپوزیدیک اسید، جنیپوزید، و {0}}اپید اکسی لوگانیک اسید گرفته شدند و به دنبال آن انرژی های مختلف برخورد ارائه شد و نقشه های MS مربوطه به دست آمد (شکل 2).

گلیکوزیدهای ایریدوئید دارای الگوهای تکه تکه شدن طیف جرمی مشابهی هستند، مسیرهای برش در حالت یون منفی عمدتاً شامل (1) شکاف گلیکوزیدی: از دست دادن باقیمانده گلوکز خنثی (CHoO, 05/162)؛ (2) از دست دادن CO خنثی (43.99) و H ، O (18.01).

شناسایی ترکیبات موجود در عصاره های CD، CD-NP و CD-HP

تجزیه و تحلیل UPLC-QTOF-MSE

بهینه سازی شرایط کروماتوگرافی انجام شد. در مرحله بعد، ترکیبات سیستانچه هربا در دو حالت یونی منفی و مثبت با CE های بالا و همچنین پایین مورد ارزیابی قرار گرفتند. نتایج به‌دست‌آمده نشان داد که سازگاری حالت منفی نسبت به حالت مثبت برای این ترکیبات بیشتر است. شکل 3 کروماتوگرم پیک یون پایه MS (BPI) را نشان می دهد که با پیک های شماره گذاری شده ردیابی شده است. شدت هر یون شناسایی شده در آنالیز UPLC-Q-TOF-MS با توجه به تعداد کل یون برای تولید یک ماتریس داده که شامل مقدار m/z، مساحت پیک نرمال شده و زمان ماند است، نرمال شد.

ارزیابی اجزای CD و محصولات پردازش شده آن در پلت فرم UNIFl

در مجموع 97 ترکیب با حالت -SEM (n=6) از CD و محصول فرآوری شده آن (جدول 2)، از جمله گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید (PhGs)، ایریدوئیدها، لیگنان ها و الیگوساکاریدها شناسایی شدند. اجزای 95،91 و 94 بر این اساس در CD، CD-NP و CD-HP شناسایی شدند. از این میان، 64 مورد فنیل اتانوئید، 13 مورد ایریدوئید و 20 نوع ترکیب دیگر تعیین شد. در ترکیب شیمیایی CD و محصول فرآوری شده آن شباهت وجود داشت، با این حال، کمیت اجزاء در بین CD و محصول فرآوری شده آن متفاوت بود.

تغییرات در اجزای شیمیایی محصولات فرآوری شده نرم افزار Simca-P 13.{2}} برای تجزیه و تحلیل ماتریس داده های چند متغیره استفاده شد. قبل از PCA، همه متغیرها میانگین محور و مقیاس پارتو بودند و به دنبال آن متغیرهای متمایز بالقوه شناسایی شدند. در یک نمودار امتیاز PCA، هر نقطه یک نمونه جداگانه را نشان داد. نمونه هایی که از نظر ترکیبات شیمیایی شباهت داشتند، در مجاورت یکدیگر پراکنده شدند، در حالی که نمونه هایی که دارای تغییرات در اجزای آنها بودند، تقسیم شدند. همانطور که در PCA (شکل 4) مشاهده می شود، گروه CD-HP از گروه های CD و CD-NP جدا شد.

To distinguish CD from CD-HP and CD-NP, OPLS-DA, permutation test, S-plot, and VIP value were developed. (Figs.5, 6,7)The obtained results revealed that many components were key characteristic components of each product. The screening condition was the VIP>1 و P<0.05. from="" the="" date="" of="" the="" s-plot,="" the="" characteristic="" components="" were="" evaluated,="" which="" were="" commonly="" existing="" in="" the="" three="">

از شکل 8، ما شدت اکتئوزید (54)، سیستانوزید C (74)، کمپنئوزید I (43)، اسمانتوزید (75) و 2'-اکتیلاکتئوزید (80) را دریافتیم که دارای گروه 4'-O-کافئویل هستند. بخش 8-O- -D-glucopyranosyl (شکل 9 را ببینید) پس از فرآوری توسط شراب برنج کاهش یافت، در حالی که شدت ایزواستوزید (60)، castanoside (71)، ایزو-کامپنئوزید I است. (69)، ایزومارتینوزید ({20}}) دارای گروه 6'-O-کافئویل (نگاه کنید به شکل 9) به ویژه برای گروه CD-NP افزایش یافت. اگرچه توبولوزید B (72) دارای یک گروه 6'-O-کافئویل، همان ایزواکتئوزید است، اما به دلیل گروه 2'-استیل آن، شدت کاهش یافت. شدت اکیناکوزید (38) و سیستانوزید B با گروه‌های نیمه 6'-O{35}D-گلوکوپیرانوزیل افزایش یافت، اما شدت توبولوزید A (55) نیز به دلیل گروه 2'-استیل آن کاهش یافت.

تیم تحقیقاتی ما همچنین پایداری حرارتی اکتئوزید و ایزواکتئوزید را مورد مطالعه قرار داد و دریافت که اکتئو ساید در آب، متانول و محلول شراب برنج زرد ناپایدار است و می‌تواند تا حدودی تحت شرایط گرمایش به ایزواکتئوزید تبدیل شود. اما پایداری حرارتی ایزواکتئوزید به خصوص در محلول شراب برنج زرد بهتر بود. شکل 10 تغییرات احتمالی PhGs در CD را در طول پردازش نشان می دهد:

شناسایی متابولیت‌ها در موش‌ها از داده‌های طیف‌سنجی جرمی با وضوح بالا، وزن مولکولی دقیق و ترکیب عنصری برای متابولیت‌ها و ترکیبات پروتو مولکولی آنالیز و مقایسه شد. از آنجایی که همان نوع ترکیبات در TCM در تغییرات متابولیکی شباهت نشان دادند، همبستگی ترکیبات فیتوشیمیایی در شرایط آزمایشگاهی می‌تواند به متابولیت‌های آنها در داخل بدن گسترش یابد. در همین حال، بر اساس مسیرهای تبدیل زیستی مرسوم، یک تغییر معقول وزن مولکولی استنباط شد. در نهایت، متابولیت ها با تجزیه و تحلیل طیف جرمی MSE متابولیت ها و مسیر تکه تکه شدن پروتو ترکیبات در طیف جرمی شناسایی شدند [21، 22]. در مقایسه با نمونه خالی، اجزای آن در داخل بدن بر اساس اطلاعات ارائه شده توسط کروماتوگرام-طیف جرمی، امکان واکنش متابولیکی، ویژگی های ساختار ترکیب و قانون تکه تکه شدن طیف جرمی آن شناسایی شدند. جدول 3 را ببینید.

شناسایی متابولیت های مرتبط با گلیکوزیدهای فنیل اتانول

برای پردازش از پلتفرم UNIFI استفاده شد. شکل 11 کروماتوگرافی TIC ادرار، مدفوع و پلاسما را برای CD و محصولات فرآوری شده آن نشان می دهد. در مقایسه با نمونه‌های خالی، در مجموع 54 متابولیت در موش‌ها شناسایی شد که شامل 10 جزء نمونه اولیه و 44 متابولیت می‌شد که از این تعداد 24، 49 و 6 متابولیت در مدفوع، ادرار و پلاسما بودند.

بر اساس جرم دقیق، آبشار تکه تکه شدن و تلفات خنثی قابل پیش‌بینی توسط تبدیل زیستی، در مجموع 35 متابولیت فنیل اتانوئید مرتبط با گلیکوزیدها به طور آزمایشی مورد ارزیابی قرار گرفتند. متابولیت های مرتبط گلیکوزیدهای فنیل اتانوئیدی دارای الگوهای تکه تکه شدن طیف جرمی مشابهی هستند، مانند قطعه معمولی بدون کافئویل m/z 461.16{10}}5، سپس بیشتر توسط پیوندهای گلیکوزیدی و استری در داخل بدن هیدرولیز شده و به هیدروکسی تیروزول (HT) (m/) متابولیزه می شوند. z153.0504، C.HO.4.73 دقیقه) و کافئیک اسید (CA) (m/z179.0389، CH، O0.77 دقیقه)، شکل 12A را ببینید.

M11 [MH]~ at m/ 153.0504 را با فرمول یعنی C.HO نشان داد و به عنوان HT شناسایی شد. M16 [MH]- را در m/z 329.0851 ارائه کرد که 176 Da بالاتر از HT بود و نشان داد که ممکن است متابولیت گلوکورونید شده HT باشد. [MH] -از M26 در m/z 343.1037،14 Da بالاتر از HT-glucuronide بود. بنابراین، M26 به عنوان گلوکورونید متیله HT شناسایی شد. M17 به عنوان سولفات HT بر اساس [MH]-at m/z 233.0112،80 Da بر روی HT شناسایی شد، که می‌توانست بیشتر متیله شود، سپس M22 تولید کرد که m/z 247.0278 را نشان داد، که نشان می‌دهد HT- است. متابولیت سولفاته متیله M7 (m/167.0335) و M5 (m/z 167.0762) به ترتیب به عنوان محصولات اکسیداسیون و HT متیله در نظر گرفته شدند (شکل 12B).

M1 نشان داد [MH] - در m/z 179.0389، فرمول مولکولی روشن شده CH-O بود و به عنوان اسید کافئیک (CA) شناسایی شد. M25 [MH]- را در m/355.0704 نشان داد که 176 Da بالاتر از CA بود، نشان می‌دهد. که ممکن است متابولیت گلوکورونید شده CA باشد. M27 m/z 258.994 داشت که 80 Da بالاتر از CA بود، بنابراین ما آن را به عنوان سولفات CA روشن کردیم و می‌توانست M35 (m/z 273.0064) تولید کند. از آنجایی که M4 [MH] 7 در m/z 193.0524،14 Da بالاتر از CA می دهد، به عنوان متابولیت متیله CA شناسایی شد. M39 متابولیت CA دهیدروکسیلاسیون با m/z 163.04 بود و می‌توان آن را به M32 سولفات کرد (m/z 242.9951).

M33 (m/z 181.{14}}491، C.HO، 9.06 دقیقه) محصول احیا CA بود، یعنی 3،{6}}دی هیدروکسی بنزن پروپیونیک اسید، که می‌توان آن را به M19 متیله کرد. /z 195.0623، C10H12O4، 0.93 دقیقه). M33 می‌تواند به M43 کم آب شود، یعنی 3-HPP (m/z 165.0558، C9H10O3، 11.29 دقیقه)، و M31 (m/z 341.0942، C15H17O9، 8.90 دقیقه) و M29 (m/z 165.0558، 01.010.025. 8.52 دقیقه) محصولات گلوکورونید و سولفاته بودند (شکل 12C).

برای متابولیت های مرتبط با گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید، آبشارهای متابولیکی کلیدی واکنش های متابولیکی فاز II، یعنی گلوکورونیداسیون، متیلاسیون و سولفاته شدن بودند. آبشارهای متابولیک پیشنهادی فنیل اتانوئیدها در شکل 13 نشان داده شده است.

شناسایی متابولیت های مرتبط با ایریدوئیدها

با تجزیه و تحلیل ترکیب عنصری متابولیت ها، تکه تکه شدن MSE و ادبیات مرتبط، در مجموع 19 متابولیت مرتبط با iridoid به طور آزمایشی مورد ارزیابی قرار گرفتند. گلیکوزیدهای ایریدوئید توسط پیوندهای گلیکوزیدی هیدرولیز شدند تا آگلیکون های مربوطه خود را تشکیل دهند. m/z 185.117 برای M8، 162 Da کمتر از ajugol بود که با از دست دادن باقیمانده گلوکز به دست آمد.

M40 (m/z 199.0641، Rt 10.91 دقیقه) محصول deglycosylated کاتالپول بود. M45 m/z 169.0487، Rt 12.15 دقیقه) کمتر از 30 Da متابولیت deglycosylated کاتالپول بود و به عنوان حذف یک مولکول متابولیت CH، O شناسایی شد. M34 (m/z 151.0352، Rt 9.08 دقیقه)، از دست دادن بیشتر متابولیت H، O بود.

M44 (m/z 211.0665، Rt 11.31 دقیقه) یک متابولیت دیگلیکوزیله ژنیپوزید بود و M37 (m/z 197.0833، Rt 15.03 دقیقه) گلیکوزیلاسیون 8-اپیداکسی لوگانیک اسید بود. واکنش‌های متابولیک برای ایریدوئیدها را می‌توان به عنوان متابولیسم فاز I دگلیکوزیلاسیون نشان داد (شکل 12D).

مقایسه پروفایل متابولیک در پلاسما، ادرار و مدفوع بین CD و محصولات فرآوری شده آن

2 نمونه اولیه در پلاسما، 7 نمونه در ادرار و 3 نمونه در مدفوع مقایسه شدند. 7 نمونه اولیه در CD، 7 نمونه اولیه در CD-NP و 8 نمونه اولیه در CD-HP جذب شد. M21 فقط در گروه مدفوع CD-NP و M38 و M51 فقط در گروه ادرار CD-HP تشخیص داده شد. در مقایسه با متابولیت ها، متابولیت های یکسان در پلاسما، ادرار و مدفوع به ترتیب 4، 42 و 21 بود. 34 متابولیت در گروه CD، 39 در CD-NP و 40 در گروه CD-HP جذب شد. M5، M7، M40 و M52 فقط در گروه‌های CD-NP شناسایی شدند، در حالی که M24، M4l و M48 فقط در گروه‌های CD-HP شناسایی شدند.

تغییرات در جذب و همچنین متابولیسم ترکیبات فعال در محصولات مختلف فرآوری شده CD مشاهده شد. از شکل 14، ما دریافتیم که شدت کونژوگه HT-سولفات (M17) در ادرار بالاترین است، به دنبال آن 3-همراهی سولفات HPP (M29)، کونژوگه سولفات HT متیله (M22)، سولفات CA دهیدروکسیله شده است. کونژوگه (M32) و 3،{8}} کونژوگاسیون دی هیدروکسی بنزن پروپیونیک اسید سولفات (M19). محتوای محصولات متابولیک در گروه فرآوری شده بیشتر از گروه CD بود، به ویژه برای M22، M29، M27، M16، M19، M1، M2. پیش ساز گروه 6'-O-کافئویل آنها در قسمت 8-O- -D-glucopyranosyl، ترکیباتی مانند هیدروکسی تیروزول دارای خواص ضد توموری، ضد التهابی، ضد باکتریایی، ضد ویروسی و ضد قارچی هستند. 23]. کافئیک اسید دارای فعالیت های ضد التهابی، ضد سرطانی و ضد ویروسی است [24]. این با استفاده بالینی CD و محصولات فرآوری شده آن سازگار بود.

بحث

CD یک TCM است و اجزای زیست فعال اصلی آن، از جمله PhGs، ایریدوئیدها، پلی ساکاریدها توسط مطالعات تحقیقاتی مختلف مستند شده است. در عمل بالینی TCM، محصولات فرآوری شده CD به طور گسترده ای نسبت به محصولات خام استفاده شده است. ترکیب شیمیایی در طول فرآوری تغییر خواهد کرد که ممکن است منجر به تغییراتی در اثرات دارویی شود (شکل 14).

PhG ها نوعی ترکیب فنلی هستند که با ساختار گلوکوپیرانوزید مشخص می شود که دارای یک نیمه هیدروکسی فنیل اتیل به عنوان آگلیکون است. این ترکیبات اغلب شامل اسید کافئیک و رامنوز هستند که به ترتیب از طریق پیوندهای استری یا گلیکوزیدی به باقی مانده گلوکز متصل می شوند. در مطالعه حاضر به تجزیه و تحلیل کیفی CD, CD-NP پرداخته شده است. و CD-HP انجام شد و در مجموع 97 ترکیب از جمله گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید (PhGs)، ایریدوئیدها و غیره شناسایی شدند. نتایج به‌دست‌آمده، تغییرات ترکیب شیمیایی را قبل و بعد از فرآوری نشان داد. شدت PhGهای دارای گروه 4'-O-کافئویل در قسمت 8-O- -D-گلوکوپیرانوزیل، مانند اکتئوزید، سیستانوزید C، کمپنئوزید II، سمت اسمانتوس پس از پردازش کاهش یافت، در حالی که PhGs با

مانند isoacetoside، isocistanoside، isocampneoside I، isomartynoside به ویژه در گروه CD-NP افزایش یافته است. شدت اکیناکوزید و سیستانوزید B که ساختار آنها دارای نصفه 6'-O- -D-glucopyranosyl است نیز افزایش یافت. PhGهایی که دارای یک گروه 2'-استیل هستند اغلب به دلیل واکنش هیدرولیز در طول فرآیند کاهش می‌یابند، مانند توبولوزید B، 2-استیلاکتئوزید.

بررسی متابولیت های جذب شده در داخل بدن پس از تجویز خوراکی CD و محصولات فرآوری شده آن انجام شد. فرآیندهای متابولیک فاز II آبشارهای کلیدی بودند و بیشتر متابولیت‌ها سولفات، گلوکورونید و مزدوجات متیله بودند. گلیکوزیدهای فنیل اتانول جذب و استفاده خوراکی کمی دارند. آنها به سختی در خون جذب می شوند و به عنوان پیش ساز برای ایفای نقش خود پس از فعال شدن متابولیک در داخل بدن عمل می کنند. فنیل اتانوئیدهای تولید شده به فنیلتا-نولاگلیکون، مانند هیدروکسی تیروزول (HT) و کافئیک اسید (CA) و مشتقات آن 3-هیدروکسی فنیل پروپیونیک اسید (3-HPP)، این متابولیت ها ممکن است راحت تر در پلاسما جذب شوند و دارای یک اثر دارویی بهتر

سی دی و محصولات فرآوری شده آن. کونژوگه سولفات HT (M17) بیشترین شدت را در ادرار دارد و به دنبال آن 3-همراهی سولفات HPP (M29)، کونژوگه سولفات HT متیله (M22)، کونژوگاسیون سولفات CA دهیدروکسیله (M32) و 3،{{ 7} کونژوگاسیون سولفات دی هیدروکسی بنزن پروپیونیک اسید (M19). محتوای محصولات متابولیک در گروه فرآوری شده بیشتر از گروه CD بود، به ویژه برای M22، M29، M27، M16، M19، M1، M2.

به طور کلی، مولفه‌هایی که در اندام‌های هدف قرارگیری بالایی دارند می‌توانند مؤثر باشند. مقدار کافی از فنیل اتانوئیدها و مشتقات آنها در شرایط آزمایشگاهی ارزیابی و تعیین شده است. Acteoside ترکیب مشخصه ای است که محتوای آن پس از فرآوری توسط برنج-شراب کاهش یافته و محتوای ایزواکتئوزید، ایزوسیستانوزید C، ایزوکامپنئوزید I به ترتیب افزایش یافته است. محصولات تخریب PhGs مانند مشتقات CA و HT را می توان در نمونه های زیستی ارزیابی کرد و پردازش برنج-شراب می تواند جذب متابولیت ها را در داخل بدن افزایش دهد.

نتیجه

در این مطالعه 97 ترکیب در عصاره CD و محصول فرآوری شده آن شناسایی شد. تخریب چند گلیکوزید در دمای بالا رخ داد و در نتیجه، برخی ایزومرها و کمپلکس‌های جدید سنتز شدند. در مطالعه in vivo، اجزای نمونه اولیه (10) و متابولیت ها (44) در پلاسما، مدفوع و ادرار موش صحرایی تعیین یا به طور آزمایشی ارزیابی شدند. فرآیندهای متابولیک فاز دوم آبشارهای کلیدی بودند، بیشتر متابولیت‌ها با اکیناکوزید یا آکتئوزید، مانند HT، CA و مشتقات آنها 3-هیدروکسی فنیل پروپیونیک اسید 3-HPP مرتبط بودند. این متابولیت ها ممکن است راحت تر جذب پلاسما شوند و اثر دارویی بهتری داشته باشند. نتایج به‌دست‌آمده نشان داد که ترکیب شیمیایی CD متفاوت بوده و بر وضعیت ترکیب در شرایط in vitro و in vivo تأثیر می‌گذارد.

اختصارات

PhGs: گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید. CD: Cistanche deserticola; CMM: چینی Materia Medica. TCM: طب سنتی چینی؛ CD-NP: Gistanche deserticola با بخارپز کردن با شراب برنج تحت فشار معمولی پردازش می شود. CD-HP: Cistanche deserticola با بخارپز کردن با شراب برنج تحت فشار بالا پردازش می شود. UPLC-Q-TOF-MS: کروماتوگرافی مایع با عملکرد فوق العاده بالا همراه با TOF-MS. PCA: تجزیه و تحلیل اجزای اصلی. VIP: اهمیت متغیر برای طرح ریزی؛ CA: کافئیک اسید. HA: هیدروکسی تیروزول.

قدردانی

قابل اجرا نیست.

مشارکت نویسندگان

LZ، LBN، SJ در تهیه پیش نویس، نوشتن دستنوشته شرکت کردند. RJ، LPP به آزمایش‌های حیوانی کمک کرد و تمام شکل‌ها و جداول را پیش‌نویس و نهایی کرد. ZC، HY. ITZ به طراحی و اجرای این مطالعه کمک کرد و نسخه خطی را بررسی کرد. همه نویسندگان نسخه نهایی را خوانده و تایید کردند.

منابع مالی

این کار توسط بنیاد ملی علوم طبیعی چین (Grant No:81874345) و بنیاد علوم طبیعی استان لیائونینگ (Grant No: 2020-MS-223) پشتیبانی شد.

در دسترس بودن داده ها و مواد

مجموعه داده‌های مورد استفاده و/یا تجزیه‌وتحلیل‌شده در طول مطالعه کنونی در صورت درخواست معقول از نویسنده مربوطه در دسترس است.

اعلامیه ها

تایید اخلاق و رضایت برای شرکت

تأییدیه اخلاقی برای استفاده از حیوانات آزمایشی برای این مطالعه از کمیته اخلاق پزشکی دانشگاه لیائونینگ طب سنتی چینی (شماره تأیید: 2018YS(DW)-044-01) اخذ شده بود، تمام مراحل آزمایشی در این مطالعه تحت استانداردهای اخلاقی بودند. کمیته اخلاق پزشکی دانشگاه لیائونینگ طب سنتی چینی.

رضایت برای انتشار

قابل اجرا نیست.

منافع رقابتی

نویسندگان اعلام می کنند که هیچ تضاد منافعی برای افشا ندارند.

مشخصات نویسنده

"گروه داروسازی، دانشگاه لیائونینگ طب سنتی چینی، دالیان، لیائونینگ، چین." موسسه تحقیقات دارویی گروه مونوس، اولان‌باتور 14250، مغولستان.

دریافت: 31 مه 2021 پذیرش: 17 سپتامبر 2021 انتشار آنلاین: 28 سپتامبر 2021

Zhe Li1، Lkhaasuren Ryenchindorj2، Bonan Liu1، Ji Shi1*، Chao Zhang1، Yue Hua1، Pengpeng Liu1، Guoshun Shan1 و Tianzhu Jia1

منابع

1. کمیسیون فارماکوپه چین. Pharmacopeia of The People's Republic of China, vol. I. پکن: چاپ علوم پزشکی چین. 2020. ص. 140.
2. Li Z، Lin H، Gu L، Gao J، Tzeng CM. Herba Cistanche (Rou Cong-Rong): یکی از بهترین هدایای دارویی طب سنتی چین است. فارماکول جلو. 2016؛ 7:41.
3. Liu BN، Shi J، Zhang C، Li Z، Hua Y، Liu PP، Jia TZ. تأثیر روش‌های مختلف فرآوری خشک‌کردن صحرای سیستانش تازه بر محتویات اجزای آن. جی چین مد ماتر. 2020؛ 10:2414-8.
4. Liu BN، Shi J، Jia TZ، Lv TT، Li Z. بهینه سازی فرآیند بخاردهی با فشار بالا برای Cistanches Herba. چانه Trad Patent Med. 2019؛ 11:2576–80.
5. Fan YN، Huang YQ، Jia TZ، Wang J، La-Sika، Shi J. اثرات گیاه Cistanches قبل و بعد از پردازش بر عملکرد ضد پیری و عملکرد ایمنی موش‌های پیری ناشی از D-گالاکتوز. Chin Arch Trad Chin Med، 2017; 11:2882-2885.
6. Gao YJ، Jiang Y، Dai F، Han ZL، Liu HY، Bao Z، Zhang TM، Tu PF. مطالعه بر روی ترکیبات ملین در Cistanche deserticola YMCA. مدرن چین مد. 2015؛ 17 (4): 307-10.
7. Liu BN، Shi J، Li Z، Zhang C، Liu P، Yao W، Jia T. مطالعه بر روی عملکرد سیستم ایمنی عصبی Cistanche deserticola و محصولات بخارپز شراب برنج آن در مدل موش القا شده با گلوکوکورتیکوئید. Evid Based Complement Alternat Med. 2020؛ 22:5321976.
8. Guo Y، Wang L، Li Q، Zhao C، He P، Ma X. تقویت عملکرد تقویت کننده کلیه در مدل موش توسط Cistanches herba که به سرعت در دمای متوسط ​​به بالا خشک شد. جی مد غذا. 2019؛ 22 (12): 1246-53.
9. Wang T، Zhang X، Xie W. Cistanche deserticola YC Ma، "Desert ginseng": یک بررسی. ام جی چین مد. 2012؛ 40 (6): 1123-41.
10. Fu Z، Fan X، Wang X، Gao X. Cistanches Herba: مروری بر خواص شیمی، فارماکولوژی و فارماکوکینتیک آن. J Ethnopharmacol col. 2018؛ 219:233-47.
11. Lei H، Wang X، Zhang Y، Cheng T، Mi R، Xu X، Zu X، Zhang W. Herba Cistanche (Rou Cong Rong): بررسی فیتوشیمی و فارماکولوژی آن. شیمی فارم بول. 2020؛ 68 (8): 694-712.
12. Geng X، Tian X، Tu P، Pu X. اثرات محافظتی عصبی اکیناکوزید در مدل MPTP موش بیماری پارکینسون. Eur J Pharmacol. 2007؛ 564:66-74.

13. دنگ ام، ژائو جی، جو ایکس دی، تو پی اف، جیانگ یی، لی زد بی. اثر محافظتی توبولوزید B بر آپوپتوز ناشی از آلفا TNF در سلول های عصبی. Acta Pharmacol Sin. 2004؛ 25 (10): 1276-84.
14. Nan ZD، Zhao MB، Zeng KW، Tian SH، Wang WN، Jiang Y، Tu PF. ایریدوئیدهای ضد التهابی از ساقه‌های گیاه Cistanche deserticola کشت شده در صحرای تاریم. چین جی نات مد. 2016؛ 14 (1): 61-5.
15. Nan ZD، Zeng KW، Shi SP، Zhao MB، Jiang Y، Tu PF. گلیکوزیدهای فنیل اتانوئیدی با فعالیت ضد التهابی از ساقه گیاه Cistanche deserticola کشت شده در کویر تاریم. فیتوتراپی. 2013؛ 89:167-74.
16. Morikawa T، Pan Y، Ninomiya K، Imura K، Yuan D، Yoshikawa M، Hayakawa T، Muraoka O. گلیکوزیدهای مونوترپن Iridoid و غیر حلقوی، kankanosides L، M، N، O و P از Cistanche tubulosa. شیمی فارم بول. 2010؛ 58 (10): 1403-7.
17. Li SL، Song JZ، Qiao CF، و همکاران. یک استراتژی جدید برای کشف سریع نشانگرهای شیمیایی بالقوه برای تمایز بین Radix Rehmanniae خام و فرآوری شده توسط UHPLC-TOF-MS با تجزیه و تحلیل آماری چند متغیره. J Pharm Biomed Anal. 2010؛ 51 (4): 812-23.
18. Peng F، Chen J، Wang X، Xu CQ، Liu TN، Xu R. تغییرات در سطوح گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید، فعالیت آنتی اکسیدانی و سایر صفات کیفی در برش‌های Cistanche deserticola توسط پردازش بخار. شیمی فارم بول. 2016؛ 64:1024-30.
19. Ma ZG، Tan YX. تغییرات محتویات شش گلیکوزید فنیل اتانوئید تحت بازه زمانی بخاردهی با شراب در Desertliving Cistanche. چانه Trad Pat ent Med. 2011؛ ​​33 (11): 1951-4.
20. Peng F, Xu R, Wang X, Xu C, Liu T, Chen J. تأثیر فرآیند بخاردهی بر کیفیت سیستانچ کویر پس از برداشت برای استفاده دارویی در طی خشک شدن در آفتاب. بیول فارم بول. 2016؛ 39 (12): 2066-70.
21. Cui Q، Pan Y، Zhang W، Zhang Y، Ren S، Wang D، Wang Z، Liu X، Xiao W. متابولیت‌های اکتئوزید رژیمی: پروفایل‌ها، جداسازی، شناسایی و ظرفیت‌های محافظت از کبد. J Agric Food Chem. 2018؛ 66 (11): 2660-8.
22. Cui Q، Pan Y، Bai X، Zhang W، Chen L، Liu X. شناسایی سیستماتیک متابولیت های اکیناکوزید و اکتئوزید از Cistanche tubulosa در پلاسما، صفرا، ادرار و مدفوع موش بر اساس UPLC-ESI-Q-TOF -ام‌اس. Biomed Chromatogr. 2016؛ 30 (9): 1406-15.
23. Bertelli M, Kiani AK, Paolacci S, Manara E, Kurti D, Dhuli K, Bushati V, Miertus J, Pangallo D, Baglivo M, Beccari T, Michelini S. Hydroxytyrosol: یک ترکیب طبیعی با فعالیت های دارویی امیدوارکننده. جی بیوتکنول. 2020؛ 309:29-33.
24. Touaibia M, Jean-François J, Doiron J. Cafeic Acid, یک گزارش دارویی همه کاره: یک مرور کلی. Mini Rev Med Chem. 2011؛ ​​11 (8): 695-713.

یادداشت ناشر

Springer Nature با توجه به ادعاهای قضایی در نقشه های منتشر شده و وابستگی های سازمانی بی طرف باقی می ماند.