بررسی مکانیسم اثر گلیکوزیدهای کل سیستانچ بر بیماری التهابی روده بر اساس فارماکولوژی شبکه و آزمایشات حیوانی Ⅲ

3 نتایج و تجزیه و تحلیل

3.1 تجزیه و تحلیل اهداف گلیکوزید کل Cistanche tubulosa و اهداف بیماری

فایل های ساختار سه بعدی را وارد کنیدعناصر فعالبه پایگاه داده PharmMapper برای به دست آوردن نقاط هدف مربوطه مربوط به مواد مختلف. پایگاه داده UniProt برای به دست آوردن اطلاعات نام پروتئین و نام ژن مربوط به هر هدف استفاده شد. با ترکیب نقاط هدف مربوط به هفت جزء، در مجموع 354 هدف به دست آمد. در پایگاه GeneCards، ژن های مربوطه با استفاده از کلمه کلیدی "بیماری التهابی روده" جستجو شدند و نتایج جستجو مرتب شدند و در نهایت 7851 هدف به دست آمد. از رویدادها برای ترسیم نمودار ون به صورت آنلاین برای به دست آوردن تقاطع اهداف ماده فعال Cistanche tubulosa و نقاط هدف IBD استفاده کنید. همانطور که در شکل 1 نشان داده شده است، 254 هدف از ماده موثره ازسیستانچ توبولوزاکه اثر محافظتی بر IBD دارند به دست آمد.

شکل 2 نمودار شبکه PPI از اهداف مشترک

شکل 5 شبکه کامپوننت-هدف-مسیر

شکل 7 کل گلیکوزیدهای سیستانچ توبولوزا mRNA مسیرهای سیگنالینگ TGF- و mTOR را در موش های IBD تنظیم می کند.

3.4 گلیکوزیدهای کل Cistanche tubulosa امتیاز DAI ناشی از DSS را بهبود می بخشد

نتایج آزمایش نشان داد که به جز گروه CZ، سه گروه دیگر درجات مختلفی از کاهش وزن و خون مخفی مدفوع داشتند (شکل 6). در این میان، گروه کنترل DSS بیشترین میزان کاهش وزن بدن، شدیدترین خون مدفوع، بالاترین DAI و خونریزی آشکار مدفوع را در روز ششم داشتند. پس از مداخله گلیکوزیدهای توتال Cistanche tubulosa، نمره DAI به تدریج کاهش یافت و وضعیت خون مخفی به تدریج کاهش یافت. گروه HZ کمترین میزان کاهش وزن بدن و کمترین میزان خون پنهان در مدفوع را داشتند. نتایج نشان داد که گلیکوزیدهای کل Cistanche tubulosa پاسخ های فیزیولوژیکی ناشی از بیماری التهابی روده را بهبود می بخشد.

مکمل CISTANCHE برای درمان IBD PHGS75% ECH 30% ACT 12%

3.5 گلیکوزیدهای توتال Cistanche tubulosa IBD را کاهش می دهند

بیان مسیرهای سیگنالینگ mTOR و TGF در طحال موش مسیرهای سیگنالینگ mTOR و TGF- دو مسیر سیگنالینگ مهمی هستند که پاسخ های التهابی را فعال می کنند. بیان mTOR و TGF- در بافت طحال موش توسط qRT-PCR شناسایی شد. نتایج نشان داد که بیان mRNA mTOR و TGF- در موش‌های گروه کنترل DSS در مقایسه با موش‌های معمولی به‌طور معنی‌داری افزایش یافت. در مقایسه با موش‌های کنترل DSS، در مقایسه با Cistanche tubulosa، بیان mTOR و TGF- در موش‌ها پس از مداخله Cistanche tubulosa به طور قابل‌توجهی کاهش یافت. در میان آنها، گروه با دوز بالا بیشترین کاهش را داشت و سطح بیان اساساً با گروه نرمال مطابقت داشت (شکل 7). نتایج نشان داد که گلیکوزیدهای کل Cistanche tubulosa بیان مسیرهای سیگنال دهی mTOR و TGF- را کاهش می دهند.

شکل 8 نقشه حرارتی PICRUSt2-خوشه‌بندی فراوانی عملکردی

3.6 تجزیه و تحلیل حاشیه نویسی عملکردی PICRUSt2

PICRUSt2 یک ابزار بیوانفورماتیک برای پیش‌بینی عملکرد متاژنومیک بر اساس اطلاعات بیولوژیکی rRNA 16S، درخت ASV و ژن ASV در پایگاه داده Greengene است. انتخاب پایگاه داده COG برای پیش بینی عملکرد استفاده شد، و نتایج نشان داد که عملکرد فلور روده عمدتا شامل پردازش RNA است. ساختار و دینامیک کروماتین؛ کنترل چرخه سلولی، تقسیم سلولی، تقسیم بندی کروموزوم؛ مکانیزم دفاعی؛ سیگنالینگ بیوژنز دیواره سلولی/غشاء سلولی/پاکت؛ سلول ها بیش از 20 عملکرد مانند ساختار خارج سلولی دارد. انتقال درون سلولی، ترشح و انتقال وزیکول؛ تولید و تبدیل انرژی؛ انتقال کربوهیدرات و متابولیسم 15 ویژگی برتر و اطلاعات فراوانی آنها را در هر نمونه انتخاب کنیدیک نقشه حرارتی (شکل 8) برای اطلاعات ترسیم شده و از سطوح عملکردی مختلف خوشه بندی شده است.

در مقایسه با گروه CZ، موش‌های گروه کنترل DZ دارای COG1132 (سیستم انتقال چند داروی نوع ABC)، COG0745 (تنظیم‌کننده پاسخ اتصال به DNA)، COG1131 (سیستم انتقال چند داروی نوع ABC)، COG1961 (Recombinase DNA خاص مربوط به سایت) پین اینورتاز DNA)، COG0438 (گلیکوزیل ترانسفراز درگیر استدر بیوسنتز دیواره سلولی)، COG0534 (Na +- رانده شده استپمپ خروجی چند دارو)، COG0642 (هیستیدین کیناز انتقال سیگنال)، COG1595 (زیر واحد سیگما تخصصی RNA پلیمراز هدایت شده با DNA)، COG0463 (اندونوکلئاز)، COG4974 (Recombinase-specific site XerD)، COG2C-typeC (DNA-Dimennding) حاوی پروتئین)، COG1136 (سیستم صادرات لیپوپروتئین نوع ABC).، و COG1309 (تنظیم کننده رونویسی اتصال به DNA) ناهنجاری های عملکردی بیان ژن. این ژن ها عمدتاً در موارد زیر نقش دارند: V: مکانیسم دفاعی. T: مکانیسم انتقال سیگنال؛ M: بیوژنز دیواره سلولی/غشاء سلولی/پاکت؛ I: انتقال و متابولیسم لیپید. ک: رونویسی; L: همانند سازی، نوترکیب و تعمیر.

پس از اینکه به این شش عملکرد کل گلیکوزیدهای سیستانش توبولوزا داده شد، بیان این عملکردهای فیزیولوژیکی مختلف نزدیک به گروه نرمال بود. در مقایسه با موش‌های گروه‌های CZ و DZ، موش‌های گروه HZ بیان بالایی از ژن‌های COG1028 (خانواده الکل دهیدروژناز با زنجیره کوتاه) و COG0451 (نوکلئوزید-فسفات-قند اپی‌مراز) داشتند. این دو ژن مربوط به I هستند: انتقال لیپید و متابولیسم. و M: توابع بیوژنز دیواره سلولی/غشاء سلولی/پوشش بسیار مرتبط هستند. بنابراین، حدس زده می‌شود که گلیکوزیدهای کل Cistanche tubulosa ممکن است آسیب موش‌های IBD را با تنظیم متابولیسم لیپید، متابولیسم گلوکز و مکانیسم‌های انتقال سیگنال دفاعی مرتبط در موش تنظیم کند.