ارزیابی انتقال روده ای عصاره غنی از گلیکوزید فنیل اتانوئید از سیستانش دسرتیکولا در مدل تک لایه سلولی کاکو{1}}

معرفی

رده سلولی Caco{0}}، که از آدنوکارسینوم های کولون انسانی مشتق شده است، ویژگی های آنتروسیت مانند را نشان می دهد. در شرایط عادی، سلول‌های Caco{2}} خود به خود از سلول‌های بالغ متمایز می‌شوند و تک لایه‌های دست نخورده را تشکیل می‌دهند. سلول های مجاور از طریق اتصالات محکمی که در سمت آپیکال تک لایه تشکیل شده است، می چسبند، که می تواند به طور غیرفعال از هم متمایز شود.و داروها را به طور فعال در سراسر لایه اپیتلیال منتقل می کند. به دلیل شباهت مورفولوژیکی و بیوشیمیایی با انتروسیت‌های طبیعی، تک لایه‌های سلولی Caco{0}} به عنوان یک مدل آزمایشگاهی پذیرفته‌شده برای مطالعه پتانسیل جذب روده‌ای و ویژگی‌های انتقال داروها عمل می‌کنند.

برخلاف مواد شیمیایی، عصاره های گیاهی (PE) مخلوط هایی هستند که فعالیت بیولوژیکی و ترکیبات فعال آنها اغلب به خوبی شناسایی نمی شوند. علاوه بر این، خواص حمل و نقل روده ای پلی اتیلن، بر خلاف خواص اجزای تشکیل دهنده آن، ارتباط نزدیکی با استفاده بالینی دارد. اندازه‌گیری شار برای یک نمونه آزمایشی در یک لایه سلولی Caco{0}} معمولاً شامل روش‌های شیمیایی مانند HPLC، LC/MS، و غیره است. اگرچه این روش‌ها ابزار قدرتمندی هستند، اما پیچیده، زمان‌بر، گران و گهگاهی هستند. نیاز به تجهیزات پیچیده مهمتر از آن، نه یک جزء واحد و نه یک جزء اقلیت نمی تواند PE را به عنوان یک کل منعکس کند. بنابراین، یک رویکرد جدید مستقل از تعیین اجزای تشکیل دهنده باید برای شناسایی و ارزیابی ویژگی های حمل و نقل PE ایجاد شود.

Cistanche deserticola YC Ma (CD)، یک گیاه هولوپارازیت، یک داروی رایج سنتی چینی است که عمدتاً برای درمان کمبود کلیه، ضعف بدن و یبوست استفاده می شود و این موارد به طور رسمی در فارماکوپه چینی ثبت شده است.گلیکوزیدهای فنیل اتانوئید (PhGs)از جمله اکیناکوزید (EC)، آکتئوزید (AC) و ایزواکتئوزید (IS) و غیره، یک کلاس از ترکیبات پلی فنلی هستند. آنها یکی از اجزای اصلی فعال زیستی گونه های سیستانچ محسوب می شوند. مطالعات فارماکولوژیک نشان داده اند که زیست فعالی PhGs متنوع است و شامل اثرات ضد اکسیداتیو، ضد خستگی، محافظت از کبد، تعدیل کننده ایمنی، ضد التهابی و محافظت کننده عصبی است. با این حال، ویژگی های حمل و نقل روده ای PhG ها بررسی نشده است. در این مطالعه، نفوذپذیری روده عصاره غنی از PhG (PRE) از CD را به عنوان یک سیستم یکپارچه و نفوذپذیری سه PhG اصلی (AC، IS، و EC) در سلول‌های Caco{4}} تمایز یافته بررسی کردیم. نتایج ما نشان داد که PRE عمدتاً از طریق انتشار غیرفعال ضعیف جذب شده به پایین گرادیان غلظت بدون جریان منتقل می‌شود، که مبنای فارماکوکینتیکی را برای کاربرد بالینی PhGs در CD فراهم می‌کند.

توبولوزای طبیعی سیستانچی برای بهبود عملکرد جنسی PHGS75% ECH 30% ACT 12%

مواد و روش ها

مواد

The human intestinal Caco-2 cell line was obtained from the American Type Culture Collection (ATCC, Rockville, MD, USA). AC, IS, and EC (>98٪ از شرکت Must Biotechnology (چنگدو، چین) خریداری شده است. محیط Eagle اصلاح شده Dulbecco (DMEM)، سرم جنین گاوی (FBS) و اسیدهای آمینه غیر ضروری (NEAA) توسط Gibco BRL (Grand Island، نیویورک، ایالات متحده آمریکا) تولید شد. 6-صفحات چاه TranswellTM (درج سطح رشد غشاء 4.67 سانتی‌متر مربع) از Corning (Costar) Inc. (Tewksbury, MA, USA) تهیه شد. کلاژن دم موش از سیگما آلدریچ (سنت لوئیس، MO، ایالات متحده آمریکا) به دست آمد. تمام معرف ها و مواد شیمیایی برای تجزیه و تحلیل HPLC از درجه تحلیلی بودند.

تهیه PRE از سی دی

مواد CD خشک شده در هوا پودر شده و با نفوذ با اتانول 70 درصد استخراج شد. بخش غنی از PhG همانطور که قبلا توضیح داده شد تهیه شد و با الکل n-بوتیل اشباع از آب استخراج شد. مایع عصاره غلیظ و تحت فشار کاهش یافته خشک شد. اسپکتروفتومتری رزین-UV ماکروپوروس محتوای PhG 78.4 درصد را اندازه گیری کرد. نمونه نهایی عملکرد 1.75 درصد از مواد خام را بر حسب وزن خشک نشان داد. نمونه به دست آمده در دمای 20- درجه تا استفاده بعدی نگهداری شد.

تعیین AC، IS و EC توسط HPLC

یک سیستم HPLC Shimadzu مجهز به نرم افزار محلول LC ​​برای سنجش محتویات AC، IS و EC در PRE استفاده شد. یک ستون Intersil C18 فاز معکوس (4.6 میلی متر × 25{5}} میلی متر، 5 میکرومتر) استفاده شد و در دمای اتاق نگهداری شد. فازهای متحرک استونیتریل و آب حاوی 0.1٪ اسید فسفریک (v/v) با شستشوی گرادیان (جدول 1) با سرعت جریان 1.0 میلی لیتر در دقیقه بودند. آشکارساز اسپکتروفتومتر UV روی 334 نانومتر تنظیم شد. برای تعیین دقیق شار AC و IS، یک روش جدید تشخیص HPLC-fluorescence (HPLC-FLD) ایجاد کردیم. پس از تجزیه و تحلیل ساختاری و اسکن طول موج فلورسانس (داده‌ها نشان داده نشده است)، ما شرایط بهینه تشخیص فلورسانس را برای AC (مثلا: 338 نانومتر، Em: 448 نانومتر) و IS (مثل: 320 نانومتر، Em: 434 نانومتر) به دست آوردیم.

روش تحلیلی HPLC با استفاده از ویژگی‌های عملکرد زیر تأیید شد: پایداری، خطی بودن، حساسیت، دقت (تغییرپذیری درون و بین روز)، و دقت. آنالیت های موجود در بافر انتقال در دمای 25 درجه در تاریکی به مدت 24 ساعت نگهداری شدند و پایداری آنها اندازه گیری شد. آنالیت ها در حضور ویتامین C بسیار پایدار بودند ({4}}.4%) زیرا مقادیر انحراف استاندارد نسبی (RSD) در نواحی پیک کمتر از 3.5% بود. معادله رگرسیون خطی، ضریب همبستگی، محدوده خطی بودن، LOD و LOQ برای AC، IS و EC در جدول 2 نشان داده شده است. مقادیر نشان می‌دهند که روش‌های HPLC-FLD و HPLC-UV بسیار حساس هستند. مقادیر RSD که دقت روش را بیان می‌کنند همه کمتر از 2% برای تنوع درون و بین روز بودند که نشان‌دهنده دقت خوب است. برای ارزیابی بازیابی، AC، IS، و EC به بافر حمل و نقل اضافه شدند تا سه سطح غلظت (بالا، متوسط ​​و پایین) بدست آورند. مقادیر بازیابی روش برای آنالیت ها در جدول 3 خلاصه شده است. میانگین بازیافت ها از 90.0٪ تا 96.4٪ متغیر بود که نشان دهنده دقت خوب است. در نتیجه، روش‌های HPLC تثبیت‌شده در رابطه با خطی بودن، حساسیت، دقت و دقت برای تعیین کمیت AC، IS و EC در بافر حمل‌ونقل رضایت‌بخش هستند.

تعیین PRE توسط سیستم سنجش زیستی

سنجش زیستی (ظرفیت آنتی اکسیدانی کل) بر اساس روش FRAP (قدرت کاهش دهنده/آنتی اکسیدانی آهن) که قبلاً توضیح دادیم [16] و از نظر خطی بودن و دقت (تغییرپذیری درون و بین روز) اعتبارسنجی شد. خطی بودن روش زیست سنجش بر اساس منحنی های کالیبراسیون تعیین شد. محدوده غلظت خطی بودن 0 بود.{16}}625 - 40 ug/ml (y=0.0258x+0.0968, R{11}}.996). دقت روش سنجش زیستی تعیین شده از نظر تنوع درون و بین روز برای تجزیه و تحلیل PRE (10.0 ug/ml) تعیین شد. تکرارپذیری درون روزی روش بر اساس پنج تعیین متوالی در همان روز تعیین شد. تکرارپذیری بین روز بر اساس پنج تعیین متوالی در سه روز مختلف اندازه‌گیری شد. مقادیر RSD برای دقت روش به ترتیب 1.014٪ و 4.72٪ برای تنوع درون و بین روز بود که نشان دهنده دقت خوب است. بنابراین، روش سنجش زیستی ایجاد شده در مورد خطی بودن، دقت و صحت برای تعیین کمیت PRE در بافر حمل و نقل رضایت‌بخش است.

کشت سلولی

سلولهای کاکو در دمای 37 درجه و رطوبت نسبی 95 درصد در اتمسفر حاوی 5 درصد CO2 و محیطی متشکل از DMEM، 10 درصد FBS، 1 درصد NEAA، 1 درصد ال-گلوتامین، پنی سیلین کشت داده شدند. (100 U/ml)، و استرپتومایسین (100 ug/ml). محیط کشت یک روز در میان در طول رشد و تمایز سلولی تعویض شد. سلول ها در فلاسک های پلاستیکی 75- سانتی متر مربع رشد کردند و هر 3 تا 5 روز یک بار با 0.05٪ EDTA-تریپسین برداشت شدند. برای آزمایش‌های انتقال، سلول‌ها با تراکم 105×1 سلول بر سانتی‌متر مربع روی درج‌های Transwell پوشیده شده با کلاژن کاشته شدند. تقریباً 21 روز پس از کاشت، از تک لایه ها برای آزمایش انتقال استفاده شد. یکپارچگی آنها با اندازه گیری مقاومت الکتریکی ترانس اپیتلیال (TEER) در سراسر تک لایه ها با یک EVOM مجهز به ENDOHM-SNAP (World Precision Instruments, Inc., USA) تعیین شد. مقادیر TEER تک لایه سلول Caco{24}} باید از 500 O∙cm2 فراتر رود.

سیستانچه توبولوزای طبیعی برای تسکین دهنده و ملین PHGS75% ECH 30% ACT 12%

آزمایشات حمل و نقل

تک لایه با بافر انتقال (بافر P حاوی 1{24}} میلی‌مولار HEPES، 1 میلی‌مولار سدیم پیروات، 10 میلی‌مولار گلوکز، 3 میلی‌مولار CaCl2 و 145 میلی‌مولار NaCl، pH 7.4) شسته شد و سپس به مدت 20 دقیقه پیش انکوبه شد. در 37 درجه پس از حذف بافر حمل و نقل، بافر حمل و نقل تازه حاوی نمونه های آزمایشی به محفظه آپیکال (AP) (1.5 میلی لیتر) در مطالعات جهت AP به سمت قاعده جانبی (BL) یا محفظه BL (2.5 میلی لیتر) در مطالعات جهت BL به AP اضافه شد. برای سنجش AC، IS و EC با استفاده از HPLC، مقدار کمی (300 ul) از هر محفظه گیرنده در فواصل زمانی مختلف (30، 60، 90 و 120 دقیقه) برداشته شد. پس از هر نمونه برداری، محفظه گیرنده با همان حجم بافر انتقال تازه (37 درجه) از قبل گرم شده پر می شد. نمونه های جمع آوری شده برای استفاده بیشتر در دمای 20- درجه نگهداری شدند. برای تعیین PRE با استفاده از سنجش زیستی، تنها نمونه ها در 120 دقیقه برداشت شدند. به دلیل ناپایداری PRE، AC، IS و EC، 0.4% (w/v) ویتامین C برای تثبیت نمونه‌ها برای تعیین محتوای AC، IS و EC توسط HPLC اضافه شد و نمونه‌ها برای زیست‌سنجی PRE انتخاب شدند. بلافاصله پس از نمونه برداری مورد سنجش قرار گرفت. مقدار ضریب نفوذپذیری ظاهری (Papp یا 'Papp) هر نمونه محاسبه شد.

تحلیل داده ها

مقادیر Papp در جهت‌های AP BL یا BLAP AC، IS، و EC بر اساس معادله زیر محاسبه شد: Papp {{0}} (4Q/4t)/(AC0)، که در آن Papp ضریب نفوذپذیری ظاهری (cm/s) تعیین شده توسط HPLC است. (4Q/4t) میزان ظاهر ترکیب آزمایشی (AC، IS، یا EC) در سمت گیرنده (μmol/s) است. A مساحت سطح درج (cm2) است. C0 غلظت اولیه ترکیب آزمایشی در سمت اهداکننده (μmol/ml) است. به طور خاص، واحد جرم "ug" به جای "μmol" در هنگام محاسبه مقادیر Papp استفاده شد. داده ها به صورت میانگین ± SD بیان می شوند.

نتایج

ترکیب AC، IS، و EC در PRE از CD

زیرا AC، IS و EC به عنوان فعال زیستی اصلی در نظر گرفته می شوندPhGs گونه Cistancheما محتویات آنها را در PRE از طریق HPLC-UV تجزیه و تحلیل کردیم. کروماتوگرام معرف در شکل 1 نشان داده شده است. شناسایی این اجزا بر اساس مقایسه زمان ماند و طیف UV با استانداردهای معتبر در طول موج 334 نانومتر بود. محتوای AC، IS و EC در PRE به ترتیب 26.60، 1.84 و 32.83 درصد بود. بنابراین، این سه ترکیب 61.27٪ از PRE را تشکیل می دهند. علاوه بر این، نتایج فوق نشان می دهد که محتوای PhG در PRE 78.4٪ است. بنابراین، AC، IS و EC تقریباً 80٪ از PhG ها را در PRE تشکیل می دهند.

ظرفیت کل آنتی اکسیدان PRE، AC، IS و EC

مطالعات مربوط بهفعالیت آنتی اکسیدانی PhGsاز CD گزارش شده است، و AC، IS و EC تقریباً 80٪ از PhG ها در PRE را تشکیل می دهند. بنابراین، کل ظرفیت های آنتی اکسیدانی PRE، AC، IS، و EC با استفاده از مقادیر FRAP (× 10-6 میلی مول) مورد سنجش و بیان قرار گرفت. همانطور که در شکل 2 نشان داده شده است، زمانی که مقدار FRAP 8 × 10-6 میلی مول بود، غلظت نهایی PRE، AC، IS و EC 6.20 ug/ml، 3.14 ug/ml، 22.92 ug/ml و 4.89 ug بود. /ml، به ترتیب، نشان می دهد که کل ظرفیت آنتی اکسیدانی این چهار نمونه به شرح زیر است: AC > EC > PRE > IS. زیست فعالی PRE به گروه های ماده فعال آن (AIG) نسبت داده می شود. تقریباً 60 درصد از PRE، AC و EC فعالیت آنتی اکسیداتیو کل قوی‌تری نسبت به PRE و IS نشان دادند. از آنجا که IS (1.84٪) بخش بسیار کوچکی از PRE را تشکیل می دهد، سایر اجزا، مانند IS ضعیف آنتی اکسیدانی نیز به وضوح در PRE فعال هستند. با کمال تعجب، کل فعالیت آنتی اکسیداتیو تقریباً {22}} برابر بین AC و ایزومر IS آن متفاوت بود، که نشان می‌دهد نه تنها تعداد گروه‌های هیدروکسیل فنلی، بلکه موقعیت گروه‌های هیدروکسیل فنلی در مولکول نیز بر اثر ضد اکسیداتیو تأثیر می‌گذارد. .

اعتبارسنجی تک لایه‌های Caco-2

برای اعتبارسنجی سیستم تک لایه سلولی Caco-2، مقادیر Papp پروپرانولول (نشانگر با انتقال خوب) و زرد لوسیفر (نشانگر با انتقال ضعیف) از AP ​​به BL در سراسر تک لایه‌های Caco-2 به ترتیب 1.51 × 10-5 سانتی متر بر ثانیه و 2.8 × 10-7 سانتی متر بر ثانیه تعیین شد و این مقادیر با مقادیر منتشر شده در گزارش های قبلی مطابقت داشت. سنجش فعالیت آلکالین فسفاتاز همچنین تأیید کرد که تک لایه‌های سلولی Caco از نظر کیفی با اپیتلیوم روده کوچک قابل مقایسه هستند.

نفوذپذیری AC، IS و EC

In general, the Papp values of well-absorbed drugs were high (>1.{1}} × 10-5 سانتی‌متر در ثانیه)، در حالی که داروهایی که جذب ضعیفی دارند کم بود< 1.0 × 10–6 cm/s) [3]. As shown in Table 4, the Papp values of AC, IS, and EC were nearly on the order of 10–7 cm/s, indicating that these compounds were poorly permeable. Furthermore, efflux or active transport was not observed because the ratios of Papp BL to AP / Papp AP to BL for AC, IS, and EC were between 0.90 ~ 1.55, and the criterion of net efflux proposed by the FDA Guidance is a ratio less than 2. Based on the kinetic curves presented in Fig. 3, the bidirectional transport percentages of AC, IS, and EC at 200 μM increased linearly with time. The transport rate (TR) values of the three compounds increased linearly in both directions between approximately 100 and 300 μM (Fig. 4). These results indicate that the main transport mechanism of AC, IS, and EC is also passive diffusion. 

نفوذپذیری PRE

نتایج فوق نشان می دهد که ظرفیت آنتی اکسیدانی کل PRE حداقل به دلیل 61.27٪ AIG از PRE است. بنابراین، ما TR PRE را بر اساس منحنی غلظت اثر ظرفیت کل آنتی اکسیدان ارزیابی کردیم و مقادیر Papp را برای منعکس کردن ویژگی‌های انتقال PRE محاسبه کردیم. مقادیر PRE PRE برای AP!BL و BL!AP (2.16 ± 0.26) × 10-7 سانتی‌متر بر ثانیه و (3.13 ± 0.29) × 10-7 سانتی‌متر/ بود. s، به ترتیب، نشان می دهد که این ترکیب نفوذپذیری ضعیفی دارد. علاوه بر این، جریان یا انتقال فعال مشهود نبود زیرا نسبت "Papp BL به AP / "Papp AP به BL برای PRE 1.45 بود. علاوه بر این، TR دو طرفه PRE به صورت خطی بین تقریباً 300 و 900 ug/ml افزایش یافت (شکل 5). عدم ترجیح جهت نتایج نشان می دهد که انتشار غیرفعال مکانیسم اصلی انتقال PRE است.

توبولوزای طبیعی سیستانچی برای بهبود ایمنی PHGS75% ECH 30% ACT 12%

بحث

در مقایسه با محصولات دارویی بسیار خالص شده، پلی اتیلن به طور کلی مخلوط هایی است که از صدها ماده تشکیل دهنده با خواص فیزیکوشیمیایی بسیار متفاوت تشکیل شده است. بنابراین، PE به دلیل AIG پیچیده [21] خود، عمل هم افزایی سیستماتیک، چند هدفه و چند کانالی را اعمال می کند که مانع از تجزیه و تحلیل ویژگی های انتقال PE می شود. برای ارزیابی علمی تر خواص انتقال پلی اتیلن، برخی از محققین چندین جزء را به جای یک جزء واحد، در PE شناسایی کرده اند [22-24]. با این وجود، تعداد محدودی از اجزای تشکیل دهنده نمی توانند PE را به عنوان یک کل منعکس کنند. با این حال، تعیین تمام اجزاء در PE غیرممکن است. علاوه بر این، اگر اجزای مختلف در پلی اتیلن ویژگی های حمل و نقل کاملاً متفاوتی را نشان دهند، شناسایی ویژگی های حمل و نقل کل نگر دشوار خواهد بود.

در دهه 1990، از سیستم های سنجش زیستی برای ارزیابی TR عوامل ضد میکروبی استفاده شد [25]. تا سال 2005، اگوچی و همکارانش [26] فعالیت ضد اکسیداتیو عصاره هویج را با استفاده از محیط‌های BL از سلول‌های Caco{5}} تمایز یافته ارزیابی کردند. این رویکرد برای انعکاس شرایط in vivo مناسب تر است.

بر اساس گزارش قبلی در مورد فعالیت PhGs و نتایج ما (شکل 2)، TR AIG در PRE را می توان با تعیین ظرفیت آنتی اکسیدانی کل محیط در محفظه گیرنده ارزیابی کرد. پس از آزمایش‌های انتقال، متوجه شدیم که TR از PRE در هر دو جهت مشابه بود، و این انتقال غیراشباع و جذب ضعیفی داشت ('Papp < ​​1.{3}} × 10-6 سانتی‌متر بر ثانیه)، و اینطور نبود. جریان را نشان می دهد، نشان می دهد که انتشار غیرفعال به پایین یک گرادیان غلظت، مکانیسم اصلی انتقال PRE است (شکل 5). علاوه بر این، ویژگی های حمل و نقل PRE با ویژگی های AC، IS و EC، اجزای موثری که فعالیت آنتی اکسیدانی را در PRE نشان می دهند، مطابقت دارد (شکل 4 و جدول 4). این نتیجه مورد انتظار بود و نشان داد که سیستم سنجش زیستی موجود برای ارزیابی ویژگی‌های انتقال AIG در PRE در سلول‌های Caco{10}} متمایز مناسب و قابل اعتماد است.

برخلاف مقدار متعارف Papp که معمولاً برای منعکس کردن انتقال یک ترکیب استفاده می‌شود، «مقدار Papp به‌دست‌آمده از TR بر اساس منحنی اثر غلظت نه تنها ممکن است منعکس‌کننده اجزایی باشد که در تک لایه‌ها با ساختاری دست نخورده نفوذ می‌کنند، بلکه همچنین عوامل دیگری مرتبط با فعالیت هدف را شامل می شود، مانند متابولیت های اجزا، محصولات تخریب شده شیمیایی، و حتی برخی از سیتوکین های ترشح شده از سلول های Caco{1}} در پاسخ به تحریکی که می تواند بر فعالیت زیستی هدف تأثیر بگذارد. بنابراین، چند عامل ذکر شده در بالا، به جای اجزای دست نخورده منتقل شده، مقدار "Papp" را تعیین می کند. بنابراین، «Papp» ممکن است با موقعیت‌های in vivo قوی‌تر از مقدار متعارف Papp مرتبط باشد. در این مطالعه، ماهیت انتشار غیرفعال و جذب ضعیف PRE را بر اساس مقدار Papp آن روشن کردیم و این ماهیت ممکن است مربوط به دوز بالا و دوره درمان بالینی طولانی CD باشد. با این وجود، این یافته‌ها راهنمایی سیستماتیک‌تری را برای پزشکان در کاربرد CD ارائه می‌کنند، زمانی که فقط ویژگی‌های انتقال بیشتر AIG در CD، نه تنها PhGs، شناسایی شده باشد.

با این حال، آیتم زیست فعالی انتخاب شده باید به اندازه کافی حساس باشد تا در محیط محفظه گیرنده شناسایی شود، که چالشی را برای ایجاد یک سیستم سنجش زیستی برای ارزیابی ویژگی های حمل و نقل PE ایجاد می کند. علاوه بر این، زیست فعالی باید به اجزای زیادی که ممکن است بستگی داشته باشد. در مطالعه ما، سنجش ظرفیت آنتی اکسیدانی کل مناسب تر از چندین روش دیگر بود (شکل S1). اما با این وجود، سنجش ما فقط می تواند TR PRE را در 120 دقیقه تشخیص دهد.

در مجموع، مطالعه حاضر یک سیستم زیست سنجش جدید را برای ارزیابی نفوذپذیری روده ای PRE در سلول های کاکو{0}} تمایز یافته ایجاد کرد. نتایج به‌دست‌آمده نشان داد که انتشار غیرفعال با جذب ضعیف در شیب غلظت بدون جریان، مکانیسم اصلی انتقال PRE است (شکل 5)، که مبنای فارماکوکینتیکی را برای کاربرد بالینی PhGs در CD فراهم می‌کند. استفاده از یک سیستم زیست سنجی جدید برای ارزیابی TR و در نتیجه محاسبه مقادیر Papp برای ارزیابی خاصیت حمل و نقل روده ای AIG در PE ها امکان پذیر است. این رویکرد همچنین ممکن است برای سایر پلی اتیلن با توجه به زیست فعالی مناسب مناسب باشد.

توبولوزای طبیعی سیستانچی برای بهبود عملکرد جنسی PHGS75% ECH 30% ACT 12%